Мониторинг цитокинового профиля у больных бронхиальной астмой: влияние глюкокортикоидной терапии Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Медицинская иммунология 2001, Т.З, № 1, стр 69-76 © 2001, СПб РО РААКИ

Оригинальные статьи

МОНИТОРИНГ цитокинового ПРОФИЛЯ У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ: ВЛИЯНИЕ ГЛЮКОКОРТИКОИДНОЙ ТЕРАПИИ

Шапорова Н.Л., Трофимов В.И.,

Шири Зиад Али, Сесь Т.П.*,

Малышев М.Е.*, Васильева Т.А.,

Дудина О.В.

Кафедра госпитальной терапии СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, Санкт- Петербург

*Лаборатория Иммунологии Института Пульмонологии СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, Санкт-Петербург

Резюме. Изучали влияние гормональной терапии на цитокиновый профиль больных БА. Обследовали 39 больных бронхиальной астмой (БА): 21 - с ведущим аллергическим вариантом заболевания и 18 - с преимущественно гормонозависимой БА. У 9 пациентов последней группы наблюдали кортикочувствительную и у 9 -стероидрезистентную БА. Всем обследованным определяли содержание цитокинов (IL-4, IFNy, TNFa, IL-8) в крови и мокроте в динамике заболевания. У больных БА в фазе обострения заболевания наблюдали местную активацию, как Th2, так и Th 1-лимфоцитов, фаза затихающего обострения характеризуется переключением местных иммунных реакций на преобладание Th 1 - типа иммунного ответа. Показали, что отсутствие понижения уровня IL-8 в мокроте на фоне гормональной терапии может являться маркером резистентности клеток к действию глюкокортикоидных гормонов.

Ключевые слова: бронхиальная астма, глюкокортикоидные гормоны, цитокины.

Shaporova N., Trofimov V., Shiri Ziad Ali, Ses Т., Malyshev М., Vasyljeva Т., Dudina O.

CYTOKINE PROFILE IN PATIENTS WITH BRONCHIAL ASTHMA:

GLUCOCORTICOID TREATMENT INFLUENCE

Abstract. We investigated glucocorticoid treatment influence on cytokine profile in patients with bronchial asthma (BA). We examined 39 patients with BA. There were 21 patients with allergic BA and 18 patients with steroid-dependent BA among them. There were 9 patients with steroid-sensitive BA and 9 patients with steroid-resistant BA in the last group of patients. We measured IL-4, IFNy, TNFa and IL-8 levels in biological liquids of these patients in dynamics. We determined the increase in Thl as well as in Th2 lymphocyte local activity in the phase of the exacerbation of BA. The prevalence of Thl type of local immune reactions was observed in the phase of remission. Besides that, we determined that the absence of IL-8 level increment in sputum during glucocorticoid treatment reflects cell resistance to glucocorticoid hormones. (Med.Immunol., 2001, vol.3, N l,pp 69-76)

имущественной активации Т-хелперов 2 (Th2) по сравнению с Т-хелиерами 1 (Thl) [7]. Преобладание Th2 над Thl лимфоцитами у пациентов с астмой приводит к избыточной активации В-лимфоци-тов и развитию IgE-зависимых реакций. Активность Thl и Th2 лимфоцитов находится под цито-киповым контролем. Цитокины, выполняющие многочисленные регуляторные функции, синтезируются и выделяются различными воспалительными

Введение

В настоящее время считается общепризнанным, что у больных бронхиальной астмой (БА) имеет место изменение функции Т-хелперов в виде пре-

Адрес для переписки:

194156, Санкт-Петербург, Нежинская, д.4, кв. 231, Шатровой Н.Л.

Тел.: (812)234-54-51.

