CC BY
64КОРОНАВИРУС SARS-COV-2: ЭПИГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ ВОСПРИИМЧИВОСТИ И ВОЗМОЖНОСТИ ЭПИ-ЛЕКАРСТВЕННОЙ ПРОФИЛАКТИКИ
Айтбаев К.А.,
Доктор медицинских наук, профессор, НИИ молекулярной биологии и медицины,
г. Бишкек, Кыргызстан ORCID: 0000-0003-49 73-039X Муркамилов И. Т., Кандидат медицинских наук, и. о. доцента, Кыргызская государственная медицинская академия им. И.К. Ахунбаева,
г. Бишкек, Кыргызстан ORCID:0000-0001-8513-9279 Фомин В.В.,
Доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАН, ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова (Сеченовский Университет),
г. Москва, Россия ORCID: 0000-0002-2682-4417, Кудайбергенова И.О., Доктор медицинских наук, профессор, Кыргызская государственная медицинская академия им. И.К. Ахунбаева,
г. Бишкек, Кыргызстан ORCID:0000-0003-3007-8127 Юсупов Ф.А. Доктор медицинских наук, профессор, Медицинский факультет ОшГУ, г. Ош, Кыргызстан ORCID: 0000-0003-0632-6653
CORONAVIRUS SARS-COV-2: EPIGENETIC MECHANISMS OF SUSCEPTIBILITY AND THE
POTENTIAL FOR EPI-DRUG PREVENTION
Aitbaev K.,
Doctor of Medical Sciences, Professor, Research Institute of Molecular Biology and Medicine,
Bishkek, Kyrgyzstan ORCID: 0000-0003-49 73-039X Murkamilov I., PhD, Acting Associate Professor, Kyrgyz State Medical Academy named after I.K. Akhunbaev,
Bishkek, Kyrgyzstan ORCID:0000-0001-8513-9279 Fomin V.,
Doctor of Medical Sciences, Professor, Corresponding Member of the Russian Academy of Sciences, FSAEI HE I.M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University), Moscow, Russia
ORCID: 0000-0002-2682-4417 Kudaibergenova I., Doctor of Medical Sciences, Professor, Kyrgyz State Medical Academy named after I.K. Akhunbaev,
Bishkek, Kyrgyzstan ORCID: 0000-0003-3007-8127 Yusupov F.
Doctor of Medical Sciences, Professor, Faculty of Medicine, Osh State University, Osh, Kyrgyzstan ORCID: 0000-0003-0632-6653
Аннотация
Недавняя вспышка пандемии SARS-CoV-2 затронула судьбы всех людей во всем мире. Пандемия продолжает оказывать драматическое воздействие на здоровье, общество и экономику, хотя для остановки эпидемии используются все методы классического эпидемиологического контроля (изоляция случаев, отслеживание контактов и карантин, физическое дистанцирование и меры гигиены), а в некоторых странах даже начата вакцинация от коронавируса. Поэтому важно найти дальнейшие профилактические меры и возможные вмешательства, которые могут снизить количество инфицированных людей и уменьшить тяжесть заболевания при поражении SARS-CoV-2. Похоже, что эпигенетические механизмы являются важной частью патофизиологии и тяжести заболевания COVID-19. Эти механизмы были выявлены при SARS-CoV-2, а также при других вирусных инфекциях. Если эти механизмы будут подтверждены, то эпигенетические вмешательства, влияющие на метилирование ДНК, могут быть использованы в качестве эффективных средств первичной и / или вторичной профилактики SARS-CoV-2.
Abstract
The recent outbreak of the SARS-CoV-2 pandemic has affected the lives of all people around the world. The pandemic continues to have a dramatic impact on health, society and the economy, although all classical epidemiological control methods (case isolation, contact tracing and quarantine, physical distancing and hygiene measures) are used to stop the epidemic, and in some countries vaccination against coronavirus has even begun. Therefore, it is important to find further preventive measures and possible interventions that can reduce the number of infected people and reduce the severity of the disease when SARS-CoV-2 is affected. Epigenetic mechanisms appear to be an important part of the pathophysiology and severity of COVID-19 disease. These mechanisms have been identified in SARS-CoV-2, as well as in other viral infections. If these mechanisms are confirmed, then epigenetic interventions that affect DNA methylation can be used as effective means of primary and / or secondary prevention of SARS-CoV-2.
