Морфологический и биохимический состав крови голштинских тёлок в процессе онтогенеза
Р.М. Соловьёв, аспирант, В.Ю. Козловский, д.б.н.,
А.А. Леонтьев, к.б.н, Великолукская ГСХА
Особый интерес среди интерьерных показателей представляет кровь, которая обладает относительным постоянством состава и вместе с тем характеризуется как лабильная система, способная в определённой степени отражать динамику жизненных процессов и изменений, происходящих в живом организме.
Материалы и методы. Целью наших исследований было изучение динамики гематологических и биохимических показателей крови голштинских чёрно-пёстрых тёлок в процессе онтогенеза. Гематологические показатели определяли в условиях научно-практической лаборатории ФГОУ ВПО «Великолукская ГСХА». Биохимические показатели сыворотки крови — на полуавтоматическом проточном фотометрическом анализаторе «Stat Fax 1904 Plus» фирмы «Awareness technology inc» с использованием набора реактивов ООО «Оль-векс диагностикум». Биометрическая обработка данных проводилась на PC с использованием пакета программ Microsoft Office Excel 2007. Степень достоверности выявленной разности между группами определялась с использованием критерия достоверности по Стьюденту (td).
Результаты исследований. Исследования проводились на базе федерального государственного унитарного предприятия учебно-опытного хозяйства «Удрайское» Великолукской государственной сельскохозяйственной академии Псковской области. Под опытом находилось 54 тёлки. Учитываемые показатели определяли в возрасте 6, 12 и 18 месяцев. Основные жизненные показатели (температура тела, пульс, частота дыхания) были в пределах физиологической нормы. Животные находились в равных условиях кормления и содержания. В хозяйстве применяется привязный способ содержания. Использовали трёхразовую систему кормления, рационы составлены в соответствии с детализированными нормами [1]. При постановке и проведении опыта было исключено влияние физиологического состояния на изучаемые показатели (феномены полового
цикла, стельность). Параметры микроклимата в животноводческом помещении, где содержались подопытные тёлки, были в пределах зоогигие-нических норм. Температура воздуха в среднем составляла 18°С с колебаниями 17,0—19,5°С, относительная влажность — 75%±2%, скорость движения воздуха 0,8 м/с.
О морфологическом составе крови голштинских тёлок можно судить по результатам, представленным в таблице 1.
Установлено, что гематологические показатели у подопытных животных были в пределах физиологической нормы. Сравнительный анализ показал, что в крови шестимесячных тёлок наблюдалось более высокое содержание гемоглобина — на 6,3 г/л (р<0,001) и эритроцитов — на 0,4-1012 л (р<0,05) больше по отношению к 12 месяцам; по уровню гемоглобина — на 9,4 г/л (р<0,001) и эритроцитов на 0,6-1012 л (р<0,05) — по отношению к 18 месяцам. В возрасте 12 месяцев уровень гемоглобина был выше на 3,1 г/л (р<0,05), в сравнении с возрастом в 18 месяцев.
По уровню лейкоцитов в крови животных во все изучаемые периоды онтогенеза статистически достоверных разностей не обнаружено.
Калий, кальций, фосфор и магний являются показателями минерального обмена в организме животных. Эти элементы входят в состав каждой клетки организма и участвуют в различных физиологических процессах. Кальций принимает участие в процессах роста, свертывания крови, передаче нервных импульсов, работе желёз и клеточных мембран. Фосфор обеспечивает формирование костей, обмен энергии, взаимодействие мембран, обмен нуклеиновых кислот. Калий участвует в создании условий для мышечных сокращений, в поддержке осмоса крови, кислотно-щелочного баланса, нормализации водного баланса организма, входит в состав ферментного комплекса натрий — калий — АТФаза. Важность магния связана, в первую очередь, с его ролью в функционировании ферментативных систем организма. Определение данных элементов в крови приобрело диагностическое значение
1. Морфологический состав крови голштинских тёлок в процессе онтогенеза
Показатели Возраст, мес.