клетками [6]. При этом ТЫ лимфоциты продуцируют преимущественно а ТЬ2 лимфоциты -1Ь-4 и 1Ь-5 [5]. Таким образом, определяя уровень 1Ь-4 и 1РЫу в крови и мокроте пациентов, можно судить о соотношении ТЫ и ТЬ2 лимфоцитов среди Т-хелперов и, следовательно, о характере общего и местного иммунного ответа. ТЫИа является плюри-потентным цитокином, который в основном продуцируется моноцитами и макрофагами. ТЫРа входит в группу провоспалительных цитокинов и выполняет важнейшие функции в период запуска воспаления: активирует эндотелий, повышает экспрессию молекул адгезии на эндотелиальных клетках и способствует адгезии лейкоцитов к эндотелию, активирует лейкоциты, индуцирует продукцию других провоспалительных цитокинов, обладающих синергидным с ТЫРа действием (1Ь-1, 1Ь-6, №N(3, СМ-СБР) [5]. Таким образом, по уровню ТЫРа в биологических жидкостях можно косвенно судить об активности воспалительного процесса в целом. 11,-8, синтезируемый преимущественно моноцитами и макрофагами, является хемоаттрактантом для нейтрофилов, базофилов и Т-лимфоцитов [5]. В последние годы появилась информация о том, что 1Ь-8 также является хемоаттрактантом и для эози-

нофилов [25], а его уровень в крови коррелирует с тяжестью течения БА [24].

Известно, что глюкокортикоидные гормоны способны оказывать влияние как на синтез цитокинов, так и на реализацию их эффектов на уровне клетки [1] (рис. 1). РеЫа С., Магасо _|.А. [21] указывают, что глюкокортикоиды могут ингибировать синтез провоспалительных цитокинов. Известно, что кортикостероидные гормоны снижают продукцию 1Ь-

1, вызывающего экспрессию молекул адгезии на поверхности эндотелиальных клеток [11,12], подавляют освобождение Т-лимфоцитами фактора роста Т-лимфоцитов 1Ь-2 [8, 20], фактора роста тучных клеток 1Ь-3 [13, 17], активатора эозинофилов 1Ь-5 [14,19]. Показана способность глюкокортикоидных гормонов блокировать экспрессию гена 1Ь-8 и продукцию 1Ь-8 в эпителиальных клетках дыхательных путей [16], а также синтез фактора некроза опухоли (ТЫРа), гранулоцитарного и моноцитарного колониестимулирующего фактора (СМ-СБР) и 1Ь-6 [2, 10, 14, 18].

Возможным механизмом влияния кортикостероидных гормонов на иммунное воспаление является обнаруженное в последние годы взаимодействие комплекса глюкокортикоид-рецептор с факторами

Рис. 1. Действие глюкокортикоидных гормонов на воспаление.

транскрипции, такими как активатор-протеин 1 и ядерный фактор каппа - В, осуществляемое по принципу протеин - протеин (рис.1). Известно, что цитокины действуют на клетки путем изменения транскрипции генов. Их взаимодействие с рецепторами на поверхности клетки приводит к активации факторов транскрипции. Эти факторы затем направляются в ядро клетки, где связываются с ДНК и влияют, таким образом, на синтез мРНК и продукцию провоспалительных протеинов в клетке. Оказалось, что комплекс глюкокортикоид-рецептор может взаимодействовать непосредственно как с активатором-протеином 1, так и с ядерным фактором каппа - В в ядре клетки, предупреждая их действие как факторов транскрипции на ДНК и эффективно блокируя влияние цитокинов на клетку. Это взаимодействие объясняет один из наиболее значимых механизмов противовоспалительного действия глюкокортико-идных гормонов [10, 22].

Не только глюкокортикоидные гормоны оказывают влияние на важнейшие механизмы иммунной системы, но и многие цитокины способны воздействовать на гормональный гомеостаз, причем это воздействие является разнонаправленным (рис.1). В последние годы показана роль IL-1 в активации гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси. Sartory M.L. с соавторами [23] показали, что IL-2 способен повышать экспрессию рецепторов к глю-кокортикоидам в мононуклеарах периферической крови. Однако, по мнению Barnes P.J., Adcock I.М. [9], цитокины способны активировать факторы транскрипции, которые могут напрямую связываться с глюкокортикоидными рецепторами (ГР) и блокировать действие глюкокортикоидных гормонов. Таким образом, было высказано предположение о том, что секреция провоспалительных цитокинов может способствовать формированию стероидрези-стентности.

В связи с вышеизложенным, целью настоящей работы было исследовать уровни цитокинов в биологических жидкостях больных бронхиальной астмой в динамике и под влиянием гормональной терапии.

