CC BY
92
200мкш 1 Электронное изображение 1
Рис. 3. Электронное изображение в режиме вторичной электронной эмиссии рентгенспектрального микроанализа распределения химических элементов. Указана зона сканирования на границе коронкового дентина и пломбировочного материала. Увеличение в 500 раз.
Таблица 3
Количественный микрохимический анализ на границе коронкового дентина и пломбировочного материала.
Элемент Весовой % Атомный0/о
C 36.08 53.02
O 31.60 34.86
Si 13.14 8.26
Ca 4.49 1.98
Ba 14.69 1.89
Итого 100.00
200мкт 1 Электронное изображение 1
Рис. 4.. Электронное изображение в режиме вторичной электронной эмиссии рентгенспектрального микроанализа распределения химических элементов. Указана зона сканирования коронкового дентина вблизи границы с пломбировочным материалом. Увеличение в 500 раз.
Таблица 4
Количественный микрохимический анализ вблизи границы коронкового дентина и пломбировочного материала
Элемент Весовой % Атомный %
C 32.14 46.17
O 38.08 41.08
Si 6.07 3.73
P 6.91 3.85
Ca 10.05 4.33
Ba 6.75 0.85
Итого 100.00
Вывод. Таким образом, предложенная адгезивная биоактивная светоотверждаемая бондинговая система имеет химическую адгезию с дентином и пломбировочным материалом посредством проникновения химических элементов из биопраймера и пломбировочного материала в твердые ткани зуба, тем самым повышая качество пломбирования зуба.
Литература
1. Борисенко А.В. Композиционные пломбировочные и облицовочные материалы / А.В.Борисенко, В.П.Неспрядько. Киев: Книга плюс, 2001. 195 с.
2. Ипполитов ЮА. Топохимия и содержание «катионного белка» в структурах зуба человека / Ю.А.Ипполитов, Э.Г.Быков,
О.М.Горшкова // Новости клинической цитологии. 2001. Т.5, № 3-4. С. 162.
3. Рот Г.И. К вопросу о выборе бондинговых систем при лечении кариеса / Г.И.Ронь, Ю.В.Мандра // Настольная книга стоматолога, работающего материалами фирмы Heraeus Kulzer. М., 2000. С. 8-11.
BIOACTIVE BONDING SYSTEM AS A FACTOR OF RENEWED TOOTH SECONDARY DEMINERALIZATHION PREVENTION.
YU.A. IPPOLITOV Voronezh State Medical Academy after N. N. Burdenko
The work demonstrates histochemical studies of the extracted teeth sections. The presence of carbohydrate-protein biopolymers in teeth hard tissues is shown. The author suggests using the discovered biopolymers in bond systems for the improvement of chemical adhesion of filling materials to teeth hard tissues. The study proves the suggestion by radiographic spectral microanalysis.
Key words: biopolymer, bond systems, a tooth
УДК 611.81:615.849
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ НЕЙРОЦИТОВ СТАРОЙ И ДРЕВНЕЙ КОРЫ ГОЛОВНОГО МОЗГА КРЫС ПРИ ДЕЙСТВИИ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ
Д. А. СОКОЛОВ, В. Н. ИЛЬИЧЕВА, Н. В. МАСЛОВ, В. П. ФЕДОРОВ*
В настоящем сообщении авторами приводится описание форм морфологической изменчивости нервных клеток цитоархитектониче-ского поля САз гиппокампа и пириформной зоны древней коры головного мозга крыс при действии ионизирующего излучения в дозе 87,5 Гр. Установлено, что эффект облучения заключается в стойком уменьшении морфологических форм пограничной и адаптационной изменчивости на фоне возрастания процентного содержания нейро-цитов с признаками альтеративных изменений.
Ключевые слова: нейроцит, ионизирующее излучение, цитоархитектоника.
Современная экологическая нейроморфология пополняет свое содержание новыми данными об изменениях структур нервной системы, развивающихся при действии различных факторов окружающей среды. Эти многочисленные факторы, воздействующие на живой организм, носят в основном антропогенную природу и возникают в результате научно-производственной и хозяйственной деятельности человека.
