2004
Известия ТИНРО
Том 136
УДК 576.8(26):599.535
Л.Ю.Лаженцева, Л.В.Шульгина, И.Е.Лебедева
МИКРОФЛОРА БЕЛУХ В ПЕРИОД АДАПТАЦИИ В УСЛОВИЯХ ВЛАДИВОСТОКСКОГО ДЕЛЬФИНАРИЯ
В период адаптации в дельфинарии изучена микрофлора белух, изменения условий обитания которых вызвали ухудшение состояния здоровья (снижение активности и аппетита, появление на коже и слизистых темных пятен, язв и гиперемии). Выделенные микроорганизмы характеризовались способностью вызывать патологические процессы и иммунологические сдвиги в организме животного. Изучена чувствительность к антибиотикам микроорганизмов, доминирующих на пораженных участках кожи и слизистых, проведена комплексная терапия животных.
Lazhentseva L.Yu., Shulgina L.V., Lebedeva I.E. Microflora of white whales during adaptation in Vladivostok dolphinarium // Izv. TINRO. — 2004. — Vol. 136. — P. 290-293.
The microflora of white whales was examined during adaptation in dolphinarium, when changes in their environmental conditions entail their health deterioration (activity and appetite losses, dark spots appearance on skin and mucous membranes, ulcers and hyperemia). The revealed microorganisms can cause the pathologic processes and immunologic shifts in animal's organism. Susceptibility of the dominant microorganisms to antibiotics was investigated. Complex therapy of the animals was conducted.
Владельцы многих дельфинариев в странах ATP в последние годы проявляют научный, коммерческий и эстетический интерес к высокоорганизованным представителям морской фауны — белухам (Delphinapterus leucas Pallas). Однако желание приобрести грациозных красавиц белух сопряжено с проблемой адаптации животных к новым условиям. ТИНРО-центр производит отлов белух в Охотском море, доставку в дельфинарий г. Владивосток и подготовку их для передачи в океанариумы других стран.
Известно (Брем, 1992), что белухи обитают в морях, приближенных к северному полюсу, спускаясь летом до 63о с.ш. и изредка — до берегов Средней Европы.
Среда обитания белух характеризуется специфическими температурным, солевым и газовым режимом, микробными ценозами, подводными растениями и т.д. Комплекс перечисленных факторов влияет на все жизненные процессы, происходящие в организме животных (дыхание, питание, кроветворение и кровообращение, нервную деятельность, размножение, рост, развитие, иммунологические реакции, неспецифическую резистентность). Немаловажную роль играет структура и качество питания. Изменение условий обитания приводит к сдвигам адаптационных механизмов животного, определяющих состояние здоровья. Одним из основных факторов здоровья животного является аутомикрофлора, в норме выполняющая защитную функцию, а при ослаблении организма вызывающая у него иммунологические сдвиги.
Известно, что животные испытывают огромный стресс уже в результате отлова их в местах обитания (Cowan, W alker, 1979). Д альнейшая транспортировка и изменение условий внешней среды также являются мощным стрессовым фактором для их организма (Ведемейер и др., 1981).
Целью настоящей работы явилось изучение микрофлоры и влияние ее на состояние белух, проходящих адаптационный период в условиях дельфинария г. Владивосток и подготовку к передаче в дельфинарии стран Азиатско-Тихоокеанского региона.
Белухи Delphinapterus leucas Pallas были отловлены в районе Сахалинского залива Охотского моря и доставлены в дельфинарий ТИНРО-центра. После доставки в дельфинарий у животных отмечено снижение активности и аппетита. Через 20-30 сут появились темные выпуклые пятна до 15 см в диаметре, а также гнойные очаги размером 3-5 см в диаметре на поверхности тела животных и клюве. Отмечалась гиперемия слизистой зева.
Стерильными зондами с кожных покровов, гнойно-воспалительных участков и зева животных был отобран материал (соскобы) для микробиологического исследования и произведен посев на специальные плотные питательные среды. Посевы доставляли в микробиологическую лабораторию ТИНРО-центра, инкубировали до 5 сут и проводили дальнейшую идентификацию выделенных микроорганизмов согласно определителю Берджи (Bergey's Manual of Determinative bacteriology, 1997), изучали чувствительность микрофлоры к антибиотикам в соответствии с рекомендациями М.С.Поляка (1997).
Исследование качественного состава микрофлоры белух (табл. 1) показало ее многообразие и отсутствие каких-либо закономерностей в локализации. Отмечено, что в зависимости от периода наблюдения изменяется процентное соотношение отдельных представителей микрофлоры, выделенных с кожных покровов и зева животных. Причем после доставки животных в дельфинарий на поверхности их тела преобладающими группами микроорганизмов были микроскопические грибы и грамнегативные палочки. Среди последних наиболее массовые — бактерии родов Pseudomonas, Aeromonas, Vibrio и Proteus.