Материалы и методы

Для решения указанной цели нами было обследовано 39 больных бронхиальной астмой (БА), 14 мужчин и 25 женщин, средний возраст обследованных составил 45,9 ± 2,5 лет. У 21 пациента была диагностирована преимущественно аллергическая (атопическая) бронхиальная астма (БАА) и у 18 преимущественно гормонозависимая астма (БАГЗ). Больные первой группы получали стандартную бронхолитическую и противовоспалительную терапию инталом (или тайледом) или ингаляционными глюкокортикоидами, лечения системными кортико-

стероидными препаратами per os пациентам данной группы не назначали. Больные гормонозависимой БА кроме традиционной бронхолитической и противовоспалительной получали системную глюко-кортикоидную терапию per os. Среди больных последней группы было 9 пациентов, получавших терапию препаратами глюкокортикоидных гормонов через рот в дозе, не превышающей 15 мг преднизо-лона в сутки (кортикочувствительные пациенты (Б АКЧ)) и 9 больных, получавших более 20 мг пред-низолона в сутки через рот (стероидрезистентные пациенты (БАСР)).

У всех пациентов определяли уровни IL-4, IFNy, TNFa, IL-8 в крови и мокроте методом иммунофер-ментного анализа [ 15] с использованием коммерческих наборов ТОО “Цитокин” (Санкт-Петербург, Россия). Часть пациентов была обследована в динамике через 10 - 14 дней (в фазе обострения и в фазе затихающего обострения или ремиссии заболевания). Для расчета нормы использовали собственные данные, полученные в результате обследования крови и лаважной жидкости 30 здоровых добровольцев в возрасте от 25 до 35 лет [4].

Статистическую обработку выполняли с использованием стандартного пакета программ прикладного статистического анализа (“Statistic for Windows”) и системы концептуального моделирования “COMOD”, разработанной в Санкт-Петербургском Государственном Электротехническом университете [3].

Результаты

Уровень IL-4 в крови оказался повышен у 20 из 39 обследованных пациентов: 13 (62%) больных аллергической и 7 (39%) - гормонозависимой БА. При обследовании в динамике уровень IL-4 в крови понизился у 9 из 12 пациентов (75%), у 2-х повысился и у 1 не изменился. Следует отметить, что у 8 из 12 обследованных в динамике пациентов (67%) в фазе затихающего обострения заболевания уровень IL-4 в крови оказался в пределах нормальных величин, в то время как в фазе обострения он был нормальным только у 19 из 39 больных (49%) (рис.2).

Уровень IL-4 в мокроте был повышен только у 5 из 29 обследованных пациентов: 3 больных аллергической и 2 - гормонозависимой БА. При обследовании в динамике у 5 из 9 обследованных пациентов наблюдали снижение уровня IL-4 в мокроте. У 2 больных исходно нормальный уровень IL-4 в мокроте повысился и у 2 не изменился (рис. 2).

Уровень IFNy в крови был повышен у 12 из 39 обследованных больных: 4 - аллергической и 8 -гормонозависимой БА. У 27 из 39 обследованных больных (69%) содержание IFNy в крови оказалось в пределах нормы. В динамике у 8 из 12 обследованных больных наблюдали понижение уровня IFNy

норма

І І І III

<

ш

ет

|_

<

ш

о.

о

<

10

т

*

<

Ц>

111-4 кровь обострение 111-4 кровь затих.обострение

111-4 мокрота обострение 111-4 мокрота затих.обострение

Рис. 2. Содержание 11.-4 в крови и мокроте больных БА в динамике. По оси ординат отложены средние значения 11.-4 в пг/ мл; по

оси абсцисс группы больных: БА - больные бронхиальной астмой (вся группа);

БАА - больные аллергической бронхиальной астмой; БАГЗ - больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАКЧ - кортикочувствительные больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАСР - стероидрезистентные больные гормонозависимой бронхиальной астмой.

600

500

400

300

200

100

14.5

11.5'

норма

ГГІ П

<

ш

со

1_

<

ш

о.

и

<

ш

т

*

<

ш

■ ІРМ кровь обострение

■ ІЯМ кровь затих.обострение

■ ІРМ мокрота обострение

■ IFN мокрота затих.обострение

Рис. 3. Содержание ШРу в крови и мокроте больных БА в динамике. По оси ординат отложены средние значения МРу в пг/ мл; по оси абсцисс группы больных: БА - больные бронхиальной астмой (вся группа); БАА - больные аллергической бронхиальной астмой;БАГЗ

- больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАКЧ - кортикочувствительные больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАСР

- стероидрезистентные больные гормонозависимой бронхиальной астмой.

