CC BY
1
Оригинальные исследования
Бюллетень физиологии и патологии • • » . Bulletin Physiology and Pathology of
дыхания, Выпуск 92, 2024 Original research Respiration, Issue 92, 2024
УДК 616.248(616.21/.-233:616-008.61)616-001.19]576.385 DOI: 10.36604/1998-5029-2024-92-18-28
МОЛЕКУЛЯРНО-КЛЕТОЧНЫЕ РЕАКЦИИ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ НА
ХОЛОДОВОЙ СТИМУЛ ПРИ НЕАЛЛЕРГИЧЕСКОЙ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЕ
А.Б.Пирогов, А.Г.Приходько, Н.А.Пирогова, Ю.М.Перельман
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания», 675000, г. Благовещенск, ул. Калинина 22
РЕЗЮМЕ. Введение. Макрофаги, матриксная металлопротеиназа-9 (MMP-9) и фактор некроза опухоли-альфа (TNF-a) вносят значимый вклад в патофизиологические механизмы развития и течения бронхиальной астмы (БА). Цель. Оценить роль макрофагов и MMP-9, регулируемых сигналами TNF-a, в формировании реакции дыхательных путей больных неаллергической бронхиальной астмой на гипервентиляцию холодным воздухом. Материалы и методы. У 66 больных БА проводили измерение спирометрических показателей форсированного выдоха, оценивали клеточный состав мокроты, содержание MMP-9, тканевого ингибитора металлопротеиназ-1, TNF-a в конденсате выдыхаемого воздуха (КВВ) до и после проведения бронхопровокационной пробы с изокапнической гипервентиляцией холодным (-20°С) воздухом (ИГХВ). Результаты. Сформированы 2 группы пациентов с наличием (1 группа) или отсутствием (2 группа) холодовой гиперреактивности дыхательных путей. После пробы ИГХВ регистрировалось высокое содержание макрофагов, нейтрофилов и значимое снижение числа эпителиоцитов в мокроте. Концентрации TNF-a и ММР-9 в КВВ после ИГХВ снижались в большей степени у больных 2 группы. Содержание эпителиоцитов в мокроте коррелировало с МОС50 (r=-0,49, р=0,03), МОС75 (r=-0,45, р=0,047) и СОС25-75 (r=-0,47, р=0,038), а их содержание после пробы ИГХВ - с ДСОС25-75 (Rs=0,31; р=0,018). Найдена связь между исходным содержанием ММР-9 в КВВ и СОС25 75 (Rs=-0,59; р=0,042), а также между уровнем ММР-9 после ИГХВ и выраженностью бронхоспазма (ДСОС25 75) в ответ на пробу ИГХВ (Rs=-0,67; р=0,023). Заключение. У больных с холодовой гиперреактивностью дыхательных путей неконтролируемое течение БА и более значимые нарушения проходимости бронхов ассоциированы с продуктивно-пролиферативным воспалением, связанным с участием макрофагов, MMP-9 и TNF-a, что способствует ремоделированию бронхов.
Ключевые слова: бронхиальная астма неаллергического фенотипа, холодовая гиперреактивность дыхательных путей, макрофаги, матриксная металлопротеиназа-9, фактор некроза опухоли-альфа, холод-индуцированный бронхоспазм, ремоделирование бронхов.
MOLECULAR CELLULAR REACTIONS OF THE RESPIRATORY TRACT TO COLD STIMULUS IN NON-ALLERGIC BRONCHIAL ASTHMA A.B.Pirogov, A.G.Prikhodko, N.A.Pirogova, J.M.Perelman
Far Eastern Scientific Center of Physiology and Pathology of Respiration, 22 Kalinina Str., Blagoveshchensk, 675000,
Russian Federation
SUMMARY. Introduction. Macrophages, matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-a) make a significant contribution to the pathophysiological mechanisms of development and course of bronchial asthma. Aim. To evaluate the role of macrophages and MMP-9 regulated by TNF-a signaling in the formation of airway response of non-allergic bronchial asthma patients to cold air hyperventilation. Materials and methods. Spirometric indices of forced expiratory flow, cellular composition of sputum, MMP-9 and TNF-a content in exhaled breath condensate
Контактная информация
Алексей Борисович Пирогов, канд. мед. наук, доцент, старший научный сотрудник, лаборатория функциональных методов исследования дыхательной системы, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания», 675000, Россия, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22. E-mail: [email protected]
Correspondence should be addressed to
Aleksey B. Pirogov, MD, PhD (Med.), Associate Professor, Senior Staff Scientist, Laboratory of Functional Research of Respiratory System, Far Eastern Scientific Center of Physiology and Pathology of Respiration, 22 Kalinina Str., Blagoveshchensk, 675000, Russian Federation. E-mail: [email protected]
Для цитирования:
Пирогов А.Б., Приходько А.Г., Пирогова Н.А., Перельман Ю.М. Мо-лекулярно-клеточные реакции дыхательных путей на холодовой стимул при неаллергической бронхиальной астме // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2024. Вып.92. С.18-28. DOI: 10.36604/1998-5029-2024-92-18-28
For citation:
Pirogov A.B., Prikhodko A.G., Pirogova N.A., Perelman J.M. Molecular cellular reactions of the respiratory tract to cold stimulus in non-allergic bronchial asthma. Bulleten'fiziologii ipatologii dyhania = Bulletin Physiology and Pathology of Respiration 2024; (92):18-28 (in Russian). DOI: 10.36604/1998-5029-2024-92-18-28
(EBC) were measured in 66 patients with asthma before and after bronchoprovocation test with isocapnic hyperventilation with cold (-20°C) air (IHCA) were evaluated. Results. Two groups of patients with presence (group 1) or absence (group 2) of cold airway hyperresponsiveness were formed. High macrophage and neutrophil counts and a significant decrease in the number of epithelial cells in sputum were recorded after the IHCA. Concentrations of TNF-a and MMP-9 in EBC after IHCA decreased to a greater extent in patients of group 2. The content of epitheliocytes in sputum was correlated with FEF50 (r=-0.49, p=0.03), FEF75 (r=-0.45, p=0.047) and MEF25-75 (r=-0.47, p=0.038), and their content after IHCA test - with AMEF25-75 (Rs=0.31; p=0.018). We found a correlation between baseline MMP-9 content in EBC and AMEF25-75 (Rs=-0.59; p=0.042), as well as between MMP-9 level after IHCA and severity of bronchospasm (AMEF25 ) in response to IHCA test (Rs=-0.67; p=0.023). Conclusion. In patients with cold airway hyperresponsiveness, uncontrolled course of asthma and more significant bronchial patency disorders are associated with productive-proliferative inflammation involving macrophages, MMP-9 and TNF-a, which contributes to bronchial remodeling.
