Научная статья на тему 'Лимфоциты периферической крови пациентов с ишемической болезнью сердца: структурно-функциональные особенности'

Лимфоциты периферической крови пациентов с ишемической болезнью сердца: структурно-функциональные особенности Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
352
62
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ТИ В-КЛЕТОЧНОГО ЗВЕНО ИММУНИТЕТА / ИШЕМИЧЕСКАЯ БОЛЕЗНЬ СЕРДЦА / ISCHEMIC HEART DISEASE / ПРОТОЧНАЯ ЦИТОМЕТРИЯ / FLOW CYTOMETRY / КОМПЬЮТЕРНАЯ МОРФОДЕНСИТО-МЕТРИЯ / ИНТЕРФАЗНЫЙ ХРОМАТИН / INTERPHASE CHROMATIN / TAND B-LYMPHOCYTE / COMPUTERIZED MORPHODENSITOMETRY

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Тепляков А. И., Акулич Н. В., Кручинский Н. Г.

Проведен анализ Ти В-клеточного звена системы иммунитета больных ишемической болезнью сердца (ИБС) методами проточной цитометрии, компьютерной морфоденситометрии. Доказано участие лимфоцитов периферической крови в патогенезе ишемической болезни сердца. Выявлены фенотипические особенности лимфоцитов крови и структурно-функциональные различия интерфазного хроматина Ти В-лимфоцитов у больных с ИБС.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Тепляков А. И., Акулич Н. В., Кручинский Н. Г.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Structure functional characteristic of lymphocyte ischemic hearth disease patients

Tand B-lymphocyte chain of immunity system of ischemic hearth disease patients were investigated by flow cytometry and computerized morphodensitometry methods. Peripheral blood lymphocyte is proved to participate in ischemic heart disease pathogenesis. Phenotypi c characteristic of patient's lymphocytes and structure functional distinctions of interphase chromatin of Tand B-lymphocytes of ischemic heart disease patients are revealed.

Текст научной работы на тему «Лимфоциты периферической крови пациентов с ишемической болезнью сердца: структурно-функциональные особенности»

ложки. Эти области представляют собой скопления наиболее ранних незрелых клеток-предшественников гемопоэза и соответствуют очагам активного кроветворения in vivo. Всего было прослежено в динамике 6 совместных культур. Во всех культурах «зоны булыжной мостовой» появлялись на 2-й неделе совместного культивирования МСК и ГСК и сохранялись до 4-й недели культивирования.

Наличие большего числа «зон булыжной мостовой» в смешанной культуре позволяет предварительно выбрать наиболее пригодную для формирования сложного трансплантата культуру МСК. Что касается количества предварительных пассажей МСК, то предпочтительным представляется выбор клеток 2-го пассажа.

Таким образом, на моделях in vitro была проведена оценка способности МСК из жировой ткани человека поддерживать кроветворение, в том числе

за счет продукции таких ростовых факторов, как б!САМ-1 и ИЛ-3.

За период исследования было подготовлено 10 аллогенных трансплантатов МСК ЖТ для терапии онкогематологи-ческих больных с верифицированным диагнозом, стандартом лечения которого является аллогенная трансплантация ге-мопотоэтических стволовых клеток.

Выводы:

1. Продолжительность культивирования эффективного трансплантата МСК ЖТ для клинического применения составляет в среднем 48 дней, оптимальным является применение клеток в Р1—Р3.

2. Установлено, что посевная концентрация мононуклеаров статистически достоверно не влияет на клеточность МСК в первичной культуре.

3. Максимальное значение концентраций в!САМ-1 и ИЛ-3 в супернатантах культур приходится на 3-ю неделю культивирования, что по срокам совпадает с

появлением очагов кроветворения in vitro (cobble stone areas).

Л И Т Е Р А Т У Р А

1. Инструкция о порядке проведения тандемной аллогенной трансплантации гемопоэтических и ме-зенхимальных стволовых клеток у взрослых: утв. МЗ РБ. - Минск: Дикта, 2010. - 25 с.

