ВЕТЕРИНАРИЯ
УДК: [619:618.19-002-085.28]:636.22/.28
МОРФОЛОГИЧЕСКИЙ И БИОХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ КРОВИ СОБАК ПРИ ПАРВОВИРУСНОМ ЭНТЕРИТЕ СРЕДНЕЙ ТЯЖЕСТИ ТЕЧЕНИЯ ПОД ДЕЙСТВИЕМ
ПРЕПАРАТА «АЗОКСИВЕТ»
Великанов В.И. - д.б.н., профессор; Елизарова Е.А.- к.б.н., доцент; Кляпнев А.В. - аспирант; Терентьев С.С. - аспирант; Калачева Н.П. - аспирант; Кудряшова Е.С. - аспирант Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия
Ключевые слова: «Азоксивет», парвовирусный энтерит собак, биохимический анализ крови, иммуномодулятор.
Key words: "Azoksivet" parvovirus enteritis of dogs, blood chemistry, immunomodulator.
Одной из проблем в терапии парвови-русного энтерита собак и других заболеваний вирусной природы, выбор эффективного им-муномодулирующего препарата. Наше исследование посвящено изучению действия препарата «Азоксивет», на собаках больных парвовирусным энтеритом. Известно, что препарат нормализует фагоцитарную активность. Восстанавливает иммунные реакции при вторичных иммунодефицитных состояниях. Увеличивает резистентность организма в отношении локальных и генерализованных инфекций. Является детоксикантом, антиок-сидантом, стабилизирует клеточные мембраны [6].
Материалы и методы. Для проведения исследования были сформированы две группы по собак по 15 в каждой. Критериями подбора животных в обе группы стали: сходный симптомокомплекс, порода (беспородная), возраст (от 8 месяцев до 1 года), срок обращения в клинику от момента появления у животного первых симптомов (со слов владельца). Для определения этиологии заболевания была использована экспресс-диагностика на одношаговом иммунохрома-тографическом тесте VetExpert для диагностики инфекций и инвазий собак, позволяющий в кратчайшие сроки определить возбудителя болезни. Кровь для гематологических и биохимических исследований отбирали из вены сафена трижды - перед началом первых лечебных процедур при первичном поступлении животного, а затем на пятый и десятый дни лечения. Гематологические исследования проводили на анализаторе PCE-90Vet. Биохимический анализ крови проводили с помощью прибора BioChem SA[2, 5]. Статистическую обработку полученных данных проводили на программе Excel 2007.
К животным контрольной группы была
применена схема лечения с использованием: «Миксоферон» внутривенно - 1 коммерческая доза на 2,5 кг, раствор Рингер-Локка, внутривенно количеством 20 мл/кг, реополиглюкин -внутривенно 3 мл/кг, «Лауритин-С» внутривенно 5 мл, «Димедрол» внутривенно 1мг/кг, гентамицина сульфат 4% внутривенно 2,5 мг/кг, «Церукал» внутривенно 0,5 мл/кг, «Эн-теродез» внутрь 15 грамм, «Лактобифадол» внутрь 0,2 г/кг.
К животным опытной группы была применена схема лечения с использованием: «Азоксивет» 3мг/10кг внутривенно, раствор Рингер-Локка, внутривенно количеством 20 мл/кг, реополиглюкин - внутривенно 3 мл/кг, «Лауритин-С» внутривенно 5 мл, «Димедрол» внутривенно 1мг/кг, гентамицина сульфат 4% внутривенно 2,5 мг/кг, «Церукал» внутривенно 0,5 мл/кг, «Энтеродез» внутрь 15 грамм, «Лактобифадол» внутрь 0,2 г/кг. [3].
Результаты и исследования. При первичном осмотре у животных контрольной и опытной групп был зарегистрирован сходный симптомокомплекс: рвота, 3 - 4 раза в сутки; дефекация до 10 раз в сутки, каловые массы водянистые, с примесью слизи и прожилками крови; умеренный метеоризм; дегидратация (Сниженный тургор кожи, небольшая задержка до возвращения в нормальное положение; сухие слизистые оболочки; слегка удлиненное время наполнения капилляров; Мутноватые глаза.); субфебрильная температура тела (до 39,8°С + 0,8°С); тахикардия; незначительное тахипноэ; умеренная атаксия; небольшая задержка при ответной реакции на раздражитель. Описанное состояние животных соответствует парвовирусному энтериту средней тяжести [7].
