CC BY
1938
УДК 576.895.132
МЕТОД УЧЕТА ЧИСЛЕННОСТИ ЭНТОМОПАТОГЕННЫХ НЕМАТОД В ПОЧВЕ ПУТЕМ ВЫЛОВА НА ПРИМАНОЧНОЕ НАСЕКОМОЕ
Г.Е.Сергеев, Л.Г.Данилов
Всероссийский НИИ защиты растений, Санкт-Петербург
Сформулирована шестифакторная математическая модель вылова энтомопатогенных нематод на приманочное насекомое. По экспериментальным данным построена формула расчета плотности в почве нематод семейств Steinernematidae и Heterorhabditidae на основе их вылова. Учтены лабораторные и естественные условия вылова, число приманочных насекомых, температура, влажность, тип почвы по ее механическому составу и время экспозиции.
В сельском хозяйстве разрабатываются системы мероприятий, при которых основными методами снижения численности вредителей станут методы экологические, способствующие размножению и повышению активности естественных врагов вредителей. Так, в борьбе с насекомыми-фитофагами важное место отводится использованию их естественных врагов - паразитов, хищников, возбудителей заболеваний. В связи с этим в последние два десятилетия возрос интерес к энтомопатогенным нематодам, которые могут быть применены для снижения численности вредных видов насекомых.
Энтомопатогенные нематоды семейств Steinernematidae и Heterorhabditidae способны к активному поиску и инвази-рованию насекомых-хозяев в почве. В почве вне тела насекомого-хозяина нематоды могут существовать только на стадии инвазионной личинки. При изучении возможности применения нематод в качестве биологических агентов возникает необходимость в разработке методов учета их плотности в среде обитания, особенно в почве. Трудности при этом связаны, прежде всего, с тем, что в почве присутствуют другие виды сапробиоти-ческих нематод из отряда Rhabditidae, личинки которых по морфологическим признакам схожи с личинками энтомопа-тогенных нематод (Peters,1999; Sturhan, 1999). Кроме того, учет по погибшим от заражения нематодами насекомым практически невозможен, так как мертвые насекомые, в которых развиваются нема-
тоды, сохраняются в почвe несколько дней. По этой причине вместо непосредственных учетов плотности нематод в почве с использованием традиционных методов, основанных на выделении нематод из почвы в водной вытяжке, многими исследователями отдается предпочтение методам отлова инвазионных личинок с использованием в качестве приманки для гельминта гусениц большой вощинной моли (Galleria mellonella L.) (Bed-ding,Akhurst,1975; Mracek,1982; Akhurst, Вedding,1986; Bednarek,Nowicki, 1991; Fan,Hominick,1991).
О несовершенстве подобных методов для прямого суждения о плотности нематод можно судить по нашим экспериментальным данным. В порядке изучения экологии инвазионных личинок нематод в почве нами проводились оценки влияния на их вылов различных факторов окружающей среды, воздействующих на жизнедеятельность нематод. Полученные оценки свидетельствовали о большом влиянии этих факторов как на активность проникновения нематод в приманочное насекомое, так и на интенсивность гибели хозяина (Данилов и др.,1997). Оценки эти позволили приступить к созданию метода количественного учета абсолютной плотности энтомопатогенных нематод в почве. В настоящей статье дана разработка такого метода применительно к нематодам упомянутых двух семейств, приведены материалы по экспериментальному его обоснованию и рекомендации по практике применения.
Мет
В качестве модельных объектов были использованы нематоды вида Steinernema carpocapsae, штамм "agrюtos". Поведение энтомопатогенных нематод изучалось в зависимости от абиотических и биотических факторов. Заданную влажность почвы регулировали на основе взвешивания сосудов. Перед внесением нематод сосуды с почвой помещали на двое суток в термостаты с соответствующими температурами.
Нематод вносили в виде водной суспензии инвазионных личинок из расчета 10 особей/см2 поверхности почвы в сосуде, после чего сосуды закрывали ватными тампонами для уменьшения испарения влаги из почвы. Влияние температуры на поведение энтомопатогенных нематод оценивали в пределах 10-30°С путем экспозиции сосудов в термостатах с определенной температурой.
