февраль N02 (287) ЗНиСО
53
УДК 614.76:579.63
МИКОЛОГИЧЕСКОЕ И ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПОЧВЫ ДЕТСКИХ ПЛОЩАДОК ГОРОДА КАЗАНИ
Д.А. Долбин1, А.А. Баязитова1'2, Г.Д. Латыпова2, Л.Т. Шафигуллина2, Н.И. Глушко1, С.А. Лисовская1, Е.В. Халдеева1, В.Р. Паршаков1
1ФБУН «Казанский НИИ эпидемиологии и микробиологии» Роспотребнадзора,
Казань, Россия
2ФГАОУ ВО «Казанский федеральный (Приволжский) университет», Казань, Россия
Проведено микологическое и паразитологическое исследование почв детских площадок. Показано присутствие в почвах грибов с выраженными аллергенными свойствами, а также потенциальных возбудителей микозов. Установлено, что видовой состав и количественные характеристики обсемененности грибами зависят от уровня естественного освещения. На хорошо освещенных участках количество выделенных видов не превышало 3, тогда как на плохо освещенных участках достигало 7. В 40 % проб с детских площадок, расположенных в тени, были выявлены условно-патогенные грибы. В результате паразитологических исследований в 30 % проб выявлено присутствие яиц гельминтов. По результатам исследования даны рекомендации по мерам защиты детей от возможности заражения различными паразитозами и грибковыми инфекциями. Ключевые слова: гельминты, микромицеты, паразитозы, микозы, Toxocara canis, Aspergillus niger.
D.A. Dolbin, A.A. Bayazitova, G.D. Latypova, L.T. Shafigullina, N.I. Glushko, S.A. Lisovskaya,
E. V. Haldeeva, V.R. Parshakov □ MYCOLOGICAL AND PARASITOLOGICAL RESEARCHING OF SOIL OF KAZAN CITY PLAYGROUNDS □ Kazan research institute of epidemiology and microbiology of Rospotrebnadzor, Kazan, Russia; Kazan (Volga region) Federal University, Kazan, Russia.
Soils of the playgrounds were investigated for parasites and fungi. Presence of the allergic and opportunistic fungi was demonstrated. It was shown that species composition and amount of fungi depend on natural light level. On well-lit areas number of identified species wasn't exceed 3, on poorly-lit areas - 7 species. Opportunistic fungi were revealed in 40% of probes from poorly-lit playgrounds. Helminth eggs was in 30% of probes. Based on obtained results recommendations to protect children from parasitic and fungal infections were presented.
Key words: helminth, fungi, parasitosis, mycosis, Toxocara canis, Aspergillus niger.
Детские площадки - игровые, спортивные и туристические - являются неотъемлемой составляющей городов на протяжении многих лет. В современных городах детские площадки как важный элемент организации активного досуга детей объединяют несколько функций: практическую, эстетическую, оздоровительную и другие. Однако в последнее время все большее внимание уделяется проблеме безопасности пребывания детей на таких площадках. Помимо риска получить травму вследствие технической неисправности игровых элементов или нарушения правил эксплуатации, на детских площадках возникает опасность, обусловленная неудовлетворительным санитарно-эпидемиологическим состоянием этих территорий.
Одной из возможных проблем является опасность заражения паразитозами. По данным ВОЗ, до 4,3 млрд человек на земном шаре страдает паразитозами [3]. Наиболее широкое распространение имеют гельминтозы органов пищеварения, которыми, по оценкам Всемирной организации здравоохранения, поражена четверть населения Земли. Зараженность детей гельминтами, по некоторым источникам, выше, чем у взрослых [12]. Дети особенно восприимчивы к влиянию инфекций и паразитов. Вследствие не вполне сформированного адаптивного иммунитета для детей характерно более частое
развитие атопических, паразитарных и имму-нокомплексных процессов [10]. Согласно многочисленным исследованиям, паразитозы оказывают многоплановое воздействие на организм хозяина, в том числе на его иммунную систему, способствуя более частому возникновению соматических и обострению хронических заболеваний [3].
