CC BY
1
УДК 678
Касаткин Е.В.
бакалавр 3 курса РТУ МИРЭА, г. Москва, РФ Филатова Е.С. магистрант 1 курса РТУ МИРЭА, г. Москва, РФ
МИКРОСФЕРЫ ИЗ ПОЛИЛАКТИДА. ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ И ХАРАКТЕРИСТИКИ
Аннотация
В данной работе будут рассмотрены различные методы получения микросфер из полилактида (ПЛА), а также некоторые характеристики исходного полимера.
Актуальность данной темы обусловлена растущим спросом на микросферы из полилактида, благодаря их многофункциональности.
Методы, представленные в данной обзорной статье, представляют из себя модификации основного метода получения микросфер из полилактида - метода выпаривания растворителя. Существуют также другие технологии синтеза ПЛА микросфер: метод экстракции растворителем и распылительная сушка, которые будут рассмотрены в этой статье, однако их применение в сфере синтеза ПЛА микросфер достаточно ограничено.
В основе рассмотрения каждой технологии синтеза будут указаны реактивы, материалы, методика проведения синтеза, а также характеристики целевого продукта.
Ключевые слова
микросферы из полилактида, технологии получения микросфер из полилактида.
Введение
Микросферы - это сферические частицы диаметром от 10 нм до 1000 мкм. Их изготавливают из различных материалов, например, керамики, стекла или полимеров [1].
Отрасль производства полимерных микросфер (ПМС) можно отнести к быстро развивающимся [2]. Данный факт обусловлен тем, что ПМС находят широкое применение в самых разнообразных областях благодаря их широкому функционалу и различным свойствам. Свойства полимерных микросфер зависят от ряда факторов, в первую очередь, от выбранного для получения конкретной микросферы полимера, его молекулярной массы, а также от условий синтеза. Так, например, в зависимости от выше перечисленных критериев, ПМС используют в биоинженерии и медицине (в разработке систем доставки лекарств), в косметологии (в средствах по уходу за кожей и волосами), в электротехнике (изготовление диэлектрических материалов), пищевой промышленности (в качестве сенсоров на различные пищевые добавки) и иных отраслях [3].
Полилактид нашёл своё применение в качестве важного биомедицинского материала благодаря своим механическим свойствам, отсутствию токсического действия на организм и способности к биологическому разложению [4]. Из полилактида могут быть получены костные винты [5], которые применяют при переломах, материалы для наложения хирургических швов, средства доставки лекарственных препаратов, к числу которых можно отнести микросферы [6].
Полилактид
Полилактид (полимолочная кислота) - термопластичный, алифатический, биоразлагаемый полиэфир, который принадлежит к группе сложных полиэфиров [7].
Рисунок 1 - Структурная формула полилактида
Структура и физико-химические свойства полилактида
Мономером полилактида выступает молочная кислота (2-гидроксипропановая кислота) [7]. Структурная формула данной молекулы представлена ниже (рис. 2):
Рисунок 2 - Структурная формула молочной кислоты
Отличительная особенность данного мономера - наличие в его молекуле хирального атома углерода, позволяющего мономеру существовать в виде двух оптически активных энантиомеров (Ь- и Э-энантиомеров), отличие которых состоит в их воздействии на плоскополяризованный свет [8].
Рисунок 3 - Строение энантиомеров молочной кислоты
Физико-химические свойства полилактида в значительной степени зависят от его стереорегулярности. Полилактид, полученный из чистого Э- или 1_- стереоизомера, имеет кристаллическую структуру. Полилактид, полученный из рацемической смеси Э- и 1_- молочной кислоты, имеет аморфную структуру и обладает высокой эластичностью [9].
Вследствие наличия определённых примесей и дефектов, температура плавления чистого полилактида обычно лежит в интервале от 170 до 180 °С. В стандартных условиях чистый полилактид -кристаллический полимер, обладающий малой упругостью и достаточной прочностью [10], что делает его применимым в области разработки ортопедических протезов [11].
ПЛА обладает хорошей растворимостью в органических растворителях таких как дихлорметан, трихлорметан, ацетон и др. [12]
Одна из важнейших особенностей ПЛА - его способность к биологическому разложению в организме человека. Разложение происходит в результате ферментативного гидролиза ПЛА с образованием молочной кислоты, а также некоторых олигомеров. В дальнейшем происходит окисление продуктов гидролиза до углекислого газа и их удаление из организма. [13].
