мясо туш характеризовалось высоким качеством и низкокалорийностью. Анализ мяса на содержание тяжелых металлов выявил, что от скота абер-дин-ангусской породы можно получать экологически чистую продукцию. Анализ технологические показатели качества мяса показал, что от животных абердин-ангусской породы можно получать очень ценную в пищевом отношении говядину.
Список литературы:
1. ГОСТ Р 51447-99 (ИСО 3100-1-91) Мясо и мясные продукты. Методы отбора проб. - М., 2010. - 6 с.
2. ГОСТ Р 51478-99 Мясо и мясные продукты. Контрольный метод определения концентрации водородных ионов (рН). - М., 2010. - 6 с.
3. ГОСТ Р 55445-2013 Мясо. Говядина высококачественная. Технические условия. - М., 2013. - 16 с.
4. Зеневич В.А. и др. Кормление и содержание сельскохозяйственных животных в условиях зимовки. - Мн., 2004.
5. Карабанов Е.П. Использование нетрадиционных источников белка (сухой птичий помет) для кормления крупного рогатого скота // Ефективш корми та годавл^ - 2007. - № 8. - С. 37-38.
6. http://myaso/govyadim_telyatim/.
7. Болдуринова Е. Заводчики калмыцкого скота обменялись опытом [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://vkalmykii.com/.
МОРФОЛОГИЧЕСКИЙ И БИОХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ КРОВИ У КОРОВ ПОСЛЕ ВКЛЮЧЕНИЯ МАЛЫХ ДОЗ АЦЕТАТА КАЛИЯ В РАЦИОН В ОПРЕДЕЛЕННЫЕ ИНТЕРВАЛЫ ПОСЛЕРОДОВОГО ПЕРИОДА
© Монгалёв Н.П.1, Василенко Т.Ф.2, Рубцова Л.Ю.3, Таллина В.А.4
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения РАН,
г. Сыктывкар
Проведено исследование влияния на морфологический и биохимический состав крови коров кормового рациона с включением ацетата
1 Кандидат биологических наук, старший научный сотрудник.
2 Доктор биологических наук, ведущий старший научный сотрудник.
3 Младший научный сотрудник.
4 Инженер.
калия из расчета 40 г на голову в течение 15 или 30 дней в период 6090 дней или свыше 150 дней после родов. Использование добавки ацетата калия в течение 15 дней не оказало заметного действия на морфологический и биохимический состав крови и показатели репродукции коров. В то время как у длительно неоплодотворенных коров при использовании фармакологической дозы ацетата калия в течение 30 дней в период 150-250-й день после родов отмечали нормализацию клеточного и биохимического состава крови на фоне активации половой цикличности.
Ключевые слова состав крови, коровы, ацетат калия.
Многолетними исследованиями биохимических процессов жизнедеятельности организма продуктивных животных установлено, что их сроки использования связаны с изменениями обмена веществ [1-3] и, как следствие, снижением иммунитета [4], эффективности воспроизводства [5]. Известно, что в условиях Республики Коми сроки использования высокопродуктивных коров сокращаются до 3-5 отелов [3].
Для оптимизации метаболических процессов в организме животных и уменьшения периода от родов до оплодотворения в составе кормового рациона используют добавки с включением солей органических кислот [6-7]. Эти соли, благодаря буферным свойствам, могут создавать благоприятные условия для осуществления микробиальных процессов пищеварения в рубце и оказывать стимулирующее влияние на последующее усвоение нутри-ентов в многокамерном желудке жвачных. Полагают, что положительное действие ацетата калия (АК) на формирование овуляторных половых циклов у проблемных коров после родов обусловлено его лечебными свойствами [8-10]. Однако использование АК в небольших дозах, которое может также применяться для коррекции обмена веществ, нормализации пищеварительной и других функции, изучено далеко не полно.
Целью данной работы является исследование морфо-биохимического состава крови у коров на 60-90-й день и в период 150 дней и более после родов у животных с проблемами восстановления нормальной половой цикличности при включении в рацион кормления малых, фармакологических доз АК в течение 15 или 30 дней.