Ключевые слова: эпигенетика, метилирование, SARS-CoV-2, COVID-19, синцитий, слияние клеток, ACE2.
Keywords: epigenetics, methylation, SARS-CoV-2, COVID-19, syncytium, cell fusion, ACE2.
Введение
На 1 января 2021 года число выявленных в мире заражений коронавирусом SARS-COV-2, вызывающим у человека острое респираторное инфекционное заболевание COVID-19, достигло 83 млн. 482 случаев. SARS-CoV-2 очень заразен и распространяется довольно быстро, а фактическая летальность составляет около 7% [9]. Для борьбы с эпидемией используются классические методы эпидемического контроля, такие как, изоляция случаев, отслеживание контактов и карантин, физическое дистанцирование и меры гигиены [24]. Кроме того, в нескольких странах уже началась вакцинация от коронавируса. Эти вакцины разработаны с использованием различных технологий, в том числе так называемых «векторных», где векторами служат другие вирусы, а в качестве генетического материала выступает гликопротеин трансмембранного шипа (S) коронавируса, который опосредует его проникновение в клетку хозяина [24]. Глико-протеин шипика состоит из двух субъединиц -S1 и S2, при этом S1 отвечает за прикрепление к молекуле хозяина на клеточной мембране, а S2 способствует слиянию вирусной мембраны с мембраной клетки и / или между соседними клетками, производя межклеточное слияние, называемое синцитием [4]. Важным шагом во взаимодействии вируса с клеткой хозяина является связывание гликопроте-ина S1 с рецептором ACE2 (angiotensin-converting enzyme 2 или АПФ2 - ангиотензинпревращающий фермент 2) на поверхности клеток человека [13, 34] и расщепление шипового гликопротеина фури-ном, вторым вирусным рецептором COVID-19 [1].
Повышенные экспрессии ACE2 и фурина увеличивают восприимчивость к SARS-CoV-2
Если в ранних сообщениях ещё были какие-то сомнения в отношении влияния экспрессии АСЕ2 на восприимчивость к заболеванию [11], то более поздние публикации уже чётко выявили связь более высокой экспрессии АСЕ2 в легких с большей восприимчивостью и тяжестью заболевания [19]. То же самое касается второго идентифицированного вирусного рецептора, фурина, который отвечает за расщепление субъединиц S1 и S2 и последующий эндоцитоз вируса [10]. Более высокая экспрессия АСЕ2 и фурина у восприимчивых людей указывает на то, что определенные эпигенетические механизмы, по-видимому, являются важной частью патофизиологии SARS-CoV-2.
Метилирование ДНК и COVID-19
Большим достижением молекулярной биологии последних десятилетий стало открытие молеку-лярно-генетических структур клетки, которые регулируют активность генов без изменения нуклеотид-ной последовательности. Совокупность этих структур была названа эпигеномом, а наука, изучающая эпигеном или эпигенетические механизмы -эпигенетикой. На сегодня получены данные о трёх основных эпигенетических механизмах, которые регулируют активность генов - это метилирование ДНК, модификации гистонов и РНК-интерференция (микро-РНК). В течение многих лет было известно, что вирусные инфекции используют эпигенетические механизмы в целом и, метилирование ДНК - в частности, чтобы найти способы осуществить энтероцитоз и развитие синцития. Для своей эволюции вирусу крайне необходимо разработать стратегию слияния с мембраной клетки хозяина и / или индукции слияния с клеткой хозяина. Оба механизма облегчают вирусный эндоцитоз и вторжение в соседние клетки, а
также уклонение от врожденной противовирусной иммунной системы хозяина [3]. Тип клетки, образованный путем слияния мембраны вируса с мембраной клетки хозяина или клетки с клеткой называется синцитием. Образование синцития типично для коронавируса в целом, и SARS-CoV-2 в этом отношении не является исключением [24, 32]. С другой стороны, образование синцития является нормальным для развития плаценты млекопитающих, и гены синцитина, продуцирующие синцитин 1 и 2, происходят от двух эндогенных ретровирусов человека [2]. Образование синцития, ведущее к созданию гигантских многоядерных клеток в плаценте, делает эту ткань непроницаемой и генерирует иммунную толерантность матери и ребенка [2]. Гены синцитина гипометилированы и, следовательно, функционально активны