Технологии получения ПЛА микросфер Существует несколько основных технологий получения микросфер: выпаривание растворителя, экстракция растворителя, распылительная сушка [14].
Метод выпаривания растворителя
Выпаривание растворителя - наиболее распространённый метод получения ПЛА микросфер. В данном методе полимер растворяют в органическом летучем растворителе (например, дихлорметане или метиленхлориде). Лекарственный препарат (при необходимости его внедрения) растворяют или суспендируют в растворе полимера с летучим органическим растворителем. Далее полученную систему эмульгируют при помощи перемешивания. Органический растворитель диффундирует в водную фазу, где происходит его испарение на границе раздела вода/воздух. Испарение растворителя происходит либо при пониженном, либо при атмосферном давлении. Микрокапли эмульсии затвердевают, а затем после полного испарения органического растворителя получают твёрдые микросферы, которые фильтруют и высушивают. Преимущество этого метода состоит в том, что можно регулировать размер синтезируемых частиц, изменяя скорость перемешивания [14].
Рисунок 4 - Принципиальная схема метода выпаривания растворителя
Получение ПЛА микросфер с применением ультразвукового гомогенизатора
В стандартном методе выпаривания растворителя для гомогенизации эмульсии применяют магнитные мешалки. Некоторые исследования показали, что применение ультразвукового гомогенизатора в сочетании с использованием магнитных мешалок значительно сокращает время синтеза полимерных микросфер [15].
Реактивы и материалы: ПЛА (Мш = 150000), поливиниловый спирт (ПВС, Мш = 160000), дихлорметан (ДХМ), дистиллированная вода [15].
Методика проведения синтеза. ПВС растворяют в 10 мл ДХМ и ведут перемешивание в течение одного часа. ПВС растворяют в 20 мл дистиллированной воды и перемешивают в течение двух часов с применением магнитной мешалки при температуре 90 °С. Затем аликвоту раствора ПЛА объёмом 1 мл добавляют к аликвоте раствора ПВС объёмом 2 мл, причём раствор ПВС непрерывно перемешивают. Происходит образование эмульсии, процесс перемешивания проводят ещё в течение 10 минут. Далее по окончании перемешивания полученную эмульсию переносят в ультразвуковой гомогенизатор. Затем эмульсию перемешивают с помощью магнитной мешалки при комнатной температуре в течение трёх часов для испарения остатков ДХМ. Микросферы выделяют центрифугированием и декантацией, трижды промывают дистиллированной водой для удаления остатков ПВС. Схематично процесс синтеза изображён ниже (рис. 5) [15].
Рисунок 5 - Схематическое изображение процесса синтеза ПЛА микросфер с использованием ультразвукового гомогенизатора
Характеристики полученных ПЛА микросфер. Для проведения анализа данного метода синтеза были приготовлены четыре различные пробы, отличающиеся друг от друга соотношением концентраций между ПЛА и ПВС. Концентрации соответствующих веществ указаны в таблице (см. табл. 1).
Таблица 1
Концентрации ПЛА и ПВС
№ образца Концентрация ПЛА, (w/v %) Концентрация ПВС, (w/v %)
1 1,0 1,0
2 2,5 2,5
3 1,5 0,5
4 1,5 1,0
Размеры микросфер были исследованы с помощью сканирующего электронного микроскопа. Результаты исследования представлены ниже (рис. 6).
ПЛА микросферы, полученные при приготовлении первого образца, относительно гладкие и сферические, но довольно крупные (рис. 6 (а)) Средний диаметр составил 3 мкм. Микросферы в образце 2, также имеют гладкую внешнюю поверхность и почти сферическую форму (рис. 6 (Ь)) со средним диаметром 1,3 мкм. Анализ образца 3 (рис. 6 (с)) показал, что микросферы, изготовленные с концентрацией ПВС/ПВС (1,5 w/v%): (0,5 w/v%), имеют более грубую морфологию поверхности с пористыми поверхностями, чем микросферы в образцах 1 и 2, а также незначительные отклонения от сферической формы. Можно предположить, что свойства поверхности и размера микросфер в образце 3 обусловлены различной концентрацией ПЛА и ПВС, использованных в процессе синтеза.
