CC BY
30
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2016 УДК 612.119.083.33
Чекнев С.Б., Сарычева М.А., Мездрохина А.С., Бабаянц А.А.
МЕТАЛЛОКОМПЛЕКСЫ у-ГЛОБУЛИНА В РЕГУЛЯЦИИ ВЫРАБОТКИ КЛЕТКАМИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА МОНОЦИТАРНОГО ХЕМОТАКСИЧЕСКОГО ПРОТЕИНА МСР-1
ФГБУ «Федеральный научно-исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, 123098, г. Москва, Россия
В работе показано, что в общем пуле цитокинов, вырабатываемых клетками периферической крови человека в присутствии белков Y-глобулиновой фракции, их металлокомплексов с медью и цинком, а также катионов меди и цинка, примененных изолированно, содержится от 3,53±0,04 до 7,22±0,03 нг/мл моноцитарного хемотаксиче-ского протеина МСР-1. Металлокомплекс у-глобулина с цинком индуцирует в 1,2-1,5 раза (р < 0,001-0,01) меньше МСР-1, чем контрольный белок. Металлокомплекс у-глобулина с медью в индукции МСР-1 в 1,14-1,24 раза (р < 0,001) слабее контрольного белка и в 1,14-1,5 раза (р < 0,001-0,01) - катионов меди, примененных изолированно. При этом на сроках 24 и 48 ч инкубации «медный» металлокомплекс у-глобулина оказывается в 1,2 раза (р < 0,001) активнее «цинкового» металлокомплекса белка. Обсуждается возможность реализации на уровне выработки моноцитарного хемотаксического протеина МСР-1 противовоспалительной активности металлокомплексов человеческого сывороточного Y-глобулина, образованных с катионами меди и цинка в условиях, приближенных к физиологическим.
К л ю ч е в ы е с л о в а: у-глобулин; металлокомплексы; МСР-1; выработка.
Для цитирования: Чекнев С.Б., СарычеваМ.А., Мездрохина А.С., Бабаянц А.А. Металлокомплексы у-глобулина в регуляции выработки клетками крови человека моноцитарного хемотаксического протеина МСР-1. Иммунология. 2016; 37 (3): DOI: 10.18821/0206-4952-2016-37-3-
Cheknev S.B., Sarycheva M.A., Mezdrokhina A.S., Babayants A.A.
THE Г-GLOBULIN METAL COMPLEXES IN REGULATION OF THE PRODUCTION BY HUMAN BLOOD CELLS OF MONOCYTE CHEMOATTRACTANT PROTEIN MCP-1
Federal State N.F. Gamaleya Research Centre for Epidemiology and Microbiology of the Ministry of Health of the Russian Federation, 123098, Moscow, Russia
It is shown in the work, that in common cytokine pool induced in the culture of human peripheral blood cells (PBC) in presence of the Y-globulin fraction proteins and of their metal complexes, production of monocyte chemoattractant protein MCP-1 has been detected. Production of MCP-1 in presence of Y-globulin complex with zinc was lower than in presence of the control protein. Production of MCP-1 in presence of Y-globulin complex with copper was lower than in presence of the control protein and copper ions used alone. During the first 48 hrs of incubation the complex of Y-globulin with copper induced production by PBC of 1.2 times (p<0.001) greater amounts of MCP-1 than the complex with zinc did. Possibility for involvement of the Y-globulin metal complexes formed with copper or zinc ions at the conditions like to the physiological ones in mediating anti-inflammatory properties dealing reduce in production by normal human PBC of monocyte chemoattractant protein MCP-1 was discussed.
Keywords: y-globulin; metal complexes; MCP-1; production.
For citation: Cheknev S.B., Sarycheva M.A., Mezdrokhina A.S., Babayants A.A. The y-globulin metal complexes in regulation of the production by human blood cells of monocyte chemoattractant protein MCP-1. Immunologiya.2016; 37 (3): DOI: 10.18821/0206-4952-2016-37-3-
For correspondence: Cheknev Sergey Borisovich, Dr. med. Sci., Deputy Director on scientific of N.F. Gamaleya epidemiology and Microbiology health Ministry, head lab. intercellular interactions, Moscow, Russia, E-mail: [email protected], ORCID.org/0000-0002-9512-7148
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Funding. The study had no sponsorship.
Received 07.12.15 Accepted 18.02.16
Предшествующими исследованиями обосновано положение о способности белков у-глобулиновой фракции в физиологических условиях хелатировать из периглобулярного пространства катионы металлов и претерпевать в результате конформационные измене-
Для корреспонденции: Чекнев Сергей Борисович, д-р мед. наук, зам. директора по научн. работе ФНИЦ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи МЗ РФ, зав. лаб. межклеточных взаимодействий, Москва, Россия, E-mail: [email protected], orcid.org/0000-0002-9512-7148
ния, первично затрагивающие пространственную упаковку макромолекул в области их Fc-регионов [1, 2].