Среди антропогенных факторов, обладающих наибольшим биотропным эквивалентом, особое место занимает ионизирующее излучение. В настоящее время скопилось достаточное количество данных о морфологической реакции элементов центральной нервной системы в ответ на действие ионизирующей радиации. Однако, эти сведения, несмотря на свою многочисленность, достаточно противоречивы, несистематизированы, охватывают лишь некторые отделы ЦНС. Морфологические изменения нейронов, наблюдаемые исследователями, сводятся либо к описанию их линейных параметров, либо к подсчету так называемых «реактивных» и «деструктивных» клеток, что в определенной мере усложняет интерпретацию функционального состояния нейроци-тов при действии экзогенных факторов.
Идея создания универсальной классификации форм морфологической изменчивости нервных клеток обсуждалась нейроморфологами с середины XX века. Наибольшего внимания в этом отношении заслуживают работы Ю. М. Жаботинского [2], В. Н. Ярыгина с соавт. [5], где достаточно подробно изучено и описано многообразие форм нервных клеток, наблюдающихся как в интактном организме, так и при действии ряда физических, химических факторов, и некоторых заболеваний. Немаловажную роль сыграла работа Н. Н. Боголепова [1], где с применением метода полутонких срезов и электронной микроскопии был достигнут функциональный эквивалент морфологических изменений нервных клеток. Внимания заслуживает классификация типовых форм морфологической изменчивости центральной
* Воронежская UVF им. Н. Н. Бурденко 394036, г. Воронеж, ул. Студенческая, д. 10; (4732) 53-02-53.Воронежский институт физической культуры Московской государственной академии физической культуры 394000, г. Воронеж, ул. К. Маркса, 59
нервной системы [4], разработанная на основе положений, сформулированных в упомянутых выше работах, основанная на данных многолетних исследований реакции различных отделов нервной системы на действии факторов антропогенной природы. Последняя является оптимальной при описании структурнофункциональных изменений нейроцитов ЦНС.
Цель исследования - изучение соотношения различных форм морфологической изменчивости нейроцитов старой и древней коры головного мозга крыс при действии ионизирующего излучения. Эксперимент был выполнен на 150 половозрелых белых беспородных крысах-самцах массой 180-200 г. Животных экспериментальной группы помещали в специальную камеру из оргстекла и облучали у-квантами 60Со (1,25 МэВ) на установке «Хизотрон» (Чехия) в кранио-каудальном направлении. Доза облучения составила 87,5 Гр; мощность дозы - 0,86 Гр/мин. Дозиметрический контроль облучения осуществлялся клиническим дозиметром 27012, стержневая камера которого располагалась в поле облучения. Крыс контрольной группы помещали в ту же камеру, однако облучающую установку не включали. Эвтаназия животных осуществлялась путем декапитации на гильотине через 3, 60 и 600 мин после облучения.
Объектом для изучения в старой коре головного мозга служили нейроциты цитоархитектонического поля САз гиппокампа (ГПК), а в древней коре - пириформной зоны (ПЗ). При выборе объекта исследования отдавалось предпочтение структурам головного мозга, участвующим в обеспечении механизмов обоняния, памяти, внимания, ориентировочного рефлекса, временного обеспечения высшей нервной деятельности, которые непосредственно зависят от функционального состояния гиппо-кама и пириформной зоны древней коры головного мозга. Выбор участков мозга для изучения осуществлялся при помощи цитоар-хитектонических карт. Для проведения морфологических исследований кусочки мозга фиксировали в 10 %-ном растворе нейтрального формалина с последующей заливкой в парафин. Парафиновые срезы толщиной 6 мкм окрашивали гематоксилином Караци - эозином. Более детальную характеристику состояния нервных клеток получали при окрашивании препаратов толуиди-новым синим по методу Ниссля. С целью выявления морфологических изменений, происходящих в нейронах при действии изучаемых факторов, проводили визуальную оценку характера распределения базофильного вещества в их цитоплазме. На препаратах, окрашенных по Нисслю, выполняли морфометрию нейроцитов, проводили подсчет нервных клеток с разными типовыми формами морфологической изменчивости, которые выделяли в соответствии с классификацией [3]. Материалы исследования обрабатывались методами дескрипционной статистики.
В изучаемых отделах ЦНС интактных животных нами обнаружены следующие формы морфологической изменчивости нервных клеток. Среди нейронов преобладали нормохромные клетки. Их содержание в ГПК составляет 54,3%, а в ПЗ - 52,0% от общего количества нейроцитов. Этот тип нервных клеток отличается четкими контурами ядра и перикариона. Ядра клеток светлые, содержат базофильное ядрышко, занимающее центральное положение. Вещество Ниссля мелкими глыбками или пылевидной зернистостью заполняет нейроплазму. Распределение базофильно окрашенного рибонуклеопротеидного комплекса однородное, но нередко в области аксонального холмика имеются мелкие участки просветления цитоплазмы.