При снижении температуры воды встречаемость отдельных видов грамотрица-тельных бактерий (p. Vib-rio, p. Aeromonas, p. Proteus) и микроскопических грибов на теле белух уменьшилась. Преобладающими группами микроорганизмов в зимний период были представители р. Pseudomonas, сем. Micro-co^acea и гр. Actinomyces. Появлялись микробные штаммы родов Leuconostoc, Bacteroides, Sarcina и др., не выделяемых в более теплый период (сентябрь, октябрь).
Преобладающие формы бактерий характеризовались высокой биохимической активностью, а также способностью продуцировать различные ферменты патогенности (лецитиназу, гемолизины, протеазы, нуклеазы). Эти свойства микроорганизмов обусловливают их высокую способность колонизиро-
Таблица 1
Характеристика микроорганизмов, выделенных от белух в разные периоды наблюдения
Table 1
Characteristics of microorganisms, isolated from belugas during different periods of observation
„ „ Выделенные штаммы, % (M ± м)
Семейство, род ^ „
г ( )СРННИМ ПРПИПП ПРПИПП
Р. Pseudomonas 26,3 ± 3,8 26,7 ± 5,2
Сем. Micrococcacea 15,8 ± 2,9 28,2 ± 6,6
Гр. Actinomyces 10,5 ± 3,3 17,9 ± 4,1
Р. Aeromonas 10,5 ± 3,3 5,1 ± 2,4
Р. Proteus 5,3 ± 1,8
Р. Vibrio 10,5 ± 3,3 5,1 ± 2,4
Р. Corynebacterium 2,6 ± 1,7
Р. Leuconostoc 5,4 ± 1,7
Р. Bacteroides 1,2 ± 3.2
Р. Sarcina 2,6 ± 1,7
Р. Actinobacillus 2,6 ± 1,7
Микроскопические
грибы 21,1 ± 3,6 2,6 ± 1,1
вать пораженные участки тела, вызывать развитие гнойно-воспалительных очагов, патологические процессы, а также местные и общие иммунологические сдвиги в организме (Езепчук, 1985; Костюкова, 1989; Бухарин, Дерябин, 1996; Бухарин, 1997).
Известно, что терапия гнойно-воспалительных процессов, как правило, включает использование антибиотиков, иммуностимулирующих и общеукрепляющих лекарственных препаратов. Вместе с тем неправильный выбор антибиотиков при лечении нередко приводит к формированию и селекции резистентных штаммов возбудителей и низкой эффективности проводимой терапии (Красильников, Гудкова, 1995). Поэтому для повышения последней очень важен систематический мониторинг уровня чувствительности бактерий к лекарственным веществам. В этой связи нами изучена чувствительность микробных изолятов к различным группам антибиотиков, выяснена устойчивость к ним возбудителей гнойно-воспалительных процессов.
Для определения антибиотикочувствительности использовали диски широко применяемых антибиотиков разных групп (табл. 2). Результаты проведенных исследований (см. рисунок) показали, что изолированные из местных гнойно-воспалительных очагов белух микроорганизмы были наиболее чувствительны к группе препаратов фторхи-нолонов (офлоксацину, цип-рофлоксацину) и аминогли-козидов (гентамицину). Средней чувствительностью изоляты характеризовались к препаратам из группы пе-нициллинов (амоксицилли-ну, ампициклину) и тетрацик-линов (доксициклин). К антибиотикам группы макро-лидов (кроме азитромици-на) выделенные микробные штаммы проявляли незначительную чувствительность по сравнению с вышеуказанными или показывали устойчивость к ним.
С учетом полученных антибиотикограмм была рекомендована местная и общая терапия. Терапевтическую дозу используемых антибиотиков рассчитывали с учетом массы животного. Кроме того, раны и гнойно-воспалительные очаги на поверхности тела белух местно обрабатывали препаратом из липидов морских рыб, обладающим выраженной антимикробной активностью в отношении условно патогенных и патогенных бактерий, а также микроскопических грибов (Лаженцева, 2000).
Параллельно с общей и местной антибиотикотерапией были назначены иммуностимулирующие препараты (иммунал, тинростим) и комплекс витаминов и микроэлементов.
После проведенной комплексной терапии исчезли гиперемия и отеки, темные выпуклые пятна на теле, очистились и зарубцевались гнойные язвочки.
