CC BY
16
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммунология репродукции Immunology of reproduction
альтерации и поддержании лейкоцитарной инфильтрации в очаге воспаления.
Цель и задачи. Представленная работа посвящена изучению системы «Перекисное окисление липидов — ан-тиоксидантная защита» (ПОЛ-АОЗ) у больных с обострением хронических воспалительных заболеваний матки и придатков.
Материалы и методы. Для исследования было отобрано 124 женщины репродуктивного возраста, экстренно поступивших в гинекологическое отделение с диагнозом обострение хронического эндометрита, сальпингоофорита. Для изучения лейкоцитарной инфильтрации в очаге воспаления проводили аспирационную биопсию эндометрия с помощью маточного шприца Брауна. В окрашенных гематоксилином и эозином микропрепаратах осуществлялся подсчет участков гнойного расплавления (некроза), количества экстраваскулярных нейтрофильных гранулоцитов (НГ), макрофагов, лимфоцитов и фибробластов на 1мм2 среза. Дополнительно учитывали число плазматических клеток, выявляемых окраской по Браше, и объемную плотность коллагеновых волокон, окрашенных по ван Гизон. Уровень продуктов ПОЛ в сыворотке крови определяли спектрофотометрически с раздельной регистрацией липо-пероксидов в гептановой и изопропанольной фазах липид-ного экстракта. Результаты выражали в единицах индексов окисления (е.и.о.) — Е232/Е 220 (относительное содержание диеновых коньюгатов; ДК) и Е278/Е220 (уровень кетодиенов и сопряженных триенов; КД и СТ). Дополнительно проводилась оценка состояния антиоксидантной защиты (АОЗ), о котором судили по содержанию а-токоферола (а-ТК) и церулоплазмина (ЦП) в сыворотке крови. Статистический анализ выполнен с использованием пакета прикладных программ SPSS-17.0.
Результаты. Анализ исходного состояния больных с обострением ХВЗМП, включенных в исследование, выявил наличие очагов гнойного расплавления в биоптатах эндометрия, более чем 10-кратное превышение нормальных значений его нейтрофильной инфильтрации и заметное увеличение числа экстраваскулярных макрофагов (на 21-29%), лимфоцитов (на 16-18%) и фибробластов (на 33-45%). Одновременно в сыворотке крови пациенток наблюдалось повышение уровня продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) относительно средних значений нормы. Средние показатели содержания церулоплаз-мина (ЦП) в сыворотке крови укладывались в пределы нормального диапазона, а концентрация циркулирующего а-токоферола (а-ТК) соответствовала нижней границе нормы.
Заключение. Полученные данные свидетельствуют о формирование дисбаланса в системе «ПОЛ-АОЗ» крови на фоне лейкоцитарной инфильтрации эндометрия при обострении ХВЗМП. Корреляционный анализ продемонстрировал роль относительного дефицита АОЗ в накоплении циркулирующих продуктов ПОЛ. Это проявилось отрицательной корреляцией между концентрацией а-ТК и уровнем изопропанолрастворимых диеновых конъюгат (ДК) (г8 = -0,28; Р = 0,002).
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 16-34-60094 мол_а_дк.
МАРКЕРЫ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ И МЕДИАТОРЫ ВОСПАЛЕНИЯ У НОВОРОЖДЕННЫХ ОТ ЖЕНЩИН С ГИПЕРТЕНЗИВНЫМИ НАРУШЕНИЯМИ
Ремизова И.И., Чистякова Г.Н., Бычкова С.В., Устьянцева Л.С., Шамова К.П.
ФГБУ«Научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества» Министерства здравоохранения РФ, Екатеринбург, Россия
Повышение артериального давления у беременных оказывает непосредственное влияние на формирование основных систем гомеостаза плода и новорожденного, а также в ряде случаев является фактором, программирующим развитие различных патологических состояний в последующие периоды жизни ребенка. В связи с этим, особый интерес представляет изучение влияния гипер-тензивных состояний в период беременности на функциональную активность эндотелия у новорожденных.
Цель. Оценить функциональную активность эндотелия и продукцию провоспалительных и регуляторных медиаторов у детей от женщин с хронической артериальной гипертензией и пациенток с преэклампсией тяжелой степени.
Материалы и методы. Проведено иммунологическое обследование 67 детей, рожденных от женщин с гипер-тензивными нарушениями, из них: 1-я группа — 31 новорожденный от женщин с хронической артериальной гипертензией (ХАГ), 2-я группа — 36 детей от пациенток с преэклампсией тяжелой степени. Группу сравнения (3-ю) составили 27 новорожденных от женщин, беременность которых протекала без признаков артериальной ги-пертензии и закончилась рождением живых доношенных детей. Методом иммуноферментного анализа определяли в пуповинной крови содержание провоспалительных и регуляторных цитокинов, (IL-1ß, TNFa, IL-4, IL-10,), концентрацию С-реактивного протеина (CRP) и маркеров эндотелиальной дисфункции (эндотелина-1 — ЭТ-1, стабильных метаболитов оксида азота, гомоцистеина).