в крови, у 2 этот показатель повысился и у 2 - не изменился. При этом у 10 из обследованных в динамике 12 пациентов уровень 1РЫу в крови оказался в пределах нормы (рис.З).

Исследование мокроты показало повышение уровня 1РЫу у 19 из 28 обследованных больных (69%). Нормальный уровень был выявлен только у 9 из 28 пациентов: 5 больных аллергической и 4 - гормонозависимой БА. Средние величины содержания 1РЫу в мокроте больных БА значительно превышали норму (рис. 3). Обследование пациентов в динамике выявило дальнейшее нарастание уровня 1РКу в мокроте у 7 из 8 обследованных в фазе затихающего обострения заболевания больных (88%) и только у 1 пациента этот уровень снизился по сравнению с исходным, но по-прежнему существенно превышал норму. Обращало на себя внимание, что у всех без исключения пациентов БА в фазе затихающего обострения заболевания наблюдался повышенный уровень 1РЫу в мокроте. Анализ средних величин выявил повышение содержания 1РЫу в мокроте у всех групп пациентов: и у больных с аллергической астмой, и у пациентов с гормональной зависимостью. Однако максимальное увеличение уровня 1РЫу в мокроте наблюдали у стероидре-зистентных больных, а у кортикочувствительных пациентов нарастание уровня 1РЫу было незначительным (рис.З).

Сравнительный анализ двух показателей (1Ь-4 и 1РЫу) с использованием критерия х2 показал, что в группе больных БА в целом не было достоверных различий между количеством пациентов с повышенным в крови уровнем 1Ь-4 и количеством больных с повышенным в крови уровнем 1РЫу (1=3,3; р> 0,05). Однако в группе пациентов с аллергической БА количество больных с повышенным в крови уровнем 1Ь-4 по критерию %2 достоверно превышало количество пациентов с повышенным уровнем 1РЫу (1=8,0; р<0,01). При обследовании в динамике наблюдалось понижение как 1Ь-4 , так и 1РКу в крови.

Исследование мокроты показало, что по критерию х2 количество больных БА с исходно повышенным уровнем 1Ь-4 оказалось достоверно ниже, чем количество больных БА с исходно повышенным уровнем ШЫу (1=14,97; р<0,001).

При обследовании в динамике получены достоверные различия но критерию %2 в характере изменений двух указанных показателей в мокроте больных БА: уровень П.-4 преимущественно понижался, а содержание 1РЫу преимущественно повышалось (1=6,9; р<0,01).

Уровень ТЫРа в крови был повышен у 26 из 39 обследованных больных (67%): 12 - аллергической и 14 - гормонозависимой БА. Только у 13 из 39 обследованных больных содержание ТЫРа в крови

120

100

І 80

60

40

35.6 -24.8 -

норма

20

1 250 I

І1ІІІ 200 150 =; 2 "и* с 100 1дЫ

ІП1П 50 41.8 28.2 норма 0 1 в і л і

<

ш

со

|_

<

ш

о.

и

<

ш

X

*

<

ш

<

ш

СО о.

Ь о

< <

Ш Ш

т

*

<

10

■ТЫЯ кровь обострение ■ ТЫР кровь затих.обострение

|ТЫР мокрота обострение ЦТЫР мокрота затих.обострение

Рис. 4. Содержание Т^а в крови и мокроте больных БА в динамике. По оси ординат отложены средние значения 1№а в пг/ мл; по оси абсцисс группы больных: БА - больные бронхиальной астмой (вся группа); БАА - больные аллергической бронхиальной астмой; БАГЗ -больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАКЧ - кортикочувствительные больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАСР -стероидрезистентные больные гормонозависимой бронхиальной астмой.

норма

<

ш

W

[_

<

ш

Q.