Изучение качественного состава микроорганизмов, выделенных из соскобов, взятых с поверхности тела и слизистых оболочек глотки белух после проведения лечения, показало значительное снижение их полиморфизма и биохимической активности.
Таблица 2
Антимикробные препараты, использованные при изучении антибиотикорезистентности микроорганизмов, выделенных из локальных гнойно-воспалительных очагов белух
Table 2
Antimicrobial drugs used for study of antibiotic resistance of microorganisms isolated from local pyoinflammatory focuses of belugas
Группа препаратов Антибиотик
Фторхинолоны Офлоксацин (таривид)
Ципрофлоксацин (ципролет) Аминогликозиды Гентамицин
Тетрациклины Доксициклин
Макролиды (азалиды) Азитромицин (сумамед)
Спирамицин (ровамицин) Мидекамицин (макропен) Рокситромицин (рулид) Пенициллины Амоксициллин
_Ампициллин_
Примечание. В скобках указано коммерческое наименование антибиотиков.
X
о
п
к го X
л
Ц
s
Sí ф
I-
О
20
15
10
Чувствительность микроорганизмов, выделенных из гнойно-воспалительных очагов поверхности тела и слизистых оболочек белух, к антибиотикам: 1 — офлоксацину, 2 — ципрофлоксацину, 3 — ген-тамицину, 4 — доксицикли-ну, 5 — амоксициллину, 6 — ампициллину, 7 — азитромици-ну, 8 — мидекамицину, 9 — рокситромицину
Susceptibility of microorganisms isolated from pyoinflammatory focuses of skin and mucous tunics to antibiotics: 1 — ofloxacin, 2 — ciprofloxacin, 3 — gentamicin, 4 — doxycy-cline, 5 — amoxicillin, 6 — ampicillin, 7 — azitromycin, 8 — midekamycin, 9 — roxithromy-cin
J 8 9 Антибиотики
Выводы
Изменение условий внешней среды белух при транспортировке и адаптации в условиях дельфинария г. Владивосток приводит к полиморфизму микробных популяций на кожных покровах и слизистых оболочках, к образованию местных гнойно-воспалительных очагов.
Микробные изоляты из гнойно-воспалительных очагов поверхности тела и слизистых оболочек белух характеризуются выраженной чувствительностью к антимикробным препаратам из группы фторхинолонов и аминогликозидов.
Применение препаратов общего и местного назначения, высокоактивных в отношении возбудителей гнойно-воспалительных процессов, а также иммуностимулирующих и общеукрепляющих веществ обеспечивает эффективность проводимой комплексной терапии белух в период адаптации в условиях дельфинария.
Литература
Брем А.С. Жизнь животных. — М.: Терра-Терра, 1992. — 524 с.
Бухарин О.В. Персистенция бактериальных патогенов как результат отношений в системе паразит-хозяин // Микробиология. — 1997. — С. 3-9.
Бухарин О.В., Дерябин Д.Г. Таксономическое значение способности бактерий рода Staphylococcus к инактивации ряда факторов естественной противоинфекционной резистентности // Микробиология. — 1996. — № 4. — С. 30-33.
Ведемейер Г.А., Мейер Ф.П., Смит Л. Стресс и болезни рыб. — М.: Лег. и пищ. пром-сть, 1981. — 127 с.
Езепчук Ю.В. Патогенность как функция биомолекул. — М.: Наука, 1985. — 236 с.
Костюкова Н.Н. Начальный этап инфекционного процесса — колонизация и пути ее предотвращения // Микробиология. — 1989. — № 9. — С. 103-110.
Красильников А.П., Гудкова Е.И. Лекарственные инфекции // Актуальные вопросы микробиологии, эпидемиологии и клиники инфекционных болезней. — Харьков: Здоровье, 1995. — 194 с.
Лаженцева Л.Ю. Влияние антимикробного препарата из липидов морских рыб на возбудителей гнойно-воспалительных заболеваний: Автореф. канд. дис. ... биол. наук. — Владивосток, 2000. — 26 с.
Поляк М.С. Определение чувствительности микроорганизмов к противомикробным препаратам "методом дисков". — СПб.: Науч.-исслед. центр фармакотерапии, 1997. — 20 с.
Bergeys Manual of Determinative bacteriology. Ninth edition / John G. Holt, Noel R. Krieg, Peter H.A. Sneath et al.: Пер. с англ. — М.: Мир, 1997. — Т. 1-2. — 800 c.
Cowan D.F., Walker W.A. Disease factors in Stenella attenuatta and Stenella longilos-tris: Eastern Tropical Pacific Yellowfin Tuna Perse Seine Fishery. — October, 1979. — 21 p.