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0
Размер, мкм
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0
Размер, мкм
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0
Размер, мкм
Рисунок 6 - Результаты сканирующей электронной микроскопии и гистограммы распределения микросфер ПЛА в зависимости от соотношения концентраций ПЛА/ПВС (w/v % : w/v %): (а - b) 1,0:1,0; (c - d) 2,5:2,5; (e - f) 1,5:0,5; (g - h) 1,5:1,0, где w/v - weight per volume
Однако важно отметить, что при большой разнице между концентрациями ПЛА и ПВС, распределение микросфер по размерам в этом образце наиболее узкое, в отличие от всех остальных образцов. Микросферы в образце 4 (рис. 6 (g)), где концентрации ПЛА и ПВС различны, немного крупнее, чем в образце 3, и имеют средний диаметр около 750 нм (рис. 6 (h)). Микросферы из четвёртого образца имеют более пористую поверхность, чем микросферы из образцов 1 и 2, однако общее количество пор в них меньше, чем в микросферах образца 3. Таким образом, для образцов 3 и 4 наблюдали одинаковую тенденцию в поверхностных свойствах, вызванную различными концентрациями исходных реагентов.
Однако морфологические отклонения в образце 4 менее выражены, что связано, вероятнее всего, в меньшей разнице между начальными концентрациями ПЛА и ПВС [15].
Эмульсионно-ультразвуковой метод распыления для получения ПЛА микросфер
Традиционное механическое перемешивание занимает достаточно много времени и при его использовании распределение микросфер по размерам трудно контролировать [17]. Метод ультразвукового распыления - это технология синтеза микросфер с малым диаметром капель эмульсии, которая позволяет повысить способность к тепло- и массообмену и ускорить процесс испарения растворителя [18].
Реактивы и материалы: ПЛА, ПВС, ДХМ, деионизированная вода [18].
Методика проведения синтеза. Смешивают водный раствор ПВС и раствор ПЛА в дихлорметане. Далее полученную систему перемешивают в течение 5 мин при 1000 об/мин. Затем смесь подвергают ультразвуковому распылению в течение 1 ч для удаления дихлорметана. Полученный осадок промывают четыре раза деионизированной водой и сушат в течение 24 ч для получения микросфер [16]. Процесс синтеза схематично представлен на рисунке
1,5 ч
5 мин
Эмульсия м/в Циркулирующая распылительный агент
Рисунок 7 - Схема процесса получения ПЛА микросфер методом ультразвукового распыления
Характеристики полученных ПЛА микросфер. Для проведения анализа данного метода был проведён параллельный синтез ПЛА микросфер с использованием реактивов и материалов, указанных в пункте 2.1.3.2, но с применением метода стандартного механического перемешивания с помощью магнитной мешалки. Определение размеров частиц в разные промежутки времени от начала синтеза проводили с помощью сканирующей электронной микроскопии. Полученные результаты представлены на рисунке 1 (ПРИЛОЖЕНИЕ А).
ПРИЛОЖЕНИЕ А
Рисунок 1 - Изображения микросфер полимолочной кислоты, полученных методом эмульсии с механическим перемешиванием (а-с: 1,0, 3,0, и 5,0 ч соответственно) и ультразвуковым распылением 0,5, 1,0 и 1,5 ч соответственно). На графиках, указанных на рисунках с и ^ по оси абсцисс указан радиус частиц, по оси ординат - количество микросфер
Методы проведения синтеза оказывали заметное влияние на скорость формирования микросфер и их морфологию. Микросферы ПЛА, которые получали при механическом перемешивании по истечении 0,5 ч, содержали много волокнистых веществ на поверхности. При применении ультразвукового распыления в течение 0,5 ч микросферы начинали затвердевать, а на их поверхности оставалось незначительно количество волокнистых образований небольшого размера. Через 1 ч образцы, приготовленные при механическом перемешивании, все еще содержали непрореагировавшие волокнистые вещества. Ультразвуковое распыление ускорило затвердевание микросфер, наблюдали частичную адгезию вблизи микросфер, но волокнистое вещество отсутствовало. При механическом перемешивании в течение 3 ч реакция не была завершена - на микросферах всё ещё наблюдали остаток волокнистого вещества. По истечении пяти часов микросферы, которые получали механическим перемешиванием, полностью затвердели, достигнув размера 23,01 ± 12,13 мкм. При ультразвуковом распылении через 1,5 ч микросферы приобрели правильную сферическую форму и средний диаметр 40,96 ± 9,7 мкм [16].
Таким образом, микросферы, которые были приготовлены методом ультразвукового распыления, имели более короткое время синтеза и более узкое распределение по размерам, чем микросферы, приготовленные методом механического перемешивания [16].