Результаты. При сравнительном анализе пуповинной крови, у детей, родившихся от женщин с ХАГ, уровень эндотелина-1 не отличался от показателей группы сравнения, а концентрация общего нитрита и нитрата была достоверно выше, содержание эндогенного NO2- статистически значимо снижено. У новорожденных от женщин с преэклампсией, отмечалось повышение уровня эн-дотелина-1 (0,42 (0,14-0,56) против 0,11 (0,03-0,21) и 0,09 (0,07-0,3) фмоль/мл, Р1 2 23 = 0,0001). Значимых различий в содержании стабильных метаболитов оксида азота, не выявлено (NO2- - общий - 7,75 (5,95-11,48) против 11,69 (8,1-16,26) и 6,81 (5,56-10,08), Pt 3, = 0,010; NO2- - эндогенный - 0,6 (0,15-1,93) против 0,10 (0,04-0,99) и 0,6 (0,172,38) мкмоль/л в 1-й и 3-й группах, Pj 3 = 0,010; NO3 - 7,02 (5,06-10,42) против 10,58 (7,28-16,18!) и 6,84 (6,01-10,3) мкмоль/л в 1-й и 3-й группах, Р12 = 0,04, Pj 3 = 0,001 в 1-й и 3-й группах).
Это свидетельствует об отсутствии положительного ва-зодилатационного эффекта на эндотелий сосудов, в отличие у детей 1-й группы, уровень эндотелина-1, у которых не отличался от показателей группы сравнения. Необходимо отметить, что концентрация гомоцистеина, одного из маркеров эндотелиальной дисфункции, у новорожденных 2-й группы статистически значимо превышала аналогичные параметры детей 1-й и 3-й групп (8,76 (5,59-11,07) против 7,49 (5,54-7,72) и 6,81 (2,47-7,54) мкмоль/л, Р1-2,
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
2-3 = 0,010). Изменение показателей функциональной активности эндотелия, выявленное у новорожденных основных групп, сопровождалось нарушением синтеза про-воспалительных цитокинов, что может быть обусловлено, как проникновением активированных моноцитов матери в кровоток плода, так и развитием фетального воспалительного ответа. Повышение уровня TNFa, наблюдаемое у всех новорожденных от женщин с гипертензивной патологией (48,27 (24,81-49,58), 33,04 (24,2-39,9) против 21,41 (13,97-25,18) пг/мл в 3-й группе, р = 0,0001), сопровождалось при развитии у матери преэклампсии увеличением концентрации IL-1ß - 1,85 (0,93-3,44) против 0,86 (0,671,14) пг/мл, Р1 2 2 3 = 0,010; CRP - 0,23 (0,10-0,25) против 0,10 (0,05-0,11) мг/л, Р1 2 2 3 = 0,010; IL-4 - (1,74 (1,57-3,8) против 1,55 (1,48-4,86) пг/мл, Р12 = 0,010, Р13 = 0,017), IL-10 (4,53 (3,96-9,14) против 4,06 (3,82-4,92) пг/мл, Р23 = 0,010). Полученные результаты указывают на возможный переход цитокинов через плаценту и проникновении в фетальную циркуляцию и наоборот. У детей 1-й группы значимых различий в содержании данных медиаторов не обнаружено. Выявленные у детей от женщин с преэклампсией положительные корреляционные связи между CRP и NO2- — эндогенным, а также эндотели-ном-1, отрицательные корреляции между гомоцистеином и NO2- — общим и NO2- эндогенным, позволяют предположить, что одним из неблагоприятных факторов развития эндотелиопатии у этих детей является оксидативный стресс. Таким образом, повышение артериального давления во время беременности, способствует активации эндотелиальных клеток у плода, более выраженной при наличии у матери преэклампсии, что обуславливает высокую частоту развития перинатальной патологии у новорожденных. Определение уровня гомоцистеина и CRP в пуповинной крови может служить дополнительным прогностическим критерием развития патологических состояний у детей в раннем периоде адаптации.
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ И ПРОГНОСТИЧЕСКИЕ КРИТЕРИИ ИНФЕКЦИОННО-ВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ ПАТОЛОГИИ, ЕЕ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ И ИСХОДА У ГЛУБОКОНЕДОНОШЕННЫХ НОВОРОЖДЕННЫХ
Сотникова Н.Ю., Турова А.В., Чаша Т.В.