Методика. Было выполнено два эксперимента на коровах холмогорской породы фермы филиала ФГБУН Президиума Коми научного центра УрО РАН, рацион кормления которых был сбалансирован по основным питательным веществам. Продуктивность животных составила в среднем 4000 кг молока за 305 дней лактации.
В первом эксперименте обследовали три группы животных на 60-90-й день после родов: 1-я группа - контрольная (п = 5), циклирующие животные; 2-я группа - опытная (п = 5), циклирующие животные и 3-я группа - опытная (п = 5), стельные коровы. Животным второй и третьей опытных групп в
корм включали 20 % водный раствор АК из расчета 40 г в сутки в смеси с комбикормом или травяной мукой в течение 15 дней на 60-90-й день или в период беременности.
Во втором эксперименте исследования проводили на двух группах животных: 1-я группа (контрольная, циклирующие животные, п = 5), коров исследовали в ранний послеродовой период (1-15 дней) и через 60-90 дней после родов с последующим 15-дневным скармливанием АК; 2-я группа - длительно неоплодотворенные животные (опыт, циклирующие коровы, п = 15), которых обследовали в ранний послеродовой период, на 60-90-й и 150-250-й дни после родов. Животным 1-й группы второго эксперимента 20 % водный раствор АК из расчета 40 г на голову в смеси с комбикормом или травяной мукой включали в рацион с 60-90 дня, второй группы - в течение 30 дней в период 150-250 дней после родов.
В ходе опытов осуществляли наблюдения за состоянием животных, проявлением половой цикличности, фиксировали длительность периода от родов до оплодотворения. Кровь для анализа брали из яремной вены. В качестве антикоагулянта использовали гепарин. Определяли показатель гема-токрита, количество лейкоцитов с дифференцированием этих клеток по морфологическим признакам [11], исследовали уровень гемоглобина (по Сали) и холестерина (по Ильку), общий белок рефрактометрически, фракционный состав белка экспресс-методом [12].
Функциональное состояние организма коров оценивали по морфологическому и биохимическому профилю крови, учитывали количество оплодотворенных и неоплодотворенных животных в контроле и опытных группах (после скармливания АК). Достоверность различий оценивали по :-крите-рию Стьюдента [13] при уровнях значимости от 0,05 до 0,001.
Результаты. В первом эксперименте большинство исследуемых показателей крови (полный список показателей представлен в табл. 2 и 3) у коров на 60-90-й день после родов соответствовали норме, поэтому в табл. 1 суммированы данные по показателям крови, имеющим только значимые изменения. Через сутки после завершения 15-дневного скармливания АК у коров 2-й и 3-й групп отмечали заметное повышение уровня альфа-глобули-новой фракции (р < 0,05), количества микролимфоцитов (р < 0,05) наряду с существенным снижением содержания плазмоцитов (р < 0,01).
Использование АК в рационе для коров по-разному сказалось на распределении в крови лимфоидных клеток, обеспечивающих гуморальный иммунитет: увеличивается число клеток, способных к бласттрансформации (микролимфоцитов) и уменьшается содержание клеток, синтезирующих антитела (плазмоцитов). Через 20 дней после окончания включения АК в рацион кормления исследуемые показатели крови у коров восстановились на уровне, свойственном животным при содержании на обычном рационе, что, может свидетельствовать о непродолжительности последействия данной дозы ацетата калия.