Почва детских площадок - один из возможных источников заражения детей гельмин-тозами. Выгул домашних животных, загрязнение бытовыми отходами могут способствовать контаминации этих территорий яйцами различных гельминтов, в том числе возбудителя токсокороза (Toxocara canis и Toxsascaris leonine), аскаридоза (Ascaris lumbricoides) и трихоцефалеза, переносчиками которых являются кошки и собаки.
В почве детских площадок также возможно присутствие почвенных грибов, потенциально опасных для здоровья человека. Контакт с микромицетами или с их спорами может способствовать возникновению аллергических реакций, микотоксикозов, грибковых инфекций. На сегодняшний день описано около 400 видов болезнетворных грибов-возбудителей микозов, а исследование поверхностных микозов человека и животных относится к активно развивающейся области медицины и
54
ЗНиСО Февраль iM (20/)
ветеринарии [2]. В почве очень часто встречаются дерматомицеты, которые могут быть причиной развития дерматомикозов. Домашние животные также являются переносчиками зоофильных дерматомицетов (Microsporum canis, Trichophyton mentagrophytes, T. verruco-sum). Некоторые микромицеты (Aspergillus spp., Cladosporium spp.) способны поражать не только кожу, но и внутренние органы, вызывая висцеральные микозы. Для вида Aspergillus niger, часто встречающегося в почвах, доказана роль в развитии аспергиллезов легких, плевритов, бронхопневмонии, отомико-зов, микотических ангин, абсцессов [6]. Особую опасность микогенная контаминация представляет для детей вследствие особенностей детского иммунитета и большей вероятности попадания контаминированных грибами субстратов в организм.
Цель исследования - оценка обсемененно-сти яйцами гельминтов и микромицетами почвы детских площадок города Казани.
Материалы и методы. Для оценки наличия микромицетов произвели отбор образцов почвы 20 различных детских площадок города Казани. Пробы почвы для оценки обсемененности микромицетами отобрали с участка размером 1 м с 5 различных точек, глубина отбора проб составляла 0-5 см. Все образцы были отобраны согласно ГОСТ 17.4.4.02-84 [7]. В целях предотвращения загрязнения проб почву отбирали стерильным инструментом и помещали в стерильную тару. Точечные пробы объединили в одну общую пробу. Все образцы пронумеровали и к каждому приложили паспорт исследуемого участка.
Для проверки образцов почвы на наличие микромицетов из общей пробы отобрали 5 г почвы, заранее убрав оттуда включения (части растений, насекомых, камни, стекло и др.), и поместили в стерильную ступку, залив 10 мл воды. Образцы растёрли стерильным пестиком. Образовавшуюся кашицу вылили обратно в колбу и перемешивали 300 раз. Из разведенной в сто раз суспензии провели посев газоном на среду Чапека и среду Сабуро.
Микромицеты инкубировали при температуре 28 °С. Подсчет и идентификацию колоний микромицетов проводили с 3-го по 5-й день [7].
Расчет количества грибных зачатков в почве производили по формуле:
б ■ в ■ г
а =-, где
д
а - число грибных зачатков на 1 г почвы; б - среднее число колоний; в - соответствующее разведение; г - количество капель в 1 мл суспензии; д - масса почвы, взятой на анализ. Микромицеты идентифицировали на основании их морфологических свойств [4, 5, 9].
Для оценки содержания яиц гельминтов ^зс отобрали 25 проб. Забор производили с поверх- iz ности почвы и на глубине 10-20 см. Пробы помещали в закрытую посуду, с указанием места ^^ и условий отбора.
Для выявления яиц гельминтов готовили флотационную смесь из насыщенного рас- сЁ твора цинка хлорида (2 кг ZnCl2 на 1 л воды), ^ насыщенного раствора натрия хлорида (0,42 кг NaCl на 1 л воды) и глицерина (Ч). Компоненты смешали в соотношении 1 : 11. Всплывшие частицы удалили. После центрифугирования (центрифуга марки ЦЛС-3) в течение 3 мин при 800-1 000 об./мин воду слили, а в пробирки вновь добавили 150 мл трехкомпонентной флотационной жидкости. Смесь перемешали палочкой и снова центрифугировали 3 мин.