ФГБУ«Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В.Н. Городкова» Министерства здравоохранения РФ, Иваново, Россия
Введение. Проблема выхаживания глубоко-недоношенных новорожденных во многом определяется неэффективностью реакций врожденного иммунитета.Недо-ношенные дети крайне чувствительны к инфекции, что является важным фактором, определяющим их высокую смертность и заболеваемость. Все это требует разработки-новых критериев оценки состояния иммунной системы ребенка, позволяющих в самые первые дни жизни прогнозировать развитие инфекционно-воспалительной патологии (ИВП), степень ее тяжести и исход.
Цель. Выявить наиболее значимые иммунологические критерии ранней диагностики ИВП, прогностические критерии ее тяжести и исхода заболевания у глубоконедоношенных новорожденных с очень низкой (ОНМТ от 500 до 1000 г) и экстремально-низкой (ЭНМТ менее 500 г) массой тела при рождении.
Материалы и методы. Проводилось обследование 74 недоношенных новорожденных 32 недель гестации
с ОНМТ и ЭНМТ Из них 18 детей не имели ИВП, у 56 детей имели ИВП (27 — легкой/средней степени, 29 тяжелой степени, 50 — с локальной ИВП, 6 — с генерализованной ИВП). Выздоровели 38 детей, 10 детей умерли и у 8 детей развилась бронхо-легочная дисплазия (БЛД).
В 1-2 день жизни определяли: показатели общего анализа крови; сывороточный уровень прокальцитони-на (ПКТ) и С-реактивного белка (СРБ). Методом проточной цитофлуориметрии в периферической крови в нейтрофильном(Нф) (CD14-CD45+) и моноцитарном (Мо) (CD14+CD45+) гейтах определяли относительное содержание TLR2+, TLR4+, CD16+, CD11b+, HLA-DR+ клеток, в макрофагальном гейте (Мф) (CD14+CD45+) фарингеального аспирата — относительное содержание TLR-2+, TLR-4+ клеток.
Результаты. Для всех новорожденных с ИВП независимо от степени тяжести и исхода ИВП было характерным снижение уровня сегменто-ядерных Нф, TLR4+ Мо, TLR+ и TLR4+ Мф, максимально выраженное в группе умерших детей, и не проявляющееся при генерализованной ИВП. В общей группе детей с ИВП отмечалось повышение уровня моноцитов, ПКТ и СРБ в крови, а также снижение содержания CD16+ Нф. При летальном исходе ИВП имелось снижение содержания HLA-DR+ Мо, TLR4+ Мо относительно показателей выздоровевших детей. При развившейся впоследствии БЛД исследуемые показатели в периферической крови в наименьшей степени отличались от таковых в группе без ИВП. При тяжелой степени ИВП отмечались наибольшие средние значения содержания ПКТ и СРБ. Корреляционный анализ показал, что при благоприятном исходе ИВП имелось максимальное количество положительных связей между исследуемыми показателями (22) по сравнению с группой умерших детей (8). ROC-анализ выявил наиболее значимые критерии ранней диагностики ИВП у новорожденных с ОНМТ и ЭНМТ относительное содержание < 75% и TLR4+ < 73% Мф в фарингеальном аспирате (АиС = 0,710 и АиС = 0,704), TLR4+ < 85% Мов крови (АиС = 0,704). К прогностическим критериям неблагоприятного (летального) исхода ИВП следует отнести содержание HLA-DR+ < 75% и TLR4+ < 72% Мо в крови (АиС = 0,946 и АиС = 0,765).
Заключение. Таким образом, низкая патоген-распоз-нающая способность фагоцитов периферической крови и фарингеального аспирата ассоциируется в группе глубоко-недоношенных новорожденных с развитием ИВП, что, вероятно, определяет нарушение каскада инфекционно-воспалительных реакций, направленных на блокирование жизнедеятельности, дезинтеграцию и удаление патогена из организма. Неблагоприятный исход ИВП ассоциируется с максимально выраженным угнетением этой функции периферических и фаринге-альныхфагоцитов.
РЕГУЛЯЦИЯ ПРОЛИФЕРАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ КЛЕТОК ЛЕЙОМИОМЫ МАТКИ
Сотникова Н.Ю., Воронин Д.Н., Кирсанов А.Н.
ФГБУ «Ивановский НИИ материнства и детстваим.В.Н. Городкова» Министерства здравоохранения РФ, Иваново, Россия
Введение. Лейомиома матки является одним из наиболее распространённых гинекологических заболеваний. Она представляет собой доброкачественную гормональ-