2. Ball L.M. et al. // Blood. - 2007. - Vol.110, N7. -P.2764-2767.

3. Maitra B. et al. // Bone Marrow Transplantation. -2004. - Vol.33. - Р.597-604.

4. MajumdarM. et al. // J. Hematother Stem Cell Res. -2001. - Vol.9. - P.841-848.

5. Muguruma Yet al. // Blood. - 2006. - Vol.107, N5. -P.1878-1887.

6. Schaffler A., Buchler C. // Stem Cells. - 2007. -Vol.4. - P.818-827.

7. Talens-Visconti R. et al. // World J. Gastroenterol. -2006. - Vol.28, N12(36). - P.5834-5845.

8. YanezR. et al. // Stem Cells. - 2006. - Vol.24, N11. -Р.2582-2591.

9. Zhu Y'et al. // Cell Research. - 2008. - Vol.18. - Р.165.

10. ZukP.A. et al. // Mol. Biol. Cell. - 2002. - Vol.13. -P.4279-4295.

11. Zuk P.A. et al. // Tissue Engineering. - 2001. -Vol.7, N2. - P.211-28.

Поступила 26.03.2012 г.

Лимфоциты периферической крови пациентов с ишемической болезнью сердца: структурно-функциональные особенности

|Тепляков А.И.1, I Акулич Н.В.1, Кручинский Н.Г.2

1Могилевский государственный университет им. А.А. Кулешова 2Белорусская медицинская академия последипломного образования, Минск

I Tepljakov A.I.MAkulich N.V.1, Kruchinsky N.G.2

1 Mogilev State A.Kuleshov University, Belarus 2Belarusian Medical Academy of Post-Graduate Education, Minsk

Structure functional characteristic of lymphocyte ischemic hearth disease patients

Резюме: Проведен анализ Т- и В-клеточного звена системы иммунитета больных ишемической болезнью сердца (ИБС) методами проточной цитометрии, компьютерной морфоденситометрии. Доказано участие лимфоцитов периферической крови в патогенезе ишемической болезни сердца. Выявлены фенотипические особенности лимфоцитов крови и структурно-функциональные различия интерфазного хроматина Т- и В-лимфоцитов у больных с ИБС.

Ключевые слова: Т- и В-клеточного звено иммунитета, ишемическая болезнь сердца, проточная цитометрия, компьютерная морфоденсито-метрия, интерфазный хроматин.

Summary: T- and B-lymphocyte chain of immunity system of ischemic health disease patients were investigated by flow cytometry and computerized morphodensitometry methods. Peripheral blood lymphocyte is proved to participate in ischemic heart disease pathogenesis. Phenotypic characteristic of patient's lymphocytes and structure functional distinctions of interphase chromatin of T- and B-lymphocytes of ischemic heart disease patients are revealed.

Keywords: T- and B-lymphocyte, ischemic heart disease, flow cytometry, computerized morphodensitometry, interphase chromatin.

Ишемическая болезнь сердца (ИБС) - острое или хроническое поражение сердца, причиной которого является уменьшение или полное прекращение доставки крови к миокарду в связи с атеросклеротическим процессом в коронарных артериях, что на-

рушает равновесие между коронарным кровотоком и потребностями миокарда в кислороде [9]. Ишемия миокарда при ИБС развивается в результате фиксированного атеросклеротической бляшкой сужения просвета сосуда и ограничения притока крови к миокарду. Однако

недавние исследования показали, что снижение кровотока происходит в результате комбинации стеноза сосуда и ненормального сосудистого тонуса, обусловленного атеросклеротической дисфункцией эндотелиальных клеток [14, 16].

Предпосылками к проведению настоящего исследования стали полученные нами в течение более 10 лет данные, когда у больных с верифицированным диагнозом ишемическая болезнь сердца поэтапно были выявлены рост уровня провоспалительных цитокинов и молекул клеточной адгезии [1, 2, 5-8, 10-12, 15, 17, 18, 22], закономерные изменения интерфазного хроматина лимфоцитов, изменение характера ответа иммунокомпетентных клеток (ИКК) на тромбоцитарный и трансформирующий факторы роста, от баланса которых во многом зависит скорость развития ате-рогенеза [1-4].

Активация ИКК в большинстве случаев приводит к иммунному ответу, или воспалительной реакции, которой дебютируют многие заболевания. Так, нарушение ламинарного кровотока в артериях вызывает нарушение образования в эндотелио-цитах азота оксида, что в свою очередь способствует повышению активности фактора NFkB и увеличению количества адгезивных молекул и хемоаттрактантного протеина-1 для моноцитов [9].