Гипохромные нейроциты в контрольной группе составляют 10,9% в ГПК и 8,0% в ПЗ соответственно. Клетки этого типа имеют правильную форму ядра и клеточного тела. В их цитоплазме обнаруживаются ряд крупных очагов хроматолиза, в целом уровень хроматофилии таких клеток ниже, чем у нормо-хромных. Хроматофильное вещество при этом сохраняется в виде небольших скоплений вокруг ядра или под цитолеммой. Ядро светлое, ядрышко базофильное, расположено в центре.
Количество гиперхромных нервных клеток в контрольной группе в ГПК составляет 19,9%, в в ПЗ - не превышает 19,0%. Такие нейроциты сохраняют правильную форму тела и ядра. Их цитоплазма имеет повышенную интенсивность хроматофилии. Ядра окрашены темнее из-за наличия гетерохроматина. Ядрышки чаще крупные, занимают центральное положение. Среди нейро-цитов гиппокампа животных контрольной группы встречались пикноморфные клетки. Их содержание в ГПК находилось в пределах 2,2%, а в ПЗ - 13,0%. Эти нейроны имеют неправильную форму клеточного тела. Ядро сморщено, отличается сильной
гиперхромией и чаще всего не визуализируется. У пикноморф-ных нейроцитов нередко окрашивается аксон, имеющий прямую или зигзагообразную форму. Иногда в центре нейроцита наблюдаются участки с пониженной хроматофилией.
Содержание клеток-теней составляет 12,7 и 8,0% в ГПК и ПЗ соответственно. Они имеют нечеткие контуры клеточного тела, разнообразный уровень хроматофилии. Ядро и ядрышко в таких клетках не идентифицируются. Клетки-тени представляют собой фрагменты деструктивно измененных нейронов. К этой же категории относятся нейроциты ядра и ядрышки которых не попали в срез. У интактных особей в изучаемых отделах коры головного мозга преобладают нормохромные нервные клетки, содержание которых составляет более половины от наблюдаемых форм в нейронной популяции. Пикноморфные нейроциты и клетки-тени, отражающие процессы физиологической деструкции, представлены в меньшем количестве. Содержание гипо- и гиперхромных нейронов занимает промежуточное положение. Они отражают состояния пониженной и повышенной активности нервных клеток и являются проявлением адаптационной изменчивости. При действии у-излучения в дозе 87,5 Гр в обозначенные сроки исследования наблюдали изменения процентного соотношения типов нервных клеток в ГПК и ПЗ древней коры (рис.).
При действии изучаемого фактора мы наблюдали небольшое число нормохромных нейронов, линейные размеры которых достоверно отличались от таковых в контроле. Такие изменения мы склонны относить к «пограничным», которые представляют собой совокупность конформационных и метаболических изменений внутриклеточных биополимеров, с одной стороны, превышающих объем физиологический изменчивости, а с другой, - не достигающим уровня типовых патологических изменений. Такие изменения являются «срочной» ответной реакцией клеток на внешние воздействия. Они отражают промежуточное между вариантами бионормы и патологии состояние нейронов [3].
Рис. Процентное соотношение различных форм морфологической изменчивости нервных клеток в изучаемых отделах коры головного мозга при действии ионизирующего излучения в дозе 87,5 Гр. Обозначения: ГПК -гиппокамп, ПЗ - пириформная зона древней коры; КТ - клетки-тени; ПМ -пикноморфные нейроциты; ГР - гиперхромные нейроциты; ГО - гипо-хромные нейроциты; НХ - нормохромные нейроциты.