Key words: non-allergic bronchial asthma, cold airway hyperresponsiveness, macrophages, matrix metalloproteinase-9, tumor necrosis factor-alpha, cold-induced bronchospasm, bronchial remodeling.
Высокая чувствительность бронхов к воздействию низких температур атмосферного воздуха с манифестацией синдрома холодовой гиперреактивности дыхательных путей (ХГДП) у больных бронхиальной астмой (БА) ассоциируется со смешанным паттерном бронхиального воспаления, утяжелением клинических симптомов, отсутствием контроля болезни и неаллергическим фенотипом астмы, что обуславливает резистентность к терапии ингаляционными глюкокортикостероидами [1]. На клеточно-молекуляр-ном уровне это проявляется увеличением провоспали-тельных цитокинов и поляризацией участвующих в воспалении макрофагов (М) по классическому М1 фенотипу [2, 3].
Одним из индукторов дифференцировки макрофагов в М1 служит фактор некроза опухоли-альфа (TNF-а), активирующий при воздействии на рецепторы TNFR1 и TNFR2 фактор транскрипции NF-kB, что вызывает экспрессию генов провоспалительных цитокинов и хемокинов, в том числе самого TNF-а. Кроме того, он активирует сигнальные пути, индуцируемые MAPK (mitogen-activated protein kinase - митоген-ак-тивируемая протеинкиназа) и АР-1 (активирующий белок - activating protein-1), благодаря чему регулируются пролиферация, воспалительная активность и апоптоз макрофагов [2, 4, 5]. Реактивные формы кислорода и токсические метаболиты, секретируемые макрофагами при респираторном взрыве в начале воспаления, окисляют тиоловые группы ферментов, разрывают связи в белках, липидах и нуклеиновых кислотах поврежденного интерстиция [6]. Лизосомные гидролазы разрушают коллаген и базальные мембраны, коллагеназы из семейства матриксных металлопротеи-наз (MMP) расщепляют гликопротеиды и коллагеновые волокна соединительнотканной стромы, продуцируемые гладкомышечными клетками, эндотелием и фиб-робластами [6]. ММР-9, найденная в макрофагах, нейтрофилах, Т-клетках после стимуляции их цитоки-нами и способная гидролизовать получаемые из коллагенов желатины, коллагены IV, V, VII, X, XI и XIV типов, энтактин, витронектин, протеогликаны, эластин, фибронектин, ламинин [7, 8], играет ведущую роль в воспалительной альтерации и ремоделировании брон-
хов при обструктивных заболеваниях легких и астме [9]. Экспрессия протеазы увеличивается в монокультуре альвеолярных макрофагов астматиков. Повышение экспрессии ММР-9 и снижение экспрессии ее тканевого ингибитора (TIMP)-1 сопровождает тяжелое течение БА [2, 7, 8]. Синтез провоспалительного цито-кина TNF-a, индуцируемый ММР-9, обеспечивается наличием энхансеров с сайтами связывания транскрипционных факторов NF-kB и AP-1 в промоторной области фермента [7].
Выступающие в деструктивной фазе воспаления как сигнальные и защитные клетки, макрофаги, которые могут приводить к необратимой дегенерации соединительной ткани, меняют на последующих этапах свой «воспалительный» фенотип на «репаративный» [6, 10]. При их активном участии происходит резорбция поврежденной ткани, модулируется фиброгенез [6]. Ключевую роль данных клеток в регуляции фиб-рогенеза связывают со стадией фибротического процесса и функциональным фенотипом макрофагов [6, 10].
Считается, что продукция факторов фибро- и кол-лагеногенеза, приводящая к ремоделированию бронхов у больных БА, в значительной степени обусловлена Th2 иммунным ответом, индукцией экспрессии активатора секреции Th2 цитокинов транскрипционного фактора GATA-3 [11], «противовоспалительным», альтернативным классическому М2 путем активации и М2 поляризацией макрофагов, контролируемых интерлей-кинами (IL)-4, IL-5, IL-9 и IL-13 [3, 5, 12]. Между тем, репаративными свойствами обладают и макрофаги М1 фенотипа, способные секретировать VEGF (vascular endothelium growth factor), стимулирующий ангиогенез и образование грануляционной ткани, плейотропные цитокины (IL-6, IL-2, TNF-a), про- и антифиброгенные факторы, включающие MMPs и TIMPs [2, 10]. ММР-9 расценивается как наиболее значимая профиброгенная металлопротеиназа, способствующая высвобождению связанных с внеклеточным матриксом ангиогенных факторов, таких как VEGF [7, 10].
Исходя из данных о разнонаправленных эффектах макрофагов и ММРs в процессах воспаления и ремо-делирования дыхательных путей, цель настоящей ра-
боты состояла в изучении участия макрофагов и MMP-9, регулируемых сигналами TNF-a, в формировании реакции дыхательных путей больных неаллергической бронхиальной астмой на гипервентиляцию холодным воздухом.
Материалы и методы исследования
Выполненное исследование носило наблюдательный характер и включало 66 пациентов обоего пола с диагнозом персистирующей БА неаллергического фенотипа, легкой и среднетяжелой формы (критерии GINA, 2023) [13]. Набор клинического материала осуществлялся с соблюдением Федерального закона «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации», международных этических принципов проведения медицинских исследований с участием человека в качестве субъекта (WMA Declaration of Helsinki - Ethical Principles for Medical Research Involving Human Subjects, 2013), после согласования с комитетом по биомедицинской этике учреждения. Функциональное тестирование проводились по единым стандартам в соответствии с существующими федеральными и международными протоколами.
Отбор в группу осуществлялся на условиях стро-
гого соблюдения требований к проведению бронхопро-вокационных тестов у больных. В исследование включались лица обоего пола в возрасте 18-60 лет с верифицированным диагнозом БА, объемом форсированного выдоха за первую секунду (ОФВ1) >75% должной величины по данным спирометрии, получавшие базисную терапию в соответствии со степенью тяжести заболевания, отсутствием в анамнезе аллергической реакции на холод (метод Дугласа), наличием подписанного добровольного информированного согласия и мотивации больного на проведение планируемых инструментальных исследований. Критерии исключения: тяжелое течение БА, ОФВ1<75% должной величины, наличие холодовой аллергии при накожной пробе с кубиком льда (методика Дугласа), прием системных глюкокортикостероидов, сопутствующие заболевания органов дыхания (пневмония, фиброзные заболевания легких, обострение хронического бронхита, хроническая обструктивная болезнь легких, острые заболевания верхних дыхательных путей и т.д.), клинически значимые сопутствующие заболевания других органов и систем, беременность. Дизайн исследования, представленный на рисунке 1, предусматривал двухдневный режим обследования пациента.
Рис. 1. Протокол обследования пациентов.