О

<

ш

т

<

ш

<

ш

2

ш

«

U

<

ш

0L

о

<

ш

т

*

<

ш

■ IL8 кровь обострение

■ IL8 кровь затих.обострение

■ 11.8 мокрота обострение В і 1.8 мокрота затих.обострение

Рис. 5. Содержание 11.-8 в крови и мокроте больных БА в динамике. По оси ординат отложены средние значения 11-8 в пг/мл; по оси абсцисс группы больных: БА - больные бронхиальной астмой (вся группа); БАА - больные аллергической бронхиальной астмой; БАГЗ -больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАКЧ - кортикочувствительные больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАСР -стероидрезистентные больные гормонозависимой бронхиальной астмой.

оказалось в пределах нормы. В динамике у 10 из 12 обследованных больных (83%) наблюдали понижение уровня ТОТа в крови, у 2 этот показатель повысился. Анализ средних величин показал, что в фазе обострения заболевания имело место повышение уровня ТКРа в крови, а в динамике происходила нормализация этого показателя (рис.4).

Уровень ТЫРа в мокроте был повышен только у 11 из 28 обследованных пациентов (39%), у 17 (61%)

- он оказался в пределах нормы: 8 больных аллергической и 9 - гормонозависимой БА. При обследовании в динамике у 5 из 9 обследованных пациентов наблюдали снижение, и у 4 больных - повышение уровня ТКРа в мокроте. Следует отметить, что из 6 обследованных в динамике пациентов гормонозависимой БА, у всех 3 кортикочувствительных больных на фоне проводимой гормональной терапии наблюдали понижение уровня ТОТа в мокроте, а у всех стероидрезистентных (3 человека) - повышение уровня ТЫРа в мокроте (1=6,0; р<0,05).

Исследование уровня 1Ь-8 показало, что у пациентов БА в крови он оказался в пределах нормы как в фазе обострения заболевания, так и при обследовании в динамике (рис.5). Только у 1 больного из 39 обследованных лиц наблюдали повышенный уровень 1Ь-8 в крови в фазе обострения заболевания. Это был пациент с гормонозависимой БА. Содер-

жание 1Ь-8 в крови оказалось нормальным у 8 из 12 обследованных в фазе затихающего обострения заболевания больных. Необходимо отметить, что при обследовании в динамике отмечалось увеличение содержания 1Ь-8 в крови по сравнению с исходным уровнем у 9 из 12 обследованных в динамике больных, у 2 этот показатель не изменился и у 1 гормонозависимого больного с исходно высоким уровнем 1Ь-8 в крови - понизился.

Содержание 1Ь-8 в мокроте было достоверно выше нормы в фазе обострения заболевания у 27 из 28 обследованных больных (рис.5). В динамике 1Ь-8 в мокроте оставался повышенным у всех 9 обследованных пациентов. Необходимо отметить, что кортикочувствительные и стероидрезистентные пациенты достоверно отличались по влиянию гормональной терапии на уровень 1Ь-8 в мокроте. У кортикочувствительных больных наблюдали снижение, а у стероидрезистентных пациентов - повышение содержания 1Ь-8 в мокроте на фоне перо-ральной гормональной терапии (1=5,0; р<0,05) (рис.5).

Обсуждение

Полученные нами результаты позволили уточнить изменение цитокинового спектра у больных Б А

в динамике заболевания и влияние на него гормональной терапии.

Исследование цитокинового профиля показало, что у больных БА в целом в фазе обострения заболевания был повышен уровень как IL-4, так и IFNy в крови, что отражает повышение активности как Th2, так и Thl-лимфоцитов среди Т-хелперов. Однако у больных преимущественно аллергической Б А достоверно чаще наблюдали повышение в крови уровня IL-4 по сравнению с уровнем IFNy, что указывает на поляризацию иммунных реакций в сторону ТЬ2-тииа иммунного ответа и укладывается в общепринятое представление об особенностях иммунного статуса у пациентов с аллергической Б А [7].

Исследование мокроты показало, что у больных БА достоверно чаще имело место повышение уровня IFNy по сравнению с IL-4 даже в фазе обострения заболевания. Таким образом, у больных БА в фазе обострения заболевания наблюдалась местная активация как Th2, так и Thl лимфоцитов среди Т-хелперов. В фазе затихающего обострения или ремиссии заболевания имело место достоверное и значительное понижение уровня IL-4 при одновременном повышении IFNy в мокроте пациентов, что позволяет предполагать переключение местных иммунных реакций на преобладание Thl типа ответа. Так как Thl-лимфоциты являются супрессорами для IgE-зависимых реакций [5], подобное переключение иммунного ответа может являться одним из факторов, способствующих стиханию IgE- опосредованного воспаления у больных БА.

