CC BY
86
УДК 575.113
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ГЕНОВ-КАНДИДАТОВ ПОСТМЕНОПАУЗАЛЬНОГО ОСТЕОПОРОЗА В ВОЛГО-УРАЛЬСКОМ РЕГИОНЕ
© А. В. Мальцев , р. и. лусаинива , э. л. лусну |динива
1 Башкирский государственный университет Россия, Республика Башкортостан, 450076 г. Уфа, ул. Заки Валиди, 32. Тел.: +7 (347) 272 63 70. 2Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН
Россия, Республика Башкортостан, 450054 г. Уфа, пр. Октября, 71.
Тел.: +7 (347) 235 60 88.
E-mail: [email protected]
Проведено исследование полиморфных вариантов -13910C>T (rs4988235) гена лактазы (LCT), с.1377С>Т (P447L, rs1801197) гена рецептора кальцитонина (CTR), c.2956G>T (rs1801725; A986S) гена рецептора чувствительности к кальцию (CASR), g.13620172T>C (rs9630182), g.13617608A>G (rs2036417), g.13618804C>T (rs7125774) гена паратиреоидного гормона (PTH), с.6890-8A>C (rs7844539), c.1217-15C>T (rs3102734) c.950T>C (rs2073617), 163A>G (rs3102735), 1181 G>C (rs2073618), 245T>G (rs3134069) в гене остеопротегерина (OPG, TNFRSF11B) и поиск ассоциаций изученных локусов с риском развития остеопоретиче-ских переломов и уровнем минеральной плотности костной ткани (МПКТ) у 826 женщин по-стменопаузального возраста русской и татарской этнической принадлежности из Волго-Уральского региона России. Генотип *T*T локуса g.13617608A>G (rs2036417) гена PTH является маркером повышенного риска развития остеопении генотип *C*T полиморфизма g.13618804C>T (rs7125774) гена PTH оказался протективным фактором развития остеопении. Гаплотип *CTT чаще встречался у женщин с остеопенией и остеопорозом (0.056) по сравнению с группой с нормальными значениями МПКТ (0.027), различия достигают статистической значимости (X = 4.157, p = 0.041), относительный риск (OR) составил 4.015, что свидетельствует о повышенном риске снижения МПКТ для носителей данного гаплотипа изученных локусов гена PTH. Выявлена ассоциация аллеля *Т полиморфного варианта c.1217-15C>T (rs3102734) гена OPG с переломами у женщин как татарской, так и русской этнической принадлежности и снижением уровня МПКТ у женщин татарской этнической принадлежности. Установлена ассоциация аллеля *T и генотипа *T*T полиморфного локуса 245T>G (rs3134069) с риском развития переломов у женщин татарской этнической принадлежности.
Ключевые слова: остеопороз, минеральная плотность костной ткани, переломы.
Остеопороз (ОП) — это хроническое системное прогрессирующее метаболическое заболевание скелета, характеризующийся снижением минеральной плотности костной ткани, нарушением микроархитектоники и повышением хрупкости костей в силу нарушения баланса обмена костной ткани с преобладанием процессов рассасывания над процессами образования, понижением прочности кости и нарастающим риском переломов [1]. Более 9000000 зарегистрированных остеопоротических переломов происходят по всему миру, что влечет за собой значительные экономические затраты. По прогнозам число переломов увеличится на 50% к 2025 г. [2]. Таким образом, остеопоретические переломы наносят значительный экономический, социальный и клинический ущерб. Клинически ОП диагностируется, в том случае, если пациент получил перелом в результате минимальной травмы (например, падение с высоты собственного роста). МПКТ имеет достаточно высокую наследуемость, приблизительно от 50 до 85%. Несмотря на то, что МПКТ является наиболее важным клиническим
Введение
фактором риска развития остеопоретических переломов, помимо возраста и пола, большинство людей пострадавших от остеопоретических переломов имеют нормальный уровень МПКТ. Можно предположить, что факторы, которые никак не связанны с уровнем МПКТ имеют сильное влияние на риск переломов [3]. Наиболее подвержены риску развития остеопоретических переломов костей мужчины и женщины в преклонном возрасте; женщины в менопаузу и после гистерорезекции; пациенты, длительно лечащиеся глюкокортикостероидами (ГКС) — ГКС-индуцированный ОП как одно из наиболее характерных и потенциально тяжелых последствий гормонозависимости. По эпидемиологической, научной, профилактической и клинической значимости Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) ставит сегодня ОП на четвертое место после инфекционной, сердечно-сосудистой, опухолевой и эндокринной (в первую очередь сахарный диабет) патологии [1].