Гематологическая картина крови животных контрольной и опытной групп при первичном обращении были сходные. Мы
наблюдали относительное увеличение количества эритроцитов или так называемый «ложный эритроцитоз», который является следствием обезвоживания животного вследствие прогрессирующей диареи. Содержание гематокрита подтверждает явление эритроци-тоза. При этом, не смотря на высокое количество гемоглобина в крови, среднее содержание гемоглобина в эритроците находится на очень низком уровне. Данные показатели свидетельствуют о значительной дегидратации животных с явлениями гипоксии тканей [4].
Биохимический состав крови животных опытной и контрольной групп (таблица 2) при первичном приёме был сходен. Мы обнару-
В результате раздражения стеллатных клеток токсинами и вследствие некрозов ге-патоцитов, начинается накопление компонентов соединительной ткани в пространствах Диссе и капилляризацией синусоидов, с последующим формированием септального
жили значительную гиперферментемию, при значительном сдвиге коэффициента Де Рити-са и увеличении отношения АлАт к щелочной фосфотазе примерно в 1,5 раз при увеличении концентрации последней. Такие соотношения показателей укладываются в биохимическую модель холестаза с явлениями вторичного гепатоза (норма ЩФ > 2, АЛТ; ЩФ<2). Блокада ферментов, участвующих в экскреции компонентов желчи, повреждение билиарного полюса гепатоцитов, а также холангиоцитов внутри и внедольковых желчных протоков метаболитами токсинов вирусной и бактериальной природы приводит внутрипеченочно-му холестазу.
фиброза и цирроза печени. Такой механизм сопровождается обычно повышением гамма-глютамилтранспептидазы и общего билирубина. Из-за множественных метаболических нарушений печени происходит поражение тканей поджелудочной железы, что выража-
Таблица 1. - Гематологические показатели крови собак опытной и контрольной групп
п=15
Группы Показатели\ Первичный приём На 5-ый день лечения На 10-ый день лечения
Контрольная Опытная Контрольная Опытная Контрольная Опытная
Гематокрит (Ht), % 68,55±4,35 68,47±3,95* 43,55±5,51 40,47±3,9* 42,21±3,51 45,47±3,62*
Гемоглобин (Hb), г/л 126,0±9,98 130,8±10,04 105,6±11,9 115±11,9 117±11,98 131±11,98
Эритроциты (RBC), 1012/л 9,28±0,12 10,03±0,14* 5,89±0,12 6,03±0,14* 6.26±0,32 6.4±0,2*
Среднее содержание гемоглобина в эритроците (MCH), пг 0,41±0,02 0,39±0,04* 0,53±0,02 0,57±0,03* 0,56±0,02 0,61±0,02*
СОЭ, мм/ч 8,2±2,2 8,4±2,2 25,5±3,5 19,6±2,2 16,7±2,6 12,6±2,5*
Лейкоциты (WBS), 109/л 4,48±0,31 4,51±0,49* 2.7±0,31 3.5±0,22* 3.5±0,51 4.3±0,43*
Эозинофилы (EOS), % 8,80±1,2 8,80±1,5* 4,2±1,2 5,1±1,5* 7,1±1,2 7,9±1,2*
Палочкоядер-ные нейтрофи-лы, % 3,0±0,25 3,0±0,20 13,5±3,25 9.75±2,5 8.5±2,5 5.8±1,25
Сегментоядер-ные нейтрофи-лы, % 2,40±0,19 2,40±0,18* 11±1,5 9±0,5* 6.8±1,2 5.1±0,2*
Лимфоциты (LYM), % 64,60±4,5 64,60±4,5* 38,5±3,5 45,9±4,2* 49,5±4,5 55,5±4,0*
Моноциты (MONO), % 25,00±3,10 25,00±3,10 11,5±2,10 12.25±3,10 13.65±2,0 19.1±3,5
Примечание: * -p<0,05
ется снижением активности а-амилазы. Также мы наблюдаем значительное увеличение концентрации гамма-глутамилтранспептидазы, в два раза выше верхней границы нормы (16 ед). Несмотря на то, что активность фермента наиболее высока в почках, источник сывороточной активности ГГТ - преимущественно гепатобилиарная система, и увеличение значений ГГТ в сыворотке - наиболее чувствительный лабораторный показатель при заболеваниях гепатобилиарной системы (маркер холестаза) [6]. Активность ГГТ сыворотки
возрастает при всех формах заболеваний печени - как первичных, так и вторичных, осложнённых. Это более чувствительный показатель патологии печени, чем АЛТ и ACT в диагностике механической желтухи, холанги-тов и холециститов. В данном случае мы как раз наблюдаем картину повышения количества ГГТ при повышенной активности щелочной фосфатазы. В рассматриваемой группе отмечается высокое содержание общего белка за счёт общей дегидратации организма.