Пробирки установили в штатив и заполнили тем же раствором до образования выпуклого мениска. Затем накрыли обезжиренным стеклом (размером 6 х 12 см) так, чтобы оно касалось слоя жидкости. Через 20-30 мин стекло микроскопировали. Для эффективности выявления яиц снятие препарата повторили 2-3 раза [1].
Результаты исследования. Проведенное микологическое исследование почвы детских площадок позволило выделить 40 видов грибов, относящихся к 13 родам, в количестве от 0,056 до 18 х 105 КОЕ/г почвы (рис. 1). Наиболее часто встречающимися микромицетами являются представители родов Penicillium (представители этого рода присутствуют в пробах с 14 детских площадок - 70 %), Fusarium (в пробах с 8 детских площадок -40 %), Mucor (в пробах с 7 детских площадок - 35 %) и Trichoderma (в пробах с 6 детских площадок - 30 %).
Анализ полученных данных показал, что 32 выделенных вида грибов обладают выраженными аллергенными свойствами. Среди них представители родов Altemaria, Cladosporium, Aspergillus (A. flavus, A. niger), Penicilium, Rhizopus, которые могут способствовать развитию микогенной сенсибилизации и вызвать респираторные аллергические заболевания [8].
Среди выделенных микромицетов 10 видов являются патогенами человека. Некоторые из них - Scopulariopsis brevicaulis, Cladosporium cladosporioides, Alternaria altemata, Penicillium chrysogenum, Trichophyton rubrum, Trichophyton spp. - могут вызывать различные микозы кожи и онихомикозы. Другие (например, Aspergillus niger, Aspergillus flavus) способны вызывать заболевания легких и JIOP-органов, в том числе отомикозы, синуситы и аспергиллезы. Дрож-жеподобные грибы рода Candida также способны поражать кожу, слизистые оболочки, а иногда и вызывать распространенную диссеми-нацию [11].
февраль №2 (207) ЗНивО
Рис. 1. Качественный состав микобиоты почв детских площадок г. Казани
Наибольшее разнообразие микромицетов наблюдалось в образцах почвы детских площадок, находящихся на участках с низким уровнем естественного освещения. На хорошо освещенных участках количество выделенных видов не превышало 3, тогда как на плохо освещенных участках достигало 7. Практически во всех пробах с детских площадок, расположенных в тени, были выявлены условно-патогенные грибы: Aspergillus niger, Cladosporium cladosporioides, Trichophyton spp., Altemaria altemata, Penicillium chrysogenum.
Проведенное паразитологическое исследование почвы детских площадок показало наличие в почве яиц гельминтов, в том числе: Toxocara sp., Strongylata sp., Trichostrongylus sp. и Trichocephalus sp., а также членистоногих и свободноживущих червей. Так как на основе микроскопирования невозможно определить
видовую принадлежность червя, то определяли лишь родовую принадлежность яиц червей. Результаты представлены на рис. 2.
Установлено, что 28 % детских площадок заражены Toxocara sp. Яйца других гельминтов (в частности, Strongylata sp., Trichostrongylus sp., Trichocephalus sp.) встречались значительно реже.
Присутствие членистоногих и свободноживущих червей отмечено в 24 % пробах.
Выводы. Почва детских площадок города Казани может быть потенциальным источником заражения людей патогенными микроми-цетами и такими паразитозами, как токсокароз и трихоцефалез. В целях безопасности детей рекомендуется располагать песочницы и детские площадки на хорошо освещенных участках, производить более частую замену песка в песочницах, а также регулярное микробиологическое обследование детских площадок.
Toxocara spp Strongylata spp Trichostrongylus spp. Trichocephalus spp.