в плаценте млекопитающих, тогда как они гиперметилированы и, таким образом, замалчиваются в других тканях, где образование синцития может вызывать различные заболевания, включая шизофрению, рассеянный склероз и диабет 1 типа [7]. ДНК-метилирование генов синцитина в неплацентарных тканях является обязательным для предотвращения экспрессии синцитий-образующих белков [22]. Некоторые вирусы используют гены синцитина человека для слияния с клеточной мембраной хозяина и / или для индукции межклеточного слияния в инфильтрированных тканях [20]. Хорошими примерами того, как вирусы могут использовать эпигенетические механизмы для слияния с клетками хозяина, является то, как вирус Эпштейна-Барра и цитомегаловирус могут влиять на здоровье человека. Оба вируса обладают способностью деметилировать гены синци-тина 1 и 2 хозяина, увеличивая их транскрипцию и вызывая образование синцития в тканях, где эти гены обычно гиперметилированы и заглушены [8,25]. Этот процесс может вызывать такие заболевания, как рассеянный склероз и даже боковой амиотрофический склероз [18]. Образование синцития с помощью SARS-CoV-2 происходит во много раз быстрее, чем в случае SARS-CoV 2002 года, и образование синцития в значительной степени отвечает за фактор вирулентности и индукцию цитокинового шторма любого вируса в целом и SARS-CoV-2 - в частности [23,32].
Эпигенетические механизмы восприимчивости к SARS-CoV-2 и тяжести заболевания
Две недавние публикации [6,26] выявили важность паттерна метилирования гена, кодирующего ангиотензин-превращающий фермент 2, который, как известно, является наиболее важным для SARS-CoV-2 вирусным рецептором на эпителиальных клетках легких хозяина [35,27]. Было показано, что скорость продукции фермента ACE2 его геном находится под эпигенетическим контролем [35]. Результаты исследований Corley and Ndhlovu (2020) [6] показывают, что активность гена ACE2, основанная на паттерне метилирования нескольких промоторных CpG-островков, связана с возрастом и полом. ACE2 присутствует во многих тканях и органах человека, включая легкие, кишечник, печень,
поджелудочную железу, мозг и кровь. Скорость метилирования эпителиальных клеток легких была самой низкой по сравнению со всеми другими тканями, что позволяет предположить, что легочная ткань имеет самую высокую скорость транскрипции и экспрессии ACE2 [6]. В то же время было доказано, что ген ACE2 в нейронах и лейкоцитах ги-перметилирован и что белок, по-видимому, не экс-прессируется. В этом исследовании возраст коррелировал с гипометилированием гена ACE2 в легочной ткани, что может частично служить объяснением того, почему старение является фактором риска смерти от SARS-CoV-2, тогда как мужской пол демонстрировал лишь тенденцию к гипомети-лированию. В другом исследовании были проанализированы 700 образцов транскриптома легких пациентов, страдающих тяжелым SARS-CoV-2 с сопутствующими заболеваниями, и было обнаружено, что ACE2 был высоко экспрессирован у этих пациентов по сравнению с контрольными лицами [26]. Более высокая экспрессия гена ACE2 в выборках курильщиков по сравнению с никогда не курившими была выявлена в исследовании Cai (2020) [5] и эти результаты были подтверждены в последующей работе Leung и соавторов [19]. Помимо курения, как фактора риска SARS-CoV-2, тестостерон также был связан с более высокой экспрессией ACE2 и фурина у мужчин [10].
Эпигенетическая регуляция и повышенная экспрессия ACE 2 как в полости рта, так и в ткани легких могут объяснить, почему пожилые люди более чувствительны к развитию симптоматического SARS-CoV-2, чем молодые люди и, особенно, дети [26]. Эти данные согласуются с гипотезой эпигенетического старения, в результате которого одни гены в процессе старения постепенно становятся более активными, а другие, напротив, теряют свою активность [16]. Один из наиболее активных генов в пожилом возрасте - это ACE 2, и это делает пожилых людей более восприимчивыми к вирусным инфекциям и, следовательно, к COVID-19. Совсем по иному обстоят дела у детей. У них ген ACE 2 в легких, тканях ротовой полости и других органах обычно гиперметилирован и, следовательно, практически подавлен [14].