Экспозицию опытов определяли по срокам появления половозрелых особей нематод в поколении гигантских форм, по которым проводили учет количества инвазионных личинок, проникших в приманочное насекомое, то есть спустя 2, 3, 6 дней и при температурах 25, 20, 12°С соответственно. При проведении учетов насекомых извлекали из контейнеров и вскрывали. Вскрытие проводили на часовом стекле в физиологическом растворе. Для установления связи количества нематод п, вылавливаемых с помощью приманочных насекомых из почвы, с плотностью популяции нематод m производился экспериментальный их вылов при заданных плотностях и условиях. При количественном изучении закономерностей использовались методы нелинейного регрессионного анализа, дисперсионного анализа, линейной двумерной интерполяции. Синтез результатов проведен по принципу имитационного моделирования. Ниже приведены параметры, исследованные в процессе экспериментальных учетов нематод (Данилов и
;ика
др.,1997) и даны их условные обозначения, использованные в формулах и таблицах.
1. Место экспозиции C (насекомые в лаборатории помещались в пробу почвы, находящуюся в стеклянной банке объемом 300 мл, либо насекомые в сетчатом контейнере помещались прямо в почву в поле), тип почвы s по механическому составу (песок, супесь, суглинок).
2. Количество приманочных насекомых L, в которых подсчитывалось общее число проникших из почвы нематод п.
3. Температура почвы, ^С.
4. Влажность почвы h (% от ее полной влагоемкости).
5. Длительность экспозиции k (сутки).
Для построения формулы плотности
нематод исследовались также вторичные параметры учетов:
Р - исходный процент вылова нематод из почвенных проб;
у - его регрессионная расчетная
оценка в зависимости от количества приманочных насекомых L;
р - условный процент вылова - в пересчете на суточную экспозицию при одном приманочном насекомом;
г - условное расстояние привлечения нематод (подробное описание параметра дано после формулы (3);
v - условный объем облова (подробное описание параметра дано после формулы (3); v фД) - значение v при влажности h и температуре ^
z(k) - кратность увеличения вылова нематод при экспозиции k суток в сравнении с суточной (регрессионная оценка).
Во всех случаях обозначения типа у^), v(h,t), z(k) - общепринятые сокращенные представления соответствующих формул или величин из таблиц: для вычисления значения у по значениям L (формула (1)), значения v по значениям h и t (по таблице 2), значения z по значению k (формула (2)) и так далее.
Результаты и обсуждение
На рисунке 1 показано, какое влияние матод (S.carpocapsae штамм "agriotos") производит на долю Р выловленных не- количество приманочных насекомых (гу-
сеницы G.mellonela Ь. старших возрастов), которые были свободно выпущены в стеклянные банки объемом 300 мл, наполненные суглинистой почвой. Опыты проводились при температуре почвы 25°С и ее влажности 20%, в 15 повторно-стях.
0 5 10 15 20
Количество приманочных насекомых (Ь)
Рис.1. Связь вылова нематод (Р, %) из почвенных проб с количеством приманочных насекомых (Ь), свободно выпущенных в почву
В пределах данного интервала Ь рассчитана функция у(Ь). Она представляет собой оценку средне ожидаемой величины Р для того или иного значения Ь в форме полинома третьей степени:
у(Ь)= 1.25916Ь+0.04296Ь2-0.00259Ь3 %/экз. (1)
Общее количество вылавливаемых из почвы нематод особенно быстро возрастает при количестве приманочных насекомых от 5 до 10 экземпляров. При дальнейшем увеличении количества приманочных насекомых с 10 до 20 экземпляров интенсивность проникновения нематод в каждое насекомое значительно снижается.
По экспериментальным данным в пределах восьмисуточного вылова была рассчитана и функция z(k), определяющая кратность увеличения вылова нематод при экспозиции к суток, в сравнении с суточной:
z(k) = 0.21п(1 + 157.327к - 9.914к2). (2)
При к=1 z(k)=1 с увеличением к темпы роста z(k) замедляются быстрее, чем для предыдущей функции; для к= 3, 4, 8,
Вестник защиты растений, 2, 2002 соответственно, z(k)= 1.19, 1.23, 1.29. Очевидно, это связано с тем, что с увеличением расстояния до приманки ее действенность резко снижается, а облавливаемая зона исчерпывается достаточно быстро.
