БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
Митохондриальная ДНК пчелы медоносной (A. Melífera L.) как удобный генетический маркер для идентификации пород Курак Е. М.1, Волошин А. Н.2
'Курак Екатерина Михайловна / Kurak Ekaterina Mihailovna - старший преподаватель, кафедра зоологии, физиологии и генетики;
2Волошин Александр Николаевич / Voloshin Alexander Nikolaevich - студент, биологический факультет, Гомельский государственный университет им. Франциска Скорины, г. Гомель, Республика Беларусь
Аннотация: с целью выявления удобных генетических маркеров дана характеристика митохондриального генома медоносной пчелы (Apies melífera L.). Анализ последовательности митохондриальной ДНК пчел показал, что в ее составе между генами цитохромоксидазы I и цитохромоксидазы IIприсутствует АТ-богатыйучасток, представленный P и Q повторами, обладающий высоким полиморфизмом. Этот участок у особей среднерусской породы A. mellifera имеет размер около 600 п. н., а у представителей южных пород (карпатской и кавказской) - 350 п. н. Ключевые слова: митохондриальный геном, медоносная пчела.
Для сохранения генофонда пород пчелы медоносной важное значение имеет тестирование и отбор исходного материала. Традиционно для определения принадлежности пчел к конкретной породе применяют экстерьерные признаки отдельных особей. При этом анализируемые признаки зачастую подвержены влиянию условий внешней среды. Поэтому более перспективным представляется использование с этой целью молекулярно-генетических методов на основе анализа полиморфных последовательностей нуклеотидов в молекуле ДНК. Изучение митохондриального генома — основной инструмент при проведении идентификации. Возможность идентификации связана с материнским типом наследования и существующими в митохондриальном геноме животных групповыми и даже индивидуальными различиями. Скорость мутаций в мтДНК примерно в 10-20 раз больше, чем в ядерной ДНК [1]. Это связано с отсутствием эффективных систем репарации и активными окислительно-восстановительными процессами, проходящими в митохондриях. При этом накапливаются преимущественно селективно-нейтральные изменения, вносящие свой вклад в полиморфизм мтДНК [2]. Целью нашей работы являлась характеристика митохондриального генома медоносной пчелы с целью выявления удобных генетических маркеров.
В настоящее время митохондриальный геном A. mellifera полностью просеквенирован. Он представлен кольцевой молекулой размером 16,3 кб и состоит из 13 протеин-кодирующих генов, 22 генов тРНК, 2 генов рРНК и одного некодирующего региона [3]. Некодирующие регионы очень редки в мтДНК животных. Анализ последовательности нуклеотидов показал, что мтДНК пчел насыщена AT парами. Большое количество АТ-пар было выявлено в спейсерном участке мтДНК, локализованном между генами COI и СОИ. Известно, что участок, расположенный между ними, образован последовательностью гена тРНКЬеи и сложными повторами [4]. Повторы представлены Р и Q элементов. Элемент Р этих повторов длиной 54 п. н. состоит только из АТ-пар, а содержание этих нуклеотидов в элементе Q составляет 93%. [5]. Изучение структуры межгенного участка COI-COII показало его специфичность и возможность использования в качестве маркера для различения среднерусской породы и пород южного происхождения (кавказской и карпатской) благодаря вариабельности длины, обусловленной различным
соотношением Р и Q элементов. У представителей среднерусской породы межгенный участок имеет комбинацию PQQ и содержит около 600 п. н, тогда как у представителей южных пород имеется единственный элемент Q, и локус COI-COII содержит 350 п. н., что легко разделяется при электрофорезе. Таким образом, этот маркер может быть использован для различения особей среднерусской породы от карпатской и кавказской пород.
Литература
1. Brown W. M., Prager E. M., Wang A., Wilson A. C. Mitochondrial DNA sequences of primates: tempo and mode of evolution // J. Mol. Evol, 1982. V. 18. P. 225-239.
2. Минченко А. Г., Дударева Н. А. Митохондриальный геном / Новосибирск. Наука, 1990, 194 с.
3. Cornuet J.-M. L., Garnery L. Mitochondrial DNA variability in honeybees and its phylogeographic implications // Apidologie, 1991. V. 22. P. 627-642.
4. Crozier R. H., Crozier Y. C. The cytochrome b and ATPase genes of honeybee mitochondrial DNA // Mol. Biol. Evol, 1992. V. 9. P. 474-482.
5. Николенко А. Г., Поскряков А. В. Полиморфизм локуса COI-COII митохондриальной ДНК Apis mellifera L. на Южном Урале // Генетика, 2002. № 4. С. 458-462.