Повышенный уровень TNFa в крови пациентов БА в фазе обострения заболевания, его снижение до нормальных значений в фазе затихающего обострения заболевания укладывается в общепринятое представление о пусковой роли данного цитокина в генезе иммунного воспаления [5].

Мы не наблюдали сколько-нибудь существенных изменений в уровне IL-8 в крови больных БА как в фазе обострения, так и в фазе затихающего обострения заболевания. В то же время содержание IL-8 в мокроте в десятки и даже сотни раз превышало норму в фазе обострения заболевания и оставалось повышенным у больных в фазе затихающего обострения БА. Таким образом, содержание IL-8 изменялось преимущественно в мокроте, а не в крови, что отражает паракринное действие IL-8 в очаге воспаления и свидетельствует о большей значимости этого цитокина для местных воспалительных реакций при БА.

Изучение уровня IL-8 в мокроте пациентов БА в динамике показало, что у кортикочувствительных больных имело место существенное снижение местного уровня IL-8 на фоне проводимой гормональной терапии per os в динамике, а у стероидрезистен-тных пациентов такого эффекта не наблюдалось. Аналогичная тенденция прослеживалась для всех

провоспалительных цитокинов, однако достоверные отличия были получены только для 11.-8. С учетом данных литературы о способности глюкокортико-идных гормонов блокировать экспрессию гена 1Ь-8 и генерацию 1Ь-8 в эпителиальных клетках дыхательных путей [16], наши результаты позволяют предположить, что отсутствие понижения уровня

11.-8 на фоне гормональной терапии может являться маркером резистентности клеток к действию глю-кокортикоидных гормонов.

Список литературы

1. Гущин И.С. Контроль глюкокортикоидами клеточных функций в аллергическом ответе // International Journal on Immunorehabilitation. 1999, № П. - С. 108 -116.

2. Дунаева Л.Л. Комплексная оценка активности воспалительного процесса у больных бронхиальной астмой //дисс.... канд.мед.наук. - Санкт-Петер-бург:- 1998. - С. 154.

3. Немцов В.И. Концептуальные модели различных вариантов бронхиальной астмы на основе нового метода системного моделирования // Дисс.... д-ра мед. наук. - Санкт-Петербург: - 1995. - 385 с.

4. Малышев М.Е. Лабораторные критерии оценки течения воспалительного процесса у больных с профессиональными заболеваниями легких // Ав-тореф. дис.... канд. биол. наук. - Санкт-Петербург. -2000. - 20 с.

5. Фрейдлин И.С. Иммунная система и ее дефекты // Руководство для врачей. - Санкт-Петербург: НТФФ “Полисан”, 1998. - ИЗ с.

6. Фрейдлин И.С., Тотолян А. А. Иммунопатологические механизмы воспаления бронхов и легких // Механизмы воспаления бронхов и легких и противовоспалительная терапия / Под ред. Г.Б.Федосеева. Санкт-Петербург: “Нормед - издат”, 1998. -С.194 - 298.

7. Фрейдлин И.С., Тотолян А. А. Роль изменений иммунной системы в формировании бронхиальной астмы // Бронхиальная астма: Библиотека врача общей практики. Т.2./ Под ред. Г.Б.Федосеева. Санкт-Петербург: Медицинское информационное агентство, 1996. - С. 54 - 69.

8. Bamberger С.М., Else Т., Bamberger A.M., Beil F.U., Schulte H.M. Regulation of the human interleukin-2 gene by the alpha and beta isoforms of the glucocorticoid receptor // Molecula & Cellular Endocrinology. - 1997. - Vol. 136, № 1. - P. 23 - 28.

9. Barnes P.J., Adcock I.M. Steroid resistance in asthma // QJM. - 1995. - Vol. 88, № 7. - P. 455 - 468.

10. Barnes P.J., Pedersen S. Efficacy and safety of inhaled corticosteroids in asthma // American Review of Respiratory Disease. - 1993. - Vol. 148, № 4, Pt 2. -P. 1 - 26.

