«1нноваци в стоматологи», № 3, 2015 ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-ТЕОРЕТИЧНИЙ РОЗД1Л
УДК 616.724:599.323.4/616.72-002-036.12-001.6
К. А. Семенов, к. мед. н., О. С. Решетникова, д. мед. н.
Государственное учреждение «Днепропетровская медицинская академия Министерства здравоохранения Украины»
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВИСОЧНО-НИЖНЕЧЕЛЮСТНОГО СУСТАВА У КРЫС, ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ ХРОНИЧЕСКОГО ТРАВМАТИЧЕСКОГО АРТРИТА (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ГРУППА, ЧАСТЬ 2)
Изучение морфологических изменений структур височно-нижнечелюстного сустава (ВНЧС) представляет научный интерес в связи с ростом частоты функциональных нарушений в зубочелюстном аппарате. Создание адекватной модели патологии в сравнении с данными, полученными при изучении животных в физиологических условиях, является необходимым условием при разработке новых методов диагностики и лечения болезни в экспериментальной медицине. В настоящей работе представлены данные морфологического исследования структур ВНЧС у крыс при моделировании хронического травматического артрита.
Макроскопическое и микроскопическое исследование структур ВНЧС проводили у 5 крыс, через 14 дней после моделирования хронического травматического артрита. Для патоморфологического исследования выделяли височно-нижнечелюстные суставы и прилежащие мягкие ткани слева и справа.
Ключевые слова: височно-нижнечелюстной сустав, лабораторные животные (крысы), морфологическое исследование структур ВНЧС, травматический артрит ВНЧС.
К. А. Семенов, О. С. Решетткова
Державний заклад «Дншропетровська медична академiя Мшстерства охорони здоров'я Укра1ни»
МОРФОЛОГ1ЧНА ХАРАКТЕРИСТИКА СКРОНЕВО - НИЖЬОЩЕЛЕПНОГО СУГЛОБА ЩУР1В, ПРИ МОДЕЛЮВАНН1 ХРОН1ЧНОГО ТРАВМАТИЧНОГО АРТРИТУ (ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ГРУПА, ЧАСТИНА 2)
Вивчення морфологiчних змт структур скронево-нижньощелепного суглоба (СНЩС) представляв науко-вий iнтерес у зв'язку з зростанням частоти функцюнальних порушень зубощелепного апарату. Створення адекватное моделi патологИ в порiвняннi з даними, отриманими при вивчент тварин у фiзiологiчних умовах, э не-обхiдна умова при розробцi нових методiв дiагностики та лiкування хвороби в експериментальнш медицинi. У данш роботi представлен данi морфологiчного дослiдження структур СНЩС щурiв при моделюванш хронiч-ного травматичного артриту.
Макроскопiчне i мiкроскопiчне до^дження структур СНЩС проводили у 5 щурiв, через 14 днiв пся мо-делювання хротчного травматичного артриту. Для патоморфологiчного до^дження видшяли скронево-нижньощелепнi суглоби i прилеглi м'яю тканини злiва та справа.
Ключовi слова: скронево-нижньощелепний суглоб, лабораторн тварини (щури), морфологiчнi дослiджен-ня структур СНЩС, травматичний артрит СНЩС.
K. A. Semenov,O. S. Reshetnikova
State Institution "Dnipropetrovsk Medical Academy of the Ukrainian Ministry of Health"
MORPHOLOGICAL FEATURES OF TEMPOROMANDIBULAR JOINT WHEN MODELLING CHRONIC TRAUMATIC ARTHRITIS IN RATS (EXPERIMENTAL GROUP, PART 2)
The study of morphological changes within the structures of the temporomandibular joint (TMJ) is of a certain scientific interest due to the increasing frequency of functional disorders of dentoalveolar apparatus. Creating an adequate model of pathology in comparison with the data, obtained from the studies of animals under physiological conditions is a necessary factor for the development of new methods of diagnostics and treatment of the disease in experimental medicine. This research contains the data of morphological examination of the TMJ structures when modelling chronic traumatic arthritis in rats.
© Семенов К. А., Решетникова О. С., 2015.
Macroscopic and microscopic researches of the TMJ structures were carried out on 5 rats, 14 days after modelling of the chronic traumatic arthritis. Certain temporomandibular joints and the surrounding soft tissues to the left and to the right were allocated for pathomorphological studies.
Keywords: temporomandibular joint, laboratory animals (rats), morphological research of the TMJ structures, traumatic arthritis of the TMJ.
Эмоциональное, физическое напряжение и окклюзионная дисгармония - это главные причины, которые приводят к нарушениям функционального баланса жевательного аппарата и адаптационной способности организма. В результате появляются такие клинические симптомы, как боль, напряженность и усталость мышц, пощелкивание и ограничение подвижности в области височно-нижнечелюстных суставов, болевые симптомы со стороны ушей, истирание, разрушение зубов и выраженная нагрузка на перио-донт [1, 3, 5, 6].
