CC BY
19
УДК 616.31-002-085:616-07]-092.9
Ю.1. Силенко, М.В. Хребор, Г.М. Силенко, О.А. Писаренко
КЛ1Н1ЧН1 ТА Б10Х1М1ЧН1 ПОКАЗНИКИ У Б1ЛИХ ЩУР1В ПРИ Л1КУВАНН1 ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ГЕНЕРАЛ1ЗОВАНОГО ПАРОДОНТИТУ
Вищий державний навчальний заклад УкраТни «Укранська медична стоматологiчна академя»
Захворювання пародонту, зокрема, генерал1зова-ний пародонтит е одн1ею з центральних проблем стоматологи. Медичне i соц1альне значення цього захворювання визначаеться не ттьки наявнютю патолопч-них процеав в пародонтi та послабленням функци зу-бощелепного апарату, але й порушенням при цьому травлення, обмшних процесiв, iнфiкуванням та сенси-б^за^ею органiзму, небезпекою утворення джерела хронюсепсису i нервово-психiчними розладами де-пресивного характера, що призводять до зниження працездатностк
Серед факторiв патогенезу пародонтиту провщ-ними е порушення трофiки пародонту за рахунок по-гiршення мiкроциркуляцií (функцiонального та органь чного характеру, дисбаланс iмунокомпетентних та ба-р'ерних систем оргаызму, а також бiохiмiчних змiн, якi характеризуються в першу чергу порушеннями стану антиоксидантно' системи, що призводить до пщви-щення втьнорадикальних процесiв в тканинах [1, 2].
1снування значно' ктькост теорiй, якi роблять спробу пояснити етюлопю та патогенез генералiзова-ного пародонтиту, а в зв'язку з цим i рiзних пiдходiв до терапи даного захворювання, значно ускладнюють його дiагностику та лiкування. До цього часу одыею з маловивчених проблем е взаемодiя структурних елемен^в тканин в багатоклiтинному органiзмi. Рядом вчених висунуто i пiдтверджено припущення про наявнють в органiзмi бюлопчних регуляторiв, полтеп-тидiв, якi здмснюють перенесення iнформацií, необ-хiдноí для функцюнування, розвитку, взаемоди клiтинних популяцш. Проблема вивчення механiзму дм та кгмшчного застосування полiпептидiв е ключо-вою в сучаснiй медицинi [3,4].
Мета роботи дослщити клiнiчнi показники та стан втьнорадикального окислення в кровi та тканинах пародонту бтих щурiв при лiкуваннi спонтанного ге-нералiзованого пародонтиту iз застосуванням полте-птидiв.
Матерiали i методи дослщження
Експерименти виконанi на 280 шестимiсячних щурах лiнií Wistar обох статей масою 120-130 г, Пщ час проведеня дослiдження тварин утримували в умовах вiварiю в Ыдивщуальних клiтках, 'жу та воду не обме-жували. Всi дослiдження на тваринах проводилися у вщповщност1з положенням Свропейсько' конвенци щодо захисту хребетних тварин, яких використовують в експериментальних та шших цтях (Страсбург, 1986 р.). Директиви Ради Свропи 2010/63/EU, Закону Укра-'ни №3447- IV «Про захист тварин вщ жорстокого по-водження».
Всi тварини були роздтеш на такi групи:
I група - штактш тварини (70),
II група - тварини зi спонтанним пародонтитом
(70),
III група — тварини зi спонтанним пародонтитом, яким проводилося лкування полтептидним препаратом тималш в дозi 0,1 мг/кг в/м, щоденно, протягом 10 дтв (70),
IV група - тварини зi спонтанним пардонтитом, яким проводилось лкування полтептидом пародонтилiном в дозi 1 мг/кг в/м, щоденно протягом 10 дыв (70) ,
Кров для дослщження у щурiв забирали на фон ге-ксеналового наркозу шприцем iз серця у пластиковий шприц. В подальшому ii змшували з цитратом натрiю (3,8 % розчин ) у стввщношеы 9:1 i центрифугували при 1500 об/хв протягом 10 хв. Тканини пародонта i щелепи у тварин забирали i дослщжували вiдразу пю-ля евтаназп. Для дослiдження проводили забiр тканин пародонта (ясен з окютям) в дiлянцi верхнiх та нижых молярiв, так як пародонтит часто уражае ц тканини. В кровi та тканинах пародонту визначали показники втьнорадикального окислення [5]. ОцЫювали резорбцю кiстковоí тканини альвеолярного вщростку [6].