Таблица 2 - Результаты биохимических анализов крови собак n=15
^^ Группы Первичный приём На 5-ый день лечения На 10-ый день лечения
Контрольная Опытная Контрольная Опытная Контрольная Опытная
Показатели
Общий белок, г/л 98,5 ± 24,2 96,5 ± 21,3 122,1 ± 11,4 104,5± 19,9 146,1 ± 31,7 118,5± 13,7
Глобулины, г/л 17,7 ± 3,11 19,1 ± 4,06* 14,6± 4,01 24,6± 6,31 21,3± 2,44 36,7± 3,44*
АлАт, ед 197± 35 194± 41 244± 54 202± 48 197± 37 175± 21
АсАт, ед 315± 65 291± 49* 512± 92 323± 89* 315± 46 245± 35*
Индекс Рейтиса 1,6± 0,2 1,5± 0,2 2,1± 0,4 1,6± 0,3 1,6± 0,4 1,4± 0,3
Билирубин общий, мкмоль/л 24,4±6,11 26,2±6,98 49,2±9,93 41,8±11,4 42,3±13,2 36,8± 14,9
Щелочная фосфата-за, МЕ/л 114,5± 11,2 108,5± 13,5* 148,5± 33,5 134,1± 31,8 139,2± 17,5* 103,2± 16,8*
а-амилаза, ед 308± 75 297± 97 306± 85 323±110 503± 76 669± 107*
ГГТ, ед 16 ± 4 16± 3* 16 ± 6 14 ± 2* 12 ± 2 8± 2*
Креатинин, мкмоль/л 140,3± 35,2 145,2± 44,8 278,8± 76,6 301,2± 98,5 182,5± 44,8 187,2± 33,6
Мочевина, ммоль/л 16,9 ± 3,49 17,2 ± 3,11 10,6 ± 2,11 8,9 ± 2,36 8,9 ± 3,03 8,6 ± 1,78
Примечание: * ^<0,05
Клиническая картина животных контрольной группы на 5-ый день терапии: у 3-х животных сохраняется рвота; у всех животных наблюдается диарея (до 5-ти раз в сутки); консистенция каловых масс полужидкая; сохраняется лёгкое угнетение; болезненность при пальпации в живота; частота сердечных сокращений и дыхательных движений в пределах, или на верхней границе нормы; Т = 38,9°С + 0,4°С; сохраняется незначительная потеря эластичности кожи; аппетит значительно снижен; жажда усилена. Общее состояние животных удовлетворительное. Болезнь перешла в тяжёлую форму у 4-х животных (27%), 1 случай летального исхода (7%).
Из данных гематологического исследования видно: Значительное снижение количество эозинофилов (на 52% по сравнению с первичным приемом); подъём количества па-лочкоядерных нейтрофилов в три раза по сравнению с исходными показателями, что превышает гематологическую норму в три
раза. Палочкоядерный нейтрофилёз, в данной ситуации, можно интерпретировать, как вторичную кишечную бактериемию на фоне снижения общего иммунного статуса организма. На 10-ый день терапии количество сегментоядерных лейкоцитов снижается на 38%, по сравнению с 5-ым днем. В общей картине на 5-й и 10-й дни терапии, мы видим повышение содержания сегментоядерных клеток, при продолжающейся лейкоцитопе-нии.
По биохимическому составу крови контрольной группы, можно заключить следующее: отмечается высокое содержание общего белка за счёт общей дегидратации организма, это состояние, не смотря на лечение, продолжается и на 5-ый день лечения; На 5-ый день терапии количество глобулинов снизилось на 6% (с 18% до 12%); увеличилось количество креатинина (в 2-а раза) и уменьшено - мочевины (на 62,7%) в сыворотке крови, данный процесс является «ложным повышением» и
может быть вызван применением ряда лекарственных препаратов. К 10-му дню терапии количество мочевины и креатинина снизились (на 16% и 34% соответственно); высокий уровень ГГТ сохраняется на 5-ый день терапии и значительно снижается к 10-му дню лечения на 25%; количество билирубина и общей щелочной фосфатазы к 5-му дню растет (на 50,4% и 22,9% соответственно). Оба показателя незначительно снижаются на 10-ый день (на 14% и 6,3% соответственно); Показатель а-амилазы, на 5-день терапии незначительно снижается, затем происходит повышение активности ферментов ( на 39% по сравнению с 5-ым днем терапии) [1].