Генетические исследования ОП в значительной степени основываются на изучении кандидатных генов, участвующих в костном метаболизме. Анализ полиморфных вариантов генов-кандидатов ОП в
* автор, ответственный за переписку
этнических группах, отличающихся по лингвистическому и территориальному признакам, является необходимым условием для выявления генетических маркеров заболевания, разработки подходов его ранней диагностики и профилактики [4].
Целью данного исследования является поиск ассоциаций полиморфных вариантов —13910C>T гена лактазы (LCT), с.1377С>Т (P447L, rs1801197) гена рецептора кальцитонина (CTK), c.2956G>T (rs1801725; A986S) гена рецептора чувствительности к кальцию (CASK), g.13620172T>C (rs9630182), g.13617608A>G (rs2036417), g.13618804C>T (rs7125774) гена паратиреоидного гормона (PTH), c.6890-8A>C (rs7844539), c.1217-15C>T(rs3102734) c.950T>C (rs2073617), 163A>G (rs3102735), 1181 G>C (rs2073618), 245T>G (rs3134069 гена остео-протегерина (OPG, TNFRSF11B) с риском развития остеопоретических переломов и уровнем МПКТ у женщин постменопаузального возраста из Волго-Уральского региона России.
Материалы и методы исследования
В работе использованы образцы ДНК 826 женщин от 40 до 84 лет, средний возраст составил 62 года, проживающих на территории Республики Башкортостан и Свердловской области, с информированного согласия на участие в исследовании. Формирование выборки осуществлялось на базе городских клинических больниц №5 и №21 г. Уфы и областной клинической больницы №1 г. Екатеринбурга. Критерием для исключения из исследования было наличие сопутствующих заболеваний и состояний, которые могут привести к потере костной массы. Общая выборка была разделена в зависимости от этнической принадлежности и наличия переломов. В группу с переломами отобраны женщины с низкотравматичными переломами, произошедшими в постменопаузе. Все переломы были подтверждены рентгенологически.
Оценка МПКТ шейки бедра и поясничного отдела позвоночника проводилась методом двухэнер-гетической рентгеновской абсорбциометрии (DEXA) на аппарате QDR 4500A («Hologic», США). Показатели МПКТ шейки бедра исследованы у 328 женщин, МПКТ поясничного отдела позвоночника — у 336 женщин. Для диагностики ОП были использованы критерии ВОЗ (WHO, 1994), согласно которым к нормальным значениям МПКТ относятся показатели выше - ISD от референтной базы данных по Т-критерию, значения от ISD до -2.5SD классифицируются как остеопения, отклонение ниже -2.5 SD - ОП.
ДНК выделяли из периферической крови стандартным методом фенольно-хлороформной экстракции [5]. Анализ полиморфных локусов гена паратиреоидного гормона (PTH) и гена лактазы (LCT) осуществляли с применением метода детекции флуоресценции «по конечной точке» с помощью встроенных средств программного обеспече-
ния (FLASH/RTAS) на амплификаторе Bio-Rad CFX 96. Исследование остальных однонуклеотид-ных полиморфизмов проводили методами ПЦР и ПДРФ с последующим электрофорезом в 7%-ном ПААГ с использованием праймеров описанных ранее [6-8]. Статистическую обработку результатов исследования проводили с помощью пакета программ статистического анализа "SPSS v.13".