Слабым звеном и наиболее частой причиной нарушения функционального равновесия в структурах височно - нижнечелюстного сустава являются зубы, зубные ряды, нервно - мышечный аппарат.
Основным гарантом функционального равновесия зубочелюстного аппарата является оптимальный контакт между зубами в зубных рядах и в значительной степени, генетически обусловленная, психоэмоциональная сфера индивидуума [1, 2, 7].
Поиск новых методов диагностики и лечения данной патологии диктует необходимость создания адекватных экспериментальных моделей, а также определения морфологических характеристик (ВНЧС) в норме и патологии.
Цель данной работы. Изучение морфологических характеристик структур височно-нижнечелюстного сустава после моделирования травматического артрита у крыс для выявления закономерностей развития патологии.
Материал и методы исследования. Материалом экспериментального исследования служили 10 половозрелых беспородных восьмимесячных крыс - самцов. Перед началом эксперимента животные были распределены на 2 группы - экспериментальную (опытную) и контрольную. [4].
В экспериментальную группу вошли 5 крыс, у которых моделировали хронический травматический артрит ВНЧС. [4]
Для патоморфологического изучения выделяли височно-нижнечелюстные суставы с прилежащими мягкими тканями слева и справа.
Гистологическое исследование. Кусочки мягких тканей ВНЧС фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина. После фиксации материал промывали, обезвоживали в серии спиртов растущей концентрации, проводили через хлороформ и заливали в парафин (О.В.
Волков 1982) [Волков О.В., Елецкий Ю.К., 1982]. Срезы тканей толщиной 7-8 мкм готовили на ротационном микротоме, размещали на стекле, красили гематоксилином и эозином, а также по Ван - Гизону, заливали канадским бальзамом.
Комплексы височно-нижнечелюстных суставов и прилежащих мягких тканей декальциниро-вали в жидкости Эбнера следующего состава: 1215 % раствор поваренной соли (200мг) и крепкая соляная кислота с удельным весом 1,19 (4мл). К этому раствору по ходу кальцинации ежедневно прибавляли 1 -2 мл соляной кислоты для удержания первоначальной концентрации. По окончанию декальцинации кусочки на несколько дней переносили в ежедневно сменяемый 12-15 % раствор поваренной соли, в дальнейшем промывали в проточной воде 24-28 часов. (Г. А. Меркулов 1969) [Г. А. Меркулов, 1969].
Гистологические препараты изучались при увеличении х10, х40 с помощью микроскопа Primo Star 5, комплектация 5(Carl Zeiss, ФРГ), с последующим фотографированием микроскопических изображений.
Результаты и их обсуждение. Изучение макро- и микроскопических особенностей структур ВНЧС экспериментальной группы проводили в сравнении с характерными признаками ко-стно-суставного соединения у крыс контрольной группы.
При экспериментальном одностороннем акте жевания у крыс в височно-нижнечелюстном суставе на стороне повреждения (слева) осмотр околосуставных мягких тканей невооруженным глазом, не позволил выявить заметных различий в материале опытной и контрольной групп.
Использование лупы позволило выявить некоторую неравномерность кровенаполнения в области левой височной и левой латеральной крыловидной мышц. Подробное изучение остальных мышц, входящих в исследуемый блок мягких тканей, связанных с нижнечелюстным суставом не выявило заметных различий в контрольной и опытной группах наблюдений.
После продольного рассечения височно-нижнечелюстного сустава слева, осмотр поверхности разреза также проводился под простым увеличением линзы лупы. Тщательное рассмотрение латеральной связки, мениско-височных связок и внутрисуставной поверхности свидетельствовало об отсутствии макроскопических заметных повреждений.
Головка сустава несколько смещалась вправо, незначительно деформируясь на ее медиальной поверхности.
При микроскопическом исследовании гистологических препаратов мягких тканей животных опытной группы, на поврежденной стороне обнаруживались разнообразные морфологические изменения. В латеральной связке обнаруживались мелкие очаги разрыва коллагеновых волокон (рис. 1).
лись участки фрагментации мышечных волокон (рис. 3).
Отдельные миоциты были увеличены в размерах, цитоплазма нередко содержала розоватого цвета белковые гранулы (рис. 4).
Прослойки межмышечной соединительной ткани расширялись, чаще в связи с отеком стро-мы (рис 5) .
Рис. 1. Фрагмент латеральной связки височно-нижнечелюстного сустава. Очаги повреждения. Опыт - сторона повреждения. Окр. Гематоксилином и эозином. Ув. х40.
