Лечебная эффективность нового отечественного химиопрепарата Триазавирин в отношении возбудителя гриппа a (H5N1) Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

Є

Лечебная эффективность нового отечественного химиопрепарата Триазавирин в отношении возбудителя гриппа А (Н5Ш)

С. Я. ЛОГИНОВА, С. В. БОРИСЕВИЧ, В. А. МАКСИМОВ, В. П. БОНДАРЕВ,

С. К. КОТОВСКАЯ1, В. Л. РУСИНОВ1, В. Н. ЧАРУШИН1, О. Н. ЧУПАХИН1

Филиал Федерального государственного учреждения «48 Центральный научно-исследовательский институт Министерства обороны Российской Федерации» — «Вирусологический центр», Сергиев Посад 1 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

«Уральский государственный технический университет — УПИ» имени первого Президента России Б. Н. Ельцина, Екатеринбург

Therapeutic Efficacy of Triazavirin, a Novel Russian Chemotherapeutic, Against Influenza Virus A (H5N1)

S. A. LOGINOVA, S. V. BORISEVICH, V. A. MAKSIMOV, V. P. BONDAREV,

S. K. KOTOVSKAYA, V. L. RUSINOV, V. N. CHARUSHKIN, O. N. CHUPAKHIN

Virusological Centre, Branch of Central Research Institute No. 48 of the Ministry of Defense of the Russian Federation, Sergiev Posad B. N. Yeltsin Urals State Technical University, Ekaterinburg

Экспериментальное изучение терапевтической эффективности Триазавирина в отношении экспериментальной формы гриппа А у белых мышей, интраназально инфицированных вирусом гриппа, штамм А/курица/Курган/Рос-сия/02/05(Ы5Ш), в сравнении с препаратами сравнения (Осельтамивир, Ремантадин и Арбвдол®) выявило, что исследуемый препарат в терапевтической дозе 1 мг/кг эффективно защищает животных от гибели. Протективная лечебная эффективность Триазавирина (36,7+1,7%) приближается по лечебной эффективности к Осельтамивиру — (50,0+0,0%), сопоставима с Ремантадином (38,3+1,7%) и превосходит Арбидол® (11,7+1,7%). На протяжении всего срока наблюдения (вплоть до терминальной фазы) этот препарат подавляет уровень накопления вируса гриппа А в лёгких инфицированных белых мышей более чем на 3 ^.

Ключевые слова: грипп А (И5М1), Триазавирин, противовирусная эффективность, лечение.

Therapeutic activity of Triazavirin against experimental influenza A was studied on albino mice intranazally infected with influenza virus A/Chicken/Kurgan/Russia/02/05 (H5N1) vs. reference drugs (Oseltamivir, Remantadin and Arbidol®). The study showed that in a therapeutic dose of 1 mg/kg Triazavirin was efficient in protection of the animals from death. Its protective therapeutic efficacy (36.7+1.7%) was close to that of Oseltamivir (50.0+0.0%), comparable with that of Remantadin (38.3+1.7%) and higher than that of Arbidol® (11.7+1.7%). During the whole observation period (up to the terminal phase) Triazavirin inhibited the influenza virus A accumulation in the lungs of the infected albino mice by more than 3 lg.

Key words: influenza virus A (H5N1), Triazavirun, antiviral efficacy, therapy.

В настоящее время в мире периодически регистрируются эпизоотии гриппа А, подтип Н5Ш, в странах Юго-Восточной Азии, Ближнего и Среднего Востока, Европы и Африки. Вирус преодолел межвидовой барьер и вызывает тяжёлые заболевания людей (505 человек) с летальностью около 59,4% (по состоянию на 31 августа 2010 г.) [1]. Интенсивная циркуляция вируса гриппа А (Н5Ш) среди диких и домашних птиц в 63 странах мира обосновывает актуальность поиска новых эффективных не-

© Коллектив авторов, 2010

Адрес для корреспонденции: 141306 Московская обл., Сергиев Посад-6.