Объективизация клинических симптомов БА проводилась посредством заполнения валидизированного вопросника Asthma Control Test (АСТ, Quality Metric Inc., 2002) с подсчетом в баллах уровня контроля над заболеванием.
Спирометрию с оценкой вентиляционной функции легких выполняли на аппарате Easy on-PC (ndd Medizintechnik AG, Швейцария). Анализировали жизненную емкость легких (ЖЕЛ) и скоростные параметры поток-объем форсированного выдоха: объем форсированного выдоха за 1 сек. (ОФВ1), ОФВ1/ЖЕЛ, максимальную объемную скорость выдоха на уровне 50% (МОС50) и 75% форсированной ЖЕЛ (МОС75), среднюю объемную скорость выдоха на уровне 25-75% форсированной ЖЕЛ (СОС25-75) в процентах от должной величины (% долж.), используя должные значения ECSC для лиц европеоидной расы старше 18 лет. При выполнении бронходилатационной пробы с Р2-агони-
стом короткого действия применяли сальбутамол в дозе 400 мкг. Для проведения бронхопровокационной пробы изокапнической гипервентиляции холодным воздухом (ИГХВ) использовали устройство для охлаждения вентилируемого воздуха (-20°С). Бронхопрово-кация выполнялась 3 минуты в режиме гипервентиляции на уровне 60% должной максимальной вентиляции легких воздушной смесью, содержащей 5% СО2. Регистрировали изменение ОФВ1 после пробы ИГХВ на 1 и 5 минутах восстановительного периода (ДОФВ1игш, %). Холодовую гиперреактивность дыхательных путей диагностировали при снижении ОФВ1 на 10% и более от исходного фактического значения показателя [14].
Процедура забора биологического материала была стандартизована по времени и последовательности выполнения. Сбор индуцированной мокроты осуществляли под спирометрическим контролем, анализируя
ОФВ1 по завершении каждой ингаляции 3, 4 и 5% растворами хлорида натрия [15]. Спонтанно продуцируемую мокроту получали путем откашливания в стерильный контейнер (25 мл). Перед забором мокроты во всех случаях рот ополаскивали дистиллированной водой. Изучение образцов полученной мокроты проводили не позднее 1,5-2 часов после ее сбора. Мазки мокроты подготавливали стандартным образом: высушивали (5-10 мин., 37°С) в термостате ТМ-2 (Россия), фиксировали в парах 40% раствора формалина (10 мин), окрашивали в водном красителе Романов-ского-Гимзы (4-5%, рН 6,8) по стандартной методике. Используя светооптический иммерсионный микроскоп, оценивали клеточный состав с подсчетом не менее 400 клеток в полях зрения (центр и периферические области), число клеточных элементов выражали в процентах от общего их содержания.
Конденсат выдыхаемого воздуха (КВВ) собирали с помощью аппарата ECoScreen II (VIASUS Healthcare GmbH, Германия) до и после пробы ИГХВ (по 20 мин.) при спокойном дыхании ртом [16], предварительно ополоснув ротовую полость дистиллированной водой. Полученный биологический материал аликвотировали в полипропиленовые пробирки (объем 1,5 мл), замораживали (-80°С). Перед анализом образцы КВВ размораживали, концентрировали (в 15 раз), применяя вакуумный концентратор (Savant SpeedVac SPD120P2, Thermo Fisher Scientific, США). Определяли содержание TNF-a, ММР-9 и TIMP-1 (в фг/мл) путем мультиплексного анализа на проточном цитофлуориметре (BD FACSCanto II, BD, США) с наборами LEGENDplex HU Essential Immune Response Panel (BioLegend, США) по протоколу производителя.
Полученный количественный материал обрабатывали, используя программу «Автоматизированная система диспансеризации» [17]. Выполняли проверку на нормальность распределения количественных параметров по критериям Колмогорова-Смирнова, Пир-сона-Мизеса. Сравнение рядов при нормальном (гауссовом) распределении осуществляли при помощи непарного и парного критерия t (Стьюдента) (при условии гомогенности дисперсий групп сравнения по критерию Фишера). При распределении параметров, отличном от нормального (негауссовом), использовали критерии Манна-Уитни и Вилкоксона. Количественные параметры представлены как M±m (М - среднее арифметическое, m - стандартная ошибка) или как Me [Qp Q3] (медиана и межквартильный размах). Анализ распространенности признака в сравниваемых группах (частот альтернативного распределения) проводили по критерию х2 (К.Пирсона) для четырехпольной таблицы. С целью определения степени связи между двумя случайными величинами проводили классический корреляционный анализ, рассчитывали коэффициент корреляции по Пирсону (r), при непараметрическом корреляционном анализе - по Спирмену (Rs). Критический уровень значимости (р)
менее 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение
Анализируемая выборка, включавшая 66 пациентов БА (57% женщин, 43% мужчин), по основным количественным клинико-физиологическим параметрам и показателям базовой спирометрии имела нормальный тип распределения. Средний возраст обследуемых составил 39,1±1,8 лет, рост - 170,8±1,4 см, вес - 79,3±2,2 кг, ОФВ1 - 98,2±2,2% долж., ОФВ/ЖЕЛ - 74,2±1,1%. Изменение ОФВ1 после пробы ИГХВ (ДОФВ1игхв, %) варьировало от -34% до 12%, с медианным значением -8[-12; -4,4]%. По результатам теста ИГХВ в зависимости от наличия или отсутствия синдрома ХГДП больные были распределены, соответственно, в 1 (32 человека) и 2 (34 человека) группы.
По данным спирометрии, выявлены значимые межгрупповые различия в проходимости мелких бронхов (табл. 1). Так, пациенты 1 группы с ХГДП имели более низкие значения МОС50 и СОС25 75, чем лица 2 группы, не реагировавшие на холод, что свидетельствовало о более выраженных патологических изменениях в дис-тальных бронхах, связанных с персистенцией хронического воспаления, формированием «воздушных ловушек» и зональной неравномерности вентиляционных нарушений, способствующих дисфункции дыхательных путей малого калибра на ранней стадии заболевания. Это приводило к неполному достижению контроля над астмой при применении базовых средств ингаляционной фармакотерапии, о чем свидетельствовали результаты АСТ-теста (табл. 1).