Мелкие очаги дистрофических изменений обнаруживались также во внутрикапсульных связках ВНЧС. На гистологических срезах задней мениско-височной связки обнаруживались очаговые инфильтраты, состоящие из гистиоцитов с примесью лимфоцитов, расположенные преимущественно вблизи полнокровных сосудов микроциркуляторного русла (рис. 2).
Рис. 3. Очаги дистрофических изменений в мышцах. Опыт - сторона повреждения.Окр. Гематоксилином и эозином. Ув. х40.
Рис. 4. Гипертрофия миоцитов. Паренхиматозный диспро-теиноз (ПД). Опыт - сторона повреждения. Окр. Гематоксилином и эозином. Ув. х40.
Рис. 2. Капилляры в области задней мениско-височной связки полнокровны. Периваскулярные гистиоцитарные инфильтраты. Опыт - сторона повреждения. Окр. Гематоксилином и эозином. Ув. х40.
В жевательных мышцах - височной, латеральной крыловидной и жевательной, - обнаруживались мелкие очаги дистрофии. На продольных срезах перечисленных мышц регистрирова-
Рис. 5. Отек межмышечной соединительной ткани. Опыт -сторона повреждения. Окр. Гематоксилином и эозином. Ув. х40.
«1нноваци в стоматологи», № 3, 2015 В сосудах перимизия выявлялись признаки показало, что большая часть мыщелка образова-
застойного полнокровия капилляров (рис. 6).
на ретикулофиброзной костной тканью.
Суставная поверхность головки нижней челюсти, обращенная в полость сустава, была образована коллагеновыми волокнами, фибробла-стами, фиброцитами, гистиоцитами (рис. 7).
Рис. 6. Застойное полнокровие капилляра перимизия. Опыт - сторона повреждения. Окр. Гематоксилином и эозином. Ув. х40.
Рис. 7. Суставная поверхность головки нижней челюсти. Изучение височно-нижнечелюстного сустава Опыт - сторона повреждения. Окр. Гематоксилином и эози-
крысы на декальцинированных гистопрепаратах
ном. Ув. х40.
Рис. 8. Полнокровие синусоидных капилляров головки нижней челюсти крысы. Опыт - сторона повреждения. Окр. Гематоксилином и эозином. Ув. х40.
Рис. 9. Фукусы дистрофических изменений в суставном диске, головке нижней челюсти. Полнокровие капилляров (ПК). Опыт - сторона повреждения. Окр. Гематоксилином и эозином. Ув. х40.
Обращало внимание застойное полнокровие синусоидных капилляров (рис. 8), фокусы дистрофических изменений в суставном диске и в головке нижней челюсти (рис. 9).
Морфологическое изучение правого височно-нижнечелюстного сустава в опытной группе животных (на стороне, где отсутствовали повреждения зубов), также включало макроскопическое и микроскопическое исследование материала.
Внешний вид мягких тканей, прилежащих к суставу, а также особенности костно-суставного соединения в правом височно-нижнечелюстном суставе не имел характерных особенностей в сравнении с левым суставом опытной группы, а также с контролем.
Жевательные мышцы имели макроскопические характеристики аналогичные соответст-
вующим мышцам, прилежащим к левому ВНЧС. При этом выявляли неравномерное кровенаполнение собственно жевательной мышцы, аналогичное таковому в левой жевательной мышце опытной группы.
Внешний вид правых височной, латеральной, медиальной крыловидной мышц и мышц, участвующих в образовании дна полости рта, не имел видимых отличий от наблюдений контрольной группы.
Связки правого ВНЧС у животных опытной группы, даже при трехкратном увеличении с помощью лупы, имели морфологические признаки сходные с контрольными. Суставной диск ВНЧС справа в анализируемой подгруппе крыс не имел видимых изменений по сравнению с контрольными характеристиками.
Костные образования, входящие в сустав, также внешне не отличались от контрольной группы наблюдений.
Гистологическое исследование начиналось с изучения микроскопических характеристик мышц и связок, прилежащих к правому ВНЧС опытной группы животных.
При изучении латеральной и внутрикапсуль-ных связок местами выявлялись очаговые дистрофические изменения коллагеновых структур, фокусы гиперемии сосудов микроциркуляторно-го русла. Однако удельный объем подобных процессов не превышал показатели, свойственные контрольной группе.
В собственно жевательной мышце отмечалась гипертрофия мышечных волокон, расширения перимизия и эндомизия, очаги повреждения в коллагеновых волокнах стромы (рис. 10).
Заметна очаговая утрата поперечной исчер-ченности мышечных волокон, регистрируются участки миоцитов, лишенные ядер (рис 12).
Рис. 12. Утрата поперечной исчерченности мышечных волокон. Уменьшение числа ядер миосимпласта. Опыт - неповрежденная сторона. Окр. гематоксилином и эозином. Ув. х40.
При изучении латеральной крыловидной мышцы также заметны фокусы повреждения. (рис. 13).