Вiдбiр тварин зi спонтанним пародонтитом здшс-нювали серед щурiв, що утримувалися в стандартних вiварiйних умовах на основi клiнiчного стану зубоще-лепноí системи: гiперемií, набряку, цианозу, що по-ширювалися на альвеолярну частину ясни, кровото-чивост1, наявност промiжкiв мiж зубами, íх конвер-генцií та патологiчноí рухомостi, наявност пародонта-льних кишень, заповнених 1жею.
Результати та 'х обговорення
При лкуваны експериментального спонтанного пародонтиту з використанням тималшу на 7 день спо-стережень вiдмiчали регресiю симптомiв захворювання у тварин. Практично зникала гiперемiя i набряк, кровоточивють ясен.
При уведеннi пародонтилiну тваринам зi спонтанним пародонтитом нами уже через 7 дшв спостере-жень знайдено покращення мiсцевого статусу: зникла синюшнiсть i припинялася кровоточивють у 94,1 %, гноетеча у 93,2 %, хоча рухливiсть зубiв зменшилась незначно (Таблиця 1).
Визначення бально1 оцiнки стоматологiчноí симптоматики пщтверджуе високу ефективнiсть лiкування. Якщо пщ впливом тималiну спостерiгаеться регрес стоматолопчно! симптоматики в 3,8 рази, то пщ впливом пародонтилЫу, в 7,2 рази. Порiвнюючи зменшення симптомiв пародонтиту у лiкованих тварин ми виявили зменшення останых в 1,9 раз у лкованих пародонтиль ном.
Таблиця1
Оц/нка сmомаmологiчного статусу в балах у тварин хворих спонтанним пародонтитом, яких лкували пол'тептидними препаратами (на 10 день спостережень)
Клiнiчнi прояви Групи тварин
!нтакты (n=70) З пародон-титом (n=70) Лковаы тималшом (n=70) Лковаы пародонтилшом (n=70)
1 2 3 4 5
Колip ясен - 70 9 3
Кpовоточивiсть - 70 9 3
Набряк - 70 7 3
Ексудат: Серозний Гнмний - 70 70 27 14
Абсцеси - 45 - -
Рухомiсть зубiв - 70 65 37
Пародонтальна кишеня - 70 17 10
Проба Шиллера-Писарева - 70 27 14
Всього балiв 0 605 161 84
Бали на тварину 0 8,64 2,3 1,2
Разом з тим стан тканин пародонту у тварин пок- статусу свщчить, що у лкованих тварин тималшом вш ращився в бтьш значнш мiрi на 20 день спостере- становить 1,1, а пародонтилшом - 0,3 бали на твари-ження, проведення бальноТ оцшки стоматолопчного ну (Таблиця 2).
