CC BY
79
Орипнальна стаття
УДК 616.831-006-091
Жукова Т.В.1, Смеянович А.Ф.2
1 Лаборатория клинической морфологии, Республиканский научно-практический центр травматологии и ортопедии, Минск, Беларусь
2 Нейрохирургический отдел, Республиканский научно-практический центр неврологии и нейрохирургии, Минск, Беларусь
Клинико-морфологические и патогенетические особенности глиобластом, контаминированных вирусом простого герпеса
Цель исследования. Изучить клинико-морфологические и патогенетические особенности глиобластом, контаминированных вирусом простого герпеса (ВПГ).
Материалы и методы. Проанализированы 708 историй болезни пациентов, которых лечили по поводу глиобластомы, в период с 2000 по 2012 г. Изучали клинические, морфологические и патогенетические особенности течения опухолей.
Результаты. У пациентов при наличии глиобластомы, контаминированной ВПГ, наблюдали явление сыпи в области носогубного треугольника, у 57% — обнаружена вирусная ДНК в спинномозговой жидкости (СМЖ). При контаминации глиобластом ВПГ экспрессия bcl-2 в эндотелиальных клетках увеличивается в 3 раза, в опухолевых клетках — в 2 раза.
Выводы. 1. У некоторых пациентов при наличии глиобластомы наблюдали клинические проявления герпетической инфекции в виде высыпаний на коже, лейкоцитоза, увеличение СОЭ. У 57% пациентов в СМЖ с помощью цепной реакции с полимеразой (ЦРП) выявляли ДНК ВПГ.
2. В ткани глиобластом выявлен антиген ВПГ, который экспрессируется опухолью, стенкой сосудов, а также стенкой сосудов и тканью опухоли одномоментно, что сопровождается инфильтрацией Т-лимфоцитами.
3. При контаминации глиобластом ВПГ экспрессия bcl-2 в эндотелиальных клетках увеличивается в 3 раза, в опухолевых клетках — в 2 раза, в среднем по всем группам исследованных опухолей.
4. Контаминация глиобластом ВПГ неоднозначно влияет на рост и прогрессирование опухоли: в контаминированных опухолях отмечают меньшую митотическую активность, но большее количество и разнообразие сосудов, что проявляется ускоренным ростом опухоли.
Ключевые слова: глиобластома, апоптоз, вирус простого герпеса.
Укр. нейрохiрург. журн. — 2014. — №3. — С. 12-18.
Поступила в редакцию 23.10.13. Принята к публикации 17.06.14.
Адрес для переписки: Жукова Татьяна Владимировна, Лаборатория клинической морфологии, РНПЦ травматологии и ортопедии, ул. Кижеватова, 60, Минск, Беларусь, 220024, e-mail: [email protected]
Глиобластома — наиболее часто выявляемая злокачественная опухоль нейроэпителиального происхождения у взрослых. По данным литературы, ее обнаруживают с частотой от 19 до 48% [1].
«Возрастной пик» появления опухоли от 46 до 55 лет. Структурно-биологические свойства глиоблас-томы зависят от особенностей гистогенеза, а также фенотипа клеток, обусловливающих его биологическую агрессивность.
Существенными этапами канцерогенеза являются иммортализация клеток, а также процессы ангиоге-неза, более интенсивные в опухолях, контаминированных ВПГ [2-4].
Появление продуктивной воспалительной реакции у пациентов при наличии глиобластомы может быть обусловлено амплификацией определенных последовательностей ДНК генома ВПГ, персистиру-ющего в клетках нервной системы, под влиянием де-репрессированных клеточных онкогенов и запуском пролиферативных процессов неоангиогенеза, в чем и состоит роль ВПГ [1-3, 5].
Цель исследования. Изучить клинико-морфо-логические особенности глиобластом, контаминированных ВПГ.
Материалы и методы исследования. Проанализированы 708 наблюдений глиобластом, контаминированных ВПГ, за период с 2000 по 2012 г. В группу сравнения включены 40 пациентов, у которых опухоли не экспрессировали антигены ВПГ1 и ВПГП.