Результаты и обсуждение
Нами проведено исследование 12 полиморфных вариантов, 5 генов-кандидатов у женщин русской и татарской этнической принадлежности из Волго-Уральского региона России.
Лактаза (LCT) - это фермент из семейства ß-галактозидаз, лактаза гидролизует гликозидные связи и принимает участие в гидролизе дисахарида лактозы. У человека лактаза в основном экспресси-руется в энтероцитах кишечника и располагается на плазматических мембранах дифференцированных энтероцитах кишечника [9]. Лактазу кодирует ген лактазы человека LCT, который находится в локусе 2q21 генома человека, имеет размер ~55кб и состоит из 17 экзонов. В своем исследовании Obermayer-Pietsch et al. (2004) продемонстрировали, что полиморфизм гена LCT -13910С>Т (rs4988235) влияет на предрасположенность к переломам у женщин в постменопаузный период опосредованно через снижение захвата кальция, вследствие уменьшения толерантности к лактозе [10]. Статистический анализ показал что, частота аллеля *Т, ассоциированного с персистенцией лактазы, у женщин русской этнической принадлежности варьировала от 30.65% у больных до 35% в контрольной группе, тогда как у женщин с остеопоретическими переломами татарской этнической принадлежности частота аллеля *Т оказалась выше (31.82%) чем в контрольной группе (21.05%), различия не достигают статистической значимости. Частота гомозиготного генотипа *С*С, детерминирующего гиполактазию, составила 51.61% у женщин русской этнической принадлежности с переломами и 40% в контрольной группе. При этом у женщин татарской этнической принадлежности частота генотипа *С*С в контрольной группе (63%) была выше по сравнению с группой больных (45.5%), что предполагает существование других генетических вариантов, кроме полиморфизма LCT *C/T-13910, определяющих синтез лактазы у татар.
Кальцитонин - гормон щитовидной железы, регулирующий обмен кальция. Под воздействием кальцитонина происходит снижение уровня кальция в крови за счет снижения поступления кальция в кровь из костной ткани, а также за счет снижения реабсорбции кальция в почках и уменьшения всасывания кальция в кишечнике. Рецепторы к каль-цитонину находятся на клеточной мембране клеток костной ткани (остеокластов), почек, печени и др. тканей. Активизация кальцитониновых рецепторов
остеокластов приводит к ингибированию их активности и снижению скорости костной резорбции. Нарушение функции кальцитониновых рецепторов может приводить к увеличению костной резорбции и развитию ОП [11]. Ген рецептора кальцитонина СТЯ картирован в локусе 7q21.3 имеет размер 70 кб и состоит из 14 экзонов, 12 из которых белоккоди-рующие. Шкатига и др. описали полиморфизм 1377С>Т приводящий к замене пролина ( генотип *С*С ) на лейцин (генотип *Т*Т ) [12]. Было отмечено, что в популяции японцев преобладал в большей степени генотип *С*С, нежели генотип *Т*Т. В итальянской популяции напротив, преобладали аллельные варианты *Т*Т и *Т*С [13]. По литературным данным индивиды с генотипом *Т*Т имеют значительно более низкий уровень МПКТ, по сравнению с генотипом *С*С. ТаЬоиМ с соавт. изучали распределение частот аллелей и генотипов локуса 1377С>Т гена СТЯ в выборке из 215 постменопау-зальных европейских женщин, страдающих от переломов, обусловленных ОП, и группе контроля. Они обнаружили, что генотип *Т*С был связан с более высокой МПКТ шейки бедра по сравнению с *Т*Ти *С*С генотипами. Кроме того генотип *С*Т был связан с более низкой частотой переломов позвоночника [14]. Отсутствие остатка пролина может изменить вторичную структуру рецептора кальцитонина, что влечет за собой изменение биологической активности белка. С целью определения роли полиморфизма 1377С>Т в гене СТЯ в развитии переломов нами проанализировано распределение частот аллелей и генотипов данного локуса у больных женщин постменопаузальным остеопоро-зом русской и татарской этнической принадлежности, и в соответствующей контрольной группе. Частота аллеля *Т, у женщин русской этнической принадлежности варьировала от 70.4% у больных до 72.6% в контрольной группе, данные различия не достигают статистической значимости, тогда как у женщин с остеопоретическими переломами татарской этнической принадлежности частота алле-ля оказалась ниже (50%) по сравнению с контрольной группой (60%). Частота гомозиготного генотипа *С*С, составила 5% у женщин русской этнической принадлежности с переломами и 6% в контрольной группе. При этом у женщин татарской этнической принадлежности наблюдается увеличение частоты генотипа *С*С в группе больных с остеопоретическими переломами (18%) по сравнению с контрольной группой (6%), результаты статистически незначимые.