Нарушения проходимости дистальных дыхательных путей у больных 1 группы сопровождались более выраженным по отношению к больным 2 группы брон-ходилатационным ответом на ингаляцию сальбутамола (ДСОС50 40,0±4,65 и 21,4±4,36% р=0,008; ДМОС75 45,7±6,67 и 22,4±3,67% р=0,004) и бронхоконстриктор-ным ответом на пробу ИГХВ (ДМОС50 -23,4±2,7 и -7,3±2,8%, соответственно, р=0,0003). По существующим данным, воспаление мелких дыхательных путей отличается более высокой плотностью и глубиной распространения клеточного инфильтрата по сравнению с бронхами крупного калибра [18]. В обеих группах нами был зарегистрирован смешанный паттерн клеточного воспаления как исходно, так и после пробы ИГХВ (рис. 2), характеризующийся наличием более 2% эозинофилов и 40% нейтрофилов [19]. Данный воспалительный паттерн часто встречается у лиц с неаллергической БА, он характеризуется увеличением выживаемости нейтрофилов в бронхах, увеличением их активности при безусловном снижении атопического компонента, что определяет развитие резистентности к терапии глюкокортикостероидами у ряда больных [20]. Как следует из цитограмм мокроты, в обеих группах после пробы ИГХВ количество нейтрофилов оставалось достаточно высоким, не отличаясь от исходно найденного в бронхах. При этом
процентное содержание макрофагов во 2 группе увеличивалось (рис. 2). Обращает на себя внимание уменьшение количества эпителиоцитов в мокроте больных (рис. 2), что, на наш взгляд, являлось резуль-
татом деструкции паренхиматозных клеток бронхов -одного из основных звеньев патогенеза мукоцилиарной дисфункции, облигатного признака всех хронических воспалительных заболеваний дыхательных путей [21].
Таблица 1
Клинико-функциональные параметры больных БА с разными типами реакции на ИГХВ
Параметр 1 группа 2 группа Значимость
Возраст, лет 38,6±2,7 38,9±2,6 р>0,05
Рост, см 172,8±1,7 170,2±2,3 р>0,05
Вес, кг 85,2±3,9 75,7±3,4 р>0,05
ИМТ, кг/м2 28,8±0,9 26,3±1,1 р>0,05
Пол (ж/м), % 45/55 60/40 Х2=0,40; р>0,05
Курящих лиц, % 47 26 Х2=2,15; р>0,05
АСТ, баллы 16,8±0,6 15,7±0,8 р>0,05
ОФВ1, % 94,1±2,6 101,7±2,7 р=0,044
ОФВ1/ЖЕЛ, % 73,7±1,7 74,8±1,5 р>0,05
МОС50, % 60,6±4,4 76,7±3,8 р=0,011
СОС25-75, % долж. 60,3±3,6 71,4±3,4 р=0,027
ДОФВ, , % 1 игхв' -13[-19; -11] -6[-7,8; -3,0] р<0,0001
ДОФВ1 Р2, % 11,8[3,2; 19,0] 8[4; 14] р>0,05
Примечание: р - значимость различий показателей между 1 и 2 группами у больных БА; ДОФВ1 в2 - изменение показателя в ответ на ингаляцию сальбутамола.
нейтрофилы макрофаги эозинофилы эпителиоциты
■ 1 группа исходно ■ 1 группа после ИГХВ ■ 2 группа исходно ■ 2 группа после ИГХВ
Рис. 2. Среднее содержание клеток (в %) в мокроте больных БА с различной реакцией на ИГХВ. Примечание: р' - значимость различий показателей до и после пробы ИГХВ (парный метод).
Концентрация ТОТ-а, ММР-9 в конденсате выдыхаемого воздуха у больных БА после пробы ИГХВ более активно снижалась у лиц 2 группы (табл. 2). Содержание Т1МР-1 значимо не менялось. Зарегистрирована связь между исходным содержанием ММР-9 в КВВ и проходимостью периферических бронхов (СОС25-75) (Кб=-0,59; р=0,042), а также концентрацией ММР-9 после ингаляции холодного воздуха и выраженностью бронхоспазма (ДСОС25 75) в ответ на пробу
ИГХВ (Кб=-0,67; р=0,023). Попутно отметим, что у лиц с ХГДП найденное в мокроте содержание эпителиоци-тов тесно коррелировало с исходными значениями МОС50 (г=-0,49; р=0,03), МОС75 (г=-0,45; р=0,047) и СОС25-75 (г=-0,47; р=0,038). Более высокому содержанию эпителия после пробы соответствовала менее выраженная бронхоконстрикторная реакция периферических дыхательных путей (ДСОС25-75) в ответ на ИГХВ (Яб=0,31; р=0,018).
Таблица 2
Содержание ТКР-а, ММР-9 и Т1МР-1 в конденсате выдыхаемого воздуха у больных БА после пробы
ИГХВ (Ме Юр Qз])
Показатель TNF-a, фг/мл р' MMP-9, фг/мл р' TIMP-1, фг/мл р'
Исходный 1 группа 51[30; 59] >0,05 2084[1938; 2229] >0,05 970[463; 1132] 0,07
После ИГХВ 1 группа 32[25; 42] 1115[606; 2431] 3961[991; 8544]
Исходный 2 группа 52[25; 73] р>0,05 0,012 2308[1017; 4432] р>0,05 0,033 1734[808; 4254] р>0,05 >0,05
После ИГХВ 2 группа 12[11; 27] р>0,05 495[92; 73] р=0,041 1840[709; 4762] р>0,05
Примечание: р - значимость различий показателей в телей в группах до и после ИГХВ (парный метод).
В ранее выполненных исследованиях, касающихся морфофункционального статуса, барьерной функции и мукоцилиарного клиренса бронхиального эпителия у больных БА с ХГДП, нам удалось показать связь между дезорганизацией десмоэпителиальной выстилки, деструкцией ее реснитчатого и бокаловидно-клеточного компонентов и активацией пероксидазной функции, а также деструкцией инфильтрирующих эпителий гранулоцитов [1, 22, 23]. Из полученных результатов следовало, что более выраженная эпителиальная деструкция у лиц с ХГДП и смешанным паттерном воспаления коррелировала с более интенсивными деструктивными изменениями нейтрофилов, инфильтрирующих бронхи. Совокупность вышеуказанных явлений, по нашему мнению, лежит в основе возникновения и поддержания гиперреактивности бронхов и потери контроля над астмой.
Реакция дыхательных путей на острую холодовую бронхопровокацию сопровождается эскалацией секреторной активности эпителиоцитов, повышением генерации муцинов и накоплением гликопротеинов в бокаловидных клетках, увеличением концентрации гликопротеинов в мокроте [1, 22]. В процессе обусловленного холодовым воздействием повреждения многорядного мерцательного эпителия и его метаплазии с переходом в многослойный плоский наблюдается гиа-линоз базальной мембраны слизистой оболочки бронхов. В эпителии, в рыхлой соединительной ткани, в
сравнении с 1 группой; р'- значимость различий показа-
стенке кровеносных сосудов, в утолщенной базальной мембране накапливаются гликозаминогликаны (ГАГ), вызывающие метахромазию, набухание, фрагментацию и гомогенизацию коллагеновых волокон. Происходит нарушение взаимоотношений между коллагеном и белково-углеводными комплексами, цементирующими вещество волокнистого матрикса [24]. Хроническое воспаление, фибриллогенез, фиброз и склероз стромы бронхов, индуцированные гиперпродукцией ГАГ и му-копротеидов эпителиальной паренхимой, пронизанной гранулоцитами с активированным нейтрофильным пулом, рассматриваются в качестве структурно-функционального базиса для развития ремоделирования дыхательных путей. Последнее ассоциируется с мукоцилиарной недостаточностью и обусловлено реакцией на многократное и продолжительное холодовое воздействие [22-24].