Вышеупомянутые данные подтверждают мнение о том, что эпигенетические механизмы участвуют во множестве процессов, в том числе и в таком, как проникновение SARS-CoV-2 в организм человека. Это также может означать, что существуют определенные подгруппы пациентов с известными эпигенетическими характеристиками, которые более восприимчивы к SARS-CoV-2. Одной из таких подгрупп могут быть пациенты, страдающие системной красной волчанкой (СКВ). Пациенты с СКВ, возможно, более склонны к развитию симптомов SARS-CoV-2 не столько из-за ослабленной иммунной системы, сколько из-за сильной сверхэкспрессии белка ACE2 в легких и связанного с ним гипометилирования его гена, а также значительного уровня деметилирования генов интерферона [28]. Более высокая экспрессия генов интерферона связана с развитием тяжелой
СКВ, характеризующейся цитокиновым штормом [31], а цитокиновый шторм, как известно, характерен для SARS-CoV-2 [24]. Все эти молекулярные детали, относящиеся к СКВ, соответствуют условиям повышенной восприимчивости к COVID-19 и серьезности заболевания. Недавний отчет подтверждает возможную повышенную восприимчивость и тяжесть заболевания SARS-CoV-2 у пациентов с СКВ, и его авторы также отмечают необходимость дополнительных исследований, поскольку у пациентов с СКВ высока распространенность сопутствующих болезней, таких как заболевания легких, хроническая болезнь почек и ожирение [21].
Эпи-лекарства как возможный подход к профилактике SARS-CoV-2 Эпигенетика как наука все еще находится в стадии становления. Тем не менее, можно влиять на эпигенетическую регуляцию нескольких генов с помощью естественных вмешательств. Использование витамина D и кверцетина может представить интерес для облегчения тяжести SARS-CoV-2 за счет ингибирования экспрессии ACE2 и фурина, хотя исследование, предлагающее это вмешательство, пока ещё основано лишь на данных in vitro [10]. Тем не менее, Ilie and Smith (2019) [15] обнаружили, что средний уровень витамина D в европейских странах отрицательно коррелирует с уровнем смертности от SARS-CoV-2, и это подтверждает все еще несколько предварительную рекомендацию использовать витамин D в качестве профилактического вмешательства для SARS-CoV-2. Другими кандидатами на эпигенетическое подавление генов ACE2 и интерферона являются курку-мин, деферасирокс и 8-гидроксихинолоны (8HQ) [30]. Куркумин является мощным активатором ДНК-метилтрансфераз в реальных клинических дозах [12]. Другим, так называемым эпи-лекарствен-ным препаратом с доказанной способностью к метилированию является сульфорафан (из брокколи) [17]. Все эти вещества являются натуральными лекарствами, отпускаемыми без рецепта, и могут помочь уменьшить тяжесть и восприимчивость к болезни. Куркумин особенно интересен из-за его понижающих уровень ферритина эффектов [29], так как было показано, что повышенные значения фер-ритина у пациентов, страдающих тяжелым SARS-CoV-2, значительно ухудшают прогноз [33].
Заключение SARS-CoV-2 вызвал разрушительную пандемию во всем мире с огромными последствиями не только для здоровья, но и для экономики. Хотя уже разработаны вакцины и начата вакцинация в некоторых странах, тем не менее, пандемия всё ещё продолжается и важно найти способы снизить вирусную инфекцию и тяжесть заболевания. Эпигенетические пути, как следует из данных обзора, представляются решающими в патофизиологии COVID-19, и все основные белки хозяина, выполняющие функции рецепторов вируса, демонстрируют более высокую экспрессию у восприимчивых людей, включая мужчин, курильщиков и пожилых людей. Поэтому стимуляция метилирования генов
ACE2, фурина и интерферона может помочь снизить восприимчивость к заражению и тяжесть заболевания, а витамин D и куркумин можно рассматривать в качестве эпи-лекарств и регуляторов экспрессии ДНК. Безусловно, эпигенетические данные, связанные с инфекцией SARS-CoV-2 и тяжестью заболевания, должны быть подтверждены дополнительными эпидемиологическими исследованиями, прежде чем дать какие-либо подробные рекомендации по использованию эпи-лекарств. Тем не менее, добавление куркумы, отказ от курения и использование безопасных доз витамина D определенно не причинят никакого вреда и, возможно, помогут облегчить инфекцию SARS-CoV-2 и тяжесть заболевания у восприимчивых людей.