По данным других исследователей, личинки природных видов энтомопато-генных нематод на открытой поверхности активно инвазируют насекомых-хозяев, находящихся на расстоянии не более 3.5 см (Gaugler е! а1.,1989). Однако в почве расстояние восприятия нематодами насекомых может быть несколько иным. Расчеты с помощью данной функции показывают, что за 1, 2, 3 и 4 суток из этой зоны вылавливается, соответственно, 78, 87, 92 и 96% активных особей нематод.
Статистически значимо различаются доли нематод, вылавливаемых за одно и то же время экспозиции в песке (19%), супеси (23.9%) и суглинке (13.6%). Это позволяет оценить влияние типа почвы на эффективность вылова через параметр s как отношение вылова (Р - относительного вылова, доли) в данной почве к эталонному вылову в суглинке при одинаковых условиях. Таким образом, для суглинка s=1, для песка s=1.40, для супеси s=1.76. Аналогичным образом параметром С учитывается, производится ли экспозиция приманки в сетках непосредственно в полевых условиях, либо имеет место лабораторная (эталонная) экспозиция гусениц, свободно выпущенных в банку с почвенной пробой (то есть С есть усредненное отношение вылова в поле к вылову в лаборатории в почвенных образцах при прочих равных условиях). В поле С=1.177, в лаборатории С=1.
Влияние на долю Р выловленных нематод влажности почвы h и ее температуры ! оценивалось в двуфакторном лабораторном эксперименте при трех уровнях влажности и температуры с четырьмя повторностями в каждом варианте. В качестве приманки в каждую банку-повторность с суглинистой почвой выпускалось по 10 гусениц (Ь=10). Средние результаты по вариантам приведены в левой части таблицы 1.
Вестник зашиты, растений, 2, 2002 41 Таблица 1. Исходные данные для оценки влияния температуры (1) и влажности (Ь) почвы, длительности (к) нахождения приманочных насекомых в почве (сутки) _на эффективность вылова нематод_
р* г* V*
ь 15°С 20°С 28°С 15°С 20°С 28°С 15°С 20°С 28°С
к=8 к=4 к=3 к=1 к=1 к=1 к=1 к=1 к=1
10 1.8 2.0 3.2 5.1 5.4 6.4 566 661 1087
20 4.5 14.6 161 7.0 10.5 11.0 1417 4826 5499
30 0.0 1.7 6.3 0.0 5.1 8.0 0 562 2151
*См. радел "методика".
Слева в таблице приведены характеристики вылавливаемости нематод в зависимости от температуры 1 и влажности И почвы (эмпирические значения Р вылова нематод при Ь=10 гусениц для разных сроков экспозиции к); справа -соответствующие расчетные значения "расстояний привлечения" г (мм) и "объемов облова" V в кубических миллиметрах (для суточной экспозиции одиночной приманки при Ь=1, к=1).
Длительность экспозиции для 1= 15, 20 и 28 фактически составляла, соответственно, к= 8, 4 и 3 суток. Она определялась зависящими от температуры сроками появления половозрелых особей в поколении гигантских форм, по которым и проводится учет количества нематод, проникших в приманочное насекомое. Для наибольшей точности эксперимента экспозиция должна была выбираться максимальной, но не превышающей определенных пределов (различных для разной температуры). Поэтому для определения сопоставимых характеристик вылавливаемости нематод исходные результаты эксперимента были определенным образом пересчитаны.
Исходный процент вылова Р был преобразован в условный процент р (для суточной экспозиции приманки в полевых условиях при одной приманочной гусенице). С этой целью для каждого сочетании к и Ь исходный Р был помножен на соответствующий этому сочетанию коэффициент. В частности, при Р=16.1:
р= Р[СуД(к) у(Ь)] = 16.1 [1.177-1.3/1.19-14.3] = 1.447 %. (3)
То есть, если бы при той же температуре 1=28°С и влажности 11=20% вылов
производился не в лаборатории, а в поле, не на десять гусениц, а на одну и не трое суток, а сутки - тогда было бы выловлено не 16.1%, а лишь около 1.4% всех нематод, обитающих в объеме 380 см3 (а точнее их доля, равная 0.01447). Следовательно, в данном случае такое их количество приходится на объем почвы V, равный:
у(11,1;) = у(20%, 28°) = 380р = 380-0.01447 = 5.499 см3 или 5499 мм3.