Ранее были опубликованы работы, касающиеся стимулирующего влияния ТОТ-а на функцию макрофагов, их участие в процессах воспаления, резорбции и репаративной регенерации соединительной ткани, поврежденной в зоне воспаления [4-6]. Также имеются сведения об индукции ТОТ-а провоспалительной и профиброгенной активности секретируемой фагоцитами ММР-9. Последняя, в свою очередь, индуцирует ТОТ-а, способствуя процессингу и активации воспалительных цитокинов/хемокинов [7-9]. Кроме того, благодаря гидролизу входящего в состав базальной
мембраны коллагена IV типа, ММР-9 способствует инвазии в базальную мембрану воспалительных клеток, мобилизации матрикс-связанных факторов роста, избыточному фиброзу и ремоделированию дыхательных путей при астме. Попутно следует отметить, что увеличение продукции ММР-9 влечет активацию TGF-P, усиление синтеза коллагена фибробластами и ангиоге-неза [7-9]. Это находит свое подтверждение в очевидном участии данного цитокина, макрофагов и ММР-9 в развитии и поддержании ХГДП.
Полученные нами значения провоспалительных TNF-a и ММР-9 у лиц с ХГДП после холодовой брон-хопровокации в КВВ были выше, чем у больных, не реагировавших на пробу (табл. 2). Содержание TNF-a и ММР-9 в дыхательных путях пациентов 1 группы ассоциировались со стабильно высоким (до и после хо-лодового воздействия) содержанием макрофагов. Увеличение, по сравнению с исходным содержанием, количества макрофагов, наблюдаемое после пробы ИГХВ в мокроте пациентов 2 группы, не сопровождалось продукцией таких концентраций TNF-a и ММР-9, которые были бы равнозначны концентрациям таковых у пациентов 1 группы либо превышали их уровень. При этом, межгрупповые значения TIMP1 в КВВ больных после ИГХВ значимо не различались (табл. 2).
От взаимодействия макрофагов, TNF-a и ММР-9 при холодовом бронхоспазме в значительной мере зависела активация деструкции эпителия бронхов у лиц с ХГДП, что подтверждалось найденными нами корреляционными связями. Зависимость между уровнем ММР-9, количеством нейтрофилов, макрофагов и эпи-телиоцитов в бронхоальвеолярной лаважной жидкости была найдена ранее при острой астме [9], при этом авторы подчеркивали, что десквамация эпителиальных клеток, индуцированная MMP-9, способствовала формированию бронхиальной обструкции [9].
Обусловленная холодовым воздействием стимуляция TNF-a клеток М1 макрофагов при остром оксида-тивном стрессе направлена, прежде всего, на интенсификацию респираторного взрыва. Последний сопровождается лабилизацией мембран лизосом, высвобождением в бронхиальный интерстиций лизосом-ных ферментов, медиаторов воспаления, высоко-реакционноспособных форм кислорода, галогенов (HOCl), оксида азота, активным гидролизом и деградацией внеклеточного матрикса. Одной из причин, способствующих усилению респираторного взрыва, могла быть продукция макрофагами, стимулированными TNF-a, низких доз интерферона (IFN). Он взаимодействует со специфическим рецептором на поверхности клеток и активирует сигнальный путь -Janus Kinases/Signal Transducer and Activator of Transcription (JAK/STAT) [4, 5]. Латентный STAT1 при фос-форилировании активированными JAK1 и JAK2, димеризуясь, становится активным; активные STAT1 гомодимеры транслоцируются в ядро, где связываются
с промоторными элементами сайта активации IFN-y и инициируют транскрипцию генов провоспалительных цитокинов через IFN-y [25, 26]. IFN-y представляет собой центральный регуляторный цитокин, поляризующий иммунный воспалительный ответ дыхательных путей, реагирующих на холодовой стимул, по Th1 типу. Активирующее воздействие IFN-y на макрофаги обусловлено стимуляцией эффекторных функций клеток, что связано с индукцией цитозольных компонентов фагоцитарной NADPH-оксидазы (NOX) [25-27]. Индуцируя NOX, IFN-y участвует в прайминге респираторного взрыва и активации ферментов фагоцитарных лизосом [25].
По мнению ряда авторов, активация различных изо-форм NOX в дыхательных путях больных БА происходит на нескольких клеточных уровнях и принимает непосредственное участие в развитии обструкции бронхов и бронхоконстрикции [27]. В цилиарном эпителии пациентов с нейтрофильным эндотипом воспаления усиленно экспрессируются стимулирующие эпителиальную дисфункцию NOX4 и NOX1. Повышенная активность NOX4 в гладкомышечных клетках, индуцирующая экспрессию сигнального белка RhoA, контролирующего динамику актинового цитоскелета, гипертрофическую и пролиферативную активность ле-йомиоцитов, рассматривается в качестве ключевого звена бронхоспазма. При обструктивном типе нарушений вентиляционной функции легких увеличивается показатель оптической плотности цитоплазмы гладких миоцитов бронхов, повышается доля миоцитов с высоким уровнем цитоплазматического белка, что обусловлено их трансформацией от контрактильного к синтетическому фенотипу и связано с запускаемыми регенераторно-гиперпластическими процессами, приводящими к резкой структурной перестройке ткани [27].
Следовательно, взаимосвязь между индуцируемым NOX респираторным взрывом, протекающим в паренхиме и строме бронхов в ходе острой ответной реакции на холодовой стимул, так же, как и структурную реорганизацию дыхательных путей при многократном хо-лодовом воздействии, можно связать с морфофункциональным переходом альтеративно-экс-судативной стадии воспаления на старте ХГДП, в стадию продуктивную, с исходом в фиброз, соответствующую завершению развития процесса.