специфических защитных препаратов в отношении гриппа А (Н5Ш).

Ранее в ходе экспериментальных исследований была установлена высокая противовирусная активность Триазавирина в культуре клеток МДСК в отношении вируса гриппа А (Н5Ш) [2]. Это явилось основанием для оценки защитной эффективности этого препарата на лабораторных животных.

Целью настоящей работы явилось доклиническое изучение лечебной эффективности препарата Триазавирин, относящемуся к группе соединений триазоло-а8-триазинов, в отношении вируса гриппа А (Н5Ш).

О

Є

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

Изучение лечебной эффективности триазавирина в отношении экспериментальной формы гриппа у белых мышей, интраназально инфицированных вирусом гриппа А (H5N1)

Пpeпapaт Cxeмa введения Дoзa пpeпapaтa, 4acTOra гибели пpeпapaтa мг/кг животньк Зaщитнaя эффективность от гибели, %, Х±ах Увеличение cpeднeй щодолжи-тельности жизни, А, cyi™, X±ffx

Триазавирин +24 ч,+48 ч, +72 ч, WG 37/6G 38,3+1,7 2,4+G,G

+96 ч, +12G ч, + 144 ч

5G 42/6G 3G,G+G,G 2,2+G,1

1G 39/6G 35^^ 2,8+G,1

1 4G/6G 36,7+1,7 2,8+G,1

Арбидол® То же 135 53/6G 11,7+1,7 G,5+G,1

Тамифлю® —//— 25 3G/6G 5G,G+G,G 3,5+G,1

Ремантадин —//— 3G 37/6G 38,3+1,7 3,8+G,2

Kонтроль дозы — — 6G/6G — —

Kонтроль стада — — G/6G — —

Материал и методы

Вирус. Использовали вирус гриппа, штамм А/курица/Курган/Россия/2/05 (H5N1), выделенный в октябре 2005 года специалистами филиала ФГУ «48 ЦНИИ Минобороны России — ВЦ» из биопроб павших кур Утятской птицефабрики Курганской области. Штамм был охарактеризован с помощью биологических [3] и молекулярно-биологических методов исследования [4] и депонирован в Специализированную коллекцию Филиала ФГУ «48 ЦНИИ Минобороны России — ВЦ».

Исследуемые препараты. Препарат Триазавирин синтезирован специалистами ИОС Уральского отделения РАН, г. Екатеринбург, Россия.

В качестве контроля использовали:

— Арбидол® — производства ЗАО «Мастерлек», Россия, серия 770905.

— Ремантадин — производства ООО «РОЗФАРМ», Россия, серия 1209.

— Осельтамивир (Тамифлю®) — производства фирмы Хоффманн — Ля Рош Лтд., Швейцария, серия В 1154.

Лабораторные животные. Для моделирования экспериментальной формы гриппа А использовали белых мышей массой 10—12 г, полученных из вивария филиала ФГУ «48 ЦНИИ Минобороны России — ВЦ».

Наблюдение за инфицированными животными проводили в течение 14 суток. Титрование возбудителя гриппа А проводили на 10-суточных РКЭ.

Оценка противовирусной эффективности используемых лекарственных препаратов осуществлена в соответствии с требованиями [5]. Основными критериями оценки эффективности in vivo являлись:

— показатели защиты лабораторных животных от гибели;

— среднее время жизни животных в группе;

— снижение уровня накопления вируса в лёгких (A, lg).

Результаты и обсуждение

Оценку терапевтической эффективности Триазавирина в отношении вируса гриппа, штамм А/курица/Курган/2/05 (H5N1) проводили in vivo на белых мышах массой 10—12 г инфицированных интраназально в дозе 10—15 ЛД50. В качестве инфицирующего препарата использовали аллантоисную жидкость инфицированных РКЭ с биологической активностью 5,5 lg ЦПД50/мл, 8,3lg ЭЛД50/мл, 6,3 lg ЛД50МИЦ /мл.

