Лимфопролиферативная активность у жителей Заполярья Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

УДК 576.36:[612.017.1:612.018]-055.1(470.1)

ЛИМФОПРОЛИФЕРАТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ У ЖИТЕЛЕЙ ЗАПОЛЯРЬЯ

© 2009 В.П. Репина, О. В. Кривоногова, О. А. Ставинская, Е. А. Меньшикова Институт физиологии природных адаптаций УрО РАН, г. Архангельск Статья получена 6.10.2009 г.

В работе изучены особенности лимфопролиферативной активности у жителей Ненецкого автономного округа. Определена взаимосвязь особенностей пролиферативных реакций с уровнем содержания провоспалительных цитокинов, реагина и дифференцированных лимфоцитов.

Ключевые слова: пролиферация, лимфоцит, моноцит, нейтрофил, цитокин

Пролиферативная активность клеток регулируется рядом факторов, в том числе интер-лейкинами. IL-1 является фактором роста для Т-лимфоцитов и стимулирует их пролиферацию. Механизм его действия заключается в индукции синтеза IL-2 и IL-4 - ростовых факторов, секретируемых T-хелперами. Кроме того, IL-1 усиливает экспрессию рецепторов к IL-2 и IL-4, что обеспечивает регуляцию пролиферации Т-хелперов. Наибольшая стимулирующая активность IL-1P связана с Т-хелперами 2 типа, продуцирующими IL-4 [1, 2, 3]. Провоспалительные цитокины IL-1P, IL-6 и TNFa участвуют в реализации воспалительной реакции, усиливают пролиферацию лимфоцитов. Главной мишенью IL-6 служат В-клетки, поскольку он является кофактором их пролиферации. Аналогичные функции принадлежат и TNFa [4-10]. IL-1P выступает как фактор усиления пролиферации В-клеток и ингибиру-ет синтез цитокинов ТЬ1-лимфоцитами [9, 10].

Цель работы - изучить особенности иммунных реакций при повышенном и пониженном уровнях лимфопролиферации.

Материалы и методы исследования. Обследовано 100 человек в возрасте от 20 до 60 лет. Проведено определение содержания в периферической крови лимфоцитов фенотипов CD3+, CD4+, CD5+, CD8+, CD10+, CD16+, CD25+, CD71+, CD95+, HLADR+ с помощью непрямой иммунопероксидазной реакции с использованием препаратов лимфоцитов типа «высушенной капли» (реактивы НПЦ «Мед-БиоСпектр», г. Москва). Моноцитограмму определяли по методике О.Н. Григоровой (1958), лимфоцитограмму учитывали по методу И.А. Кассирского, Г. А. Алексеева (1970). Содержание цитокинов (IL-6, TNFa, IL-10, IL-1p, IFNy), IgE определяли методом ИФА тест-наборами «BIOSOURCE» (Германия). Учет

Репина Вероника Павловна, кандидат биологических наук, научный сотрудник

Кривоногова Ольга Вячеславовна, аспирантка Ставинская Ольга Александровна, кандидат биологических наук, научный сотрудник. E-mail: [email protected]

Меньшикова Елена Александровна, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник. E-mail:[email protected]

результатов проводили на спектрофотометре серии Multiscan MS (Финляндия). Результаты исследования обработаны с использованием пакета прикладных программ «SPSS 11.5» (США). Тип исследования ретроспективный, выборки случайные, одномоментные. Проведено определение границ нормального распределения количественных показателей при помощи критерия Шапиро-Уилка. Достоверность различий между группами оценивали с помощью параметрического t-критерия Стьюдента для независимых выборок и непараметрического критерия Уилкоксона. Корреляционный анализ параметров проведен с учетом ранговой корреляции Спирмена с определением коэффициента корреляции (r) и оценки его достоверности. Статистическая достоверность присваивалась при значении p<0,05 [11].