Вследствие таких конформационных преобразований меняются характеристики взаимодействия модифицированных металлом антител с Fc-рецепторами клеток, что проявляется реализацией новых эффек-торных свойств трансформированных по Fc-региону белков в индукции выработки клетками периферической крови (КПК) человека основных иммуноактив-ных цитокинов и факторов роста [3-11].
Металлокомплексы у-глобулина индуциру-
ют клетки к выработке интерферона-а (ИФН-а) и интерлейкина-1р (^-1Р), определяющих развитие индуктивной фазы иммунного реагирования [4, 6], ИФН-у, ^-2, IL-18 и ¿-10, способствующих поляризации иммуногенеза и реализующих специализированную активность на уровне продуктивной фазы клеточного ответа [3, 5, 9, 10], ^-6, фактора некроза опухоли а (ФНОа), а также факторов роста ГМ-КСФ, Г-КСФ и VEGF, усиливающих провоспалительную составляющую иммунного ответа [7, 8, 11].
В индукции ИФН-а, ИФН-у и раннего ^-2 белковые комплексы с медью выступают усилителями ответа клеток, в то время как «цинковые» металло-комплексы у-глобулина ослабляют выработку цито-кинов [3-5]. Выработка КПК человека ранних ^-1р и ^-6 усиливается белковым комплексом с цинком и ослабляется в присутствии «медного» металлоком-плекса у-глобулина [6, 8]. Продукция ^-18, ФНОа и ^-10 усиливается, а выработка ГМ-КСФ, Г-КСФ и VEGF ослабляется белковыми металлокомплексами, образованными с катионами меди и цинка [7, 9-11]. На активность КПК, вырабатывающих ^-4 и ^-17, трансформированные связыванием катионов металлов у-глобулины влияния не оказывают [10].
Согласно современным представлениям, процессы транспорта и обмена катионов металлов в микроокружении клетки существенно значимы не только в индукции конкретного типа иммунного ответа, включая его моноцитарно-макрофагальное звено [3, 5-10], но также в реализации и контроле других типов реагирования, в частности воспалительных реакций, развивающихся на фоне активной экспрессии факторов роста и хемотаксиса клеток [11-17]. При этом множественность взаимосвязей, реализующихся внутри цитокиновой регуляторной сети, определяет комплексный характер изменения клеточных функций, зависимость динамики воспалительного процесса от реального статуса локального окружения [14, 16, 17].
Известно, что ^-1р, ^-6, ^-18 и ФНОа выступают индукторами или усилителями выработки клетками ^-8 [18-20], которая в определенных условиях реализуется одновременно с продукцией ГМ-КСФ [18] или МСР-1 [16, 17]. Выработка МСР-1 в сочетании с продукцией ^-8 служит одним из ранних маркеров локального воспаления [17, 21] или развивающегося цитокинового шторма [22]. Как и выработка ^-8, синтез и секреция МСР-1 индуцируются, а трансдук-ция сигналов с активированных рецепторов МСР-1 ССИ2 - усиливается в присутствии ^-1р, ИФН-у и ФНОа [17, 23, 24].
Поскольку в отношении выработки КПК человека факторов роста ГМ-КСФ, Г-КСФ и VEGF, вовлекающихся в инициацию и пролонгирование воспаления, металлокомплексы у-глобулина, образованные с катионами меди и цинка, реализуют сходное тормозящее действие, подтверждающее обретение белками вследствие трансформиации катионами металлов, противовоспалительной активности [11], можно полагать, что продукция МСР-1, функционально связанная с выработкой ^-8 и ГМ-КСФ [16-18], тоже будет
ORIGINAL ARTICLE
ослабляться в присутствии белков у-глобулиновой фракции, трансформированных хелатированием катионов металлов.
Цель работы - оценка выработки моноцитарного хемотаксического протеина МСР-1 КПК человека в присутствии металлокомплексов человеческого сывороточного у-глобулина, образованных с катионами меди и цинка.
Материал и методы
Индукцию МСР-1 в суспензиях клеток, полученных разведением проб цельной периферической венозной крови человека (106 клеток в 1 мл), проводили в полной питательной среде, приготовленной на основе среды RPMI-1640 (ООО «ПанЭко», Россия), дополненной 2% плазмы донорской крови, L-глутамином (из комплекта к флакону среды), гентамицином (20 Ед/мл) и гепарином (до 5 Ед/мл), в течение 24, 48 и 72 ч при 37 oC во влажной атмосфере, содержащей 5% СО2. Использовали пластиковые плоскодонные 24-луночные планшеты (Costar).