6 (n = 20) 12 (n = 18) 18 (n = 16)
М±т Cv М±т Cv М±т Cv
Гемоглобин, г/л 99,6±1,65***""" 7,4 93,3±0,87" 4,0 90,2±0,94 4,2
Эритроциты, 1012 л 7,9±0,15*" 8,5 7,5±0,12 6,8 7,3±0,11 6,0
Лейкоциты, 109 л 8,0±0,19 10,6 7,7±0,21 11,9 7,8±0,16 8,2
Примечание: * - p<0,05; *** - р<0,001(к 12 мес.); ■ - p<0,05; ■■ - p<0,01; ■■■ - p<0,001 (к 18 мес.).
2. Биохимические показатели сыворотки крови голштинских тёлок
в процессе онтогенеза
Показатели 6 мес. 12 мес. 18 мес.
n=20 n=18 n=16
M±m 5 Cv M±m 5 Cv M±m 5 Cv
Калий, ммоль/л 4,33±0,16 0,72 16,69 4,45±0,09 0,38 8,66 4,48±0,13 0,52 11,59
Кальций, ммоль/л 2,29±0,017*** 0,07 3,26 2,18±0,02 0,08 3,72 2,24±0,03 0,11 5,05
Магний, ммоль/л 1,13±0,05™ 0,24 21,68 1,01±0,03^ 0,14 14,00 0,90±0,02 0,10 11,57
Фосфор, ммоль/л 3,47± 0 09***ш 0,44 12,74 2,45± 0,06™ 0,24 9,76 1,94±0,09 0,37 19,31
Глюкоза, ммоль/л 3,53±0,06 0,26 7,30 3,40± 0,09 0,37 11,02 4,46± 0,15/// *** 0,62 13,88
Холестерин, ммоль/л 2,09±0,06 0,29 13,91 3,15± 0,12/// 0,51 16,31 3,27± 0,05/// 0,21 6,35
Общий белок, г/л 71,23±0,79 3,52 4,94 76,22± 1,38// ■■ 5,85 7,67 71,41± 1,09 4,39 6,15
Мочевина, ммоль/л 2,33±0,15 0,65 27,96 2,62±0,15 0,62 23,53 3,79± 0,29/// *** 1,164 30,67
Креатинин, мкмоль/л 99,89± 4,06** 18,17 18,19 86,04± 2,32 9,83 11,42 111,46± 4 77*** 19,09 17,13
Щелочная фосфатаза (ЩФ), Ед/л 448,87± 19,97*" 89,30 19,89 393,22± 16,81 71,32 18,14 363,39± 19,95 79,79 21,96
Креатинкиназа (КК), Ед/л 127,61± 6 07***ш 27,15 21,28 75,10± 6,71 28,45 37,88 65,44± 5,16 20,66 31,56
Аспартатамино-трансфераза (АСТ), Ед/л 74,92±3,54 15,82 21,11 71,23±1,31 5,57 7,82 67,38±2,13 8,53 12,67
Аланинамино-трансфераза (АЛТ), Ед/л 31,07±1,32^ 5,92 19,06 29,48±1,00 4,26 14,46 27,28±0,70 2,80 10,27
Примечание: / - p<0,05; И - p<0,01; 111 - р<0,001(к 6 мес.); * - p<0,05; ** - p<0,01; *** - p<0,001 (к 12 мес.); ■ - p<0,05; ■■ - p<0,01; ■■■ - p<0,001(K 18 мес.).
при изучении процессов роста, заболеваний и воспалений различного генеза [2].
Индикаторами белкового обмена организма служит определение общего белка, мочевины, креатинина, АСТ, АЛТ в сыворотке крови животного. При росте, беременности, лактации, мышечной работе и других физиологических процессах, а также при заболеваниях животных содержание белков в крови изменяется. Мочевина и креатинин - конечные продукты обмена белков, их уровень в крови выполняет роль показателя функционирования мышечной системы, почек и печени. В обеспечении биосинтеза белка большое значение имеют ферменты -трансаминазы (АСТ, АЛТ). Они ускоряют реакцию переаминирования аминокислот с кетокислотами, а также осуществляют связь между белковым, углеводным и липидным обменами [3].
Холестерин в составе плазматической мембраны клеток играет роль модификатора бислоя, придавая ему определённую жёсткость, предшественник желчи и некоторых гормонов. Имеет определяющую способность у животного к проявлению высокой молочной продуктивности. Основным показателем углеводного обмена и главным источником энергии для клеток организма является глюкоза.