Рис. 2. Частота встречаемости яиц гельминтов в пробах почв детских площадок г. Казани, %
56
ЗНивО Февраль № (287)
ЛИТЕРАТУРА
Долбин Д.А. и др. Обследования почвы на яйца гельминтов / Д.А. Долбин, М.Х. Лутфуллин, Ф.М. Соколи-на // Российский паразитологический журнал. 2014. № 2. С. 70-76.
Кашкин П.Н. Дерматомикозы. Этиология, лабораторная диагностика и эпидемиология. Ленинград: Медгиз, 1987. С. 108-117.
Крамарев С.А. Гельминты и аллергия. Современные подходы к лечению гельминтозов у детей // Здоровье ребенка. 2008. № 4. С. 13.
Кулько А.Б. Атлас условно-патогенных грибов Asper-gillus-возбудителей бронхолегочных инфекций. М., 2012. 160 с.
Лугаускас А.Ю. и др. Каталог микромицетов-биодеструк-торов полимерных материалов / А.Ю. Лугаускас, А.И. Ми-кульскене, Д.Ю. Шляужене. Вильнюс, 1987. 340 с. Марфенина О.Е. Aspergillus versicolor как возбудитель системного микоза: описание клинического случая и молекулярно-биологические доказательства генетической неоднородности вида // Проблемы медицинской микологии. 2002. № 2. С. 52-53.
Методы отбора и подготовки проб для химического, бактериологического, гельминтологического анализа: ГОСТ 17.4.4.02-84 (утв. Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 19.12.1984. № 4731).
8. Паттерсон Р. и др. Аллергические болезни: диагностика и лечение: пер с англ. / Р. Паттерсон, Л.К. Грэммер, П.А. Гринбергер. М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 2000. 768 с.
9. Саттон Д. др. Определитель патогенных и условно-патогенных грибов: пер с англ. / Д. Саттон, А. Фотер-гилл, М. Ринальди. М.: Мир, 2001. 486 с.
10. Титов Л.П. и др. Особенности строения, развития и функционирования иммунной системы детского организма / Л.П. Титов, Е.Ю. Кирильчик, Т.А. Канашкова // Медицинские новости. 2009. Т. 5. С. 7-16.
11. Хмельницкий О. К. и др. Патоморфологическая диагностика микозов, вызываемых условно-патогенными грибами / О.К. Хмельницкий, Н.М. Хмельницкая, В.Л. Быков: [Электронный ресурс]. Режим доступа: http://www. msrnedserv.com (дата обращения: 10.09.2015)
12. Янович В.А. и др. Исследование почвы на наличие яиц ток-сокар в Еврейской автономной области (ЕАО) / В. А. Янович, Н.М. Брюнеткина // Медицинские паразиты и па-разитологические болезни.1999. № 3. С. 29-30.
Контактная информация:
Баязитова Алина Ахметовна, тел.: +7 (927) 407-36-63, e-mail: [email protected]
Contact information: Bayazitova Alina, р^эм: +7 (927) 407-36-63, e-mail: [email protected]
Изданные документы государственной системы санитарно-эпидемиологического нормирования
Российской Федерации декабрь 2016 — январь 2017
Нормативные правовые акты ОБЩИЕ ВОПРОСЫ Гигиена, токсикология, санитария
• Оценка мутагенной активности пестицидов: МУ 1.2.3364—16 (49 с.)
• Гигиенические требования к безопасности процессов испытаний, хранения, перевозки, реализации, применения, обезвреживания и утилизации пестицидов и агрохимикатов: Изм. в СанПиН 1.2.2584—10. Утверждены Постановлением Главного государственного санитарного врача от 28.03.2016 № 35 (6 с.)
• Гигиенические нормативы содержания пестицидов в объектах окружающей среды (перечень): Изм. в ГН 1.2.3111—13. Утверждены Постановлением Главного государственного санитарного врача от 13.07.2016 № 94 (12 с.)