Таблица 1
Морфофункциональные и биохимические показатели крови коров в трех группах первого эксперимента (по п = 5 в каждой) до- и после включения АК в рацион (М ± т)
После включения АК в рацион:
Показатели Группа До включения через 1 сутки через 20 суток
животных АК в рацион после окончания после окончания
использования использования
1 13,40 ± 0,50 12,90 ± 0,40 12,00 ± 0,90
Альфа-глобулин, г/л 2 11,80 ± 0,40 14,70± 1,00* 10,90±0,60
3 11,90 ± 0,90 14,30 ± 0,70 10,70± 0,60
1 0,05 ± 0,03 0,05 ± 0,01 0,03 ± 0,01
Лимфоциты микро, 109/л 2 0,014±0,007 0,08 ± 0,02* 0,02 ± 0,01
3 0,02 ± 0,003 0,07 ± 0,02* 0
1 0,02 ± 0,01 0,02 ± 0,01 0,03 ± 0,01
Плазмоциты, 109/л 2 0,02 ± 0,001 0,006 ± 0,002** 0,02 ± 0,01
3 0,03 ± 0,01 0,014 ± 0,008 0,02 ± 0,01
Примечания: 1 - контроль (циклирующие коровы), 2 - опыт (циклирующие коровы), 3 -опыт (стельные животные); звездочкой указаны достоверные различия морфологических и биохимических показателей крови у животных после использования ацетата калия: * - р< 0,05; ** - р< 0,01, *** - р< 0,001.
Таким образом, включение АК в рацион для коров на 60-90-й день после родов и беременным животным в течение 15 дней значимо повлияло только на отдельные исследуемые параметры морфо-биохимического состава крови, и его действие было непродолжительным.
Во втором эксперименте у коров 1-й группы на 60-90-й дни после родов по сравнению с 1 -15 днем (до использования АК в кормовом рационе), отмечали значимое снижение величин гематокрита (увеличение текучести крови), альбумино-глобулинового (А/Г) коэффициента, теней Гумпрехта. В сыворотке крови животных было увеличено содержание общего белка (за счет глобулиновых фракций), холестерина и повышалось количество малых лимфоидных клеток, эозинофилов и моноцитов (табл. 2).
Таблица 2
Гематокрит, лейкоцитарный и биохимический состав крови у коров 1-й группы (п = 5) второго эксперимента по периодам обследования (М ± т)
Показатели До включения АК в рацион После использования АК с рационом
После отела, дней 1-15 60-90 75-105
Гематокрит, % 38,40±1,08 32,39±2,03+ 30,20±1,25
Лейкоциты: 10 9/л 5,85±0,41 4,93±0,24 5,21±0,20
Лимфоциты, в том числе: 4,01±0,23 3,06±0,39 3,14±0,30
большие - 1,29±0,19 1,00±0,20
средние - 1,41±0,21 1,40±0,20
Окончание таблицы 2
Показатели До включения АК в рацион После использования АК с рационом
малые 0 0,12±0,03+ 0,56±0,09**
микро 0 0,014±0,007 0,08±0,02*
Нейтрофилы: юные 0,007±0,002 0,004±0,002 0
палочко-ядерные 0,28±0,06 0,15±0,003 0,06±0,01*
сегменто-ядерные 1,17±0,27 0,96±0,08 0,82±0,13
Всего: 1,40±0,27 1,07±0,09 0,88±0,16
Эозинофилы, 0,23±0,03 0,45±0,05++ 0,46±0,05
Базофилы, - 0,003±0,002 0
Плазмоциты, 0,02±0,004 0,02±0,001 0,006±0,002
Моноциты, 0,08±0,003 0,19±0,03++ 0,22±0,03
Тени Гумпрехта 0,18±0,04 0,07±0,02+ 0,04±0,01
Общий белок, г/л в том числе: 71,10±1,20 75,40±0,50+ 78,80±0,80**
альбумины 40,20±0,97 37,70±1,30 39,70±1,90
альфа-глобулины 5,80±0,60 11,59±0,40+++ 11,80±1,00
бета-глобулины 7,60±0,50 10,57±0,49++ 9,50±0,90
гамма-глобулины 14,20±1,20 15,50±0,50 17,80±1,70
А/Г коэффициент 1,43±0,07 1,06±0,06++ 0,88±0,09
Гемоглобин, г/л 117,0±1,90 107,7±4,16 102,8±1,90
Холестерин, ммоль/л 3,12±0,26 5,33±0,78+ 5,90±1,08
Примечания: крестиком указана достоверность различий показателей у животных до включения АК в рацион: + - р < 0,05, ++ - р < 0,01; звездочкой указана достоверность различий показателей у животных после включения АК в рацион на 60-90 дни после отела: * - р < 0,05; ** - р < 0,01.