11. Borish L„ Mascali J.J., Dishuck J. Detection of alveolar macrophage - derived IL-ip in asthma. Inhibition with corticosteroids // J. Immunol. - 1992.

- Vol. 149. - P. 3078 -3082.

12. Crastein B.N. A mechanism for the glucocorticoid receptor regulates leukocyte adhesion to endothelial cells and expression of ELAM-1 and IC AM-1 // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. - 1992. - Vol. 89. - P. 9991 - 9995.

13. Djukanovic R., Wilson J., Britten K. Quantitation of mast cells and eosinofils in the bronchial mucosa of symptomatic atopic asthmatics and healthy control subjects using immunochemistry // Am.Rev.Respir.Dis. - 1990. - Vol. 142, № 4. - P. 863 -869.

14. Hallsworth M.P., Litchfield T.M., Lee T.H. Glucocorticoids inhibit granulocytemacrophage colony-stimulating factor and interleukin-5 enhanced in vitro survival of human eosinophils // Immunology.

- 1992. - Vol. 75. - P. 382 - 385.

15. Koller D.Y., Nething I., Otto J., Urbaner R., Eichler I. Cytokine concentration in sputum from patients with cystic fibrosis and their relation to eosinophil activity // Am. J. Respir. Care Med. - 1997. Vol. 155. - P. 1050 - 1054.

16. Kwon O.J., An B.T., Collins P.D. Inhibition of interleukin-8 expression by dexamethasone in human cultured airway epithelial cells // Immunology. - 1994.

- Vol. 81, N3.-P. 389-394.

17. Laitinen L.A., Laitinen A., Haahtela T. A comparative study of the effects of an inhaled corticosteroid, Budesonide, and of (32-agonist, Terbutaline, on airway inflammation in newly diagnosed asthma //J. Allergy Clin. Immunol. - 1992.

- Vol. 90. - P. 32 - 42.

18. Lamas A.M., Leon O.G., Schleimer R.P. Glucocorticoids inhibit eosinophil responses to granulocyte-macrophage colony-stimulating factor // Immunology. - 1991. - Vol. 147. - P. 254 -259.

19. Mori A., Sulo M.N., Nishizaki Y. Regulation of interleukin-5 production by peripheral blood mononuclear cells from atopic patients with FK 506 cyclosporin A and glucocorticoid // Int. Arch. Allergy Appl. Immunol. - 1994. - Vol. 104, № 1. - P. 32 - 35.

20. Northrop J.P., Crabtree G.R., Mattila P.S. Negative regulation of interleukin 2 transcription by the glucocorticoid receptor //Journal of Experimental Medicine. - 1992. - Vol. 175, № 5. - P. 1235 - 1245.

21. Pelaia G., Marsico S. A. Molecular bases of antiasthma action of corticosteroids // Recenti Progressi in Medicina. - 1995. - Vol.86, № 6. - P. 248 - 256.

22. Ray A. Siegel MD. Prefontaine KE. Ray P. Anti-inflammation: direct physical association and functional antagonism between transcription factor NF-KB and the glucocorticoid receptor // Chest. -1995. - Vol. 107, № 3, Suppl. - P.139.

23. Sartory M.L., Masera R.G., Staurenghi A., Racca S., Angeli A. Interleukin 2 up-regulates glucocorticoid receptor number in human peripheral blood mononuclear cells and the osteosarcoma cell line Saos-2 in vitro // Steroids. - 1998. - Vol. 63, № 5-6. - P. 349 - 351.

24. Shute J.K., Vrugt B., Lindley I.J., Holgate S.T., Bron A., Aalbers R., Djukanovic R. Free and complexed interleukin-8 in blood and bronchial mucosa in asthma // Am. J. of Respiratory & Critical Care Medicine. -1997. - Vol. 155, № 6. - P. 1877 - 1883.

25. Vrugt B., Djukanovic R., Bron A., Aalbers R. New insights into pathogenesis of severe corticosteroid-dependent asthma // J. of Allergy & Clinical Immunology. - 1996. - Vol. 98, № 5, Pt 2. - P. 22 - 26.

поступила в редакцию 25.01.2001

принята к печати 05.02.2001