Предполагается что Т-лимфоциты, основные участники клеточного звена системы иммунитета, также играют важную роль на ранних стадиях развития атеросклероза, поскольку внутри атероматоз-ной бляшки обнаружены Т-клетки [9]. Согласно схеме Hanson (2001), Т-хелперы 1-го типа выделяют провоспалительные цитокины (у-интерферон, ИЛ-1, ФНО а) [1б]. Эти цитокины способствуют развитию воспаления эндотелия путем активации эндотелиоцитов, макрофагов, стимуляции продукции свободных радикалов, протеолитических ферментов и значительного повышения прокоагулянт-ной активности.

Субпопуляция Т-лимфоцитов -Т-хелперы-2, напротив, продуцируют цитокины, обладающие противовоспалительным эффектом (интерлейкины-4 и 10), а также трансформирующий фактор роста р. Эти вещества стимулируют пролиферацию гладкомышечных клеток, развитие фиброза, усиливают процессы заживления. Таким образом, степень активности бляшки, ее стабильность или нестабильность зависят от взаимоотношений Т-хелперов 1-го и 2-го типов и цитокинов, ими выделяемых. Не менее значимую роль играет количество, процент субпопуляций и функциональное состояние Т-лимфоцитов.

Поскольку нами уже было показано, что TGFp1 оказывал дозозависимое

влияние на структурно-функциональное состояние хроматина лимфоцитов пациентов с различными клиническими вариантами течения атеросклероза [4], а активация Т-регуляторных лимфоцитов (Treg) субпопуляции иммунокомпетентных клеток может ослаблять иммунный ответ [14], то логично предположить, что функциональное состояние отдельных субпопуляций лимфоцитов, определяющее тип хелперных реакций, будет иметь определенное значение в патогенезе ишемиче-ской болезни сердца.

Цель исследования - анализ Т- и В-клеточного звена системы иммунитета больных с ишемической болезнью сердца.

Материалы и методы

Под наблюдением находились 35 больных мужского пола (54,3±1,8 года) с ИБС, стенокардией напряжения II-III функционального класса, находившихся на лечении в Могилевской областной больнице. Диагноз ИБС и функциональный класс степени ишемии верифицированы на основании клинической картины заболевания, анамнеза, а также результатов инструментальных методов обследования. Контрольную группу составляли здоровые добровольцы мужского пола (15 чел., возраст 44,5±3,2 года).

Методы исследования: морфоденси-тометрия и проточная цитометрия. Предмет морфоденситометрического (МДМ) исследования: интерфазный хроматин (ИХ) лимфоцитов, разделенный при помощи методов матморфологии на 4 компоненты. Две из них были отнесены к компактному, плотному или конденсированному (гетерохроматину), две - к диффузному, рыхлому или деконденсиро-ванному (эухроматин). Наиболее темная, гранулярная, компонента гетерохрома-тина обозначена ql; светлая компонента гетерохроматина, так называемая пери-гранулярная зона, - q2; наиболее светлая компонента эухроматина - q4, промежуточная между q2 и q4 - компонента q3. Результаты получены с помощью системы анализа изображения, состоящей из микроскопа Axio Imager A1, камеры AxioCam MRc5, компьютерных аналитических программ «Диаморф-ЦИТО» (ДиаМорф, Россия) и ImageJ (National Institutes of Health, США) [1-3, 13].

Для морфоденситометрии Т- и В-лим-фоцитов венозной крови центрифугированием получали фракцию мононуклеа-ров на градиенте плотности Ficoll-Paque с последующей магнитной сепарацией субпопуляций Т- и В-лимфоцитов с использованием магнитных частиц

Dynabeads, конъюгированных с монокло-нальными антителами CD3 и CD19 [2].

Проточная цитометрия реализована на цитофлуориметре Cell Lab Quanta SC (Beckman Coulter, США) по протоколам фирмы производителя. Для корректного исключения из зоны анализа всех частиц, которые не соответствовали по размерам и гранулярности живым лимфоцитам, вводили необходимые логические ограничения в гистограммы распределения частиц по размеру, боковому светорассеянию и CD45.

Для окрашивания клеток использовали панель моноклональных антител, меченых FITC (изотиоцианат флуоресцеи-на), PE (фикоэритрин), PC5 (комплекс PE с цианином-5): CD3, CD4, CD8, CD19, CD25, CD45 и CD62P (Beckman Coulter). Для удаления эритроцитов пробоподготовку проводили по безот-мывочной технологии с использованием следующих лизирующих растворов: OptiLyse C, ImmunoPrep (Beckman Coulter, США).