Список литературы
1. Abassi ZA, Skorecki K, Heyman SN, et al.Covid-19 infection and mortality: A physiologist's perspective enlightening clinical features and plausible interventional strategies // Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 2020;318:L1020-L1022.doi: 10.1152/aj-plung.00097.2020
2. Alsaadi EAJ, Neuman BW, and Jones IM. A fusion peptide in the spike protein of MERS coronavirus // Viruses.2019;11: 1-9. doi: 10.3390/v11090825
3. Aronson J, and Ferner RE. Drugs and the renin-angiotensin system in COVID-19 // BMJ.2020;369:m1313. doi: 10.1136/bmj.m1313
4. Belouzard S, Millet JK, Licitra BN, and Whit-taker GR. Mechanisms of coronavirus cell entry mediated by the viral spike protein. Viruses 2012; 4: 10111033. doi: 10.3390/v4061011
5. Cai H. Sex difference and smoking predisposition in patients with COVID19 // Lancet Respir. Med. 2020; 8:e20. doi: 10.1016/S2213-2600(20)30117-X
6. Corley MJ, and Ndhlovu LC. DNA methylation analysis of the COVID-19 host cell receptor, angiotensin I converting enzyme 2 gene (ACE2) in the respiratory system reveal age and gender differences // Preprints. 2020. doi: 10.20944/preprints202003.0295.v1
7. Dupressoir A, Lavialle C, and Heidmann T. From ancestral infectious retroviruses to bona fide cellular genes: role of the captured syncytins in placenta-tion // Placenta.2012;33:663-671. doi: 10.1016/j.pla-centa.2012.05.005
8. Esteki-Zadeh A, Karimi M, Straat K, et al. Human cytomegalovirus infection is sensitive to the host cell DNA methylation state and alters global DNA methylation capacity // Epigenetics.2012;7:585-593. doi: 10.4161/epi.20075
9. Ferretti L, Wymant C, Kendall M, et al. Quantifying SARS-CoV-2 transmission suggests epidemic control with digital contact tracing // Sci-ence.2020;6936:1-13.doi: 10.1126/science.abb6936
10. Glinsky G. Genomics-guided molecular maps of coronavirus targets in human cells: a path toward the repurposing of existing drugs to mitigate the pandemic // arXiv [Preprint 2020]. arXiv:2003.13665
11. Gurwitz D. Angiotensin receptor blockers as tentative SARS-CoV-2 therapeutics // Drug Dev. Res.2020;2-5.doi: 10.1002/ddr.21656
12. Hassan FU, Rehman MSU, Khan MS, et al. Curcumin as an alternative epigenetic modulator: mechanism of action and potential effects. Front // Gene.2019;10:1-16.doi: 10.3389/fgene.2019.00514
13. Hoffmann M, Kleine-Weber H, Schroeder S, et al. SARS-CoV-2 cell entry depends on ACE2 and TMPRSS2 and is blocked by a clinically proven protease inhibitor // Cell.2020;181:271-280.e8.doi:10.1016/j.cell.2020.02.052
14. Holmes L, Lim A, Comeaux CR, et al.DNA methylation of candidate genes (ACE II, IFN-r , AGTR 1, CKG, ADD1, SCNN1B and TLR2) in essential hypertension: A systematic review and quantitative evidence synthesis // Int. J. Environ. Res. Pub. Health.2019;16:4829.doi: 10.3390/ijerph16234829
15. Ilie PC, and Smith L. The role of vitamin D in the prevention of coronavirus disease 2019 infection and mortality current status: posted // Aging Clin. Exp. Res.2019;1-4.doi: 10.21203/rs.3.rs-21211/v1
16. Jones MJ, Goodman SJ, and Kobor MS. DNA methylation and healthy human aging // Aging Cell.2015;14: 924-932.doi:10.1111/acel.12349
17. Kaufman-Szymczyk A, Majewski G, Lubecka-Pietruszewska K, and Fabianowska-Majew-ska K. The role of sulforaphane in epigenetic mechanisms, including interdependence between histone modification and DNA methylation // Int.J.Mol.Sci.2015 ;16:29732-29743. doi:10.3390/ijms161226195
18. Küry P, Nath A, Creange A, et al. Human endogenous retroviruses in neurological diseases // Trends Mol. Med. 2018; 24: 379-394. doi: 10.1016/j.molmed.2018.02.007