Координация макрофагами поздней стадии воспаления базируется на продукции ростовых факторов (VEGF, TGF-P (Transforming Growth Factor), IGF-1 (Insulin-like Growth Factor), PDGF (Platelet-derived Growth Factor)), стимуляции ангиогенеза, пролиферации фиб-робластов, резидентных прогениторных клеток фибро-бластического ряда и миофибробластов, дифференцировке клеток-предшественников в мио-фибробласты, синтезе компонентов внеклеточного мат-рикса, преимущественно коллагена [8, 10]. TNF-a выступает потенциальным индуктором или маркером
как макрофагов «антифиброзных», так и макрофагов, инициирующих фибротический процесс, так же, как и экспрессия ММРб в одном типе клеток может быть сопряжена с профиброгенной, в другом - с антифибро-генной активностью [8, 10]. В фиброзно-рубцовой ткани присутствуют макрофаги, продуцирующие ММРб [8, 10]. Синтез ММРб и ТШРб, семейство которых не только супрессирует активность ММРб, но и стимулирует пролиферацию фибробластов, контролируется различными сигналами микроокружения, в том числе ростовыми факторами и плейотропными цито-кинами [8, 10]. ТОТ-а, способствующий развитию фиброза путем усиления TGF-pl-индуцированного образования соединительной ткани через активацию рецептора TGF-P типа I, может оказывать ингибирующее влияние на этот процесс, подавляя экспрессию а1-цепи коллагена I, тем самым модулируя разрешение фиброза, и, кроме того, препятствуя фиброзу гладкой мускулатуры вследствие индукции апоптоза предшественников миофибробластов [8, 10].
Решающая роль регулируемых ТОТ-а и продуцирующих ММРб макрофагов в «многоходовых» межклеточных взаимодействиях с фибробластами, миофибробластами, адвентициальными, малодиффе-ренцированными фибробластическими и другими клетками интерстиция, осуществляемая в зоне воспалительной деструкции, расщепления соединительнотканного матрикса, резорбции и репарации поврежденной ткани, свидетельствует о функциональной пластичности клеток [6, 8, 10]. Все вышеперечисленное реализуется у больных неаллергической БА с бронхоконстрикцией на холодовой стимул как в результате однократного бронхопровокационного воздействия, при котором доминируют активация респираторного взрыва и гидролитическая, «антифиб-ротическая» функция макрофагов, так и при хрониче-
ском холод-индуцированном оксидативном стрессе, вызывающем активацию фиброза и формирование стойкой ХГДП.
Ухудшение показателей функции внешнего дыхания и неконтролируемое течение болезни у пациентов со смешанным фенотипом воспаления и ХГДП связаны с ремоделированием, в первую очередь, дисталь-ных бронхов, обусловленным хроническим воспалением, склерозом слизистой оболочки, разрастанием грануляционно-соединительной ткани, гипертрофией гладкомышечных клеток, склерозом и гиалинозом базальной мембраны, а также деформирующим интерстициальным фиброзом. В свою очередь, последний потенцирован повышенной активностью эффекторных воспалительных и фибро-пластических функций макрофагов, MMP-9 и TNF-a, участвующих в холод-индуцированном бронхоспазме, Th1 иммунном ответе, развитии и поддержании ХГДП.
Вывод
У больных с холодовой гиперреактивностью дыхательных путей неконтролируемое течение БА и более значимые нарушения проходимости бронхов ассоциированы с продуктивно-пролиферативным воспалением, связанным с участием макрофагов, MMP-9 и TNF-a, что способствует ремоделированию бронхов.
Конфликт интересов
Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи
Conflict of interest
The authors declare no conflict of interest
Источники финансирования
Исследование проводилось без участия спонсоров
Funding Sources
This study was not sponsored
ЛИТЕРАТУРА
1. Приходько А.Г., Пирогов А.Б., Перельман Ю.М. Роль нейтрофилов и эпителия бронхов в потере контроля над бронхиальной астмой и формировании холодовой гиперреактивности дыхательных путей // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2020. Вып. 78. С.47-55. doi: 10.36604.1998-5029-2020-78-47-55
2. Jiang Z., Zhu L. Update on the role of alternatively activated macrophages in asthma // J. Asthma Allergy. 2016. Vol. 9. Р.101-107. https://doi.org/10.2147/JAA.S104508
3. Arora S., Deva K., Agarwalb B., Dasc P., Ali Syed M. Macrophages: their role, activation and polarization in pulmonary diseases // Immunobiology. 2018. Vol. 223, №4-5. P.383-396. https://doi.org/10.1016/j.imbio.2017.11.001
4. Ярилин Д.А. Роль фактора некроза опухолей в регуляции воспалительного ответа моноцитов и макрофагов // Иммунология. 2014. Т.35, №4. С.195-201. EDN: SJZPLV.
5. Li M., Wang M., Wen Y., Zhang H., Zhao G.-N., Gao Q. Signaling pathways in macrophages: molecular mechanisms and therapeutic targets // MedComm. (2020). 2023. Vol.4, №5. Article number:e349. https://doi.org/10.1002/mco2.349
6. Фрейдлин И.С. Система мононуклеарных фагоцитов. Москва: Медицина, 1984. 272 с.
7. Ярмолинская М.И., Молотков А.С., Денисова В.М. Матриксные металлопротеиназы и ингибиторы: классификация, механизм действия // Журнал акушерства и женских болезней. 2012. Т.61, Вып. 1. С.113-125. EDN: PAIYTX.
8. Adhyatmika A., Putri K.S., Beljaars L., Melgert B.N. The elusive antifibrotic macrophage // Front. Меd. (Lausanne). 2015. Vol. 2. Article number:81. https://doi.org/10.3389/fmed.2015.00081
9. Atkinson J.J., Senior R.M. Matrix metalloproteinase-9 in lung remodeling // Amer. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2003.
Vol.28, №1. Р.12-24. https://doi.org/10.1165/rcmb.2002-0166TR
10. Максимова А.А., Шевела Е.Я., Сахно Л.В., Останин А.А., Черных Е.Р. Продукция факторов, участвующих в регуляции фиброза, различными типами макрофагов человека // Медицинская иммунология. 2020. Т.22, № 4. С.625-632. https://doi.org/10.15789/1563-0625-POF-1
11. Минеев В.Н., Сорокина Л.Н., Нема М.А., Трофимов В.И. Экспрессия транскрипционного фактора GATA-3 в лимфоцитах периферической крови больных бронхиальной астмой // Медицинская иммунология. 2010. Т.12, № 1-2. С.21-28. EDN:PVLAKR.
12. Abdelaziz M.H., Abdelwahab S.F., Wan J., Cai W., Huixuan W., Jianjun C., Kumar K.D., Vasudevan A., Sadek A., Su Z., Wang S., Xu H. Alternatively activated macrophages; a double-edged sword in allergic asthma // J. Transl. Med. 2020. Vol. 18, №1. Article number:58. https://doi.org/10.1186/s12967-020-02251-w
13. Global Initiative for Asthma (GINA). Global strategy for asthma management and prevention (2023 update). Accessed August 07, 2023. URL: https://ginasthma.org/wp-content/uploads/2023/07/GINA-2023-Full-report-23_07_06-WMS.pdf
14. Приходько А.Г., Перельман Ю.М., Колосов В.П. Гиперреактивность дыхательных путей. Владивосток: Дальнаука, 2011. 204 с.