Ретро- и проспективно изучены данные анамнеза, клинико-неврологический статус пациентов, проведены комплексные инструментальные и лабораторные исследования. Вирусологические исследования проводили по общепринятой методике, в СМЖ определяли наличие ВПГ методом цепной реакции с полимеразой (ЦРП) [6, 7]. Для гистологического исследования материал опухолей фиксировали в 4% растворе забуференного формалина с последующей обработкой с применением стандартных гистологических методов (исследования проводили на гистологическом процессоре замкнутого типа ASP200, Leica, Германия); иммуногистохимические
Статья содержит рисунки, которые отображаются в печатной версии — в оттенках серого, в электронной — в цвете.
© Жукова Т.В., Смеянович А.Ф., 2014
исследования — с использованием поликлональных антител кролей к антигену ВПГ I и II типа (AntiHerpes Simplex Virus Type 1, разведение 1:100, Dako, Германия; Anti-Herpes Simplex Virus Type 2, разведение 1:100, Dako, Германия); моноклональ-ных антител мышей к маркеру пролиферативной активности Ki-67 (разведение 1:50, BioGenex, США). Использовали систему визуализации K0673 LSAB2 Universal 150 tests (HRP, Rb/Mo, Liquid DAB, Diagnostic BioSystems, США), разбавитель антител S080981-2 (Dako, Дания). Индекс пролиферативной активности (ИПА) определяли путем подсчета в 9 случайных полях зрения при большом увеличении (х40) соотношения общего количества опухолевых клеток (не менее 100) и Ki-67-иммунопозитивных (в процентах). Апоптоз изучали иммуногистохимическим методом с использованием моноклональных антител мыши к p53 и Ьс1-2 (разведение 1:50, Dako, Германия). Эндотелиальные клетки выявляли с помощью моноклональных антител мыши к CD34 (разведение 1:100, BioGenex, США). Использовали именно их, поскольку нужно было доказать пролиферацию именно эндотелия. Количество иммунопозитивных CD34 структур сосудов подсчитывали при большом увеличении микроскопа (х40), для определения пролиферации эндотелия в сосудах использовали Фактор Виллебранда — моноклональные антитела мыши к фактору Виллебранда (разведение 1:50, Dako, Германия). Для идентификации спектра воспалительного инфильтрата использовали наборы моноклональных антител мышей к CD45 (общий лейкоцитарный фактор, разведение 1:200, BioGenex , США), CD8 (цитотоксические T-лимфоциты, разведение 1:150, BioGenex, США), CD20 (В-лимфоциты, разведение 1:50, Dako, Дания), а также Plasma Cell (плазмоциты, разведение 1:50, Dako, Дания). Мор-фометрические исследования проводили с анализом интенсивности и клеточного состава воспаления в ткани опухоли, особенностей кровоснабжения опухоли, а также особенностей пролиферативной активности, интенсивности апоптоза.
Результаты исследования и их обсуждение. У обследованных пациентов выявлены следующие клинические особенности течения заболевания: у 58% — в анамнезе были сведения о частых кожных проявлениях герпетической инфекции в виде вы-
Рис. 1. Микрофото. Глиобластома. Внутриядерное герпетическое включение I типа. Окраска гематоксилином и эозином. Ув.х1000 (иммерсия).
сыпаний в области губ и носогубного треугольника, повышении температуры тела до субфебрильной, умеренном лейкоцитозе при исследовании периферической крови. В СМЖ отмечали умеренный цитоз, выявлена ДНК ВПГ. У 76% пациентов опухоль удалена субтотально.
При изучении морфологических особенностей глиобластом, контаминированных ВПГ, обнаружены особенности их строения. По данным гистологических исследований, в 92% глиобластом выявлены внутриядерные герпетические включения I и II типа в клетках опухоли и эндотелии сосудов; трансформация ядер клеток опухоли, соответствующая стадия репродукции вирусных белков в нервной ткани; появление воспалительных инфильтратов, как в ткани опухоли, так и в стенке сосудов; наличие симпластов как в ткани опухоли, так и в стенке сосудов. Внутриядерные герпетические включения I типа представляют собой значительно увеличенные гиперхромные ядра (рис. 1), в которых ядрышко и хроматин не различимы. В 58% наблюдений глиобластом частота выявления внутриядерных герпетических включений I типа составляла 7,31±0,12; в 42% — их было в 2,5 раза меньше. В отдельных наблюдениях в гигантских ядрах определяли вакуоли, заполнявшие ядро, что свидетельствовало о формировании включений II типа — увеличенные ядра представлены скоплением вакуолей. В каждой вакуоли определяется точечная интенсивно окрашенная субстанция. Контуры ядерной мембраны неровные. Цитоплазма оптически пустая, измененное ядро с включениями II типа напоминает «тутовую» ягоду (рис. 2).