После 15-дневного включения АК в кормовой рационом в сыворотке крови коров на 75-105-й дни послеродового периода выявили повышение содержания общего белка, количества малых - и микролимфоцитов и уменьшение палочкоядерных нейтрофилов.
Исследуемые показатели крови длительно неоплодотворенных коров (2-я группа второго эксперимента) на 60-90-е сутки после родов по сравнению с 1 -15 днем (до включения в рацион АК) характеризовались повышением уровня общего белка за счет глобулиновых фракций, увеличением количества малых лимфоидных клеток наряду с уменьшением числа средних лимфоцитов (табл. 3).
У проблемных животных на 60-90-й дни после отела в отличие от коров 1-й группы, обследованных в аналогичный период, в сыворотке крови определили заметное уменьшение содержания альфа-, бета глобулиновых фракций (р < 0,05), холестерина (р < 0,05), а в цельной крови - более низкое количество эозинофилов (р < 0,05) и плазмоцитов (р < 0,01) (табл. 2 и табл. 3). На 150-250-й день по сравнению с 60-90-м в крови животных второй группы увеличилось количество эозинофилов (р < 0,01), малых лимфоцитов, микролимфоцитов (р < 0,01) и уменьшалось содержание больших форм
лимфоидных клеток (р < 0,01).Следовательно, у длительно неоплодотво-ренных коров изменения морфологического и биохимического состава крови определяются в течение всего периода исследования, начиная с раннего послеродового периода.
Таблица 3
Гематокрит, лейкоцитарный и биохимический состав крови у коров 2-й группы (п = 15) во втором эксперименте до и после включения АК в рацион (М ± т)
Показатели До включения АК в рацион После включения АК в рацион
После отела, дней 1-15 60-90 150-250 180-280
Гематокрит, % 37,23±2,87 33,00±1,20 32,96±1,27 33,46±0,94
Лейкоциты: 10 9/л 5,62±0,48 4,90±0,14 5,29±0,74 5,20±0,46
Лимфоциты, в том числе: 3,63±0,22 3,38±0,25 2,68±0,14+ 3,16±0,11*
большие 1,93±0,11 1,61±0,16 0,98±0,07++ 1, 14±0,16
средние 1,60±0,09 1,24±0,14+ 1,18±0,16 1,51±0,19
малые 0,06±0,02 0,15±0,03+ 0,50±0,06++ 0,42±0,06
микро 0 0 0,13±0,01++ 0,03±0,01***
Нейтрофилы: юные 0,006±0,003 0,011±0,007 0,013±0,004 0,007±0,002
палочко-ядерные 0,31±0,06 0,17±0,05 0,26±0,03 0,14±0,03**
сегменто-ядерные 1,36±0,28 1,04±0,18 1,07±0,15 0,90±0,16
Всего: 1,68±0,24 1,19±0,21 1,31±0,17 1,09±0,14
Эозинофилы 0,18±0,02 0,25±0,06 0,75±0,06++ 0,54±0,08*
Базофилы - - 0 0
Плазмоциты - 0 0 0,05±0,01***
Моноциты - - 0,11±0,04 0,13±0,03
Тени Гумпрехта - 0,11±0,03 0,16±0,02 0,15±0,03
Белок сыворотки, г/л, в том числе: 69,20±1,80 76,00±1,60+ 77,20±1,20 77,50±1,42
альбумины 41,80±1,16 41,10±0,77 40,30±0,76 40,60±0,40
альфа-глобулины 6,20±0,43 10,4±0,40+++ 10,90±0,12 10,30±0,50
бета-глобулины 7,80±0,60 9,20±0,40 11,50±1,30 7,40±1,00*
гамма-глобулины 13,40±1,80 14,80±0,80 14,50±0,85 18,20±1,10*
А/Г коэффициент 1,50±0,04 1,26±0,08+ 1,15±0,08 1,16±0,07
Гемоглобин, г/л - - 108,2±1,40 110,0±3,70
Холестерин, ммоль/л 3,07±0,27 3,37±0,40 4,26±0,53 5,86±0,23**
Примечания: крестиком указана достоверность различий показателей у животных между периодами исследования: + - р < 0,05, ++ - р < 0,01; звездочкой указана достоверность различий показателей у животных после включения АК в рацион на 150-250 дни после отела: * - р < 0,05; ** - р < 0,01.