Математическую обработку цитоме-трических данных проводили при помощи программ Summit 5.0 (Beckman Coulter). Статистический анализ проводился с использованием непараметрических методов (тест Вальда-Вольфовица) [10].

Результаты и обсуждение

На первом этапе была проведена позитивная и негативная магнитная сепарация клеток крови при помощи по-листирольных магнитных частиц, имеющих участки, образующие комплекс «антиген - антитело» с молекулами главного комплекса гистосовместимо-сти лимфоцитов. При выделении Т- и В-лимфоцитов удалось добиться высокой чистоты выделенной популяции при сохранении высокой жизнеспособности лимфоцитов, поскольку количество «мертвых» клеток находилось в пределах 0,5%, что соответствует уровню фона.

На втором этапе был проведен МДМ анализ Т- и В-лимфоцитов периферической крови, полученных при помощи магнитной сепарации (табл. 1). Полученные результаты свидетельствует о том, что Т-лимфоциты больных атеросклерозом имеют большую изрезанность как ядер, так и гетеро- и эухроматина и меньшую оптическую плотность, что свидетельствует о меньшей компактизации ДНК и указывает на активацию Т-клеточного звена иммунитета у больных ишемиче-ской болезнью сердца. Подобная тенденция, но в меньшей степени, характерна и для В-лимфоцитов.

Таблица 1 Морфоденситометрические параметры интерфазного хроматина лимфоцитов периферической крови (X ±а)

Параметр Контроль Основная группа

Т-лимфоциты В-лимфоциты Т-лимфоциты В-лимфоциты

Площадь ядра, мкм2 42,42± 2,54** 50,14±3,44 58,31±3,52* 58,27±3,11

Оптическая плотность ядра, у.е. 1,59±0,29 1,83±0,25 0,93±0,35* 1,01 ±0,42*

Изрезанность ядра 0,58±0,21 0,54±0,11 0,60±0,15* ** 0,50±0,26*

Доля мкм2 1,67±0,10 1,99±0,81 1,75±0,42 ** 1,92±0,42

Доля мкм2 4,47±0,17** 3,44±0,83 3,50±0,97* ** 3,85±0,72*

Доля мкм2 3,83±0,27 4,11±1,55 5,53±2,61* ** 4,53±3,14*

Изрезанность у.е. 3,91±0,23 3,77±0,38 4,08±0,72 3,84±0,66

Изрезанность у.е. 6,98±0,42** 6,22±1,55 8,03±2,21* ** 7,92±1,96*

Изрезанность р4, у.е. 3,34±0,49 3,99±0,87 4,80±0,28* ** 4,62±0,88*

Гетерохроматин/ Эухроматин. у.е. 2,07±0,22 1,81±0,30 1,68±0,13* ** 1,12±0,31*

* - достоверное различие между однотипными лимфоцитами разных групп; ** - достоверное различие между Т-и В-лимфоцитами (Вальд-Вольфовиц)

В предыдущих исследованиях нами также были отмечены признаки увеличения транскрипционной активности лимфоцитов [2]. Однако ранее мы не дифференцировали лимфоциты на Т- и В-субпопуляции, считая, что к Т-лимфоцитам относится порядка 70% мононуклеаров и полученные данные, касающиеся оптической плотности и морфологических характеристик ядер, можно относить ко всей популяции лимфоцитов.

Метод магнитной сепарации клеток крови позволил существенно уменьшить вариацию исследуемых признаков и тем самым увеличить точность проводимых измерений.

Таким образом, выявленные изменения в морфоденситометрических параметрах Т- и В-лимфоцитов у больных с ИБС, с одной стороны, совпадают с полученными нами ранее данными, а с другой - доказывают вовлечение Т-лимфоцитов в прогрессирование атеро-склеротического процесса.

Выявленные различия между Т- и В-лимфоцитами вызвали необходимость проведения дальнейших исследований для оценки вклада известных на сегодня как минимум двух субпопуляций Т-лимфоцитов в процессы атерогенеза. Поэтому на третьем этапе настоящего исследования были проанализированы особенности фенотипа лейкоцитов периферической крови больных с ИБС (табл. 2).