Препараты вводили белым мышам перорально через 24 часа после заражения животных и далее в течение пяти дней.

-Q-

Влияние лечебного применения препаратов на репродукцию вируса гриппа в лёгких белых мышей.

При применении Триазавирина в качестве лечебного средства в дозе 1 мг/кг массы животного защитная эффективность составила в среднем 36,7%; в дозе 10 мг/кг — 35,0%, 50 мг/кг — 30,0%; и 100 мг/кг — 38,3% (таблица). В группе животных, которые принимали Триазавирин, значительно увеличивался показатель СВЖ на 2,8; 2,8; 2,2 и 2,4 суток соответственно.

Таким образом, по лечебной схеме Триазавирин выявил свою эффективность при применении в диапазоне доз от 1 до 100 мг/кг массы животного.

При применении Осельтамивира в дозе 25 мг/кг защитная эффективность составила в среднем 50%. При этом наблюдали удлинение среднего времени

О

жизни на 3,5 суток. Ремантадин в дозе 30 мг/кг выявил высокую лечебную эффективность. Защита от гибели инфицированных животных составила в среднем 38,3%, увеличение среднего времени жизни — 3,8 суток. Терапевтическая эффективность Арбидола составила 11,7%.

Триазавирин, Ремантадин и Осельтамивир в первые сутки после инфицирования полностью подавляют размножение вируса гриппа А (рисунок).

Далее на протяжении длительного срока наблюдения (вплоть до терминальной фазы) Триазавирин, Ремантадин и Осельтамивир подавляют уровень накопления вируса гриппа А в лёгких инфицированных белых мышей более чем на 3 Арбидол эффективно подавляет размножение вируса гриппа в органе-мишени в первые сутки после инфицирования, однако,

ЛИТЕРАТУРА

1. http://www.who.int/csr/disease/avian_influenza/country/cases_table_ 2010_08_31/еп/тдех.Ыш1.

2. Логинова С. Я., Борисевич С. В., Максимов В. А. и др. Изучение противовирусной активности Триазавирина в отношении возбудителя гриппа А (Н5№) в культуре клеток. Антибиотики и химиотер 2007; 52: 11—12: 18—20.

3. Сыромятникова С. И., Борисевич С. В., Хамитова М. Ф. и др. Обоснование выбора штамма гриппа А, подтип Н5№, предназначенного для оценки защитной эффективности существующих и вновь разрабатываемых в Российской Федерации лекарственных средств и медицинских иммунобиологических препаратов: Труды

начиная с 3-х суток эффективность ингибирования значительно снижается и к 5—6 суткам — практически отсутствует.

Следовательно, новый химиопрепарат Триазавирин в соответствии с требованиями (терапевтическая защитная эффективность препаратов должна составлять не ниже 30% [3]) обладает терапевтической эффективностью в отношении вируса гриппа А (Н5Ш). Его про-тективная эффективность при применении по лечебной схеме приближается к эффективности Осельтамивира, сопоставима с Ремантадином и превосходит Арбидол®.

По результатам доклинических исследований предложено на этапе клинических испытаний использовать лечебную дозу Триазавирина 1 мг/кг в отношении гриппа А (Н5Ш) (равноэквивалентная доза для человека составляет 6 мг).

второго съезда военных врачей медико-профилактического профиля «Современные проблемы военной профилактической медицины, пути их решения и перспективы развития», 15—17 ноября 2006г., г. Санкт-Петербург. Вест Росс Военно-мед акад 2006; 1: 15: Приложение: 184—185.

4. Мельников Д. Г., Меркулова О. В., Маношкин А. В. и др. Лабораторная диагностика гриппа А (Н5№) во время эпизоотий 2005—2007 гг. на территории Российской Федерации: Мат докл международной научно-практической конференции «Проблемы совершенствования межгосударственного взаимодействия в подготовке к паццемии гриппа». 9—10 октября 2008 г., Новосибирск. Новосибирск, 2008; 34—35.

5. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М.: 2005.

-О-