Уровень экспрессии антигенов ВПП и ВПГП, выявленных с использованием поликлональных антител кролей, составил в клетках глиобластом (55,58±0,85)%. В глиобластомах, контаминированных ВПП и ВПГП, обнаружены три варианта экспрессии антигенов ВПГ: антигены ВПП и ВПГП экспрессировались преимущественно в эндотелии сосудов (в 57% образцов), преимущественно в клетках опухоли (в 35%), а также одновременно в клетках опухоли и эндотелии сосудов (в 8%) (рис. 3-5). Глиобластомы, экспрессирующие антигены ВПП и ВПГП в клетках опухоли и эндотелии сосудов, занимают промежуточное положение между
Рис. 2. Микрофото. Глиобластома. Внутриядерное герпетическое включение II типа. Окраска гематоксилином и эозином. Ув.х1000 (иммерсия).
Рис. 3. Иммуногистохимическое исследование. Глиобластома. Экспрессия антигенов ВПГ1 и ВПГП в структурах стенки сосуда. Ув.х200.
Рис. 5. Иммуногистохимическое исследование. Глиобластома. Распределение иммунопозитивных структур в опухоли. Экспрессия антигенов ВПГ1 и ВПГП. Ув.х200.
первыми двумя группами. При пересчете ИПА, а также соотношения экспрессии антител к фактору апоптоза и антиапоптоза, доказано что эндотели-альные клетки делятся скорее, чем опухолевые. Промежуточная группа — деление и эндотелиаль-ных, и опухолевых клеток с одинаковой скоростью. Затем делятся только клетки опухоли, пока их количество не начинает опережать таковое эндо-телиальных клеток. Когда экспрессия антител к основным факторам роста в сосудах или в сосудах и ткани опухоли происходит одновременно, эффективно противовирусное лечение в сочетании с метронидазолом (интеркаляция ДНК) [8].
Важный компонент структуры глиобластом, контаминированных ВПГ — воспалительная инфильтрация. Идентификация клеток воспалительного инфильтрата в глиальных опухолях представляет объективные трудности, поскольку своеобразие микроглии не позволяет с полной уверенностью отличать клетки воспаления, за исключением ситуаций с выраженным очаговым воспалением либо обильной инфильтрацией стенки сосудов.
По данным иммуногистохимического исследования с антителами к CD45, CD8, Р^тасеИ, в воспалительном инфильтрате 98-99% клеток составляют ци-тотоксические Т-лимфоциты, 1-2% — плазмоциты.
Во всех исследованных глиобластомах, конта-минированных ВПГ, цитотоксические Т-лимфоциты
Рис. 4. Иммуногистохимическое исследование. Глиобластома. Экспрессия антигенов ВПГ1 и ВПГП в клетках опухоли. Ув.х200.
и плазмоциты обнаруживали либо в ткани опухоли, либо в стенках сосудов, либо и в ткани опухоли, и в стенке сосудов одновременно, подобно экспрессии антигенов ВПГ (рис. 6-8). В глиобластомах, не экспрессирующих антигены ВПГ, воспалительный инфильтрат не наблюдали.
В 57,08% наблюдений глиобластом в воспалительном инфильтрате преобладали нейтрофиль-ные гранулоциты, что оценивали как обострение хронического продуктивного воспаления, на фоне которого развивается опухоль. При обострении предшествовавшего воспаления заметно изменяются морфологические особенности глиобластом. В опухолях, сопровождающихся хроническим воспалением, морфологические признаки типичные, в глиоблас-томах, растущих на фоне обострения воспалительного процесса, наблюдают клеточный полиморфизм. Частота выявления типичных глиобластом составила 52,53%, гигантоклеточных глиобластом — 33,89%, в 13,78% наблюдений опухоль по строению подобна глиосаркоме.
В ткани глиобластом (как в клетках опухоли, так и в эндотелии сосудов), растущих на фоне обострения хронического воспаления, экспрессия антигенов ВПГ составляет (86,95±0,29)%. В ткани опухоли отмечена интенсивная пролиферация эндотелиальных клеток, образующих своеобразные скопления. В ядрах таких эндотелиальных структур выявлены включения ВПГ, преимущественно II типа.