Таблиця 2
Бальна о^нка сmомаmологiчного статусу у тварин зi спонтанним пародонтитом, яких лкували пол'тептидними препаратами (на 20 день спостережень)
Кл^чы прояви Групи тварин
!нтакты (n=70) З пародонтитом (n=70) Лковаы тималшом (n=70) Лковаы пародонтилшом (n=70)
1 2 3 4 5
Колip ясен - 70 - -
Кpовоточивiсть - 70 6 1
Набряк - 70 2 -
Ексудат: Серозний Гнмний 70 70 6 1
Абсцеси - 45 - -
Рухомiсть зубiв - 70 17 2
Пародонтальна кишеня - 70 17 2
Проба Шиллера-Писарева - 70 27 14
Всього балiв 0 605 75 20
Бали на тварину 0 8,64 1,1 0,3
На покращення стану тканин пародонту вказуе те, пародонтилшом в деяш Mipi вщбуваеться регенера-що у тварин зменшуеться рухомють зубiв та оголення ^я тканин пародонту, особливо навколо ill моляра моляpiв. Це свiдчить, що при лкуваны тималiном i (Таблиця 3).
Таблиця 3
Оголення Ill моляра при л'жуванш тималном i пародонтилном
Показники, що вивчались Стат. показн. Групи тварин
!нтакты (n=70) З пародонтитом (n=70) Лiкованi тималшом (n=70) Лiкованi пародонтилшом (n=70)
М 48,00 55,10 51,1 50,40
±м 1,46 1,24 1,18 1,60
Оголення III моляра Р1 < 0,01 > 0,05 > 0,05
(% ) Р2 < 0,01 < 0,01
Р3 > 0,05
Е % 114,79 106,45 104,8
Примiтки: 1. р1 - вiрогiднiсть показниюв мiж нтактними та до^дними тваринами;
2. р2 - вiрогiднiсть показниюв мiж до^дними i лкованими тваринами;
3. р3- в'рог'дшсть показникв м/'жлкованими тваринами тимал'том i пародонтил'том.
При вивченн процеав ВРО лт^в в тканинах па- тилшу. Зокрема, спостер^алось зменшення ТБК-родонту установлене 'х значне зменшення у щуpiв 3i активних продук^в в 4,93 рази, пiд час шкубаци цей спонтанним пародонтитом теля введення пародон- показник став менше в 4,38 раз, а piвень накопичення
МДА став меншим, шж у хворих тварин в 288%. Ми дантних фермент1в. Так, активнють СОД стала вищою спостер1гали також зб1льшення активност1 антиокси- в 2 рази, каталази в 1,95 раз (Таблиця 4).
Таблиця 4
Вплив пародонmилiну на деяю показники вльнорадикального окислення лiпiдiв при спонтанному пародонтитi
Групи тварин
Показники, що вивчались Стат. показн. lнтактнi З пародонтитом Лковаы тимальном Лковаы пародон-тилшом
(п=70) (п=70) (п=70) (п=70)
1 2 3 4 5 6
Рiвень ТБК-активних проду- М 13,63 34,92 24,20 7,08
клв до шкубаци ±м 0,45 0,42 0,87 0,16
(мкмоль/г) Р1 < 0,001 < 0,001 < 0,001
Р2 < 0,001 < 0,001
Р3 < 0,001
Е % 256,19 177,54 51,94
Рiвень ТБК-активних проду- М 15,67 42,57 28,42 9,71
клв через 1,5 год. шкубаци ±м 0,24 0,73 0,35
(мкмоль/г) Р1 < 0,001 < 0,001 < 0,001
Р2 < 0,001 < 0,001
Р3 < 0,001
Е % 271,67 181,37 61,96
Накопичення МДА в процес М 2,04 7,59 4,22 2,63
шкубаци (мкмоль/г) ±м 0,31 4,42 0,41 0,32
Р1 < 0,001 < 0,01 > 0,05
Р2 < 0,01 < 0,001
Р3 < 0,01
Е % 372,55 206,86 128,92
СОД (У.Од.) М 0,87 0,54 0,74 1,08
±м 0,05 0,04 0,04 0,05
Р1 < 0,01 < 0,05 < 0,01
Р2 < 0,01 < 0,001
Р3 < 0,01
Е % 62,10 85,05 124,07
Каталаза (КП) М 1,34 1,26 1,30 2,46
(У.Од.) ±м 0,09 0,16 0,08 0,05
Р1 < 0,05 > 0,05 < 0,01
Р2 > 0,05 < 0,01
Р3 < 0,01
Е % 94,03 97,76 183,58
Дослщженнями установлено, що пародонтил1н мав бтьшу ефективнють у вщношенш втьнорадика-льних реакц1й в пор1внянн1 з тимал1ном (Таблиця 4). Про це свщчить б1льш значне зменшення р1вня ТБК-активних продукт1в як до шкубаци, так I в процес1 п1в-торагодинноТ 1нкубац1Т I р1вня малонового диальдег1ду. Зменшення реакцш ПОЛ, можливо, зумовлено б1льш високою активн1стю антиоксидантних фермент1в тканин пародонта, зокрема, супероксиддисмутази I каталази. Осктьки пародонт 1нтенсивно кровопостачаеть-ся, р1вень реакц1й ВРО л1пщ1в в велик1й м1р1 залежить вщ Тх переб|гу у кров1.