Са2—чувствительный рецептор (CaSR), относящийся к семейству рецепторов, сопряженных с G-белком, благодаря высокой чувствительности к небольшим изменениям в концентрациях циркулирующего кальция действует как сенсор (датчик), реагирующий на концентрацию катионов, и играет существенную роль в поддержании катионного гомеостаза. Он широко экспрессируется в различ-
ных тканях организма, обеспечивая постоянную концентрацию ионов кальция в плазме. Рецептор чувствительности к кальцию также регулирует важные клеточные функции, такие как защиту от апоптоза и клеточную пролиферацию. Главная функция CaSR считается модуляция синтеза и секреции паратиреоидного гормона (ПТГ) и контроль жизненного цикла клеток околощитовидных желез. Секреция ПТГ максимальна при низком уровне ионизированного кальция, повышение уровня кальция снижает секрецию ПТГ и замыкает первый круг отрицательной обратной связи. Повышение уровня ПТГ приводит к высвобождению кальция из костного депо, усилению реабсорбции кальция в почечных канальцах и стимулирует 1а-гидроксилазу почек, в результате чего увеличивается выработка кальцитриола. Последний увеличивает всасывание кальция и фосфатов в кишечнике, а также подавляет выработку ПТГ и деление клеток околощитовидных желез. Таким образом, замыкается второй круг обратной связи в регуляции уровня кальциемии. Ген, кодирующий Са2+— чувствительный рецептор, находится на 3 хромосоме в области q21.1 и состоит из 7 экзонов. Полиморфизм A986S располагается в 7-ом экзоне и приводит к замене аланина на серин в кодоне 986. Дефекты в этом гене связаны как с гиперкальциемией, так и с гипокальциемией [15]. Изучение полиморфизма A986S гена рецептора чувствительности к Са+ (CaSЯ) не выявило достоверных отличий, по распределению частот аллелей и генотипов, между женщинами с переломами и без переломов. В нашем исследовании обнаружена тенденция повышения частоты генотипа *Т*Т у женщин с низким уровнем МПКТ (0.034) по сравнению с контролем (0.005), различия не достигают статистических значений.