К 10-му дню терапии, состояние 4-х животных контрольной группы продолжало ухудшаться, развивались осложнения (процент осложнений 26,6%). Три собаки погибли, в первые пять дней лечения (процент летальности 20%). Длительность болезни составила 11±3 дня.
Клиническая картина у животных опытной группы на 5-ый день терапии: рвота не наблюдается; диарея не наблюдается; частота дефекации до 5 раз в сутки, каловые массы оформленные; незначительная болезненность при пальпации брюшной стенки; аппетит сохранён; жажда умеренная; частота сердечных сокращений и дыхательных движений в пределах или на верхней границе физиологической нормы; Т= 38,6°С±0,4°С; животные умеренно активны. У трёх собак болезнь прогрессирует, летальных случаев нет. Общее состояние животных удовлетворительное.
На 5-ый день лечения количество эози-нофилов снизилось на 42%, что видно из данных представленных в таблице 1; количество лейкоцитов ваше на 23%, по сравнению с контрольной группой; на 10-ый день содержание лейкоцитов в крови увеличилось на 19% (по сравнению с показателями 5-го дня), что выше на 18% чем у контрольной группы; количество палочкоядерных нейтрофилов увеличено в четыре раза, по сравнению с исходными показателями, что в два раза выше гематологической нормы, однако к 10-му дню терапии их количество приходит к верхним границам нормы.
По биохимическим показателям крови опытной группы, представленных в таблице 2, можно заключить следующее: при повторном исследовании содержание билирубина, печёночных трансаминаз, а также щелочной фос-фатазы и ГГТ продолжает возрастать (эти показатели немного ниже по сравнению с пока-
зателями контрольной группы), на 10-ый день терапии биохимическая картина «печёночного профиля» значительно улучшается, и значительно ниже показателей контрольной группы; уровень ГГТ на 5-ый день терапии ниже чем у контрольной группы животных на 12,5%, а на 10-день разница составила 33%; показатель á-амилазы на 5-ый день терапии начинает расти, а на 10-ый день ферментативная активность поднимается до физиологической нормы (что на 24,8% выше чем у контрольной группы); количество глобулинов на 5-ый день выросло до 23%; Наблюдается ложное повышение креатинина, как в крови животных контрольной группы; на 10-ый день лечения количество мочевины и креати-нина снизились и незначительно отличаются от значений контрольной группы.
Длительность течения болезни, у животных опытной группы составило 8±1 дней. Три собаки остались в тяжелом состоянии, на 5-ый день терапии (процент осложнений 20%), летальные случаи отсутствуют.
Заключение. Исходя из полученных данных биохимического и гематологического анализа крови собак, можно сделать вывод, что препарат «Азоксивет» оказывает комплексное действие на организм животных, прямое иммуностимулирующее действие и детоксикационное действие. «Азоксивет» значительно облегчает течение болезни, уменьшает продолжительность болезни на 27% (в среднем на 3 дня), снижает летальность (в нашем эксперименте на 20) и частоту вторичных осложнений.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Маршалл, В.Дж. Клиническая биохимия. / Перс англ.-М.-СПб.: «БИНОМ»-«Невский диалект», 2000.-100.
2. Кондрахин, И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: Справочник /Под ред. проф. И.П.Кондрахина. - М.: КолосС, 2004. - 520 с.
3. Хаитов, Р.М., Пинегин Б.В. Основные принципы иммуномодулирующей терапии // Аллергия, астма клин. иммунол. — 2000. — № 1. — С. 9-16.
4. Veterinary Disaster Medicine: Working Animals// Wayne E. Wingfield, Sherrie L. Nash, Sally B. Palmer, Jerry J. Upp. Willey-Blackwell,2009.
5. Green R.M., Flamm S., 2002; AGA technical review on the evaluation of liver chemistry tests. Gastroenterologia p.1367.