После включения АК в рацион длительно неоплодотворенным коровам в течение 30 дней в крови заметно увеличивается уровень гамма-глобулино-вой фракции белка и содержание холестерина (р < 0,01), количество лимфоцитов (р < 0,05) за счет больших и средних форм клеток, плазмоцитов
(р < 0,001) на фоне уменьшения бета-глобулиновой фракции белка (р < 0,05), микролимфоцитов (р < 0,001), палочкоядерных нейтрофилов (р<0,01) и эо-зинофилов (р < 0,05).
Эффект использования АК в рационе для коров 2-й группы второго эксперимента по сравнению с коровами контрольной группы первого эксперимента проявился в меньшем снижении количества молодых форм грануло-цитов (р < 0,05), эозинофилов (р < 0,01), теней Гумпрехта (р < 0,01), А/Г коэффициента (р < 0,05), а также в увеличении числа моноцитов (р < 0,05) (табл. 2 и 3). В то время как уровень общего белка, его фракций, холестерина, показатели гематокрита, количества лейкоцитов, лимфоцитов и их суб-популяционного состава, зрелых гранулоцитов и базофилов не имели значимых отличий.
Характерной особенностью для длительно неоплодотворенных коров является проявление эозинопении в ранний послеродовой период (р < 0,001), а к 150-250 дням послеродового периода - устойчивой эозинофилии (р < 0,05), что дает основание судить о наличии хронического субклинического нарушения обмена веществ, повышенной возбудимости и понижения стрессоус-тойчивости этих животных [14]. Поэтому нормализацию содержания эозинофилов в крови этих коров после включения АК в кормовой рацион можно рассматривать как один из позитивных признаков.
Положительное влияние АК на организм длительно неоплодотворен-ных коров проявляется в увеличении количества лимфоцитов в крови, что при уменьшении числа нейтрофильных лейкоцитов обусловливает высокие показатели лимфоцито-нейтрофильного отношения, которое является одним из прогностических признаков вероятности оплодотворения животных [3]. При этом уменьшение содержания самых малых лимфоидных клеток до нормы, несмотря на увеличение общего количества лимфоцитов, вероятно, связано с их активной бласттрансформацией.
Повышению количества сегментоядерных нейтрофилов в крови длительно неоплодотворенных коров соответствует заметное увеличение суточной молокопродукции (в среднем на 22,7 %). У стельных коров первого эксперимента выявлена стабильность в количестве лимфоцитов на фоне снижения сегментоядерных нейтрофилов (на 27,6 %) и уменьшения суточной молокопродукции (на 8 %). Такое снижение удоя согласуется с ранее представленными данными об уменьшении уровня молокопродукции у коров, находящихся на высококонцентратном рационе с дополнительным включением 140 г ацетата натрия и 200 г АК в сутки в качестве противо-ацидозного средства [15].
После включения АК в кормовой рацион у длительно неоплодотворен-ных животных отмечали наличие четких признаков «половой охоты» в цикле. До использования АК коровы имели «тихие» охоты без явных признаков возбуждения.
Таким образом, на морфологический и биохимический состав крови коров оказывают влияние дозы и длительность использования АК в составе рациона, а также физиологическое состояние животных. Для циклирующих коров на пике лактации (60-90-й день) или стельных животных, в рацион которых включали АК в течение 15 дней, характерным является изменение реактивности лимфоцитов, которые имеют способность к трансформации и заметное увеличение альфа-глобулиновой фракций белка в сыворотке. У животных на пике лактации, которым включали добавку в корм в течение 30 дней, также выявлено изменение реактивности лимфоцитов, способных к трансформации, в условиях незначительного увеличения содержания общего белка в крови.