Сравнительная характеристика морфологических особенностей глиобластом на фоне хронического воспаления и его обострения приведена в табл. 1.
Таким образом, состав клеток ткани глиобластом, контаминированных ВПГ, различается по морфологическим признакам.
В опухолях, растущих на фоне обострения хронического воспаления, увеличивается количество внутриядерных герпетических включений I типа, в воспалительном инфильтрате появляются ней-трофильные гранулоциты, активная пролиферация эндотелия с формированием своеобразных пластов. Эти признаки косвенно свидетельствуют об активации вирусной инфекции.
Таким образом, при активации ВПГ, характеризующейся формированием внутриядерных герпетических включений I типа, повышается активность проли-
Рис. 6. Иммуногистохимическое исследование. Глиобластома. Распределение иммунопозитивных клеток. Экспрессия СD8 (цитотоксические Т-лимфоциты) в структурах стенки сосуда. Ув.х100.
""«
Рис. 8. Иммуногистохимическое исследование. Глиобластома. Особенности экспрессии СD8 в ткани опухоли. Ув.х200.
ферации различных клеточных элементов опухоли, что обусловливает клеточный полиморфизм.
В группе сравнения в 0,5% наблюдений выявлена воспалительная инфильтрация, о чем свидетельствовала интенсивность экспрессии CD45.
В зоне вокруг глиальных опухолей также отмечены структурные признаки воспаления. Эти изменения в значительной мере зависят от структурно-биологических особенностей опухоли. При наличии глиоблас-томы клетки опухоли инвазивно распространяются в окружающую ткань мозга, что всегда сочетается с выраженной деструкцией компонентов нервной ткани в пограничной зоне, реактивными изменениями элементов макро- и микроглии и ранее существовавших кровеносных сосудов. В зоне инвазивного роста глиобластомы возникают отек, деструктивные изменения астроцитов, клазматодендроз их отростков,
Рис. 7. Иммуногистохимическое исследование. Глиобластома. Экспрессия СD8 в ткани опухоли. Ув.х200.
появляются гидропические формы клеток, зернистые шары, полиморфная лейкоцитарная инфильтрация (представленная как Т-, так и В-лимфоцитами), фокальная пролиферация микроглии с преобладанием палочкоподобных форм.
Признаком воспаления, обусловленного ВПГ в ткани опухоли и в стенке сосудов, является не только инфильтрация Т- лимфоцитами, часто с наличием ней-трофильных гранулоцитов, но и наличие в эндотелии и в клетках опухоли внутриядерных герпетических включений I и II типа, экспрессия антигенов ВПП и ВПГП в стенке сосудов и в ткани опухоли, а также в эндотелии сосудов и в клетках опухоли одновременно.
Признаком цитопролиферативного воздействия ВПГ является образование в ткани глиобластомы, контаминированной ВПГ, пластов эндотелиальных клеток, количество которых увеличивается по мере активации вируса и пропорционально зависит от количества внутриядерных герпетических включений I типа в эндотелии. В эндотелии сосудов и сосудистых конгломератах определяют включения ВПГ I и II типа. Мы предполагаем, что пусковым механизмом пролиферации является воспаление в ткани опухоли, обусловленное присутствием в ней части генома ВПГ.
В 30% наблюдений в опухоли обнаруживают плотную сосудистую сеть в виде гирлянды вокруг основного узла. Можно предположить, что при наличии такого плотного конгломерата эндотелиальных клеток глиобластомы становятся резистентными к лечению. Эндотелиальная и опухолевая клетки обладают различной чувствительностью к противоопухолевым препаратам из-за их биологических и функциональных различий. При анализе серийных срезов мы установили, что в 30% высоко злокачественных опу-
Таблица 1. Сравнительная характеристика морфологических особенностей глиобластом, контаминированных ВПГ, на фоне хронического воспаления и признаков обострения воспалительного процесса
Варианты течения глиобластом, контаминированных ВПГ Тип воспалительной инфильтрации Эндоте-лиальный пласт (количество в 5 полях зрения, ув.х40) Гистологический тип опухоли Тип включений ВПГ (количество в 5 полях зрения, ув.х40)
Хроническое течение без обострения Лимфоидная 1,47±0,62 Глиобластомы I (5,53±0,16) II (55,01±0,84)
Хроническое течение с обострением Лимфоидная и нейтрофильная 5,13±0,12 Глиобластомы, гигантоклеточные, глиосаркомы I (13,93±0,26) II (167,91±0,39)
холей имеется плотный конгломерат сосудов вокруг основного узла. Такое строение (предположительно) может обусловить неэффективность химиотерапии. При изучении отдаленных результатов установлено, что комбинированное лечение оказалось неэффективным также приблизительно в 30% наблюдений.