6. Paul T. Mildly Elevated Liver Transaminase Levels in the Asymptomatic Patient / T. Paul, M.D. Giboney // Am Fam Physician. 2005.-
V.71(6).-P.1105-1110.
zoomedvet
URL:
7. Macintire DK, Smith-Carr S. Canine parvovirus. Part II. Clinical signs, diagnosis, and treatment. Compend Contin Educ Pract Vet 1997;19:291-302.
http://www.zoomedvet.ru/articles/lechenie/azoksi vet-kompleksnyy-vysokotekhnologichnyy-immunomodulyator/ (дата обращения: 20.12.2016).
МОРФОЛОГИЧЕСКИЙ И БИОХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ КРОВИ СОБАК ПРИ ПАРВОВИРУСНОМ ЭНТЕРИТЕ СРЕДНЕЙ ТЯЖЕСТИ ТЕЧЕНИЯ ПОД ДЕЙСТВИЕМ
ПРЕПАРАТА «АЗОКСИВЕТ»
Великанов В.И., Елизарова Е.А., Кляпнев А.В., Терентьев С.С., Калачева Н.П., Кудряшова Е.С. Резюме
Целью работы явилось, изучение действия препарата «Азоксивет» на физиологические показатели крови собак, при терапии парвовирусного энтерита средней тяжести течения. Материалы и методы: исследования проводились на собаках с кишечной формой течения парвовирусного энтерита, из которых было сформировано две группы (контрольная и опытная). В схеме лечения животных опытной группы был применён препарат «Азоксивет» в дозе 3мг/10кг внутривенно. У животных отбирали кровь для биохимического и гематологического анализа. Результаты исследования: В результате применения препарата «Азоксивет», на 5-ый день терапии мы наблюдали, разницу состояний животных контрольной и опытных групп: У собак опытной группы отсутствовала рвота и диарея, в контрольной группе эти симптомы присутствовали. При помощи гематологического анализа было обнаружено, что на 5-ый день терапии в крови опытной группы количество лейкоцитов больше на 23%, за счет лимфоцитов и эозинофилов. По результатам биохимических анализов был сделан вывод, что токсический эффект от болезни, был нейтрализован у собак опытной группы на 5-ый день терапии. У животных контрольной группы биохимические показатели печеночного профиля подходили к нижней границе нормы, только на 10- день эксперимента. Средняя продолжительность болезни у животных опытной группы составила 8 дней, что на 27% ниже чем у собак контрольной группы. Процент осложнений в опытной группе составил 20%, а в контрольной 26,6%. Летальность в контрольной группе составила 20%, а в опытной группе болезнь не привела к смертельному исходу.
MORPOLOGICAL AND BIOCHEMICAL BLOOD COMPOSITION IN DOGS IN A CASE OF PARVOVIRUS OF MODERATELY GRAVE INFLUENCED BY THE «AZOKSIVET» MEDICATION
In the treatment of viral diseases is important problem selection effective immunomodulating drug.The aim of the reseach was to study the study study of the drug "Azoksivet" on dogs for the treatment of parvovirus enteritis on moderately severe. Materials and methods: The eperement studies were conducted in dogs with the intestinal form of parvovirus enteritis flow, of which two groups (control and test) was formed. In the therapeutic regimen of the animals of the experimental group was applied drug "Azoksivet" in the 3mg / 10kg dose intravenously. Animals were bled for hematological and biochemical analysis. The investigtion results, as a result, use of the drug "Azoksivet", on the 5th day of treatment, we observed difference between state animal control and experimental groups: At dogs of experimental group was absent vomiting and diarrhea, these symptoms were present in the control group. With hematological analysis, it was found that the 5-th day of therapy in the experimental group the number of blood leukocytes greater by 23% due to lymphocytes and eosinophils. Based on the results of biochemical analyzes, it was concluded that the toxic effect of the disease in dogs was neutralized of experimental group on 5th day of therapy. The animals in the control group biochemical parameters of liver profile approached the lower limit of normal, just 10-day experiment. The mean duration of the disease in the ex-perement group was 8 days, that is 27% lower than the control group . The percentage of sequelas in experimental group was 20%, and 26.6% in the control. Mortality in the control group was 20%, while in the experimental group, the disease does not lead to death.
Velikanov V.I., Elizarova E.A., Klyapnev A.V., Terentev S.S., Kalacheva N.P., Kudryashova E.S. Summary