Получение ПЛА микросфер методом экстракции растворителем
Метод экстракции растворителем - модификация метода выпаривания растворителя, однако данную технологию получения ПЛА микросфер применяют достаточно редко. Процесс включает стадию эмульгирования, аналогичную выпариванию растворителя. После завершения стадии эмульгирования эмульсию переливают в фазу разбавителя, который не солюбилизирует полимер, но способен к смешиванию с непрерывной и дисперсной фазами эмульсии. В результате растворитель мигрирует из микрокапель полимера в фазу разбавителя. Систему непрерывно перемешивают до полного извлечения растворителя из микрочастиц. Преимущество этого метода состоит в том, что экстракцию можно проводить при низких температурах, не нагревая систему до температуры кипения растворителя [14].
Полнлакггид -
органический растворитель
гекарствен1-ь й препарат
Пере мешивание с образованием эмульсии
Цо5а влен не эмульсии
з разбавитель
Пере мешивание и
экстракция растворителя
Высушивание полученных микросфер
Рисунок 8 - Принципиальная схема метода выпаривания растворителя
Реактивы и материалы: ПЛА (Мш = 109000); витамин Ээ; метанол; этанол; ДХМ; трихлорметан
(ТХМ); изопропанол; глицерин с добавлением 0,02 % раствора ТВИН-20; мембранные фильтры с размером пор от 1,2 до 0,2 мкм; дистиллированная вода, инертный газ [17].
Методика проведения синтеза. Готовят 5 % раствор ПЛА и витамин Э3 в смеси с дихлорметаном и трихлорметаном (ДХМ и ТХМ берут в соотношении 1 к 1 по массе) при комнатной температуре. Полученную смесь по каплям добавляют в раствор глицерина в соотношении 1 к 20 и эмульгируют путём перемешивания со скоростью 13500 об/мин. Полученную эмульсию заливают в 15 % раствор изопропанола в воде (раствор изопропанола выступает разбавителем) в соотношении 1:1 между эмульсией и разбавителем. Далее ведут перемешивание путём барботажа азота через реакционную систему в течение двух часов при температуре 35 °С для обеспечения удаления растворителя из капель полимера. Полученные микросферы отфильтровывают с использованием мембранного фильтра. Затем микросферы промывают 15 % раствором изопропанола в воде и сушат под вакуумом [17].
Характеристики полученных ПЛА микросфер. Анализ морфологических особенностей ПЛА микросфер проводили с помощью сканирующего электронного микроскопа. Фотография микросфер представлена на рисунке 9.
Рисунок 9 - Фотография микросферы, полученной методом экстракции растворителем
На изображении видно, что полученные микросферы имеют правильную сферическую форму с некоторыми незначительными искажениями поверхности.
Получение ПЛА микросфер методом распылительной сушки
Преимущество этого метода состоит в том, что можно эффективно инкапсулировать как водорастворимые, так и гидрофобные соединения. При таком подходе лекарство, находясь в водном растворе или в виде твердых частиц диспергирует в растворе полимера. Далее смесь подают через распылитель распылительной сушилки в сушильную камеру, где нагретый газ-носитель высушивает частицы, перенося их в струйный сепаратор для сбора. Испарение растворителя происходит мгновенно, оставляя твёрдые микросферы. К переменным процесса можно отнести концентрацию полимера, концентрацию лекарственного средства, объем, характеристики распылителя, скорость прокачки жидкости, температура газа на входе и выходе и скорость потока газа [14].
Рисунок 10 - Принципиальная схема метода распылительной сушки [14]
Реактивы и материалы: ПЛА (Мш = 109000); витамин Ээ; метанол; этанол; ДХМ; ТХМ; глицерин с добавлением 0,02 % раствора ТВИН-20; мембранные фильтры с размером пор от 1,2 до 0,2 мкм; дистиллированная вода, инертный газ [17].
Методика проведения синтеза. Готовят 0,75% раствор ПЛА и витамин Ээ в смеси с дихлорметаном и трихлорметаном (данные растворы взяты в соотношении 1:1 по массе) при комнатной температуре. Полученную систему распыляют через сопло распылительного устройства с начальной температурой 51 °С под давлением 5 бар. Твёрдые ПЛА микросферы, выпавшие в осадок в приёмнике (температура приёмника 34 °С) собирают и хранят под вакуумом [17].
Характеристика полученных ПЛА микросфер.