Вычисленное таким образом значение V есть некий "условный объем полного облова" (сокращенно "объем облова"). Он имеет довольно громоздкую словесную характеристику. Величина V определяет тот объем почвы, к которому следует отнести суточный вылов нематод на одно приманочное насекомое для того, чтобы полученное значение численно равнялось плотности нематод, обитающих в этом объеме почвы.
Такое тяжеловесное определение потребовалось лишь для того, чтобы рассчитать параметр, предельно очевидный для практики: V эквивалентен объему почвы, в данных условиях полностью облавливаемому за сутки на одно приманочное насекомое.
Очевидно, что на самом деле часть нематод из соответствующего объему V слоя почвы вокруг приманочного насекомого (особенно из наружных его областей) к приманке за сутки вообще не мигрирует, это с одной стороны. С другой стороны, существенная часть инвазиро-вавших приманку нематод была привлечена также из-за пределов этого слоя, с большего расстояния. Так что объем почвы, фактически облавливаемой (но не
полностью, а в той или иной степени!), больше условного объема полного облова V.
Тем не менее, объективно существует некое среднее расстояние, с которого нематоды мигрировали и инвазировали приманочное насекомое. Оно и определяет толщину вышеназванного слоя почвы вокруг приманки. Толщина эта в равной степени зависит от поисковых способностей нематод, их миграционной активности при данных условиях среды. Среднее расстояние привлечения нематод за сутки на одиночное насекомое (сокращенно "расстояние привлечения") характеризует эту активную подвижность нематод для разных условий температуры и влажности. Независимо от размера и формы насекомого, оно может быть стандартным образом количественно выражено радиусом (г) шара. Объем его равен упомянутому объему (у) почвы, соответствующего условному полному суточному
Вестник зашиты, растений, 2, 2002 облову нематод на одно приманочное насекомое. При этом, данный радиус г не больше фактического среднего расстояния привлечения нематод в данных условиях, в любом случае.
Исходя из формулы объема шара, для данного примера (при 1=28°С и 11=20%) получаем:
г= (Зу/4-3.14159)1/з = (3-5499/4-3.14159)1/з = 11 мм.
Значения г, вычисленные для условий эксперимента, приведены в центральной части таблицы 1. Исходные значения V (вычисленные по экспериментальным данным) приведены в правой части таблицы 1. Путем линейной интерполяции рассчитаны промежуточные значения; таблица 2 дает их для любого сочетания температуры и влажности в исследованных их пределах.
Таблица 2. Стандартизованные "объемы облова" V (Ь,1;) куб. мм: объемы почвы, которые содержат количества нематод, равные их суточному вылову на одно насекомое, при различных зна-_чениях влажности Ь и температуры почвы °С)_
ь%. Температура почвы, °С
15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28
10 566 585 604 623 642 661 714 767 820 874 927 981 1034 1087
11 651 736 822 907 992 1077 1134 1190 1247 1303 1359 1416 1472 1528
12 736 888 1039 1191 1342 1494 1553 1613 1672 1732 1791 1851 1910 1969
13 821 1039 1257 1475 1693 1911 1973 2036 2098 2161 2223 2386 2348 2411
14 906 1191 1475 1759 2043 2327 2393 2458 2524 2589 2655 2721 2786 2852
15 991 1342 1692 2043 2393 2743 2812 2881 2950 3018 3087 3156 3224 3293
16 1077 1493 1910 2327 2743 3160 3232 3304 3375 3442 3519 3591 3662 3734
17 1162 1645 2128 2611 3094 3577 3557 3551 3801 3876 3951 4026 4101 4175
18 1247 1796 2345 2895 3444 3993 4071 4149 4227 4305 4383 4461 4539 4617
19 1332 1947 2563 3178 3794 4409 4491 4572 4653 4734 4815 4896 4977 5058