Одним из основных механизмов образования сосудов в глиобластоме является «почкование» или «отшнуровка» клеток опухоли [2, 9]. Просвет сосуда сужается до критического. В норме соотношение диаметра просвета сосуда и толщины его стенки — величина постоянная [2, 9]. Поэтому, как только процессы пролиферации превышают уровень запрограммированной гибели клетки (апоптоза), происходит сужение сосуда и его облитерация. Более четко этот процесс можно идентифицировать с помощью имму-ногистохимических методик (рис. 9).
Контаминация опухоли ВПГ неоднозначно влияет на ее морфологические свойства: с одной стороны, активация вируса способствует увеличению полиморфизма вследствие образования пластов и ядер клеток опухоли на различных этапах вирусной трансформации, с другой стороны, в ткани опухоли, контаминированной ВПГ, уменьшается количество митозов [10, 12].
Однако в эндотелии количество митозов увеличивается, в 2,54 раза увеличивается количество тонкостенных (новообразованных) сосудов. В период обострения герпетического воспаления, в сосудах глиобластомы увеличивается количество включений как I, так и II типа.
При сравнении количества внутриядерных герпетических включений I и II типа в глиобластомах на фоне хронического воспаления и его обострения с применением ^критерия Стьюдента установлено, что оно достоверно (р<0,002). Количество включений I
Рис. 9. Иммуногистохимическое исследование. Глиобластома. Активная ангиопролиферация. Экспрессия фактора Виллебранда. Ув.х1000 (иммерсия).
типа увеличивается более значительно (р<0,001). При этом увеличивается количество новообразованных сосудов: 25,01±0,16 — при хроническом воспалении, 37,01±0,12 — при хроническом воспалении с обострением. Увеличивается также количество сосудов с признаками пролиферации эндотелия: 13,76±0,36
— при хроническом воспалении, 29,37±0,66 — при его обострении. В глиобластомах на фоне обострения хронического воспаления форма просвета сосудов более разнообразна, что может быть косвенным подтверждением более активного процесса их образования при активации вируса. Морфологические особенности глиобластом, контаминированных ВПГ, приведены в табл. 2.
Следовательно, глиобластомы, контаминиро-ванные ВПГ, отличаются достоверно меньшим количеством митозов в ткани опухоли, однако большим количеством сосудов.
Глиобластомы, экспрессирующие антигены ВПГ, экспрессируют факторы апоптоза и антиапопто-за. В опухолях, экспрессирующих антигены ВПП и ВПГП в стенке сосудов, ИПА в эндотелиальных клетках составлял (30,64±0,18)%, экспрессия р53
— (26,19±0,48)%; Ьс1-2 — (32,23±0,44)%. Количество сосудов в «горячей точке» 37,05±0,11. ИПА клеток опухоли в этой группе составил (5,27±0,58)%, экспрессия р53 — (5,89±0,24)%; Ьс1-2 — (5,16±0,28)%.
В глиобластомах при более выраженной интенсивности экспрессии ВПП и ВПГП в ткани опухоли, ИПА в эндотелии сосудов составлял (5,27±0,66)%, экспрессия р53 — (5,09±0,72)%; Ьс1-2 — (9,03±0,39)%. Количество сосудов в «горячей точке» 26,05±0,41, ИПА в ткани опухоли этой группы составил (43,32±0,84)%, экспрессия р53
— (15,82±0,19)%, Ьс1-2 — (25,89±0,98)%.