15. Dragonieri S., Bikov A., Capuano A., Scarlata S., Carpagnano G.E. Methodological aspects of induced sputum // Adv. Respir. Med. 2023. Vol.91, №5. Р.397-406. https://doi.org/10.3390/arm91050031
16. Konstantinidi E.M, Lappas A.S., Tzortzi A.S., Behrakis P.K. Exhaled breath condensate: technical and diagnostic aspects // ScientificWorldJournal. 2015. Vol. 2015. Article number:435160. https://doi.org/10.1155/2015/435160
17. Ульянычев Н.В. Системность научных исследований в медицине. Саарбрюккен: LAP LAMBERT Academic Publishing, 2014. 140 с.
18. Usmani O.S., Singh D., Spinola M., Bizzi A., Barnes P.J. The prevalence of small airways disease in adult asthma: A systematic literature review // Respir. Med. 2016. Vol.116. Р. 19-27. https://doi.org/10.1016/j.rmed.2016.05.006
19. Hastie A.T., Moore W.C., Meyers D.A., Vestal P.L., Li H., Peters S.P., Bleecker E.R. Analyses of asthma severity phenotypes and inflammatory proteins in subjects stratified by sputum granulocytes // J. Allergy Clin. Immunol. 2010. Vol.125, №5. Р. 1028-1036. https://doi.org/10.1016/jjaci.2010.02.008
20. Терехов Д.В. Тяжелая неаллергическая бронхиальная астма: характеристика фенотипа и особенности лечения // Астма и аллергия. 2019. №3. С.3-7. EDN:DJDDHE.
21. Mall M.A. Role of cilia, mucus, and airway surface liquid in mucociliary dysfunction: lessons from mouse models // J. Aerosol. Med. Pulm. Drug Deliv. 2008. Vol.21, №1. Р.13-24. https://doi.org/10.1089/jamp.2007.0659
22. Пирогов А.Б, Зиновьев С.В., Приходько А.Г., Перельман Ю.М., Чжоу С.Д., Ли Ц. Особенности структурной организации бокаловидного эпителия бронхов у больных бронхиальной астмой с холодовой гиперреактивностью дыхательных путей // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2018. Вып.67. С.17-24. https://doi.org/10.12737.article_5a9f25a71c7b18.21464221
23. Пирогов А.Б., Приходько А.Г., Перельман Ю.М. Гранулоциты бронхов в развитии деструкции эпителия и окислительной модификации липидов у больных бронхиальной астмой с холодовой и осмотической гиперреактивностью дыхательных путей // Сибирский научный медицинский журнал. 2021. Т.41, №2. С.40-48. https://doi.org/10.18699.SSMJ20210206
24. Целуйко С.С., Красавина Н.П., Семенов Д.А., Чжоу С.Д., Ли С. Гистохимическая характеристика углеводных соединений в воздухоносном отделе легких крыс под действием холодного воздуха // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2012. Вып.46. С.69-76. EDN:NVHETE.
25. Schroder K., Hertzog P.J., Ravasi T., Hume D.A. Interferon-gamma: an overview of signals, mechanisms and functions // J. Leukoc. Biol. 2004. Vol.75, №2. P.163-189. https://doi.org/10.1016/ j.trsl.2017.09.002
26. Луцкий A.A., Жирков A.A, Лобзин Д.Ю., Рао М., Алексеева Л.А., Мейрер М., Лобзин Ю.В. Интерферон-у: биологическая функция и значение для диагностики клеточного иммунного ответа // Журнал инфектологии. 2015. Т.7, №4. С.10-22. https://doi.org/10.22625/2072-6732-2015-7-4-10-22
27. McCarty M.F., DiNicolantonio J.J., Lerner A. Review - nutraceuticals can target asthmatic bronchoconstriction: NADPH oxidase- dependent oxidative stress, RhoA and calcium dynamics // J. Asthma Allergy. 2021. Vol.14. Р.685-701. https://doi.org/10.2147/JAA.S307549
REFERENCES
1. Prikhodko A.G., Pirogov A.B., Perelman J.M. [Role of neutrophils and bronchial epithelium in loss of control of bronchial asthma and formation of respiratory tract response to cold stimulus]. Bülleten'fiziologii ipatologii dyhania = Bulletin Physiology and Pathology of Respiration 2020; (78):47-55 (in Russian). https://doi.org/10.36604.1998-5029-2020-78-47-55
2. Jiang Z., Zhu L. Update on the role of alternatively activated macrophages in asthma. J. Asthma Allergy 2016; 9:101107. https://doi.org/10.2147/JAA.S104508
3. Arora S., Deva K., Agarwalb B., Dasc P., Ali Syed M. Macrophages: Their role, activation and polarization in pul-
monary diseases. Immunobiology 2018; 223(4-5):383-396. https://doi.Org/10.1016/j.imbio.2017.11.001
4. Yarilin D.A. [The role of tumor necrosis factor in the regulation of the inflammatory response of monocytes and macrophages]. Immunologija = Immunology 2014; 35(4):195-201 (in Russian).
5. Li M., Wang M., Wen Y., Zhang H., Zhao G.-N., Gao Q. Signaling pathways in macrophages: molecular mechanisms and therapeutic targets. MedComm.(2020) 2023; 4(5):e349. https://doi.org/10.1002/mco2.349
6. Freidlin I.S. [Mononuclear phagocyte system]. Moscow: Medicine; 1984 (in Russian).
7. Yarmolinskaya M.I., Molotkov A.S., Denisova V.M. [Matrix metalloproteinases and inhibitors: classification, mechanism of action]. Zhurnal akusherstva i zhenskih boleznej = Journal of Obstetrics and Women's Diseases 2012; 61(1):113— 125 (in Russian).
8. Adhyatmika A., Putri K.S.S., Beljaars L., Melgert B.N. The elusive antifibrotic macrophage. Front. Med. (Lausanne) 2015; 2(81):11. https://doi.org/10.3389/fmed.2015.00081
9. Atkinson J.J., Senior R.M. Matrix metalloproteinase-9 in lung remodeling. Amer. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2003; 28(1):12-24. https://doi.org/10.1165/rcmb.2002-0166TR
10. Maksimova A.A., Shevela E.Ya., Sakhno L.V., Ostanin A.A., Chernykh E.R. [Production of factors involved into fibrosis regulation by various types of human macrophages]. Medicinskaja immunologija = Medical Immunology 2020; 22(4):625-632 (in Russian). https://doi.org/10.15789/1563-0625-P0F-1954
11. Mineev V.N., Sorokina L.N., Nyoma M.A., Trofimov V.I. [Expression of the transcription factor GATA-3 in peripheral blood lymphocytes of patients with bronchial asthma]. Medicinskaja immunologija = Medical Immunology 2010; 12(1-2):21-28 (in Russian).