Паратиреоидный гормон (ПТГ) регулирует концентрацию кальция в сыворотке крови. Секреция ПТГ паращитовидными железами повышается в ответ на низкую концентрацию ионизированного кальция в крови. ПТГ оказывает сложное влияние на костное формирование — при быстром и выраженном повышении концентрации ПТГ отмечается стимуляция активности остеокластов и нарастание костной резорбции, в то время как постепенное введение ПТГ приводит к угнетению апоптоза остеобластов и остеоцитов и повышению костеобра-зования [7]. Многими исследователями было выявлено, что ген РТН является кандидатным геном остеопороза, и несколько полиморфных вариантов ^.13620172Т>С (ге9630182), g.13617608A>G (ге2036417), g.13618804C>T (ге7125774)) в данном гене ассоциированны с уровнем МПКТ и с повышенным риском переломов [16]. При изучении ло-куса ге2036417 гена РТН, было установлено, что в выборке с переломами аллель *С встречается с частотой 0.60, а в контрольной группе с частотой 0.59. Частота генотипа *С*Т составила 0.46 в группе с
остеопорозом, тогда как в группе контроля 0.47, различия не достигают статистической значимости. В зависимости от уровня МПКТ выборка женщин была разделена на 3 группы: группа контроля; группа женщин с остеопенией; группа женщин с остеопорозом. При сравнении группы с нормальными показателями МПКТ и группы с остеопенией нами выявлены статистически достоверные различия в распределении частот генотипа *Т*Т, полиморфного локуса g.13617608A>G (ге2036417) гена РТН частота которого в группе с нормальной МПКТ составила 0.22, а в группе с остеопенией 0,12(%2 = 5.530 р = 0.018). Генотип *Т*Т является маркером повышенного риска развития остеопении ^ = 2.07 (95%С1 1.11-3.83)). Изучение распределения частот генотипов и аллелей полиморфного локуса g.13618804C>T (ге7125774) гена РТН показало, что частота аллеля *С варьирует от 0.33 в группе с переломами до 0.37 в группе контроля, различия статистически не достоверны. Сравнительный анализ распределения частот генотипов в группах с переломами и без переломов, также не показал статистически значимых различий. Анализ ассоциаций изученного локуса с уровнем МПКТ выявил значимые различия между женщинами с нормальным уровнем МПКТ и остеопенией. Генотип *С*Т оказался протективным фактором развития остеопении (х2 = 6.898 р = 0.008; OR = 0.55 (95% С1 0.35-0.86)).
В результате исследования полиморфного ло-куса g.13620172T>C (ге9630182) гена РТН было установлено, что у больных частота аллеля *С и генотипа *С*Т ниже чем в группе контроля (0.56 и 0.57; 0.43 и 0.45, соответственно). Не выявлено ассоциации изученного локуса с уровнем МПКТ и переломами. Учитывая что изученные локусы находятся в неравновесии по сцеплению ф' = 93), мы провели гаплотипический анализ. Обнаружено 6 гаплотипов, наиболее частым, как у больных ОП, так и у здоровых женщин, оказались гаплотипы *СТС и *ТСТ по локусам ге2036417, ге9630182 и ге7125774, соответственно. Гаплотип *СТТ чаще встречался у женщин с остеопенией и остеопоро-зом (0.056) по сравнению с группой с нормальными значениями МПКТ (0.027), различия достигают статистической значимости (х2 = 4.157, р = 0.041), относительный риск (OR) составил 4.015, что свидетельствует о повышенном риске снижения МПКТ для носителей данного гаплотипа изученных локусов гена РТН. Гаплотипы *ТТТ и *ТСС локусов гена РТН чаще встречались в выборке с нормальным уровнем МПКТ и оказались маркерами пониженного риска формирования низкого МПКТ ^ = 0.867 и 0.334, соответственно).
Ключевая роль в формировании, дифференци-ровке и функционировании остеокластов принадлежит цитокинам семейства факторов некроза опухоли КАМК, RANKL и OPG как молекулярным посредникам других медиаторов обновления кост-
ной ткани. RANK, рецептор-активатор ядерного фактора кВ, экспрессируется на поверхности гемо-поэтических клеток-предшественников остеокластов — рецепторов для RANKL. RANKL, лиганд рецептора-активатора ядерного фактора кВ, экс-прессируется на остеобластах и стромальных клетках, а также Т-лимфоцитах и других клетках. Он связывается с RANK, находящимся на предшественниках остеокластов, стимулируя дифференци-ровку и активность, а также ингибируя апоптоз остеокластов. OPG — остеопротегерин, растворимый «ложный» рецептор RANKL, конкурентно тормозит связывание RANKL с RANK, чем блокирует образование остеокластов и таким образом способствует повышению массы костной ткани. Система RANKL/RANK/OPG, точнее, баланс между продукцией RANK и OPG занимает центральное место в регуляции резорбтивной активности остеокластов как первого необходимого звена в обмене костной ткани [17, 18]. Ген TNFRSF11B (OPG), который картирован на длинном плече 8 хромосомы в области q23—24, содержит 5 экзонов протяженностью 29 Кб, является мощным ингибитором активации и дифференциации остеокластов. По данным полногеномного анализа ассоциаций было выявлено, что ген TNFRSF11B является кан-дидатным геном остеопороза, и несколько полиморфных вариантов в данном гене ассоциированны с уровнем МПКТ и с повышенным риском переломов. Нами были изучены 6 полиморфных вариантов в гене ОПГ, которые по литературным данным наиболее значимо ассоциированы с уровнем МПКТ и с повышенным риском переломов.