ОРГАНИЗАЦИЯ ГОССАНЭПИДСЛУЖБЫ РОССИИ
• Расчет показателей, характеризующих численность населения под воздействием факторов потенциального риска причинения вреда здоровью человека объектами санитарно-эпидемиологического надзора: Методические рекомендации (30 с.)
• Классификация хозяйствующих субъектов и видов деятельности по потенциальному риску причинения вреда здоровью человека для организации плановых контрольно-надзорных мероприятий: Методические рекомендации (76 с.)
• Классификация пищевой продукции, обращаемой на рынке, по риску причинения вреда здоровью и имущественных потерь потребителей для организации плановых контрольно-надзорных мероприятий: Методические рекомендации (38 с.)
• Изменения в отдельные санитарно-эпидемиологические правила в части приведения используемой в них терминологии в соответствие с Федеральными законами от 21.11.2011 № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» и от 12.04.2010 № 61-ФЗ «Об обращении лекарственных средств» (13 с.)
КОММУНАЛЬНАЯ ГИГИЕНА
• Предельно допустимые концентрации (ПДК) микроорганизмов-продуцентов, бактериальных препаратов и их компонентов в атмосферном воздухе населенных мест: Изм. в ГН 2.1.6.2177—07. Утверждены Постановлением Главного государственного санитарного врача от 12.02.2016 № 15 (7 с.)
• Предельно допустимые концентрации (ПДК) загрязняющих веществ в атмосферном воздухе населенных мест: Изм. в ГН 2.1.6.1338—03. Утверждены Постановлением Главного государственного санитарного врача от 30.08.2016 № 146 (5 с.)
ГИГИЕНА ТРУДА
• Предельно допустимые концентрации (ПДК) микроорганизмов-продуцентов, бактериальных препаратов и их компонентов в воздухе рабочей зоны: Изм. в ГН 2.2.6.2178— 07. Утверждены Постановлением Главного государственного санитарного врача от 12.02.2016 № 16 (6 с.)
и методические документы:
ГИГИЕНА ПИТАНИЯ
• Медико-биологическая оценка безопасности генно-инженерно-модифицированных организмов растительного происхождения с комбинированными признаками: МУ 2.3.2.3388—16 (30 с.)
РАДИАЦИОННАЯ ГИГИЕНА
• Радиационный контроль рентгеновских установок для досмотра багажа и товаров: МУ 2.6.1.3386—16 (11 с.)
• Радиационная защита детей в лучевой диагностике: МУ 2.6.1.3387—16 (32 с.)
ЭПИДЕМИОЛОГИЯ
• Эпидемиологический надзор за ВИЧ-инфекцией: МУ 3.1.3342—16 (75 с.)
• Методические указания по прогнозированию эпизоотической активности природных очагов чумы Российской Федерации: МУ 3.1.3.3394—16 (43 с.)
• Паспортизация природных очагов чумы Российской Федерации: МУ 3.1.3.3395—16 (39 с.)
• Организация и проведение мероприятий по борьбе с насекомыми на воздушных и водных транспортных средствах, осуществляющих международные перевозки: МР 3.5.2.0112—16 (15 с.)
МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ
• Определение остаточных количеств бацитрацина в продуктах животного происхождения методом иммунофер-
ментного анализа: МУК 4.1.3379—16 (12 с.)
***
Приобрести документы можно по безналичному расчету, направив заявку по адресу: Варшавское ш., 19а, Москва, 117105 - ФБУЗ «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Роспотребнадзора, или по факсу -телефон/ факс: +7 (495) 952-50-89, или по адресу электронной почты: [email protected].
В заявке следует указать:
- полное наименование учреждения;
- наименование документа и количество экземпляров;
- самовывоз / почтовые расходы;
- карта клиента;
- фамилия, имя, отчество исполнителя (полностью) с телефоном (код города - обязательно).
Почтовые расходы составляют 10 % от стоимости заказа.
О наличии в продаже ранее изданных документов и редакционной подписке для физических и юридических лиц можно узнать на сайте ФБУЗ «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Роспотребнадзора http://fcgie.ru/ в разделе «Издания нормативных и методических документов».