20 1417 2099 2781 3462 4144 4826 4910 4994 5078 5163 5247 5371 5415 5499
21 1275 1900 2525 3150 3775 4400 4495 4591 4686 4782 4877 4973 5069 5164
22 1134 1702 2269 2837 3405 3973 4080 4187 4294 4401 4508 4615 4722 4829
23 992 1503 2014 2525 3036 3547 3665 3784 3902 4021 4139 4258 4376 4495
24 850 1304 1758 2212 2666 3120 3250 3380 3510 3640 3770 3900 4030 4160
25 709 1106 1503 1900 2297 2694 2835 2977 3118 3259 3401 3542 3684 3825
26 567 907 1247 1587 1927 2268 2420 2573 2726 2879 3032 3185 3337 3490
27 425 708 992 1275 1558 1841 2005 2170 2334 2498 2663 2827 2991 3155
28 283 510 735 962 1189 1415 1591 1766 1942 2118 2293 2469 2645 2821
29 142 311 480 650 819 988 1176 1363 1550 1737 1924 2111 2299 2486
30 0 112 225 337 450 562 761 959 1158 1357 1555 1754 1952 2151
Сформулированные параметры процесса вылова нематод и их связи с условиями учета определяют функцию оценки плотности популяции т в почве по
количеству нематод п, инвазировавших приманочное насекомое при этих условиях, при влажности И и температуре 1 почвы, в условиях С "лаборатория - по-
Вестник зашиты, растений, 2, 2002 ле", при почве э, количестве приманочных насекомых для одной повторности Ь и длительности экспозиции к суток. Плотность популяции нематод т, таким образом, равняется фактическому вылову п, деленному на величину сформулированного выше условного "объема облова", приведенного к задаваемым условиям (И, 1, С, э, Ь, к):
т=п/У экз/см3,
где V = у(11,1)Сзу(Ь)7(к)/1000у(1), отсюда: т = 1000п-у(1)/[у(11,1)Сзу(Ь)7(к)].
Подставляя функции (1) и (2), значение у(1) = 1.3, а также заменяя натуральный логарифм на более общепринятый десятичный, окончательно получаем следующую итоговую формулу для расчета точечной оценки плотности нематод на кубический сантиметр почвы по их вылову для различных условий в поле:
т(п,11,1;,с,5,Ь,к)=
2822.9П/[Сзу(111;)'( 1.25916Ь+0.04296Ь2-0.00259Ь3)'^(1+157.327к-9.914к2)],
где п - количество нематод, проникших в приманочное насекомое за к суток; Ь -количество приманочных насекомых (гусениц); С - параметр: для полевых условий С=1.177, для лаборатории С=1; э -параметр, отражающий специфику почвы (для суглинка 5=1, для песка 5=1.40 и для супеси 5=1.76); к - длительность экспозиции, сутки; у(11,1;) - находимый по таблице 2 параметр интенсивности вылова в зависимости от активности нематод, при различных значениях влажности 11 и температуры почвы 1 (в среднем за время учета) - "стандартизованный объем облова".
Из всех перечисленных выше параметров (значения которых требуются для того, чтобы вылов нематод на приманочное насекомое мог быть истолкован в виде плотности их обитания в почве) более всего имеет значение интенсивность вылова в зависимости от активности инва-зирования нематодами насекомого-хозяина при различных значениях влажности И и температуры почвы 1. Это можно видеть на следующих примерах.
В поле (с=1.177), в суглинистой почве (s=l), на приманку из L=5 гусениц в сетках за время к=3 суток выловлено п=10 нематод. При этом средняя влажность и температура почвы были, соответственно, h=10% и t=20°C. По таблице 2 находим v(h,t) = v(10, 20) = 661, после чего подставляем все приведенные выше значения в формулу:
m(n, h, t, С, s, L, k) = m(10, 10, 20, 1.177, 1, 5, 3) = 2822.9-10/[l.l77-1-661 (1.25916-5+0.04296-52 -0.002595-53)-lg(l + l 57.327-3-9.914-32)] = 2822.9-10/[l.177-661-7.046-2.584] = 2822.9/[l,l 7 7-7.046-2.584]-[ 10/661 ] = 131.73[10/661]= 2 экз/см3.
Здесь 131.73 - постоянный коэффициент, определяемый условиями учета (кроме температуры и влажности, отраженными значением знаменателя).