Образцы модифицированного катионами меди или цинка человеческого сывороточного у-глобулина (исходный препарат - ICN) применяли в конечной концентрации 0,5 мкг/мл. Параллельно оценивали действие контрольных препаратов у-глобулина и солевых растворов меди (водный сульфат, Merc) и цинка (хлорид), содержание катионов в которых соответствовало количеству металла, связавшегося с белком на стадии получения экспериментальных образцов: меди - 1 нг/мл, цинка - 2,5 нг/мл.
В качестве контрольных по меди и цинку использовали у-глобулины, приготовленные из той же порции белка, что и соответствующие опытные (модифицированные), и прошедшие все те же стадии обработки, но не содержащие в растворе солей меди или цинка. Растворы контрольных белков дополняли по объему необходимым количеством 0,15 М NaCl.
Контрольными индукторами выработки МСР-1 служили: вирус болезни Ньюкасла (ВБН) в дозе 10 ЦПД на клетку и фитогемагглютинин Р (ФГА, Difco, 1 мкг/мл).
Содержание МСР-1 в супернатантах, индуцированных КПК, определяли методом ИФА с использованием ELISA Processor II (Behring). Наборы для ИФА (ЗАО «Вектор-Бест», Россия) применяли согласно инструкции фирмы-производителя, с дополнительными технологическими контролями.
Каждый образец полученных супернатантов тестировали в разведениях 1:2 и 1:20 питательной средой RPMI-1640 (Gibco). Каждое разведение каждого образца и всех использованных контролей экспериментальной системы (ВБН, ФГА, нативный у-глобулин, спонтанная продукция МСР-1 КПК) тестировали не менее чем в 2 параллельных лунках микропланшетов.
Металлокомплексы человеческого сывороточного у-глобулина, образованные с катионами меди и цинка, получали по методике, подробно описанной в работе [11]. Полученные и использованные в исследовании
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
комплексы содержали 8 катионов меди и 12 катионов цинка на молекулу белка.
При математической обработке результатов достоверность различия средних величин устанавливали с помощью ¿-критерия Стьюдента.
Результаты и обсуждение
Полученные данные обнаруживают, что в раннем (24 ч инкубации клеток) пуле цитокинов, вырабатываемых в присутствии образцов контрольного и модифицированного катионами меди и цинка у-глобулина, а также катионов металлов, примененных изолированно, содержится от 3,53±0,04 до 7,22±0,03 нг/мл МСР-1 (рис. 1). ФГА индуцировал выработку КПК 11,75±0,19 нг/мл МСР-1; в присутствии ВБН клетки вырабатывали 14,5±0,07 нг/мл МСР-1; спонтанная продукция хе-мокина КПК составляла 4,74±0,11 нг/мл.
Белок, трансформированный связыванием цинка, индуцирует на 22% (р < 0,001) меньше МСР-1, чем контрольный у-глобулин, но на 37% (р < 0,001) больше хемокина, чем катионы цинка, примененные изолированно. Белок, модифицированный связыванием меди, индуцирует на 19% (р < 0,001) меньше МСР-1, чем контрольный у-глобулин, и на 12% (р < 0,01) меньше хемокина, чем катионы меди, примененные изолированно. Одновременно в присутствии метал-локомплекса у-глобулина с медью выработка МСР-1 оказывается в 1,2 раза (р < 0,001) больше, чем в условиях воздействия белка, связавшего катионы цинка (см. рис. 1).
Катионы меди, примененные изолированно, в контрольной дозе 1 нг/мл индуцируют выработку в 1,9 раза (р < 0,001) больших количеств МСР-1, чем контрольные 2,5 нг/мл катионов цинка (см. рис. 1).
6-
4-
2-
6,20
**
Рис. 1. Выработка МСР-1 КПК человека в присутствии металлоком-плексов человеческого сывороточного у-глобулина на 24-й час инкубации (M±m, n = 8).
Здесь и на рис. 2 и 3: по оси ординат - концентрация МСР-1, нг/мл; 1 - контрольный по цинку у-глобулин; 2 - модифицированный цинком у-глобулин; 3 - цинк; 4 - контрольный по меди у-глобулин; 5 - модифицированный медью у-глобулин; 6 - медь; концентрации: 1, 2, 4 и 5 - 0,5 мкг/мл; 3 - 2,5 нг/мл; 6 - 1 нг/мл.; *-р < 0,01; ** -р < 0,001 между показателями, указанными на рисунке.
В течение последующих 24 ч инкубации содержание МСР-1 в культуральной жидкости клеток, инкубированных в присутствии у-глобулина, трансформированного связыванием катионов цинка, и белка, модифицированного катионами меди, снижается в 1,3 раза (р < 0,001).
В результате в пуле цитокинов, вырабатываемых на 48-й час наблюдения, содержится от 3,69±0,08 до 6,13±0,11 нг/мл МСР-1; отмеченные для ранних (24 ч) сроков индукции закономерности выработки хемоки-на принципиально не меняются (рис. 2).