В глиобластомах, экспрессирующих антигены ВПП и ВПГП как в стенке сосудов, так и в ткани опухоли ИПА в эндотелии сосудов составлял (33,17±0,16)%, экспрессия р53 — (25,09±0,72)%, Ьс1-2 — (37,58±0,39)%. Количество сосудов в «горячей точке» 30,25±0,11, в клетках опухоли этой группы ИПА составил (33,67±0,32)%, экспрессия р53
— (22,82±0,19)%; Ьс1-2 — (23,19±0,08)%.
В 8% наблюдений глиобластомы не экспрессиро-вали антигены ВПГ. В эндотелии сосудов ИПА составлял (55,27±0,66)%, экспрессия р53 — (7,09±0,72)%, Ьс1-2 — (9,08±0,39)%. Количество сосудов в «горячей точке» насчитывало 12,25±0,11, в клетках опухоли этой группы ИПА составил (58,67±0,32), экспрессия р53 — (7,82±0,19)%, Ьс1-2 — (9,19±0,59)%.
Интенсивность апоптоза в глиобластомах, экспрессирующих антигены ВПГ I и ВПГ II в сосудах, ткани опухоли, а также в сосудах и ткани опухоли одномоментно, приведена в табл. 3.
Группы больных Количество клеток в 5 полях зрения, ув.х40 (М±т)
включения I типа включения II типа воспалительная реакция количество митозов сосуды с однорядным эндотелием
Основная 7,31±0,12 21,01±0,15 Т-лимфоциты 9,32±0,04 20,64±0,18
Сравнения - - - 15,15±0,01 9,06±0,19
Таблица 2. Сравнение морфологических признаков глиобластомы, контаминированной ВПГ, и опухолей контрольной группы
Таблица 3. Интенсивность апоптоза в глиобластомах, экспрессирующих антигены ВПГ I и ВПГ II в ткани опухоли
Опухоль Количество экспрессирующих клеток, % (M±m)
P53 (сосуды) P53 (опухоль) bcl-2 (сосуды) bcl-2 (опухоль)
Глиобластома, экспрессирующая антигены ВПГ в сосудах 26,19±0,48 5,89±0,24 32,23±0,44 5,16±0,28
Глиобластома, экспрессирующая антигены ВПГ в ткани опухоли 5,09±0,72 15,82±0,19 9,03±0,39 25,89±0,98
Глиобластома, экспрессирующая антигены ВПГ в сосудах и ткани опухоли 25,09±0,72 22,82±0,19 37,58±0,39 23,19±0,08
Группа сравнения 7,09±0,72 7,82±0,19 9,08±0,39 9,59±0,08
Таблица 4. Пролиферация глиобластом, экспрессирующих антигены ВПГ в сосудах, в ткани опухоли, в сосудах и ткани опухоли одновременно
Опухоли с преобладанием активности пролиферации в определенных структурах Количество экспрессирующих клеток, % (M±m)
сосуд (количество в поле зрения, ув.х40) ИПА (сосуды) ИПА (клетки опухоли)
Глиобластома (в сосудах) 37,05±0,11 30,64±0,18 5,27±0,58
Глиобластома (в ткани опухоли) 26,05±0,41 3,27±0,66 53,67±0,32
Глиобластома (в сосудах и ткани опухоли) 30,25±0,11 33,17±0,16 33,32±0,84
Группа сравнения 12,25±0,11 55,27±0,66 58,67±0,32
Интенсивность роста глиобластом в зависимости от преимущественной экспрессии антигенов ВПГ приведена в табл. 4.
Такое течение опухолевого процесса может быть связано с различным уровнем наработки латентно ассоциированных транскриптов, которые являются важным антиапоптозным фактором в системе ВПГ-клетка (у эндотелиальной клетки и у опухолевой разная экспрессия ростовых факторов [3]).
Выводы.
1. У пациентов при наличии глиобластомы наблюдали клинические проявления герпетической инфекции в виде высыпаний на коже, увеличения СОЭ. У 57% пациентов в СМЖ с помощью ЦРП выявляли ДНК ВПГ.
2. В ткани глиобластом выявлен антиген ВПГ, который экспрессируется опухолью, стенкой сосудов, а также стенкой сосудов и тканью опухоли одномоментно, что сопровождается инфильтрацией Т-лимфоцитами.
3. При контаминации глиобластом ВПГ экспрессия Ьс1-2 в эндотелиальных клетках увеличивается в 3 раза, в опухолевых клетках — в 2 раза, в среднем по всем группам исследованных опухолей.