12. Abdelaziz M.H., Abdelwahab S.F., Wan J., Cai W., Huixuan W., Jianjun C., Kumar K.D., Vasudevan A., Sadek A., Su Z., Wang S., Xu H. Alternatively activated macrophages; a double-edged sword in allergic asthma. J. Transl. Med. 2020; 18:58. https://doi.org/10.1186/s12967-020-02251-w
13. Global Initiative for Asthma (GINA). Global strategy for asthma management and prevention (2023 update). Accessed August 07, 2023. Available at: https://ginasthma.org/wp-content/uploads/2023/07/GINA-2023-Full-report-23_07_06-WMS.pdf
14. Prikhodko A.G., Perelman J.M., Kolosov V.P. [Airway hyperresponsiveness]. Vladivostok: Dal'nauka; 2011 (in Russian).
15. Dragonieri S., Bikov A., Capuano A., Scarlata S., Carpagnano G.E. Methodological aspects of induced sputum. Adv. Respir. Med. 2023; 91(5):397-406. https://doi.org/10.3390/arm91050031
16. Konstantinidi E.M, Lappas A.S., Tzortzi A.S., Behrakis P.K. Exhaled breath condensate: technical and diagnostic aspects. ScientificWorldJournal 2015; 2015:435160. https://doi.org/10.1155/2015/435160
17. Ul'yanychev N.V. [Systematic research in medicine]. Saarbrücken: LAP LAMBERT Academic Publishing; 2014 (in Russian).
18. Usmani O.S., Singh D., Spinola M., Bizzi A., Barnes P.J. The prevalence of small airways disease in adult asthma: A systematic literature review. Respir. Med. 2016; 116:19-27. https://doi.org/10.1016Zj.rmed.2016.05.006
19. Hastie A.T., Moore W.C., Meyers D.A., Vestal P.L., Li H., Peters S.P., Bleecker E.R. Analyses of asthma severity phenotypes and inflammatory proteins in subjects stratified by sputum granulocytes. J. Allergy Clin. Immunol. 2010; 125(5):1028-1036. https://doi.org/10.1016/jjaci.2010.02.008
20. Terekhov D.V. [Severe non-allergic bronchial asthma: characteristics of the phenotype and treatment features]. Astma i allergija = Asthma and Allergy. 2019; (3):3-7 (in Russian).
21. Mall M.A. Role of cilia, mucus, and airway surface liquid in mucociliary dysfunction: les-sons from mouse models. J. Aerosol. Med. Pulm. Drug Deliv. 2008; 21(1):13-24. https://doi.org/10.1089/jamp.2007.0659
22. Pirogov A.B., Zinoviev S.V., Prikhodko A.G., Perelman J.M., Zhou X., Li Q. [Features of structural organization of goblet epithelium of bronchi in asthma patients with cold airway hyperresponsiveness]. Bulleten'fiziologii ipatologii dyhaniya = Bulletin Physiology and Pathology of Respiration 2018; (67):17-24 (in Russian). https://doi.org/10.12737.ar-ticle_5a9f25a71c7b18.21464221
23. Pirogov A.B., Prikhodko A.G., Perelman J.M. [Bronchial granulocytes in the development of epithelial destruction and oxidative lipid modification in patients with bronchial asthma with cold and osmotic airway hyperresponsiveness]. Sibirskij nauchnyj medicinskij zhurnal = Siberian Scientific Medical Journal. 2021; 41(2):40-48 (in Russian). https://doi.org/10.18699.SSMJ20210206
24. Tseluyiko S.S., Krasavina N.P., Semenov D.A., Zhou S.D., Li S. [Histochemical characteristics of carbohydrate compounds in the pneumatic part of the lungs of rats under the influence of cold air]. Bulleten' fiziologii ipatologii dyhaniya = Bulletin Physiology and Pathology of Respiration. 2012; (46):69-76 (in Russian).
25. Schroder K., Hertzog P.J., Ravasi T., Hume D.A. Interferon-gamma: an overview of signals, mechanisms and functions. J. Leukoc. Biol. 2004; 75(2):163-189. https://doi.org/10.1016/ j.trsl.2017.09.002
26. Lutckii A.A., Zhirkov A.A., Lobzin D.Yu., Rao M., Alekseeva L.A., Maeurer M., Lobzin Yu.V. [Interferon-y: biological function and application for study of cellular immune response]. Zhurnal infektologii = Journal of Infectology.
2015; 7(4):10-22 (in Russian). https://doi.org/10.22625/2072-6732-2015-7-4-10-22
27. McCarty M.F., DiNicolantonio J.J., Lerner A. Review - nutraceuticals can target asth-matic bronchoconstriction: NADPH oxidase- dependent oxidative stress, RhoA and calcium dynamics. J. Asthma Allergy. 2021; 14:685-701. https://doi.org/10.2147/JAA.S307549
Информация об авторах:
Алексей Борисович Пирогов, канд. мед. наук, доцент, старший научный сотрудник, лаборатория функциональных методов исследования дыхательной системы, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания»; e-mail: [email protected]
Author information:
Aleksey B. Pirogov, MD, PhD (Med.), Associate Professor, Senior Staff Scientist, Laboratory of Functional Research of Respiratory System, Far Eastern Scientific Center of Physiology and Pathology of Respiration; email: [email protected]
Анна Григорьевна Приходько, д-р мед. наук, главный научный сотрудник, лаборатория функциональных методов исследования дыхательной системы, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания»; e-mail: [email protected]
Апм G. Prikhodko, MD, PhD, DSc (Med.), Main Staff Scientist, Laboratory of Functional Research of Respiratory System, Far Eastern Scientific Center of Physiology and Pathology of Respiration; e-mail: [email protected]
Наталья Алексеевна Пирогова, канд. мед. наук, научный сотрудник, лаборатория функциональных методов исследования дыхательной системы, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания»; e-mail: [email protected]
Natal'ya A. Pirogova, PhD (Med.), Staff Scientist, Laboratory of Functional Research of Respiratory System, Far Eastern Scientific Center of Physiology and Pathology of Respiration; email: [email protected]
Юлий Михайлович Перельман, член-корреспондент РАН, д-р мед. наук, профессор, зам. директора по научной работе, зав. лабораторией функциональных методов исследования дыхательной системы, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания»; e-mail: [email protected]
Поступила 23.04.2024 Принята к печати 20.05.2024
Juliy M. Perelman, MD, PhD, DSc (Med.), Corresponding Member of RAS, Professor, Deputy Director on Scientific Work, Head of Laboratory of Functional Research of Respiratory System, Far Eastern Scientific Center of Physiology and Pathology of Respiration; e-mail: [email protected]
Received April 23, 2024 Accepted May 20, 2024