Металлокомплекс у-глобулина с цинком становится в 1,5 раза (р < 0,001) слабее своего белкового контроля; белок, связавший катионы меди, остается на 12-27% (р < 0,001) слабее контрольного у-глобулина и катионов меди, примененных изолированно. Эффекты белкового комплекса с медью в 1,2 раза (р < 0,001) превосходят действие «цинкового» метал-локомплекса у-глобулина (см. рис. 2).
Катионы меди, примененные изолированно, индуцируют выработку в 1,7 раза (р < 0,001) больших количеств МСР-1, чем катионы цинка (см. рис. 2).
ФГА индуцировал выработку КПК 23,75±0,21 нг/мл МСР-1; в присутствии ВБН клетки вырабатывали более 24,16 нг/мл МСР-1; спонтанная продукция хемо-кина КПК составляла 5,25±0,12 нг/мл.
В динамике следующих 24 ч наблюдения (к 72 ч инкубации) показатели выработки МСР-1 в присутствии у-глобулина, трансформированного связыванием цинка, его белкового и катионного контролей, а также катионов меди, примененных изолированно, существенно не меняются. Выработка МСР-1 в присутствии металлокомплекса у-глобулина с катионами меди снижается на 7% (р < 0,05); индукция хемоки-на контрольным по меди белком снижается в 1,3 раза (р < 0,001).
Таким образом, в позднем (72 ч) пуле цитокинов выработка МСР-1 в присутствии металлокомплексов у-глобулина, а также их белковых и катионных кон-
Рис. 2. Выработка МСР-1 КПК человека в присутствии металлокомплексов человеческого сывороточного у-глобулина на 48-й час инкубации (M±m, n = 8).
* -р < 0,001 между показателями, указанными на рисунке.
ORIGINAL ARTICLE
8-1
6-
2-
1 **
I-1
4,87
4,15 4,03
4 5 6
I_I
Рис. 3. Выработка МСР-1 КПК человека в присутствии металлоком-плексов человеческого сывороточного у-глобулина на 72-й час инкубации (M±m, n = 8).
* -р < 0,05; ** -р < 0,01; *** -р < 0,001 между показателями, указанными на рисунке.
тролей составляет от 3,80±0,06 до 6,09±0,22 нг/мл (рис. 3). ФГА и ВБН индуцировали выработку КПК более 23,16 нг/мл МСР-1; спонтанная продукция хе-мокина КПК составляла 5,7±0,21 нг/мл.
В присутствии трансформированного связыванием цинка у-глобулина выработка МСР-1 оказывается в 1,2 раза (р < 0,01) меньше, чем в условиях воздействия контрольного белка. В присутствии «медного» металлокомплекса у-глобулина КПК человека вырабатывали в 1,5 раза (р < 0,001) меньше МСР-1, нежели в условиях воздействия катионов меди, примененных изолированно. Разница в эффектах воздействия белков, трансформированных связыванием катионов меди и цинка, не регистрируется (см. рис. 3).
Катионы меди, примененные изолированно, индуцируют выработку в 1,5 раза (р < 0,001) больших количеств МСР-1, чем катионы цинка (см. рис. 3).
Возвращаясь к данным, представленным на рис. 1, можно увидеть, что моноцитарный хемотаксический протеин МСР-1 в присутствии белков у-глобулиновой фракции, образованных ими с катионами меди и цинка металлокомплексов, а также катионов металлов, примененных изолированно, вырабатывается как хе-мокин раннего ответа с наиболее высоким уровнем продукции на первые 24 ч наблюдения и последующим монотонным снижением содержания в культу-ральной жидкости до поздних сроков реакции (72 ч инкубации клеток). Наиболее выраженное снижение выработки МСР-1 КПК человека в динамике эксперимента отмечено в присутствии контрольного по меди у-глобулина (в 1,9 раза, р < 0,001), «медного» металлокомплекса белка (в 1,4 раза, р < 0,001) и контрольного по цинку у-глобулина (в 1,3 раза, р < 0,001) (см. рис. 1 и 3).
В теории и практике воспаления МСР-1 описан как хемокин, служащий одним из ранних маркеров воспалительного ответа [17, 21]. Экспрессия МСР-1 нарастает при альвеолярном легочном протеинозе [25], у
больных туберкулезом легких - в качестве реакции на микробные стимулы [26], при синовиальном воспалении, вовлекающем клетки хряща суставов у больных ревматоидным артритом - в транскрипцию генов МСР-1 [23], на инициальных стадиях атерогенеза и атеросклероза, связанных с миграцией моноцитов в артериальный субэндотелий [27]. Выработка МСР-1 ассоциирована с продукцией Т-лимфоцитами ^-4 и ^2-поляризацией иммунного ответа [24]; она повышается в условиях развития опосредованных ТЪ2 заболеваний [24], диабета [16], гломерулонефрита [24]. Синтез хемокина индуцируется при злокачественных онкологических процессах [17]; он усиливает инфильтрацию опухолевой ткани макрофагами, что в совокупности с форсирующими эффектами VEGF и ^-8 вызывает ангиогенез, выход опухолевых клеток из сосудистого русла, воспаление и метастазирование [17].