Реакцп ВРО л1п1д1в мали однакову динамку I в
Вплив пародонтилiну на деяю показники вльнорадикального
кров1 тварин пюля уведення пародонтальних поль пептид1в I тимал1ну як I в тканинах пародонту. Ми спо-стер1гали достов1рне зменшення р1вня д1енових кон'ю-гат1в, концентрац1я останн1х досягае значення показ-ник1в 1нтактних тварин. Аналопчш результати ми отримали в вщношенш р1вня ТБК-активних продукт1в, накопичення МДА, спонтанного гемол1зу еритроцит1в. Звертае на себе увагу I те, що пародонтилш зменшу-вав реакц1Т ПОЛ кров1 в б1льш1й м1р1, шж тимал1н. Ми спостер1гали також збтьшення активност1 СОД, а з шшого боку концентрац1я церулоплазм1ну зменшуеть-ся на 25,4% (Таблиця 5).
Таблиця 5
слення лiпiдiв в кровi тварин при спонтанному пародонтитi
Групи тварин
Показники, що вивчались Стат. показн. 1нтакты (п=70) З паро-донтитом (п=70) Лковаы тималь ном (п=70) Лковаы паро-дон-тилшом (п=70)
1 2 3 4 5 6
М 1,54 1,42 1,38 1.0
Рiвень ТБК-активних продуклв до шкубаци ±м Р1 Р2 Р3 0,06 0,03 < 0,05 0,04 < 0,05 > 0,05 0,04 < 0,001 < 0,001 < 0,001
(мкмоль/л)
Е % 92,20 89,61 54,94
Продовження таблиц 5
1 2 3 4 5 6
М 1,78 2,40 2,00 1,20
±м 0,08 0,07 0,04 0,03
Рiвень ТБК-активних продук^в Р1 < 0,01 < 0,05 < 0,01
через 1,5 год. шкубацп (мкмоль/ л) Р2 < 0,01 < 0,01
Р3 < 0,01
Е % 134,83 112,35 67,42
М 0,26 1,01 0,62 0,21
±м 0,05 0,08 0,06 0,04
Накопичення МДА в процесi iнкубацií Р1 < 0,001 < 0,01 > 0,05
(мкмоль/л) Р2 < 0,01 < 0,001
Р3 < 0,01
Е % 388,46 238,46 80,77
М 5,74 18,74 14,42 10,38
±м 0,07 0,15 0,9 0,16
Спонтанний гемолiз еритроцитiв Р1 < 0,001 < 0,001 < 0,01
(% гемолiзу) Р2 < 0,001 < 0,001
Р3 < 0,01
Е % 326,48 251,21 180,84
М 38,83 45,07 40,85 38,19
±м 1,0 2,70 1,87 1,50
Ацилпдроперекиси Р1 < 0,05 > 0,05 > 0,05
(Екст/мг р ЛП) Р2 < 0,2 < 0,05
Р3 > 0,05
Е % 117,69 105,20 98,35
М 1,83 2,08 2,32 2,46
±м 0,04 0,06 0,04 0,05
СОД Р1 < 0,01 < 0,01 < 0,001
(УОд.) Р2 < 0,01 < 0,01
Р3 < 0,1
Е % 113,66 126,77 134,43
М 1,28 1,12 1,12 1,18
±м 0,02 0,06 0,03 0,05
Каталаза (К1) Р1 < 0,01 < 0,01 < 0,01
(УОд.) Р2 > 0,05 < 0,1
Р3 < 0,1
Е % 113,29 113,29 92,19
М 162,10 435,80 402,20 324,98
±м 7,50 18,30 14,30 21,83
Церулоплазмiн Р1 < 0,001 < 0,001 < 0,01
(мг/л) Р2 > 0,05 < 0,01
Р3 < 0,01
Е % 268,85 190,66 200,60