В результате выполнения этой части нашего исследования установлено, что

как в контрольной, так и в основной группе пациентов содержание В-лимфоцитов с фенотипом CD45+, CD3+, CD19+ находилось в пределах диапазона нормы (1060-2460x10® мкм3).

Количество Т-лимфоцитов в обеих группах также соответствовало уровню нормы (2024,02±99,65 и 1539,01 ±87,15 в контрольной и основной группах соответственно), однако в контрольной группе уровень Т-лимфоцитов был ближе к верхней, а в основной - к нижней границе нормы и был достоверно (« на 31%) ниже.

Уровень Т-цитотоксических клеток (708,32±56,32 и 738,72±45,98 в контрольной и основной группах соответственно) также соответствовал нормальным значениями. Индекс соотношения Т-хелперы №3+, CD4+)/ Т цитотоксические №+, CD8+) в основной группе был ниже нормы и составлял 1,08±0,15. В группе контроля этот индекс находился на уровне нормы и был равен 1,86±0,21х106 мкм3. Абсолютное количество и процентное соотношение регуляторных Т-лимфоцитов составляло 95,12±11,23 и 6,03±2,03 и 4,69 и 0,40 для контрольной и основной групп соответственно.

В-звено иммунной системы характеризовалось как соответствующее норме, поскольку абсолютное количество В-клеток №3", CD19+) в основной и контрольной группах (соответственно 259,11±32,66 и 288,16±45,44) не выходило за пределы границ нормы.

Таким образом, у больных с ИБС выявлена дизрегуляция иммунной системы

с признаками депрессии Т-клеточного звена иммунитета. Известно, что лимфоциты атеросклеротических бляшек в большинстве своем представлены Т-хелперами с фенотипом CD3+CD4+ [19]. Этот подкласс лимфоцитов секре-тирует IFN-Y, 11:2, TNFa и -р, которые приводят к активации макрофагов, сосудистой активации и воспалению, т.е. именно к тем процессам, которые и лежат в основе иммунного компонента атерогенеза. Кроме того, полагают, что IFN-Y ответствен в том числе за дестабилизацию бляшки посредством уменьшения фиброзного утолщения [9].

Атеросклеротическое поражение сосудов различных локализаций - одна из ведущих причин заболеваемости и смертности в развитых странах мира. В последние годы акцент в изучении патогенеза атеросклероза смещается от классических представлений, связанных с нарушением липидного обмена и изменениями липидтранспортных систем, к разработке гипотезы, согласно которой атеросклеро-тическое поражение представляет собой пролиферативный процесс.

А.И.Тепляков первым в нашей республике начал разработку этой гипотезы [10-12, 15, 17, 18, 22]. Под руководством В.А.Остапенко и в соавторстве с Н.Г.Кручинским была разработана технология, позволяющая проводить диагностику раннего и осложненного атеросклероза [5, 8]. В ее основе лежала, во-первых, оценка агрегатограмм с широким спектром индукторов (АДФ, адреналин и ристоцетин) с последующим

Таблица 2 Содержание основных субпопуляций лимфоцитов периферической крови ( х ±ст)

Субпопуляции лимфоцитов Контрольная группа Основная группа

Лимфоциты CD45+, CD3+, CD19+ х106 мкм3 2712,49±124,22 2057.23±98.23*

Т-клетки CD3+,CD19" 2024,02±99,65 1539.01±87.15*

Т хелперы CD3+,CD4+ 1315,72±77,25 800.29±45.35*

Т цитотоксические CD3+,CD8+ 708,32±56,32 738.72±45.98

В-клетки (CD3-, CD19+) 288,16±45,44 259.11±32.66*

Т-регуляторные (CD4+CD25+) 95,12±11,23 6.03±2.03*

Т-регуляторные (CD4+CD25+), % 4.69 0,40*

Индекс соотношения CD4+/CD8+ (у.е.) 1.86±0.21 1,08±0,15*

* - достоверное различие между группами (Вальд-Вольфовиц)

анализом первичной агрегации, степени первичной и необратимой агрегации, оценкой фазы секреции. Оценка агре-гатограмм позволяла провести анализ в системе «тромбоцит - тромбоцит» (го-мотипическая адгезия) и «тромбоцит -субстрат» (гетеротипическая адгезия типа «клетка - субстрат» - «тромбоцит -фактор Виллебранда»). В итоге в нашем распоряжении была характеристика го-меостазиологического равновесия пациентов с ИБС.