Ранее отмечено, что выработка МСР-1 функционально связана с активностью клеток-продуцентов ^-8 и фактора роста ГМ-КСФ [16-18] и усиливается в присутствии ^-1Р, ИФН-у и ФНОа [17, 23, 24], запускающих индуктивную и обеспечивающих продуктивную фазу иммунного воспаления. Определяя существенную роль МСР-1 в инициации и развитии воспалительных реакций, которым в условиях ате-рогенеза отводят уникальную, определяющую роль [27], ведутся активные исследования, направленные на поиск лекарственных средств, действие которых предполагает ограничение миграции лейкоцитов, в частности антагонистов МСР-1 [27]. Вместе с тем способность МСР-1 усиливать миграцию моноцитов, Т-клеток памяти, МК-клеток и инфильтрацию тканей этими клеточными формами позволяет рассматривать хемокин в качестве потенциального лечебного средства при рассеянном склерозе, ревматоидном артрите, инсулинрезистентном диабете [24].
Белки у-глобулиновой фракции, хелатирующие из периглобулярного пространства катионы меди, ингибируют выработку КПК человека раннего ^-1р [6], а в результате присоединения катионов цинка у-глобулины обретают способность снижать продукцию клетками крови ИФН-у [3]. Связывание катионов как меди, так и цинка переводит Fc-регион белков у-глобулиновой фракции в конформационное состояние, реализация которого в ходе взаимодействия с Fc-рецепторами отвечающих клеток снижает поток внутриклеточных индукционных сигналов, вызывающих выработку факторов роста ГМ-КСФ, Г-КСФ и VEGF, опосредующих выраженное провос-палительное действие [11]. Следовательно, в контроле цитокиновой регуляторной сети металлокомплек-сы у-глобулина выполняют противовоспалительные функции и могут вносить известный вклад в поддержание противовоспалительного состояния локального окружения и системного уровня.
Заключение
Полученные в настоящем исследовании данные свидетельствуют о том, что противовоспалительные
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
эффекты белков у-глобулиновой фракции, трансформированных физиологическим связыванием катионов меди и цинка, реализуются не только посредством контроля выработки цитокинов индуктивной и продуктивной фазы воспаления, а также провос-палительных факторов роста клеток, но и при помощи ключевого провоспалительного хемокина МСР-1, форсирующего миграционные процессы и вовлеченного в развитие широкого спектра воспалительных реакций.
Исследование не имело спонсорской поддержки. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Чекнев С.Б., Ефремова И.Е., Денисова Е.А., Юшковец Е.Н. Им-муноферментный анализ модифицированного катионами металлов у-глобулина на низких концентрациях образцов. Российский иммунологический журнал. 2008; 2 (11), 1: 55-62.
2. Siberil S., Menez R., Jorieux S., de Romeuf C., Bourel D., Fridman W.-H. et al. Effect of zinc on human IgG1 and its FcyR interactions. Immunol. Lett. 2012; 143: 60-9.
3. Чекнев С.Б., Бабаянц А.А., Денисова Е.А. Индукция выработки интерферона конформационно измененными белками у-глобулиновой фракции плазмы крови. Бюл. экспер. биол. 2008;
146 (11): 526-30.
4. Чекнев С.Б., Бабаянц А.А., Ефремова И.Е., Юшковец Е.Н. Обнаружение ИФН-а, вырабатываемого в присутствии белков у-глобулиновой фракции плазмы крови. Бюл. экспер. биол. 2009;
147 (5): 544-8.
5. Чекнев С.Б., Ефремова И.Е., Писковская Л.С., Мездрохина А.С., Юшковец Е.Н., Бабаянц А.А. Металлокомплексы человеческого сывороточного у-глобулина индуцируют выработку раннего IL-2. Российский иммунологический журнал. 2012; 6 (15), 2: 147-54.
6. Чекнев С.Б., Ефремова И.Е., Писковская Л.С., Юшковец Е.Н., Бабаянц А.А. Выработка раннего ИЛ-1Р, индуцированного ме-таллокомплексами человеческого сывороточного у-глобулина. Бюл. экспер. биол. 2012; 154 (9): 326-9.
7. Чекнев С.Б., Ефремова И.Е., Апресова М.А., Бабаянц А.А. Индукция выработки ФНО-а металлокомплексами белков у-глобулиновой фракции, образованными с катионами меди и цинка. Бюл. экспер. биол. 2012; 154 (12): 726-9.
8. Чекнев С.Б., Ефремова И.Е., Мездрохина А.С., Бабаянц А.А. Оценка выработки IL-6 клетками крови человека в присутствии металлокомплексов у-глобулина. Медицинская иммунология. 2012; 14 (6): 483-8.