4. Контаминация глиобластом ВПГ влияет на рост и прогрессирование опухоли: в контаминированных опухолях отмечают меньшую митотическую активность, но большее количество и разнообразие сосудов, что проявляется ускоренным ростом опухоли.
Список литературы
1. Жукова Т.В. Критерии прогнозирования роста нейро-эпителиальных опухолей и рекомендации по тактике их лечения / Т.В. Жукова, М.К. Недзьведь // Материалы Всерос. науч.-практ. конф. «Поленовские чтения» (Санкт-Петербург, 17-20 апр. 2012 г.). - СПб., 2012. - С.228.
2. Жукова Т.В. Клинико-морфологические особенности анги-
огенеза в глиобластомах, контаминированных вирусом простого герпеса / Т.В. Жукова, М.К. Недзьведь // Мед. журн. - 2006. - №2(16). - С.42-43.
3. Arto I. Therapy with intravenous ganciclovir. Improves survival
in human malignant glioma / I. Arto, M. Vapalahti, K. Tyyne, H. Hurskainen // Mol. Ther. - 2004. - N5. - Р.181-191.
4. O'Konek J.J. Deficiency enhances tumor cell sensitivity to ganciclovir / J.J. O'Konek, P.D. Boucher, A.A. Lacco // Cancer Gene. - 2009. - V.16, N9. - P.683-692.
5. Хмара М.Е. Патогенетические механизмы и морфогенез герпетической инфекции ЦНС и некоторых нейроэкто-дермальных опухолей, ассоциированных с вирусом простого герпеса / М.Е. Хмара, М.К. Недзьведь // Материалы съезда невропатологов и нейрохирургов Республики Беларусь. -Минск, 2002. - С.246.
6. Глик Б. Молекулярная биотехнология. Принципы и приме-
нение: пер. с англ. / Б. Глик, Дж. Пастернак. - М.: Мир, 2002. - 589 с.
7. Патрушев Л.И. Искусственные генетические системы / Л.И.
Патрушев. - М.: Наука, 2005. - В 2 т.
8. Принципы послеоперационного лечения пациентов с нейроэпителиальными опухолями, контаминированными вирусом простого герпеса / Т.В. Жукова, А.Ф. Смеянович, М.К. Недьведь, С.Д. Безубик, А.А. Ширинский, С.Н. Марты-нюк, А.И. Ахремчук, М.Н. Хмара // Рос. нейрохирург. журн. им. проф. Поленова. - 2013. - Т.5, спец. вып. - С.182.
9. Калинин В.Л. Введение в молекулярную вирусологию / В.Л. Калинин. - СПб: СПбГТУ, 2002. - 284 с.
10. Углумбеков Э.Г. Гистология / Э.Г. Углумбеков. - М.: Гэотар-мед, 2001. - 670 с.
11. O'Konek J.J. Activation of mismatch repair protects cells against ganciclovir citotoxicity through decreasing errors in DNA replication / J.J. O'Konek, P.D. Boucher, D.S. Shewach // Proc. Am. Assoc. Cancer Res. - 2007. - N48.
- P423-430.
12. Sudden progression of a glioblastoma in partial remission? / D. Lins, D. Kanakis, K. Heinrichs, C.W. Dietzmann, C.W. Wallesch // Clin. Neurol. Neurosurg. - 2004. - V.106, N7.
- P.335-336.
ЖуковаТ.В.1, Смеянович А.Ф.2
1 Лабораторiя клЫчноТ морфологи, РНПЦ травматологи та ортопеди, Мшськ, Бторусь
2 Нейрохiрургiчний вiддiл, РНПЦ неврологи та нейрохiрурпТ, MiHCbK, Бторусь
Клшшо-морфолопчш i патогенетичнi особливостi росту глюбластом, контамiнованих BipycoM простого герпесу
Мета дослщження. Вивчити кл1н1ко-морфолог1чн1 i патогенетичнi особливост1 росту гл1областом, контамшованих в1русом простого герпесу (ВПГ).
Матеpiали i методи. Проанал1зован1 708 юторш хвороби пац1ент1в, яких л1кували з приводу глюбластоми за пер1од з 2000 по 2012 р. Вивчали клЫчш, морфолопчш i патогенетичнi особливосп переб1гу пухлин.