Креатинкиназа - показатель энергетического метаболизма, выполняющий функцию акку-
муляции богатого энергией креатинфосфата, который является резервуаром энергии для процессов мышечного сокращения, синтеза белка, жиров, мочевины и систем транспорта ионов через клеточные мембраны [4].
Щелочная фосфатаза присутствует во всех органах и тканях. Её активность в крови используется в диагностике процессов роста и развития костных структур, патологии гепатобилиарной системы и костной ткани [5].
В таблице 2 представлены результаты исследования биохимических показателей сыворотки крови голштинских тёлок в процессе онтогенеза. Проведённый анализ показал, что статистически достоверная разность между биохимическими показателями сыворотки крови у тёлок в возрасте 6 и 12 месяцев была выявлена по уровню кальция — на 0,11 ммоль/л (р<0,001), фосфора неорганического — на 1,02 ммоль/л (р<0,001), креатинина — на 13,85 мкмоль/л (р<0,01), щелочной фосфатазы — на 55,65 Ед/л (р<0,05) и креатинкиназы — на 52,51 Ед/л (р<0,001) в пользу шестимесячного возраста; по уровню холестерина — на 1,06 ммоль/л (р<0,01), общего белка — на 4,99 г/л (р<0,01) — в пользу 12-месячного возраста.
Достоверная разница между подопытными животными в возрасте 6 и 18 месяцев обнаружена по магнию — на 0,23 ммоль/л (р<0,001),
фосфору неорганическому — на 1,53 ммоль/л (р<0,001), щелочной фосфатазе — на 85,48 Ед/л (р<0,01), креатинкиназе — на 62,17 Ед/л (р<0,001) и АЛТ на 3,79 Ед/л (р<0,05) в пользу шестимесячного возраста; по глюкозе — на 0,93 ммоль/л (р<0,001), холестерину — на 1,18 ммоль/л (р<0,001), мочевине — на 1,46 ммоль/л (р<0,001) в пользу 18-месячного возраста.
Между подопытными голштинскими тёлками в возрасте 12 и 18 мес. по ряду биохимических показателей также наблюдалась статистически достоверная разность. В возрасте 12 мес. был выше уровень магния на 0,11 ммоль/л (р<0,05), фосфора неорганического — на 0,51 ммоль/л (р<0,001), общего белка — на 4,81 г/л (р<0,01). В возрасте 18 мес. обнаружено более высокое содержание глюкозы — на 1,06 ммоль/л (р<0,001), мочевины — на 1,17 ммоль/л (р<0,001), креатинина — на 25,42 мкмоль/л (р<0,001).
Вывод. Таким образом, анализ результатов морфологических и биохимических исследований показал, что метаболический профиль крови всех животных в различные периоды онтогенеза находился в пределах физиологической нормы. Полученные нами результаты согласуются с
работами ряда исследователей [6, 7, 8], которые также отмечали аналогичную динамику изменений отдельных биохимических показателей у животных в процессе онтогенеза.
При статистической обработке цифрового материала по некоторым показателям не было установлено достоверных межвозрастных различий. Но, тем не менее, имелась тенденция в изменении концентрации этих метаболитов между рассматриваемыми возрастными группами животных.
Литература
1. Нормы и рационы кормления сельскохозяйственных животных: справочное пособие / под ред. А.П. Калашникова. М., 2003. 422 с.
2. Азаубаева Г.С. Картина крови у животных и птицы. Курган: Зауралье, 2004. 168 с.
3. Комов В.П., Шведова В.Н. Биохимия. М.: Дрофа, 2004. 640 с.
4. Михайлов В.В. Биоэнергетические процессы у крупного рогатого скота в связи с продуктивностью и условиями питания: дисс. ... д.б.н. Боровск, 2008. 348 с.
5. Бочков В.Н., Добровольский А.Б., Кушлинский Н.Е. и др. Клиническая биохимия / под ред. В.А. Ткачука. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. 512 с.
6. Кондрахин И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики. М.: КолосС, 2004. 520 с.
7. Головаха В.И. Функціональний стан печінки і її патологія у коней (етіологія, патогенез і діагностика): дисс. ... д.в.н. Біла Церква, 2004.
8. Головаха В.И. Вторичный гепатоз телят: автореф. дисс. ... к.в.н. Киев, 1995. 24 с.