9. Чекнев С.Б., Апресова М.А., Ефремова И.Е., Бабаянц А.А. Выработка IL-18 в присутствии металлокомплексов у-глобулина. Медицинская иммунология. 2013; 15 (1): 13-20.
10. Чекнев С.Б., Апресова М.А., Ефремова И.Е., Писковская Л.С., Бабаянц А.А. Участие металлокомплексов у-глобулина в регуляции выработки интерлейкина-10. Иммунология. 2013; 34 (4): 189-93.
11. Cheknev S.B., Apresova M.A., Moryakova N.A., Efremova I.E., Mezdrokhina A.S., Piskovskaya L.S., Babayants A.A. Production of the growth factors GM-CSF, G-CSF, and VEGF by human peripheral blood cells induced with metal complexes of human serum y-globulin formed with copper or zinc ions. Mediat. Inflamm. 2014; 2014: art. ID518625.
12. Winchurch R.A. Activation of thymocyte responses to interleukin-1 by zinc. Clin. Immunol. Immunopathol. 1988; 47: 174-80.
13. Mazzatti D.J., Uciechowski P., Hebel S., Engelhardt G., White A.J., Powell J.R. et al. Effects of long-term zinc supplementation and deprivation on gene expression in human THP-1 mononuclear cells. J. Trace Elem. Med. Biol. 2008; 22: 325-36.
14. Cuturi M.C., Anegon I., Sherman F., Loudon R., Clark S.C., Perus-sia B., Trinchieri G. Production of hematopoietic colony-stimulating factors by human natural killer cells. J. Exp. Med. 1989; 169 (2): 569-83.
15. Mallone R., Funaro A., Zubiaur M., Baj G., Ausiello C.M., Tacchetti C. et al. Signaling through CD38 induces NK cell activation. Intern. Immunol. 2001; 13 (4): 397-409.
16. Jain S.K., Rains J.L., Croad J.L. High glucose and ketosis (aceto ac-
etate) increases, and chromium niacinate decreases, IL-6, IL-8, and MCP-1 secretion and oxidative stress in U937 monocytes. Antioxidants Redox Signal. 2007; 9: 1581-90.
17. Li X., Tai H.-H. Activation of thromboxane A2 receptor (TP) increases an expression of monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1)/ chemokine (C-C motif) ligand 2 (CCL2) and recruits macrophages to promote invasion of lung cancer cells. PLoS One. 2013; 8 (1): e54073.
18. Sahoo M., Ceballos-Olvera I., del Barrio L., Re F. Role of the inflam-masome, IL-1ß and IL-18 in bacterial infections. Scientific. World J. 2011; 11: 2037-50.
19. Orjalo A.V., Bhaumik D., Gengler B.K., Scott G.K., Campisi J. Cell surface-bound IL-1a is an upstream regulator of the senescence-associated IL-6/IL-8 cytokine network. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2009; 106 (40): 17 031-6.
20. Schuhmann D., Godoy P., Weiss C., Gerloff A., Singer M.V., Dooley S., Böcker H. Interfering with interferon-y signaling in intestinal epithelial cells: selective inhibition of apoptosis-maintained secretion of anti-inflammatory interleukin-18 binding protein. Clin. Exp. Immunol. 2011; 163 (1): 65-76.
21. Slavic V., Stankovic A., Kamenov B. The role of inlerleukin-8 and monocyte chemotactic protein-1 in rheumatoid arthritis. Facta Uni-versitat. 2005; 12 (1): 19-22.
22. Tisoncik J.R., Korth M.J., Simmons C.P., Farrar J., Martin T.R., Katze M.G. Into the eye of the cytokine storm. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 2012; 76 (1): 16-32.
23. Villiger P.M., Terkeltaub R., Lotz M. Monocyte chemoatractant protein-1 (MCP-1) expression in human articular cartilage. J. Clin. Invest. 1992; 90: 488-96.
24. Deshmane S.L., Kremlev S., Amini S., Sawaya B.E. Monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1): an overview. J. Interferon Cytokine Res. 2009; 29 (6): 313-26.
25. Bonfield T.L., John N., Malur A., Barna B.P., Culver D.A., Kavurn M.S., Thomassen M.J. Elevated monocyte chemotactic proteins 1, 2, and 3 in pulmonary alveolar proteinosis are associated with chemokine receptor suppression. Clin. Immunol. 2005; 114: 79-85.
26. Intemann C.D., Thye T., Förster B., Owusu-Dabo E., Gyapong J., Horstmann R.D., Meyer C.G. MCP1 haplotypes associated with protection from pulmonary tuberculosis. BMC Genet. 2011; 12: art. 34.
27. Gu L., Okada Y., Clinton S.K., Gerard C., Sukhova G.K., Libby P., Rollins B.J. Absence of chemoattractant protein-1 reduces atherosclerosis in low density lipoprotein receptor-deficient mice. Mol. Cell. 1998; 2: 275-81.