Вторым компонентом технологии являлась оценка коагуляционного гемостаза с предпочтительной оценкой активности факторов коагуляционного каскада (!!, V, V!!!, IX, X и X!!), превышающей в случае гиперкоагуляции предел калибровочной кривой (активность > 200%). На следующем этапе оценивались структурно-функциональные характеристики тромбоцитов, основные проатерогенные цитокины (!Нр, !1=6) и маркёры активации сосудистой стенки (1САМ-1, VCAM-1). Все вышеизложенное позволяло удовлетворительно проводить оценку степени атеросклеротического повреждения сосудов сердца и мозга клиническому подразделению Института экологической и профессиональной патологии, но научная его часть поставила своей целью провести оценку роли лимфоцитов в патогенезе ишемиче-ской болезни сердца, поскольку было установлено, что патогенетически значимую роль в атерогенезе играют выделяющиеся при адгезии и секреции митогены тромбоцитарного и моноци-тарного происхождения, вызывающие гиперплазию гладкомышечных клеток и превращение липидной полоски в пролиферирующую бляшку [19]. Вероятность развития такого сценария повышается, если в стенке сосуда появляются

минимально модифицированные (окисленные) липопротеины низкой плотности, иммунные комплексы и в очагах атероге-неза происходит изменение клеточного состава с развитием воспалительных реакций [14, 21].

Продолжение работ в этом направлении позволило выяснить, что этот процесс обусловлен митогенным действием тром-боцитарного фактора роста (PDGF) на гладкомышечные клетки [16]. Обнаружение структурной идентичности В-цепи этого цитокина и протоонкогена с-sis, который влечет за собой активацию пролиферации [21], подтвердило гипотезу «псевдотумо-розного роста» [19, 20], согласно которой все пролиферирующие гладкомышечные элементы, образующие атерому, имеют моноклоновое происхождение.

Проведенные нами исследования по оценке структурно-функционального состояния интерфазного хроматина лимфоцитов в ответ на аппликацию тромбо-цитарного фактора роста исходили из предпосылки, что PDGF являясь основным митогеном, высвобождающимся из кровяных пластинок в процессе формирования тромба [McCaffrey, 2000], вызывает усиление синтеза внеклеточного матрикса, хемотаксис и последующую активацию нейтрофилов, моноцитов и фибробластов. Кроме участия в миграции фибробластов и синтезе веществ матрикса, PDGF усиливает продукцию протеаз. PDGF является митогеном для фибробластов кожи и сухожилий, гладкомышечных клеток (ГМК) сосудов, глиальных клеток и хондроцитов. PDGF взаимодействуя с TGF р1, способствует заживлению ран [19]. Гладкомышечные клетки «синтетического» фенотипа экс-прессируют рецепторы для PDGF, а также могут продуцировать свои собственные митогенные (включая и PDGF) факторы.

В нашем исследовании аппликация PDGF с цельной кровью здоровых добровольцев и пациентов с ИБС в конечной концентрации 0,5 нг/мл не вызвала реакции со стороны иммунокомпетент-ных клеток больных ИБС, тогда как у здоровых добровольцев наблюдалось определенное усиление биохимических процессов в ядре. Влияние PDGF в концентрации 5,0 нг/мл четко зависело от экспозиции: при кратковременной инкубации отмечалось некоторое усиление активности интерфазного хроматина, которая к 6 часам инкубации возвращалась к исходному уровню. У здоровых добровольцев, напротив, уже кратковременная инкубация с минимальной концентрацией PDGF вызывала мощную реакцию ИХ, которая проявлялась перестройкой компонент ИХ и ядра в целом. Продолжение инкубации приводило к диаметрально противоположным изменениям: расло отношение гетеро- и эухроматина, отмечались внутриядерные перестройки ядра: глубокое функциональное угнетение («стремление к покою») либо проапопто-тические изменения.

Полученные нами данные о структурно-функциональных особенностях лимфоцитов больных ИБС в ответ на аппликацию тромбоцитарного фактора роста нуждались как в детализации представлений о фенотипических особенностях лимфоцитов, так и в проведении более тонких исследований интерфазного хроматина Т- и В-субпопуляций лимфоцитов. В результате анализа интерфазного хроматина Т- и В-лимфоцитов больных с ИБС проявились особенности этих иммунокомпентных клеток - произошла активация Т-клеточного звена иммунитета, что можно расценить как участие этой клеточной фракции в реакциях гладкомышечных клеток на воздействие ключевых агонистов, формирование экстрацеллюлярного матрикса и пролиферацию ГМК, характерную для формирующихся атеросклеротических бляшек.