Рисунок 11 - Фотография ПЛА микросфер, полученных методом распылительной сушки
Микросферы, полученные методом распылительной сушки, имеют явно выраженную сферическую форму без пор.
Сравнительная характеристика основных методов получения ПЛА микросфер
Для сравнения представленных технологий синтеза ПЛА микросфер использовали две наиболее важные характеристики: выход целевого продукта, а также эффективность инкапсуляции микросфер лекарственным препаратом. Эффективность инкапсуляции - доля лекарственного средства, которое успешно проникло внутрь микросферы.
Были приготовлены 16 различных проб ПЛА микросфер с разным содержанием витамина Ээ в исходной смеси (5, 10, 20, 30 % от массы взятого раствора ПЛА) [17].
Таблица 2
Выход и эффективность инкапсуляции образцов ПЛА микросфер, полученных методами выпаривания растворителя, экстракции растворителем и распылительной сушки
Метод получения Номер образца Выход целевого продукта, % Эффективность инкапсуляции витамином Р3, %
Выпаривание растворителя 1 92,2 20,2
2 94,8 10,6
3 96,5 5,5
4 88,0 14,2
Экстракция растворителем 1 53,7 20,2
2 69,3 12,9
3 69,3 6,9
4 82,1 11,4
Распылительная сушка 1 38,9 58,3
2 40,3 26,7
3 45,7 14,3
4 34,2 22,0
По представленной таблице можно сделать вывод, что наиболее высокий выход имеют образцы, полученные методом выпаривания растворителя. Наименьший выход имеют образцы, полученные с использованием технологии распылительной сушки, что можно объяснить высокими потерями целевого продукта при распылении на стенках аппарата. Наибольшая эффективность инкапсуляции была достигнута в ПЛА микросферах, синтезированных методом распылительной сушки.
Заключение
Выпаривание растворителя - основной и наиболее широко распространённый метод получения микросфер из полилактида. Его повсеместное использование обусловлено, в первую очередь, тем, что данная технология синтеза позволяет достигать высокого выхода целевого продукта, имеет достаточно узкий список требуемых реактивов, материалов и оборудования, позволяет регулировать свойства целевого продукта, изменяя входные параметры процесса (соотношение концентраций исходного реагента и эмульгатора, выбор способа перемешивания и скорости перемешивания), а также может быть модифицирована добавлением новых соединений и внедрением новых приборов.
Метод экстракции растворителем не распространён так же широко, как метод выпаривания растворителя. К положительным сторонам данной технологии синтеза можно отнести столь же неширокий список реагентов и приборов, необходимых для проведения синтеза, а также отсутствие необходимости в нагревании полимерной эмульсии до температуры кипения растворителя, однако немногочисленные исследования показывают, что выход продукта при использовании данной технологии невысок. Данную технологию применяют для получения микросфер на основе других полимеров, например, е-капролактона [18].
Распылительная сушка - самый непредпочтительный метод получения ПЛА микросфер. Такая тенденция связана с тем, что при использовании данной технологии потери целевого продукта очень высоки, а также, что не менее важно, для проведения синтеза необходимо большее количество приборов, таких как сепаратор, сушильная камера, а также организация процесса беспрерывной подачи сушильного агента. Безусловно, данный метод имеет важнейшую положительную черту, отличающую его от других методов - почти мгновенное испарение растворителя, то есть процесс синтеза при использовании данного метода происходит очень быстро. Несмотря на существенные недостатки этой технологии, её всё же продолжают модифицировать [19], однако объём данных в этой сфере очень ограничен.
Таким образом, в данной обзорной статье были рассмотрены некоторые модификации метода выпаривания растворителя, рассмотрены свойства ПЛА микросфер в зависимости от метода синтеза, а также проведен сравнительный анализ трёх основных методов получения ПЛА микросфер.
Список использованной литературы:
1 Cai H. Application of biodegradable microsphere injections: an anticancer perspective / H. Cai, A. Li, F. Qi, R. Liu, X. Tang, D. Li, Y. Gu, J. Liu // Materials Advances. - 2024. - V. 5. - P. 3094-3112.
2 Polymer Microspheres Market Size and Forecast [Electronic resource] / Strategic Market Reseacrh. - URL: https://www.strategicmarketresearch.com/market-report/microspheres-market (date of application 20.05.2024).
3 Zhu H. Hollow carbon microsphere embedded with Fe nanoparticles for broadband microwave absorption / H. Zhu, J. Li, X. Wang, B. Cao, T. Liu // J. of Alloys and Compounds. - 2024. - V. 995. - P. 387-395.