Результаты исследования и их обсуждение. Результаты исследования разделены на 2 группы, по уровню содержания маркера пролиферации CD10+: > 0,5Ч109кл/л и < 0,2Ч109кл/л. В первой группе 60 человек, во второй 51 человек. Среднее значение показателя в первой группе составило 0,95±0,05Ч109кл/л, во второй группе 0,31±0,02Ч109кл/л (p<0,01). В изученных группах практически не изменяется содержание моноцитов (соответственно 0,62±0,09 и 0,52±0,06Ч109кл/л). В составе моноцитограм-мы отмечается увеличение числа промоноци-тов (32,95±0,02%), в группе с повышенным содержанием CD10+, по сравнению с таковым среди лиц с пониженным уровнем CD 10+, в которой содержание промоноцитов составило 26,77±2,06% (p<0,05) (рис.1).

При повышенной концентрации CD 10+ общее содержание лимфоцитов с (1,98±0,11 до 2,73±0,13Ч109кл/л; p<0,05), малых лимфоцитов в составе лимфоцитограммы (1,03±0,01 и 0,66±0,01Ч109кл/л; p<0,05) и больших лимфоцитов (0,45±0,010 и 0,31±0,02Ч109кл/л, p<0,05). Для группы с повышенным содержанием CD 10+ характерно увеличение содержания CD4+ с 0,32±0,04 до 0,61±0,04Ч109кл/л (<0,01). Установлено, что при возрастании активности лимфопролиферации происходит увеличение уровней провоспалительных цито-кинов. Концентрация IL-6 повышается с

Влияние экологии на внутренние болезни

9,44+1,87 пг/мл (в группе с пониженным содержанием СБ10+) до 13,51+1,39 пг/мл (в группе с повышенным содержанием СБ10+). Уровень ТЫБа - соответственно с 6,75+0,85 пг/мл до 8,88+0,95 пг/мл, 1Ь-1р - с 1,73+0,19 пг/мл до 2,21+0,26 пг/мл. Выявляется тенденция

снижения содержания 1Ь-10 с 3,18+0,41 пг/мл до 2,66+0,34 пг/мл. Содержание реагинов в группе с пониженным содержанием СБ 10+ значительно ниже (95,52+3,42 Ме/мл), чем в группе с повышенным уровнем СБ 10+ (145,88+4,61 Ме/мл, р<0,01).

60 50 40 30 20 10 0

Рис. 1. Моноцитограммы в группах с повышенным и пониженным содержанием СБ10+. Примечание: ш - высокое содержание СБ10+; □□ - относительно низкое содержание СБ10 ; *- р<0,05.

Промоноциты МОНОцшы Полиморфноядерные

моноциты

*

*

*

60 50 40 30 20 10 0

х х

Малые Средние Крупные

лимфоциты лимфоциты лимфоциты

Рис. 2. Лимфоцитограммы в группах с повышенным и пониженным содержанием СБ10+. Примечание: - высокое содержание СБ10+; I I - относительно низкое содержание СБ10+; *- р<0,05.

Для группы с повышенным содержанием СБ10+ характерно увеличение содержания СБ4+ с 0,32+0,04 до 0,61+0,04Ч109кл/л (<0,01). Установлено, что при возрастании активности лимфопролиферации происходит увеличение уровней провоспалительных цито-кинов. Концентрация 1Ь-6 повышается с 9,44+1,87 пг/мл (в группе с пониженным содержанием СБ10+) до 13,51 + 1,39 пг/мл (в группе с повышенным содержанием СБ10+). Уровень ТЫБа - соответственно с 6,75+0,85 пг/мл до 8,88+0,95 пг/мл, 1Ь-1р - с 1,73+0,19 пг/мл до 2,21+0,26 пг/мл. Выявляется тенденция снижения содержания 1Ь-10 с 3,18+0,41 пг/мл до 2,66+0,34 пг/мл. Содержание реагинов в группе с пониженным содержанием СБ10+ значительно ниже (95,52+3,42 Ме/мл), чем в группе с повышенным уровнем СБ 10+ (145,88+4,61 Ме/мл, р<0,01).