В результате проведенного сравнительного анализа распределения частот аллелей и генотипов полиморфных вариантов c.6890-8A>C (rs7844539), c.1217-15C>T (rs3102734) c.950T>C (rs2073617), 163A>G (rs3102735), 1181 G>C (rs2073618), 245T>G (rs3134069) в гене остеопро-тегерина (OPG, TNFRSF11B), были получены статистически достоверные результаты. Выявлена ассоциация аллеля *Т полиморфного варианта c.1217-15C>T (rs3102734) с переломами у женщин как татарской (х2=11.92, р = 0.0005, OR = 3.94 (1.73—8.99)), так и русской этнической принадлежности (х2 = 21.56, р = 0.000003, OR = 2.58 (1.71—3.94)) и снижением уровня МПКТ у женщин татарской этнической принадлежности ((х2 = 4.16, р = 0.041, OR = 4.33 (0.94-19.83)). По данным литературы локус c.1217-15C>T гена OPG был ассоциирован с развитием переломов у китайских женщин постменопаузального возраста. Установлена ассоциация аллеля *T (х2 = 8.19, р = 0.0042, OR = 3.16 (1.38-7.23)) и генотипа *T*T (х2 = 10.58, р = 0.001, OR = 4.08 (1.66-10.06)) полиморфного локуса 245T>G (rs3134069) с риском развития переломов у женщин татарской этнической принадлежности. По итогам изучения локусов с.6890-8A>C (rs7844539), c.950T>C (rs2073617), 163A>G
(rs3102735), 1181G > C(rs2073618) статистически значимых ассоциаций с переломами и с уровнем МПКТ выявлено не было.
Таким образом, в результате проведенного нами исследования позволило установить значимость полиморфных вариантов генов PTH и OPG в формировании уровня МПКТ и развития остеопо-ретических переломов у женщин постменопаузаль-ного возраста русской и татарской этнической принадлежности. Полученные нами результаты вносят вклад в общее представление о молекулярно-генетических основах развития постменопаузаль-ного ОП.
ЛИТЕРАТУРА
1. Яблучанский Н. И., Лысенко Н. В. Остеопороз. В помощь практическому врачу. Харьков: Medicus amicus, 2011. С. 6-16.
2. Burge R. et al. Incidence and economic burden of osteoporosis-related fractures in the United States, 2005-2025 // J. Bone Miner. 2007. P. 465-475.
3. J. Brent Richards. et al. Genetics of osteoporosis from genome-wide association studies: advances and challenges // Macmillan Publishers Limited. 2012. P. 576-588.
4. Хусаинова Р. И., Селезнева Л. И., Хуснутдинова Э. К., Исследование ряда полиморфных ДНК-локусов генов кандидатов остеопороза в трех этнических группах Республики Башкортостан // Медицинская генетика. 2008. №6. С. 36-42.
5. Mathew C. C. The isolation of high molecular weight eucariot-ic DNA // Methods in molecular biology / Ed. Walker J. M. N.Y.: Human press, 1984. P. 3-34.
6. Lee H.-J., Kim S.-Y., Kim G. S., Hwang J.-Y., Kim Y.-J., Jeong B., Kim T.-H., Park E. K., Lee S. H., Kim H.-L., Koh J.-M., Lee J.-Y. Fracture, bone mineral density, and the effects of calcitonin receptor gene in postmenopausal Koreans // Os-teoporos Int 2010. P. 1351-1360.