В мировой литературе опубликованы доказательства проатерогенного влияния Т-хелперных реакций 1-го типа от нескольких независимых исследовательских групп [14]. С другой стороны, регу-ляторные Т-лимфоциты выделяют !1-10 и трансформирующий фактор р (TGF р), обладающие способностью модулировать течение иммунного ответа.

!Ь10 подавляет антиген-индуцируе-мую активацию CD4+ Т-клеток, а роль тGF р в атерогенезе не так однозначна. Имеются данные, что TGF р пода-

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

вляет как ТМ-тип иммунного ответа, так и провоспалительные функции макрофагов [16]. Ранее мы установили обратимые время- и дозозависи-мые реакции хроматина лимфоцитов периферической крови на введение экзогенного TGF р1 у больных с атеросклерозом, что важ1но в контексте того, что в зависимости от микроокружения TGF р1 обладает способностью как по-давлят1ь рост опухолей, так и являться онкогенным фактором.

Обсуждается роль Т1117, продуцирующих Ы7. Известно, что вместе с И-23 в дифференцировке Т1||7 принимают участие провоспалительные цитокины И-!а и 1Ыр. В свою очередь, цитокины Т1||7 стимулируют синтез биологически активных веществ макрофагами и по принципу положительной обратной связи усиливают воспалительную реакцию.

Таким образом, комплексное исследование с привлечением ранее полученных данных позволило, во-первых - подтвердить участие лимфоцитов перифери-ческой крови в пато-

генезе ишемической болезни сердца; во-вторых - выявить фенотипические особенности лимфоцитов и установить структурно-функциональные различия интерфазного хроматина Т- и В-лимфоцитов у больных с ИБС. Полученные нами результаты и сделанные на их основе обобщения позволяют уточнить некоторые представления о патогенезе ИБС.

Л И Т Е Р А Т У Р А

1. Акулич Н.В. и др.// Клиническая лабораторная диагностика. - 2004. - №1. - С.61-62.

2. Акулич Н.В, Кручинский Н.Г. Гомеостазис: анализ концепции с позиции межклеточных взаимодействий. - Могилев: МоГУ им. А.А. Кулешова, 2004. -176 с.

3. Акулич Н.В, Кручинский Н.Г. Способ диагностики атеросклероза: Патент Республики Беларусь BY 13995 С1 2011.02.28.

4. Акулич Н.В. и др. // Иммунопатол., аллергол., ин-фектол. - 2004. - №2. - С.49-52.

5. Кручинский Н.Г. Автореф. дис..... д-ра мед.

наук - Могилев, 2004. - 42 с.

6. Кручинский Н.Г. и др. // Эфферентная терапия. -2004. - №1. - С.65-73

7. Кручинский Н.Г., Тепляков А.И. // Тромбоз, гемостаз и реология. - 2002. - №3. - С.8-13.

8. Кручинский Н.Г., Тепляков А.И, Горчаков А.М.

Способ определения функционального ответа лейкоцитов на процессы коагуляции и фибринолиза: Патент Республики Беларусь № 950133А // Офиц. Бюлл. Белгоспатента. - 1997. - №2. - С.16-17.

9. Патофизиология заболеваний сердечно-сосудистой системы / Под ред. Л. Лилли; пер. с англ. - М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2003. - 598 с.

10. Тепляков А.И. и др. // Ангиология и сосудистая хирургия. - 1999. - №3. - С.11-15

11. Тепляков А.И, Кручинский Н.Г. // Инж.-физич. журн. - 1996. - Т. 69. - №3. - С.451-455.

12. Тепляков А.И. и др. // News of Biomedical Sciences. - 2003. - № 4. - С.102-108.