4 Van der Elst M Bone tissue response to biodegradable polymers used for intra medullary fracture fixation: a long-term in vivo study in sheep femora / Van der Elst M, Patka P, Haarman H. Bone // Biomaterials. - 1999 -Vol. 20. - P. 121-128.
5 Bergma J. Late degradation tissue response to poly(L-lactide) bone plates and screws / Bergma J., de Bruijin W., Rozema FR, Bos RRM, Boering G. // Biomaterials. - 1995. - Vol. 16. - P. 25-31.
6 Park SJ. Preparation and characterization of biodegradable poly(L-lactide)/poly(ethylene glycol) microcapsules containing erythromycin by emulsion solvent evaporation technique. / Park SJ, Kim SH. // J. Colloid and Interface Sci. 2004; Vol. 271(2). - P. 336-341.
7 Li Y. Preparation of natural pyrethrum-polylactic acid microspheres with different particle sizes and surface morphology / Y. Li, D. Cao, F.-an Jia, F. Chang, R. Lva, J.-k. Dai // Materials Letters. - 2020. - V. 264. - P.163-170.
8 Liu Y. Synthesis and characterization of a brush-like copolymer of polylactide grafted onto chitosan / Y. Liu, F. Tian, K.A. Hu // Carbohydr. Res. - 2004. - V. 339. - № 4. - P. 845-851.
9 Mazur K. Synergistic effect of aramid and basalt fibers on mechanical, thermal and dynamic properties of polylactide hybrid composites / K. Mazur, Z.S. Siwy, A. Adamczyk, S. Kuciel // Industrial Crops and Products. -2023. - Vol. 198. - P. 145-160.
10 Ahmed J. Morphological, barrier, thermal, and rheological properties of high-pressure treated co-extruded polylactide films and the suitability for food packaging / J. Ahmed, M.Z. Mulla, S.A. Al-Zuwayed, A. Joseph, R. Auras // Food Packaging and Shelf Life. - Vol. 32. - P. 200-245.
11 Kost B. The influence of the functional end groups on the properties of polylactide-based materials / B. Kost, M. Basko, M. Bednarek, M. Socka, B. Kopka, G. Lapienis, T. Biela, P. Kubisa, M. Brzezinski // Progress in Polymer Science. - 2022. - Vol. 130. - P. 36-70.
12 Ляхов Н.З. Механохимический синтез органических соединений и композитов с их участием / Н.З. Ляхов, Т.Ф. Григорьева, А.П. Баринова, И.А. Ворсина // Успехи Химии. - 2010. - T. 79. - № 3. - C. 218-233.
13 Vert M. Biodegradation of PLA/GA polymers: increasing complexity / M. Vert, J. Mauduit, S. Li // Biomaterials. - 1994. - V. 15. - № 15. - P. 1209-1213.
14 Ikwueme S. N. Characterisation of polylactide microspheres: dis. ... Dr. of Phylosophy 04.10.2003 / Stella Ngozichukwu Ikwueme. - London. - 2003. - P. 292.
15 Singh B. Control of shape and size of poly (lactic acid) microspheres based on surfactant and polymer concentration / B. Singh, P. Singh, A. J. Sutherland, K. Pal // Materials Letters. - 2017. - V. 195. - P. 48-51.
16 Yuan X. Emulsion-ultrasonic spray method to prepare polylactic acid microspheres / X. Yuan, Si Lin, K. Zhao, Y. Han // Materials Letters. - 2022. - V. 309. - P. 345-350.
17 Pavanetto F. Solvent evaporation, solvent extraction and spray drying for polylactide microsphere preparation / F. Pavanetto, B. Conti, I. Genta, P. Giunchedi // Intern. J. of Pharmaceutics. - 1992. V. 84. - P. 151-159.
18 Jang T.-S. Hollow porous poly (e-caprolactone) microspheres by emulsion solvent extraction / T.-S. Jang, E.-J. Lee, H.-E. Kim, Y.-H. Koh // Materials Letters. - 2012. - V. 72. - P. 157-159.
19 Jian L. Development and characterization of drug-loaded biodegradable PLA microcarriers prepared by the electrospraying technique / L. Jian, H. Ren, Y. Zhenlei, T. Zhihong // Intern. J. of Molecular Medicine. - 2015. - V. 36. - P. 249-254.
© Касаткин Е.В., Филатова Е.С., 2024