REFERENCES
1. Cheknev S.B., Efremova I.E., Denisova E.A., Yushkovets E.N. Immuno-enzyme analysis of the y-globulin which has bound metal ions, at the low samples concentrations. Rossiyskiy immunologicheskiy zhurnal. 2008; 2(11), 1: 55-62. (in Russian)
2. Siberil S., Menez R., Jorieux S., de Romeuf C., Bourel D., Fridman W.-H. et al. Effect of zinc on human IgG1 and its FcyR interactions. Immunol. Lett. 2012; 143: 60-9.
3. Cheknev S.B., Babayants A.A., Denisova E.A. Induction of interferon production by conformation-modified proteins of plasma y-globulin fraction. Byul. eksper. biol. 2008; 146 (11): 591-5. (in Russian)
4. Cheknev S.B., Babayants A.A., Efremova I.E., Yushkovets E.N. Detection of IFN-a produced in the presence of plasma y-globulin fraction proteins. Byul. eksper. biol. 2009; 147 (5): 544-8. (in Russian)
5. Cheknev S.B., Efremova I.E., Piskovskaya L.S., Mezdrokhina A.S., Yushkovets E.N., Babayants A.A. Metal complexes of human serum y-globulin induce production of the early IL-2. Russian Rossiyskiy immunologicheskiy zhurnal. 2012; 6(15), 2: 147-54. (in Russian)
6. Cheknev S.B., Efremova I.E., Piskovskaya L.S., Yushkovets E.N., Babayants A.A. Production of early IL-1ß induced by human serum y-globulin metal complexes. Byul. eksper. biol. 2013; 154 (3): 343-5. (in Russian)
7. Cheknev S.B., Efremova I.E., Apresova M.A., Babayants A.A. Induction of TNF-a production by metal complexes of y-globulin fraction proteins and copper and zinc cations. Byul. eksper. biol. 2012; 154 (12): 726-9. (in Russian)
8. Cheknev S.B., Efremova I.E., Mezdrokhina A.S., Babayants A.A. Evaluation of IL-6 production by human blood cells incubated with metal complexes of y-globulin. Мeditsinskaya immunologiya. 2012; 14 (6): 483-8. (in Russian)
9. Cheknev S.B., Apresova M.A., Efremova I.E., Babayants A.A. Production of IL-18 in presence of metal-y-globulin complexes. Мeditsinskaya immunologiya. 2013; 15 (1): 13-20. (in Russian)
10. Cheknev S.B., Apresova M.A., Efremova I.E., Piskovskaya L.S., Babayants A.A. Involvement of the y-globulin metal complexes in regulation of the interleukin-10 production. Immunologiya. 2013; 34 (4): 189-93. (in Russian)
11. Cheknev S.B., Apresova M.A., Moryakova N.A., Efremova I.E., Mezdrokhina A.S., Piskovskaya L.S., Babayants A.A. Production of the growth factors GM-CSF, G-CSF, and VEGF by human peripheral blood cells induced with metal complexes of human serum y-globulin formed with copper or zinc ions. Mediat. Inflamm. 2014; 2014: art. ID518625.
12. Winchurch R.A. Activation of thymocyte responses to interleukin-1 by zinc. Clin. Immunol. Immunopathol. 1988; 47: 174-80.
13. Mazzatti D.J., Uciechowski P., Hebel S., Engelhardt G., White A.J., Powell J.R. et al. Effects of long-term zinc supplementation and deprivation on gene expression in human THP-1 mononuclear cells. J. Trace Elem. Med Biol. 2008; 22: 325-36.
14. Cuturi M.C., Anegon I., Sherman F., Loudon R., Clark S.C., Perussia B., Trinchieri G. Production of hematopoietic colony-stimulating factors by human natural killer cells. J. Exp. Med 1989; 169 (2): 569-83.
15. Mallone R., Funaro A., Zubiaur M., Baj G., Ausiello C.M., Tacchetti C. et al. Signaling through CD38 induces NK cell activation. Intern. Immunol. 2001; 13 (4): 397-409.
16. Jain S.K., Rains J.L., Croad J.L. High glucose and ketosis (aceto acetate) increases, and chromium niacinate decreases, IL-6, IL-8, and MCP-1 secretion and oxidative stress in U937 monocytes. Antioxidants Redox Signal. 2007; 9: 1581-90.
17. Li X., Tai H.-H. Activation of thromboxane A2 receptor (TP) increases an expression of monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1)/ chemokine (C-C motif) ligand 2 (CCL2) and recruits macrophages to promote invasion of lung cancer cells. PLoS One. 2013; 8 (1): e54073.
18. Sahoo M., Ceballos-Olvera I., del Barrio L., Re F. Role of the inflam-masome, IL-1P and IL-18 in bacterial infections. Scientific. World J. 2011; 11: 2037-50.