Рис. 10. Расширение перимизия мышцы, участки повреждения коллагеновых волокон стромы. Гипертрофия миоци-тов. Опыт - неповрежденная сторона. Окр. по Ван-Гизону. Ув. х40.
На гистологических срезах жевательной мышцы, окрашенных гематоксилином и эозином, заметны резко увеличенные в диаметре срезы миоцитов, регистрируются локальные признаки мышечной деструкции (рис. 11).
Рис. 1 1. Гипертрофия миоцитов. Фокусы мышечной деструкции (МД) Опыт - неповрежденная сторона. Окр. гематоксилином и эозином. Ув. х40.
Рис 1 3. Фокусы повреждения в латеральной крыловидной мышце. Опыт - неповрежденная сторона. Окр. гематоксилином и эозином. Ув. х40.
Исследование декальцинированных гистологических препаратов правого ВНЧС позволило определить признаки альтерации и компенсации в тканях, образующих сустав.
Суставная сумка, суставные поверхности костей в данной группе наблюдений имели микроскопические характеристики, подобные параметрам, регистрируемым в норме.
Суставной диск, на большем протяжении также не имел выраженных патоморфологических изменений. Вместе с тем, в отдельных его локусах были заметны признаки дистрофических изменений соединительнотканных волокон (рис. 14).
Рис. 14.Очаговые дистрофические изменения соединительнотканных волокон суставного диска.Опыт - неповрежденная сторона. Окр. гематоксилином и эозином. Ув. х40
Вывод. Изучение морфологической характеристики височно-нижнечелюстного сустава у крыс, после моделирования хронического травматического артрита, позволило выявить закономерности развития патологических изменений
в структурах ВНЧС в экспериментальной группе животных.
Список литературы
1. Гросс М. Д. Нормализация окклюзии / М. Д. Гросс, Дж.Д. Мэтьюс - М.: Медицина. - 1986. - 286с.
2. Мирза А. И. Дисфункциональные состояния, обусловленные мезиальным смещением нижней челюсти / А. И. Мирза, Э. И. Оконский, Р. А. Мирза // Современная стоматология. - 2007 .- № 1. - С. 122-125.
3. Робустова Т. Г. Хирургическая стоматология / Ро-бустова Т. Г. - М.: Медицина, 1996. - 688 с.
4 Семенов К.А. Экспериментальное моделирование окклюзионного артрита височно-нижнечелюстного сустава у лабораторных животных. / К.А. Семенов // 1нновацп в стоматологи. - 2014.- № 4. - С. 10-14.
5. Тимофеев А. А. Щелепно-лицева хiрургiя : [тдруч-ник] / О. О. Тимофеев. - К.: ВСВ «Медицина», 2011. - 512с.
6. Тимофеев А. А Руководство по челюстно -лицевой хирургии и хирургической стоматологии / Тимофеев А. А. -Киев: ООО "Червона Рута - Турс", 2004, 1062с.: ил.
7. Хватова В. А. Клиническая гнатология / Хватова В. А. - М: Медицина, 2005. - 312 с/
Поступила 01.09.15
УДК 616.31+599.323.4:616-092.4+616.379-008.64
А. В. Скиба1, к мед. н., О. С. Решетникова2, д. мед. н., С. А. Морозов2, к. мед. н.,
С. Н. Смирнов3, д. мед. н.
Государственное учреждение «Институт стоматологии Национальной академии медицинских наук Украины» Балтийский Федеральный университет им. Иммануила Канта2, ГЗ «Луганский государственный медицинский университет», МОЗ Украины3
ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ЩЕКИ, ЯЗЫКА КРЫС ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ САХАРНОМ ДИАБЕТЕ 2 ТИПА
Представлены морфологические особенности и морфометрические параметры слизистой оболочки щеки, языка и малых слюнных желез при экспериментальном сахарном диабете. Выявлены признаки повреждения в слизистой оболочке щеки и языка крыс, наличие поверхностных эрозий, атрофические изменения, патология кератинизации. Отмечены нарушения процессов репарации и дифференцировки эпителиальных клеток. В малых слюнных железах отмечались дискомплексация долек, дистрофические изменения мукоцитов, сероцитов. С большим постоянством в слизистой оболочке и периацинарной ткани регистрировались расстройства кровообращения, признаки отека стромы. Морфометрические параметры тканей предложено использовать как исходные для дальнейших экспериментальных исследований патологии зубочелюстной системы при диабете и дальнейших поисков коррекции возникающих нарушений трофики.
Ключевые слова: слизистая оболочки щеки, слизистая оболочки языка, малые слюнные железы, экспериментальный сахарный диабет, патологическая анатомия, морфометрия.
© Скиба А. В., Решетникова О. С., Морозов С. А., Смирнов С. Н., 2015.