13. Akulich N.V. et al. // J. Thromb. Haemost. - 2007. -Suppl.2. - Abstr. P.S-495.

14. Bettelli E et al. // Nature. - 2006. - Vol.441 (7090). - P.235-238.

15. DainiakN. et al. // Experim. Hematol. - 1997. -Vol. 25, N8. - Р.766.

16. Hansson GK // N. Engl. J. Med. 2005. - Vol.352. -P. 1685-1695.

17. Krouchinsky N. et al. // J. Thromb. Haemost. -1993. - Vol.69, N6. - P.1131.

18. Krouchinsky N. et al. // Anal. Cell. Pathol. - 1994. -Vol.6(3). - P.191.

19. LibbyP. // Nature. 2002. - Vol.420. - P.868-874.

20. Mor A. et al. // Eur. Heart J. - 2006. - Vol.27. -P.2530-2537.

21. Park H. et al. // Nature Immunology. - 2005. -Vol.6(1). - P.1133—1141.

22. TeplyakovA. et al. // Ann. New York Acad. Sc. -2000. - Vol.902. - P.320-322.

Поступила 26.03.2012 г.

Ш В СЛЕДУЮЩЕМ НО ПРОБЛЕМНЫЕ СТАТЬИ И ОБЗОРЫ

Гончар А.А. - Рентгеноконтрастные препараты: показания, противопоказания, осложнения и способы контрастирования церебральных артерий

Буаро М.И., Трофимов Н.М., Счесленок Е.П., Новик И.И., Рытик П.Г. - Крымская-Конго геморрагическая лихорадка

Копытов А.В., Наконечная Е.А., Ситько Л.З., Копытов Д.А. - Влияние стресса на алкоголизацию в подростковом и молодом

возрасте

Тимофеева Е.В. - Лабораторная диагностика Лайм-боррелиоза на современном этапе ЛЕКЦИИ

Козловская В.В., Тихоновская И.В. - Дерматиты вульвы: «интимная» проблема для дерматолога

ВОПРОСЫ АТТЕСТАЦИИ И ПОВЫШЕНИЯ КВАЛИФИКАЦИИ

Левончук Е.А., Яхницкий Г.Г. - Папилломавирусная инфекция: лечение и профилактика

Бритько А.А., Богданович И.П., Аносов В.С. - Пути улучшения результатов лечения пациентов с разрывами менисков коленного сустава

ВЫХОДНЫЕ ДАННЫЕ

«Медицинские новости» № 11 (218) 2012 г. Рецензируемый научно-практический информационно-аналитический журнал. Свидетельство о регистрации № 965 выдано Министерством информации Республики Беларусь 9 июля 2010 года. Периодичность - 1 раз в месяц

Учредитель

Частное издательское

унитарное предприятие «ЮпокомИнфоМед». Юридический адрес: 220018, г. Минск, ул. Якубовского, 70-5. УНП 191350993

Редакция

Шарабчиев Юрий Талетович (гл. редактор, директор)

Третьякова Ирина Георгиевна (отв. секретарь, реклама)

Марковка С.Н., Пручковская О.Н. (редакторы) Шусталик М.В. (дизайн) Колоницкая О.М. (верстка) Вашкевич С.В. (зам. директора)

Адрес для переписки: 220030, Минск, пл. Свободы, 23-35. Тел./ факс (+375-17) 226-03-95, 327-07-54 (гл. редактор), моб. (029) 695-94-19 (Velcom)

Е-гшИ: [email protected] www.mednovosti.by

Для сведения

Рукописи рецензируются независимыми специалистами

С информацией «К сведению авторов» можно ознакомиться на сайте www.mednovosti.by

Ответственность за достоверность и интерпретацию предоставленной информации несут авторы. Редакция оставляет за собой право по своему усмотрению размещать полные тексты публикуемых статей на сайте редакции www.mednovosti.by и в электронных базах данных (на сайтах) своих партнеров

Электронная версия журнала доступна на сайте научной электронной библиотеки eLIBRARY.ru (Москва) www. eLIBRARYru, а также на сайте журнала www.mednovosti.by (выборочные статьи)

Перепечатка материалов только с разрешения редакции. Рукописи не возвращаются

Подписано в печать 21.11.2012 г Формат 60х84 1/8. Гарнитура Helvetica Narrow. Уч.-изд. л. 12,64. Тираж 1620 экз. Заказ 2717 Цена свободная.

Подписка: по каталогу РУП «Белпочта» индексы: 74954 (инд.), 749542 (вед.); по каталогу ОАО «Агентство Роспечать» индекс: 74954

Типография ООО «Поликрафт» Лицензия №02330/0494199 от 03.04.09 Минск, ул. Кнорина, 50

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.