ORIGINAL ARTICLE
19. Orjalo A.V., Bhaumik D., Gengler B.K., Scott G.K., Campisi J. Cell surface-bound IL-1a is an upstream regulator of the senescence-associated IL-6/IL-8 cytokine network. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2009; 106 (40): 17 031-6.
20. Schuhmann D., Godoy P., Weiss C., Gerloff A., Singer M.V., Dooley S., Böcker H. Interfering with interferon-y signaling in intestinal epithelial cells: selective inhibition of apoptosis-maintained secretion of anti-inflammatory interleukin-18 binding protein. Clin. Exp. Immunol. 2011; 163 (1): 65-76.
21. Slavic V., Stankovic A., Kamenov B. The role of inlerleukin-8 and monocyte chemotactic protein-1 in rheumatoid arthritis. Facta Universität. 2005; 12 (1): 19-22.
22. Tisoncik J.R., Korth M.J., Simmons C.P., Farrar J., Martin T.R., Katze M.G. Into the eye of the cytokine storm. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 2012; 76 (1): 16-32.
23. Villiger P.M., Terkeltaub R., Lotz M. Monocyte chemoatractant protein-1 (MCP-1) expression in human articular cartilage. J. Clin. Invest. 1992; 90: 488-96.
24. Deshmane S.L., Kremlev S., Amini S., Sawaya B.E. Monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1): an overview. J. Interferon Cytokine Res. 2009; 29 (6): 313-26.
25. Bonfield T.L., John N., Malur A., Barna B.P., Culver D.A., Kavurn M.S., Thomassen M.J. Elevated monocyte chemotactic proteins 1, 2, and 3 in pulmonary alveolar proteinosis are associated with chemokine receptor suppression. Clin. Immunol. 2005; 114: 79-85.
26. Intemann C.D., Thye T., Förster B., Owusu-Dabo E., Gyapong J., Horstmann R.D., Meyer C.G. MCP1 haplotypes associated with protection from pulmonary tuberculosis. BMC Genet. 2011; 12: art. 34.
27. Gu L., Okada Y., Clinton S.K., Gerard C., Sukhova G.K., Libby P., Rollins B.J. Absence of chemoattractant protein-1 reduces atherosclerosis in low density lipoprotein receptor-deficient mice. Mol. Cell. 1998; 2: 275-81.
Поступила 07.12.15 Принята в печать 18.02.16
ЦИТОКИНЫ
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2016 УДК 615.373:578.245].015.44
Шитикова О.Г.1, Шерстобоев Е.Ю.1, Масная Н.В.1, Данилец М.Г.1, Трофимова Е.С.1, Лигачева А.А.1, Мадонов П.Г.2, Киншт Д.Н.2, Ершов К.И.2, Шилова М.А.2
ВЛИЯНИЕ ИММОБИЛИЗИРОВАННОГО ИНТЕРФЕРОНА-а2Ь НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК IN VITRO
1ФГБНУ «Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдбер-га», 634028, г. Томск; 2ЗАО «Сибирский центр фармакологии и биотехнологии», 630056, г Новосибирск
Добавление in vitro иммобилизированного интерферона-а2Ь (иммИФН-а2Ь) в дозах 15, 150 и 1500 МЕ/мл в культуру человеческих мононуклеаров не оказывало существенного влияния на фагоцитоз нейтрофилов, синтез иммуноглобулинов и пролиферативную активность лимфоцитов. При этом препарат сравнения реаферон-ЕС в отдельных дозах снижал пролиферацию лимфоцитов и индекс стимуляции В-клеток. ИммИФН-а2Ь, так же как и препарат сравнения реаферон-ЕС, не влиял на спонтанную и стимулированную продукцию IL-1ß и IL-4, но повышал выработку IL-2, а также иФН-y без дополнительной стимуляции митогеном. ИммИФН-а2Ь более эффективно, чем препарат сравнения реаферон-ЕС, усиливал стимулированную продукцию IL-2. При этом исследуемый препарат снижал функциональную активность естественных киллеров более значительно, чем препарат сравнения - реаферон-ЕС.
К л ю ч е в ы е с л о в а: иммобилизированный интерферон-а2Ь; мононуклеары; естественные киллеры.
Для цитирования: Шитикова О.Г., Шерстобоев Е.Ю., Масная Н.В., Данилец М.Г., Трофимова Е.С., Лигачева А.А., Мадонов П.Г., Киншт Д.Н., Ершов К.И., Шилова М.А. Влияние иммобилизированного интерферона-а2Ь на функциональную активность иммунокомпетентных клеток in vitro. Иммунология. 2016; 37 (3): 155-161. DOI: 10.18821/02064952-2016-37-3-155-161
Для корреспонденции: Шитикова Ольга Геннадьевна, аспирант лаб. иммунофармакологии НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга, E-mail: [email protected]