Для длительно неоплодотворенных коров по сравнению с контрольными животными характерным является изменение клеточного состава крови, начиная с раннего послеродового периода. Увеличение реактивности морфологического и биохимического состава крови у проблемных коров после 30 дневного использования АК в кормовом рационе проявляется в заметном увеличении лимфоцитов и плазмоцитов, гамма-глобулиновой фракций белка и холестерина в сыворотке и достоверном уменьшении микролимфоцитов, молодых форм нейтрофилов, эозинофилов. Нормализация состава крови у проблемных животных способствовала проявлению нормальных половых циклов и повышению уровня оплодотворения (до 60 % от всех обследованных животных).
Эффективное использование организмом жвачных животных ионов ацетата калия, которые в норме синтезируются в рубце коров (ацетат) или поступают с кормом (калий), вероятно, может определяться их ускоренным метаболизмом и непосредственным воздействием на обмен веществ.
Список литературы:
1. Reist M., Erdin D.K., von Euw D., Tschumperlin K.M., Leuenberger H. et al. Postpartum reproductive function: association with energy, metabolic and endocrine status in high yielding dairy cows // Theriogenology. - 2003. - Vol. 59, № 8. - P. 1707-1723.
2. Damptey J.K., Obese F.Y., Aboagye GS. et al. Blood metabolite concentrations and postpartum resumption of ovarian cyclicity in Sanga cows [Электронный ресурс] // S. Afr. J. Anim. Sci. - 2014. - Vol. 44. - P. 10-17. - Режим доступа: http://www.sasas.co.za.
3. Василенко Т.Ф., Монгалёв Н.П., Чувьюрова Н.И. Физиология эст-ральной цикличности в репродуктивной функции коров. - Екатеринбург: УрО РАН, 2011. - 176 с.
4. Дементьева Е.С. Влияние хозяйственных и биологических факторов на показатели гомеостаза крупного рогатого скота: автореф. дис. ... канд. биол. наук. - Новосибирск, 2011. - 22 с.
5. Самохин В.Т. Оптимизация обмена веществ в организме животных через систему: почва-растение-корма. Важнейшие итоги исследований по изучению заболеваний сельскохозяйственных животных незаразных этио-логий, их профилактика и лечение // Сб. науч. тр. Всерос. научно-исслед. ветеринарного института патологии, фармакологии и терапии. - Воронеж, 1992. - С. 1-4.
6. Алиев А.А., Буркова Л.М., Блинов В.И., Нагдалиев Ф.А. Ацетат как источник синтеза холина в организме жвачных животных // С.-х. биол. -1980. - Т. 15, № 5. - С. 732-735.
7. Терентьева Н.Ю., Багманов М.А. Влияние фитопрепаратов на восстановление воспроизводительной функции коров после отела // Вест. Ульяновской гос. с.-х. академии: Научно-теоретический журнал. - 2010. - № 2 (12). -С. 44-47.
8. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: Новая Волна, 2006. -1206 с.
9. Чернявский А.П. Патогенез и лечение коров с острой атонией рубца: автореф. дис. ... канд. вет. наук / Белгородская гос. с.-х. акад. - Белгород, 2008. - 17 с.
10. Grummer R.R., Carrol D.J. A review of lipoproteincholesterol metabolism: importance to ovarian function // J. Anim. Sci. - 1988. - Vol. 66, № 12. -P. 3160-3173.
11. Кудрявцев А.А., Кудрявцева Л.А. Клиническая гематология животных. - М.: Колос, 1974. - 399 с.
12. Карпюк С.А. Определение белковых фракций сыворотки крови экс-песс-методом // Лабораторное дело. - 1962. - № 7. - С. 33-36.
13. Плохинский Н.А. Биометрия. - М.: Изд-во МГУ, 1970. - 258 с.
14. Порфирьев И.А. Морфологические исследования крови высокопродуктивных молочных коров в профилактике алиментарного бесплодия // Вест. с.-х. науки. - М., 1983. - № 9. - С. 86-95.
15. Кочан Т.И. Усвоение углеводов в различных отделах пищеварительного тракта коров в зависимости от условий кормления. Физиология пищеварения и репродукции жвачных животных // Тр. Коми научного центра УрО РАН. - Сыктывкар, 1994. - № 137. - С. 31-38.