Пролиферативная реакция сопровождается увеличением числа цитотоксических клеток (соответственно 0,41+0,04 и

0,69+0,05Ч109кл/л, р<0,05) и натуральных киллеров (0,37+0,04 и 0,67+0,05Ч109кл/л, р<0,05). Отмечается адоптивное увеличение уровня апоптоза лимфоцитов, что проявляется в увеличении содержания клеток с маркером СБ95 (с 0,35+0,04 до 0,77+0,05Ч109кл/л ;<0,05).

Выводы: установлено, что активизация лимфопролиферации, выявляющаяся по изменению в составе лимфоцитограммы и содержанию в крови СБ10+ ассоциируется с увеличением концентрации провоспалительных ци-токинов 1Ь1р, Ь-6, ТЫБа, а также реагинов, цитотоксических лимфоцитов (СБ8+, СБ 16+) и Т-хелперов. Взаимосвязь уровня пролиферации лимфоцитов и содержания провоспалительных

*

*

цитокинов, Т-хелперов обоснована и объяснима. Активизация пролиферации цитотоксиче-скими лимфоцитами, вероятно, опосредована их цитокинами. Преимущественное влияние на этот процесс реагинов требует дополнительных исследований.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:

J.

1. Gery , I. / I. Gery , R . Gerson, B. Waksman Exptl Med. - 1972. - V. 136. - P. 128.

2. Oppenheim, J. / J. Oppenheim, E. Kovasc, K. Mutsishima / Immunol Today. - 1986. - V. 7. - P. 245.

3. Никонова, М.Ф. Пролиферативный статус Th1-Th2 клеток человека / М.Ф. Никонова, А.А. Яри-лин // Иммунология. - 2006. - №4. - С. 203-208.

4. Хаитов, Р.М. Иммунная система желудочно-кишечного тракта: особенности строения и функционирования в норме и при патологии / Р.М. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. - 1997. -№5. - С. 4-7.

5. Bengmark, S. Ecological control of the gastrointestinal tract. The role of probiotic flora / S. Bengmark // Gut. - 1998. - №42 (1). - Р. 2-7.

6. Cross, M.L. Microbes versus microbes: immune signal generated by probiotic lactobacilli and their role in protection against microbial pathogens // FEMS. -2002. - №34 (9). - P. 245-253.

7. Бондаренко, B.M. Микроэкологические изменения кишечника и их коррекция с помощью лечебно-профилактических препаратов / B.M. Бондаренко, Н.М. Грачева, T.B. Мацулевич, А.А. Воробьев // Журн. гастроэтерол. гепатол. колопроктол. - 2003, 4 (прил. № 20). - С. 66-76.

8. Ярилин, А.А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при па-тологии / А.А. Ярилин // Иммунология. - 1997. - №5. - С. 7-14.

9. Coffman, R. Multiple pathways for the initiation of T helper-2(Th2) responses / R. Coffman, T. Weid // JEM. - 1997. - №185(3). - P. 373-376.

10. Weid, T. Induction by a lactic acid bacterium of population CD4+ T cells with low proliferative capacity that produce Transforming Growth Factor-and Interleukin-10/ T. Weid // CDLI. - 2001. - № 8(4). - P. 695-701.

11. Сергиенко, В. И. Математическая статистика в клинических исследованиях. - 2-е изд., перераб. и доп. - М.: ГЭОТАР. - Медиа, 2006. - 304 с.

LYMPHOPROLIFERATIVE ACTIVITY AT ZAPOLYARIE INHABITANTS

© 2009 V.P. Repina, O.V. Krivonogova, O.A. Stavinskaya, E.A. Menshikova Institute of Environmental Physiology UB RAS, Arkhangelsk Article is received 2009/10/06

In work features of lymphoproliferative activity at inhabitants of Nenets autonomous region are studied. The interrelation of features proliferative reactions with a level of content of proinflammatory cytokines, reaginic antibody and differentiated lymphocytes is certain.

Keywords: proliferation, lymphocyte, monocyte, neutrophil, cytokine

Veronika Repina, Candidate of Biology, Research Fellow Olga Krivinogova, Graduate Student Olga Stavinskaya, Candidate of Biology, Research Fellow. E-mail: [email protected]

Elena Menshikova, Candidate of Biologgy, Senior Research Fellow. E-mail:[email protected]