Результати. У пац1ент1в за наявност1 гл1областоми, контамшованоТ ВПГ, спостер1гали появу висипання в зон носогубного трикутника, лейкоцитоз, зб1льшення швидкосп ос1дання еритроцит1в (ШОЕ). У 57% пац1ент1в виявлена в1русна ДНК у спинномозковш р1дин1 (СМР). При контамшаци пухлини ВПГ експрес1я bcl-2 в ендотел1альних кл1тинах зб1льшуеться втрич1, в пухлинних — удв1ч1. Висновки. 1. У деяких пац1ент1в за наявност гл1областоми спостер1гали кл1н1чн1 прояви герпетичноТ 1нфекц1Т у вигляд1 висипань на шк1р1, лейкоцитозу, зб1льшення ШОЕ. У 57% пац1ент1в у СМР виявляли ДНК ВПГ.
2. У тканин глюбластом виявлений антиген ВПГ, що експресуеться пухлиною, ст1нкою судин, а також стшкою судин i тканиною пухлини одночасно, це супроводжуеться шфшьтращею Т-л1мфоцитами.
3. При контамiнацiТ глюбластом ВПГ експреая bcl-2 в ендотелiaльних клiтинах збiльшуеться втричi, у кл^инах пухлини — удвiчi.
4. Контамшащя глiоблaстом ВПГ неоднозначно впливае на рют i прогресування пухлини: в контамшованих пухлинах менша мiтотичнa актившсть, проте, бiльшa кiлькiсть i рiзномaнiтнiсть судин, що проявляеться прискореним ростом пухлин.
Ключoвi слова: гл'юбластома, апоптоз, в/рус простого герпесу. Укр. нейрох1рург. журн. — 2014. — №3. — С. 12-18. Над1йшла до редакци 23.10.13. Прийнята до публ1кацП 17.06.14.
Адреса для листування: Жукова Тетяна Володимир1вна, Лаборатор1я кл1н1чноУ морфологи, РНПЦ травматологи та ортопед^, вул. Кжеватова, 60, М1нськ, Блорусь, 220024, e-mail: [email protected].
Zhukova T.V.1, Smeyanovich A.F.2
1 Laboratory of Clinical Morphology, Republic Scientific-Practical Center of Traumatology and Orthopedics, Minsk, Belarus
2 Neurosurgery Department, Republic Scientific-Practical Center of Neurology and Neurosurgery, Minsk, Belarus
Clinico-morphological and pathogenetic features of glioblastomas, contaminated by herpes simplex virus
The purpose. To study clinico-morphological and pathogenetic features of glioblastomas, contaminated by herpes simplex virus (HSV).
Materials and methods. 708 medical records of patients with glioblastoma have been analyzed in the period from 2000 to 2012. Clinical, morphological and pathogrenetic features of tumors flow were studied. Results. In patients with glioblastomas, contaminated by HSV, we observed rashes in the nasolabial triangle, in 57% — viral DNA in liquor. In glioblastomas, contaminated by HSV, bcl-2 expression in endothelial cells tripled, in tumor cells — doubled.
Conclusions. 1. In some patients with glioblastomas clinical symptoms of herpes infection were observed: rushes on skin, high leucocytes, increased ERS. In liquor of 57% using polymerase chain reaction (CRP) HSV DNA was detected.
2. In glioblastomas tissue HSV antigen was detected, expressed by the tumor and vessel wall and also by vessel wall and tumor tissue at the same time, which is accompanied by infiltration of T-lymphocytes.
3. At contamination of glioblastomas by HSV bcl-2 expression in endothelial cells tripled, in tumor cells — doubled, in all groups in average.
4. Contamination of glioblastomas by HSV has an ambiguous effect on the growth and progression of tumors: in contaminated tumors mitotic activity is reduced, but number and variety of vessels is increased, which is manifested by tumor's growth acceleration.
Key words: glioblastoma, apoptosis, Herpes Simplex virus. Ukr Neyrokhir Zh. 2014; 3: 12-8.
Received, October 23, 2013. Accepted, June 17, 2014.
Address for correspondence: Tatiana Zhukova, Laboratory of Clinical Morphology, Republic Scientific-Practical Center of Traumatology and Orthopedics, Kigevatova St., 60, Minsk, Belarus, 220024, e-mail: [email protected]