19. Leung JM, Yang CX, Tam A, et al. ACE-2 expression in the small airway epithelia of smokers and COPD patients: implications for COVID-19 // Eur. Respir. J.2020;55:2000688. doi: 10.1183/13993003.00688-2020
20. Levet S, Charvet B, Bertin A, et al.Human endogenous retroviruses and type 1 diabetes // Curr. Diabetes Rep. 2019;19:141. doi: 10.1007/s11892-019-1256-9
21. Mathian A, Mahevas M, Rohmer J, et al. Clinical course of coronavirus disease 2019 (COVID-19) in a series of 17 patients with systemic lupus erythematosus under long-term treatment with hydroxychloroquine // Ann. Rheum. Dis. 2020; 2019-2021. doi: 10.1136/annrheumdis-2020-217566
22. Matouskova M, BlaZkova J, Pajer P, et al. CpG methylation suppresses transcriptional activity of human syncytin-1 in non-placental tissues // Exp. Cell Res.2006;312:1011-1020.doi: 10.1016/j.yexcr.2005.12.010
23. Matsuyama S, Nao N, Shirato K, et al. Enhanced isolation of SARS-CoV-2 by TMPRSS2-
expressing cells // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2020;117:7001-7003.doi: 10.1073/pnas.2002589117
24. Mehta P, McAuley DF, Brown M, et al.COVID-19: consider cytokine storm syndromes and immunosuppression // Lancet.2020;395:1033-1034. doi: 10.1016/S0140-6736(20)30628-0
25. Niller HH, Tarnai Z, Decsi G, et al. Role of epigenetics in EBV regulation and pathogenesis // Future Microbiol.2014;9:747-756. doi:10.2217/fmb.14.41
26. Pinto BG, Oliveira AE, Singh Y, et al. ACE2 expression is increased in the lungs of patients with comorbidities associated with severe COVID-19 // MedRxiv.2020. doi: 10.1101/2020.03.21.20040261
27. Rui L, and Sang G. Analysis of angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) from different species sheds some light on cross-species receptor usage of a novel coronavirus 2019-nCoV // J. Infect. 2020; 80: 469-496. doi: 10.1016/j.jinf.2020.02.013
28. Sawalha AH, Zhao M, Coit P, and Lu Q. Epigenetic dysregulation of ACE 2 and interferon-regulated genes might suggest increased COVID19 susceptibility and severity in lupus patients // Clin. Immu-nol.2020;215:108410. doi:10.1016/j.clim.2020.108410
29. Sfera A, Bullock K, Price A, et al.Ferrosenes-cence: the iron age of neurodegeneration? // Mech. Ageing Dev. 2017; 174: 63-75. doi: 10.1016/j.mad.2017.11.012
30. Sfera A, Fayard L, Osorio C, and Price A. Epigenetic interventions for brain rejuvenation: anchoring age-related transposons // Neural Regene. Res. 2018;13:635636. doi: 10.4103/1673-5374.230283
31. Walden M, Tian L, Ross RL, et al. Metabolic control of BRISC-SHMT2 assembly regulates immune signaling // Nature. 2019; 570: 194-199. doi: 10.1038/s41586-019- 1232-1
32. Xia S, Liu M, Wang C, et al. Inhibition of SARS-CoV-2 (previously 2019-nCoV) infection by a highly potent pan-coronavirus fusion inhibitor targeting its spike protein that harbors a high capacity to mediate membrane fusion // Cell Res.2020;30:343-355. doi: 10.1038/s41422-020- 0305-x
33. Zhou F, Yu T, Du R, et al. Clinical course and risk factors for mortality of adult inpatients with COVID-19 in Wuhan, China: a retrospective cohort study // Lancet.2020; 395: 1054-1062. doi: 10.1016/S0140-6736(20)30566-3
34. Zhou P, Yang X-L, Wang X-G, et al. A pneumonia outbreakassociated with a new coronavirus of probable bat origin // Nature. 2020; 579: 270-273. doi: 10.1038/s41586-020- 2012-7
35. Zill P, Baghai TC, Schule C, et al. Dna methylation analysis of the angiotensin converting enzyme (ACE) gene in major depression // PLoS ONE. 2012; 7:e40479. doi: 10.1371/journal.pone. 0040479