Кроме этих форм изменчивости, мы наблюдали гипо- и ги-перхромные клетки с признаками как дистрофических, так и некротических изменений. В клетках с признаками нейронодист-рофии по гипо- или гиперхромному типам имелись множественные вакуоли в цитоплазме, смещение ядра и ядрышка к периферии. Морфометрические показатели этих нейронов достоверно отличались от контрольных. Эти формы морфологической изменчивости являются обратимыми. Клеткам с деструктивными изменениями соответствовали пикноморфные нейроны и клетки-тени как проявления коагуляционного и колликвационного ней-рононекрозов. При воздействии на организм у-излучения в дозе 87,5 Гр на протяжении 600 мин пострадиационного периода в цитоархитектоническом поле СА3 ГПК и ПЗ древней коры развиваются неспецифические морфологические реакции, которые заключаются в изменении процентного соотношения различных форм морфологической изменчивости нервных клеток. Эффект облучения заключается в стойком уменьшении морфологических форм пограничной и адаптационной изменчивости на фоне возрастания процентного содержания нейроцитов с признаками альтеративных изменений. Учитывая близкое по значению процентное содержание деструктивных форм нервных клеток в ГПК и ПЗ древней коры, наблюдаемое к 600-й мин эксперимента,
можно предположить наличие сходных морфогенетических механизмов развития лучевой реакции изучаемых отделов коры головного мозга в поздние сроки пострадиационного периода.
Литература
1.Боголепов Н. Н. Ультраструктура мозга при гипоксии. М.:
Медицина, 1979. 167 с.
2.Жаботинский Ю. М. Нормальная и патологическая морфология нейрона. Л.: Медицина, 1965. 323 с.
3.Петров А. В., Федоров В. П., Болтенков Е. М. Актуальные проблемы экологической нейрогисто-морфологии. 1. Методологические аспекты // ЦНИЛ - вчера, сегодня, завтра: сб. научн. тр., посвящ. 85-летию Воронежской ГМА им. Н. Н. Бурденко и 40-летию со дня организации ЦНИЛ. Воронеж, 2003. С. 122-137.
4. Федоров В. П., Петров А. В., Степанян Н. А. Экологическая нейроморфология. Классификация типовых форм морфологической изменчивости ЦНС при действии антропогенных факторов // Ж.теоретич. и практич.медицины. 2003. Т. 1, № 1. С. 62-66.
5.Ярыгин Н. Е. Патологические и приспособительные изменения нейрона. М.: Медицина, 1973. 191 с.
MORPHOLOGICAL VARIABILITY OF NERVOUS CELLS IN ARCHAEO-AND PALAEOCORTEX AT THE EFFECT OF IONIZING RADIATION
D. A. SOKOLOV, V. N. ILICHYOVA, N. V. MASLOV, V. P. FYODOROV
Voronezh state medical academy after N. N. Burdenko Voronezh Physical Culture Training Institute of Moscow State Physical Culture Training Academy
The present paper covers the description of morphological variability forms of nervous cells in cytoarchitecture field CA3 of hippocampus and zona piriformis of palaeocortex of brain at the effect of ionizing radiation in a dose of 87,5 Gr. It is stated that the effect of irradiation concludes decreasing of morphological forms of frontier and adaptive variability accompanying with increasing of alterative-changed nervous cells percentage.
Key words: neuron cell, ionizing radiation, cytoarchitectonic.
УДК 616-073. 65+612.015..36
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ АПРОБАЦИЯ МЕТОДА ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ТЕРМОМЕТРИИ В ИССЛЕДОВАНИИ РЕГУЛЯТОРНЫХ ПРОЦЕССОВ.
Е.А.БОРИСОВА, К.М. РЕЗНИКОВ*
В статье обосновывается возможность использования метода дифференциальной термометрии для исследования регуляторных процессов в организме животных в норме и при введении электроакти-вированных водных растворов.
Ключевые слова: электроактивированный, термометрия, раствор
Вода как жидкость существует в организме в крови, лимфе и секретах слезных, слюнных и пищеварительных желез. В составе клеток и тканей вода - это не жидкость, а коллоид, а возможно, и кристаллоид. С позиции квантовой физики известно, каким образом вода может в течение долгого времени сохранять информацию. Последовательность процесса структурирования биогенной воды была предложена К.М. Резниковым в 2001 году. Эти данные раскрывают процессы передачи информации в живых системах и возможности использования их в диагностических и лечебных целях. Вода организма человека способна выполнять системообразующую роль, восстанавливая структурнофункциональные нарушения органов и тканей, с одной стороны, а с другой - регуляторную роль, обеспечивая алгоритм восстановления, что согласуется с концепцией двухкомпонентной системы восстановления поврежденных тканей [9]. По мнению автора модели многоканальной рецепторно-информационной системы К.М. Резникова [10] изменения информационных возможностей структурированной воды могут быть наиболее ранними признаками возможности возникновения патологических явлений. Поэтому разработка методов, позволяющих оценить регуляторные процессы, происходящие в организме в норме и при патологии, очень важна с точки зрения наиболее раннего выявления заболеваний и возможной последующей коррекцией патологического процесса на уровне регуляторных воздействий.