7. Geoffrey N. Hendy, Lucie Canaff, David E. C. Cole. The CASR gene: Alternative splicing and transcriptional control, and calcium-sensing receptor (CaSR) protein: Structure and ligand binding sites // V. 27, Issue 3. 2013. P. 285-301.
8. Celczynska-Bajew L., Horst-Sikorska W., Bychowiec B., Wykr^towicz A., Wesoly J., Michalak M. The effects of osteo-protegerin (OPG) gene polymorphism in patients with ischaemic
heart disease on the morphology of coronary arteries and bone mineral density// Kardiologia Polska 2011. P. 573-578.
9. Marozik P., Mosse I., Alekna V., Rudenko E., Tamulaitiene M., Ramanau H., Strazdiene V., Samokhovec V., Ameliyanovich M., Byshnev N., Gonchar A., Kundas L., Zhur K. Association Between polymorphisms of VDR, COL1A1 and LCT genes and Bone Mineral Density in Belarusian women with severe postme-nopausal osteoporosis // Medicina (Kaunas). 2013. P. 177-183.
10. Obermayer-Pietsch B., Bonelli C. M., Walter D. E., Kuhn R. J., Fahrleitner-Pammer A., Berghold A., Goessler W., Stepan V., Dobnig H., Leb G., Renner W. Genetic predisposition for adult lactose intolerance and relation to diet, bone density, and bone fractures. J Bone Miner Res. 2004;19(1):42-7.
11. Masi L., Brandi M. L. Calcitonin and calcitonin receptors // Clinical Cases in Mineral and Bone Metabolism 2007. P. 117-122.
12. Nakamura M., Zhang Z., Shan L., Hisa T., Sasaki M., Tsukino R., Yokoi T., Kaname A., Kakudo K. Allelic variants of human calcitonin receptor in the Japanese population // Hum Genet. 1997. P. 2924-2927.
13. Masi L., Becherini L., Gennari L., Colli E., Mansani R., Falchetti A., Cepollaro C., Gonnelli S., Tanini A., Brandi M. L. Allelic variants of human calcitonin receptor: distribution and association with bone mass in postmenopausal Italian women// Biochemical Biophysical Research Communications. 1998. P. 622-626.
14. Taboulet J., Frenkian M., Frendo J. L, Feingold N., Julliene A., Vernjoul M. C. Calcitonin receptor polymorphism is associated with a decreased fracture risk in post-menopausal women // Hum Mol Genet. 1998. P. 2129-2133.
15. Emma L. D., Matthew A. B. Genetic studies in osteoporosis -the end of the beginning // Arthritis Research & Therapy. V. 10. No5. 2008. P. 1-8.
16. Kronenberg H. M. Parathyroid hormone: mechanism of action. In: Favus MJ, ed. Primer on the metabolic bone diseases and disorders of mineral metabolism // 3rd ed. Philadelphia, PA, Lippincott-Raven 1996. P. 68-70.
17. Xiong D.-H., Shen H., Zhao L.-J., Xiao P., Yang T.-L., Guo Y., Wang W., Guo Y.-F., Liu Y.-J., Recker R. R., Deng H.-W. Robust and Comprehensive Analysis of 20 Osteoporosis Candidate Genes by Very High-Density Single-Nucleotide Polymorphism Screen Among 405 White Nuclear Families Identified Significant Association and Gene-Gene Interaction // J Bone Miner Res. 2006. P. 1678-1695.
18. Takacs I., Lazary A., Kosa J. P., Kiss J., Balla B., Nagy Z., Bacsi K., Speer G., Lakatos P. Allelic variations of RANKL/OPG signaling system are related to bone mineral density and in vivo gene expression // European Journal of Endocrinology. 2010. P. 423-431.
Поступила в редакцию 27.09.2013 г.