Если бы такой же вылов (п=10) имел место в условиях максимальной инвазионной активности нематод (в пределах исследованных в эксперименте h=20%, t=28°C и v(20, 28) = 5499 мм3), то ему соответствовала в десять раз меньшая плотность нематод в почве: т(10, 20, 28, 20, 1.177, 1, 5, 3) = 131.73-10/5499 = 0.2 (нематоды на см3).
Наоборот, при подавленной их подвижности (слишком высокой влажности и низкой температуре при h=30%, t=16°C, v(30, 16) =112 мм3) вылов в 10 экз. свидетельствовал бы о гораздо более высокой плотности нематод в почве: m (10, 30, 16, 20, 1.177, 1, 5, 3) = 131.73-10/112 = 11.8 (экз/см3).
Таким образом, сколько-нибудь состоятельное истолкование вылова нематод на приманочное насекомое в отношении плотности их обитания в почве возможно только при учете отраженного в таблице 2 влияния влажности и температуры, имевшими место в процессе вылова. Как видно из приведенных примеров, при стандартной методике учета (отраженной значениями L и к) расчет по предлагаемой формуле плотности по вылову упрощается. Постоянная техника учета отражается постоянным коэффициентом, который может быть вычислен
заранее. Чтобы получить данные о плотности нематод в почве, коэффициент надо лишь множить на количество отловленных в разных местах нематод и делить на значение из таблицы 2.
Для исследованного диапазона условий предлагаемая формула (с использованием определенных экспериментально ее параметров) позволяет без особых трудовых затрат оценивать абсолютную плотность нематод семейств Steiner-пета^Шае и Heterorhabditidae в почве непосредственно по их вылову на приманочное насекомое, проведенному в достаточном количестве мест обследуемого биотопа. Изложенную методику можно использовать при расчете аналогичных формул для определения плотности и других видов нематод. Мера точности учета определяется, как обычно, по стандартной ошибке учета, вычисляемой на основе серии из нескольких приманочных проб, закладываемых в почву в пределах обследуемого местообитания.
Предложенный ранее австралийскими исследователями метод определения наличия энтомопатогенных нематод в почве (Bedding,Akhurst,1975; Мгасек,1982) не давал сведений об их плотности в естественных условиях. Попытку усовершенствовать этот метод, оценивая плотность нематод в почвенных образцах по связи этой плотности с процентом гибели приманочных насекомых, сделал З.Мрачек (Мгасек,1982). Другие авторы (Bednarek, Nowicki,1991; Fan,Hominick,1991) предлагали оценивать плотность энтомопатоген-ных нематод в почве по количеству инвазионных личинок, извлеченных из мерт-
вых гусениц G.mellonella. Однако в обоих случаях использовавшиеся критерии плотности оказываются не инвариантными к условиям вылова, и упомянутые методы учетов регистрируют лишь факт наличии нематод в почвенном образце. Д.Штурхан (Sturhan,1990,1996) оценку плотности нематод в почвенных пробах проводит (по аналогии с известными методами выделения из почв фитопарази-тических нематод) путем промывки почвы через сита с определенным размером ячеек. Затем с использованием микроскопа проводится идентификация и прямой подсчет инвазионных личинок энто-мопатогенных нематод в почвенных образцах. Надежно оценивать этим методом численность инвазионных личинок в естественных местах их обитания не позволяет трудоемкость метода.
Разработанный и используемый нами при изучении распространения нематод оригинальный метод подтвержден сопоставлением с плотностью объекта, оценивавшейся прямым подсчетом нематод в пробах, а также экспериментальными данными по изучению особенностей поведения различных видов энтомопатогенных нематод в почве в зависимости от абиотических и биотических факторов окружающей среды (Данилов,1978; Данилов и др.,1997). Практическое использование метода позволяет надежно оценивать как наличие в почвах энтомопатогенных нематод, так и их численность (плотность) в местах отбора проб. Существенно, что метод исключает также достаточно трудоемкий традиционный процесс транспортировки почвенных проб в лабораторию.
По экспериментальным данным построена шестифакторная математическая модель вылова энтомопатогенных нематод на приманочное насекомое. На примере семейств Steinernematidae и Heterorhabditidae дана практическая формула расчета плотности нематод в почве по их вылову на приманку. Учтены условия вылова: число приманочных насекомых, температура, влажность и тип почвы по ее механическому составу, вре-
мя экспозиции, а также - открытый грунт или условия лаборатории. С помощью предложенной методики можно оценить не только длительность выживания и динамику численности того или иного интродуцируемого вида нематод в отдельных биотопах, но и взаимодействие его с естественными местными популяциями нематод, а в их отсутствие - также возможность создания новых очагов существования этих биологических агентов.