* ГОУ ВПО «ВГМА им. Н.Н.Бурденко» Росгосздрава, Россия, 394000, Воронеж, Студенческая 10, кафедра фармакологии, тел. 8-4732-531065
Используется ряд электрофизиологических методов диагностики, анализирующих электрические характеристики кожного покрова. С их помощью установлено, что в ответ на заболевание кожа реагирует изменением всех своих электрических характеристик, измерением которых занимается электропунктурная диагностика. Данные отечественных и зарубежных авторов свидетельствуют о том, что по изменению электрических параметров отдельных акупунктурных точек можно судить о локализации патологического процесса, а также о его динамике при развитии заболевания и в ходе его лечения. Установлено, что изменения электрического сопротивления в этих точках проявляются раньше, чем появляются явные клинические признаки заболевания. На зависимость электрокожного сопротивления от состояния той или иной системы или органа человека указывают работы многих авторов [4,5,3,14]. Наиболее современным методом исследования состояния БАТ (биологически активные точки) является измерение разности потенциала между БАТ и интактной зоной кожи. При этом исследуется непосредственно искомый параметр, не требуется, как при других методах, специальный перерасчет, не травмируется зона замера, исследования можно проводить длительно и многократно [13]. Выявлена корреляционная зависимость между динамикой патологического процесса и изменением биопотенциала. Для исследования регуляторных процессов в норме и при патологии, а также для оценки действия лекарственных препаратов был разработан градиентный (дифференциальный) метод исследования электрической активности БАТ [6]. Этот метод основан на регистрации разности потенциалов между БАТ и интактной зоной кожи с помощью хлорсеребряных электродов. Метод был успешно использован в ряде научных работ по изучению действия лекарственных средств [11,1,12]. На его основе разработаны подходы к контролируемому лечению, позволяющему корректировать дозу и частоту введения препарата на протяжении всего лечения.
Более удобен для практики микропроцессорный регистратор температуры, сконструированный в Воронежском техническом университете под руководством профессора Ю.С. Балашова с участием профессора К.М. Резникова. Он разрешен для клинических испытаний Научно-техническим медицинским советом (протокол №15 от 25 марта 1999 г.). В нашем исследовании использован такой регистратор температуры, а в качестве лекарственного средства - электроактивированные водные растворы. Характеристика действия электроактивированных водных растворов натрия хлорида (анолит, католит) представлена в ряде статей. ЭАВР получали на выпускаемая промышленностью (ВНИИМТ-НПО ЭКРАН) установке СТЭЛ, имеющей сертификат Санэпиднадзора РФ, которая модернизирована для получения строго стандартных растворов анолита и католита [2]. Предпринята попытка с помощью метода дифференциальной термометрии оценить действие электроактиви-рованных водных растворов (ЭАВР) на организм животных.
Цель исследования - обоснование возможности применения метода дифференциальной термометрии для изучения регуляторных процессов организма.
Материалы и методы исследования. Исследования проводились на кафедре фармакологии Воронежской ГМА им. Н.Н. Бурденко. Исследование проводилось в стандартных условиях при температуре 10-15 градусов Цельсия на 30 здоровых кроликах обоего пола массой 2,5-4,0 кг. Искомую точку на ухе кролика находили, руководствуясь атласом аурикулярного представительства внутренних органов у кроликов. При этом при наличии нескольких искомых точек выбирали самую дистальную точку сердца, расположенную по средней линии на ухе кролика. На точку, определяемую с помощью индикатора БАТ, устанавливался основной датчик термопары, а второй накладывался на интактную зону на расстоянии 1,0-1,5 см. вверх и латеральнее первой вне сосуда. В материалах кандидатской диссертации Трофимовой О.В. [11]. проведены исследования и даны рекомендации по выявлению расположения наиболее информативных точек в интактной зоне. Эти рекомендации были использованы в нашей работе. Динамика разности температур оценивалась в течение 120 секунд и фиксировалась сразу в виде термограммы на экране компьютера. Все животные были разделены на три группы. Первой группе (10 животных) после контрольного двухминутного измерения разности температур между БАТ сердца и интактной зоной уха внутримышечно (в мышцы бедра) вводился католит из расчета 2 мл на 1 кг массы животного. Повторное измерение разности температур проводилось через 2 часа. Кроликам 2-й группы (10 животных) внутримышечно вводили ано-