Литература
Данилов Л.Г. Влияние биотических и абиотических факторов на миграционную активность энтомопатогенных нематод (Neoaplectana carpocapsae штамм "agriotos") в почве. /Бюлл. ВИЗР, 43, 1978, с.21-27.
Данилов Л.Г., Карпова Е.В., Сергеев Г.Е. Влияние абиотических и биотических факторов на эффективность отлова штейнернема-тид и гетерорабдитид из почвы. /Сб. научн. трудов БелНИИЗР, "Защита растений", Минск, Экаунт, 20, 1997, с.85-95.
Akhurst R.J., Bedding R.A. Natural occurrence of insect pathogenic nematodes (Steiner-nematidae and Heterorhabditidae) in soil in Australia. /J. Aust. Ent. Soc., 25, 1986, p.241-244.
Bedding R.A., Akhurst R.J. A simple technique for the detection of insect parasitic rhab-ditid nematodes in soil. /Nematologica, 21, 1, 1975, p.109-110.
Bednarek A., Nowicki T. New estimation method for the density of entomogenous nematodes (Rhabditida: Steinernematidae) in the soil. /Rew. nematol., 14, 4, 1991, p.638-639.
Fan X., Hominick W.M. Efficiency of the Galleria (wax moth) baiting technique for recovering infective stages of entomopathogenic rhabditids (Steinernematidae and Heterorhab-ditidae) from sand and soil. /Rew. nematol., 14, 3, 1991, p.381-387.
Gaugler R., Mc Guire T., Campbell J. Genetic variability among strains of the enthomopa-thogenic nematode Steinernema feltiae. /J. Nematol., 21, 2, 1989, p.247-243.
Mracek Z. Estimate of the number of infective larvae of Neoaplectana carpocapsae (Ne-matoda: Steinernematidae) in soil sample. /Nematologica, 28, 3, 1982, p.303-306.
Peters A. Differentiating entomopathogenic nematodes from other free living nematodes. /Entomopathogenic nematodes. DG XII, COST 819. Eds. Gwynn R.L., Smits P.H., Griffin C., Ehlers R.-U., Boemare N. and Masson J.-P. Luxemburg, 1999, p.73-75.
Sturhan D. Untersuchungen zur Verbreitung entomoparasitarer nematoden in der Bundesrepublik Deutschland. /Mitt. Biol. Bunde-sanst. Land-Forstw.Berlin-Dahlem. 266, 1990, s.453.
Sturhan D. Jareszeitliches Vorkommen, Horizontal- und Vertikalverteilung entomopatho-gener Nematoden auf einer Ackerflache. /Mitt. Biol. Bundesanst. Land-Forstwirtsch. BerlinDahlem. 1996, 317, 1996, s.35-45.
Sturhan D. Prevalence and habitat specificity of entomopathogenic nematodes in Germany. /Entomopathogenic nematodes. DG XII, COST 819. Eds.: Gwynn R.L., Smits P.H., Griffin C., Ehlers R.-U., Boemare N. and Masson J.-P. Luxemburg, 1999, p.123-132.
METHOD OF ENTOMOPATHOGENIC NEMATODES (STEINERNEMATIDAE AND HETERORHABDITIDAE) MONITORING IN SOIL BY TRAPPING THEM ON A BAIT INSECT G.E.Sergeev, L.G.Danilov The materials on statistical substantiation and on development of a method of entomopathogenic nematodes of the families Steinernematidae and Heterorhabditidae monitoring by trapping them on a bait insect are given together with the practical recommendations on application. An algorithm for calculation of nematode density in soil has been constructed in relation to parameters of their trapping: quantity of invasive larvae invaded a bait with the count of soil humidity and temperature in conditions of "laboratory - field", quantity of bait insects in sample and duration of the insects exposition in soil. The offered method allows to determine entomopathogenic nematodes density in soil directly by their trapping on a bait insect in investigated range of conditions.