Таким чином, уведення пародонтальних полтеп-тид1в при спонтанному пародонтит1, призводить до зменшення реакцш ВРО л1п1д1в в тканинах пародонту та кров1. В б1льш1й м1р1 цей ефект характерний для пародонтил1ну в пор1внянн1 з тимал1ном. Наслщком цього може бути зменшення шемп та покращення троф1ки тканин.
Лтература
1. Клiнiко-патогенетичне обфунтування лкування гене-ралiзованого пародонтиту з використанням низькомо-лекулярних полiпептидних препаратiв: дис.... доктора мед. наук: 14.01. 22/Ю1 Силенко.-Полтава, 1999.-317 с
2. Силенко Ю.1. Роль втьнорадикальних, гемокоагулюючих та iмунних механiзмiв у патогенезi генералiзованого пародонтиту / Ю1 Силенко, РМ Ступницький // Укра'нський стоматолопчний альманах.- 2011. - № 1.- С.79-83.
3. Силенко Ю.И., Мищенко В.П., Токарь Д.Л., Хавинсон В.Х. Влияние цитомедина пародонта на свободнора-дикальное окисление липидов и антиагрегационную активность в нем при хроническом стрес-се//Стоматология.-1994.-№4.-С.6-8.
4. Мищенко В.П. Пародонт и гемостаз / В.П.Мищенко, Ю.1. Силенко. - Полтава, 2001. - 151 с.
5. По^бник з експериментально-кглжчних дослщжень в бюлогп та медицинi / Беркало Л.В., Бобович О.В., Боброва Н.О. [та Ы.] ; за ред. Кайдашева 1.П., Соколенко В.М., Катрушова О.В. - Полтава,1996. - 271 с.
6. Николаева А.В.Экспериментальные дистрофии пародонта / А.В.Николаева, Е.С.Розовская // Бюлл. экспе-рим. биол. и мед.-1965.-Т.60^ 7.-С.46-48.
Стаття надшшла 15.02.2018 р.
Резюме
Мета роботи стало дослщження кглычних показник1в та стан втьнорадикального окислення в кров1 та тканинах пародонту бтих щур1в при л1куванн1 спонтанного генерал1зованого пародонтиту i3 застосуванням полтепти-Д|в.
Уведення пародонтальних полiпептидiв при спонтанному пародонтитi, призводить до зменшення реакцш ВРО лiпiдiв в тканинах пародонту та кровк В бiльшiй мiрi цей ефект характерний для пародонтилшу в порiвняннi з тималiном.
Резюме
Целью работы стало исследование клинических показателей и состояние свободнорадикального окисления в крови и тканях пародонта белах крыс при лечении спонтанного генерализованного пародонтита с применением полипептидов.
Введение пародонтальных полипептидов при спонтанном пародонтите приводит к уменьшению реакций СРО липидов в тканях пародонта и крови. В большей мере этот эффект характерен для пародонтилина в сравнении с тималином.
UDC 616.31-002-085:616-07]-092.9
CLINICAL AND BIOCHEMICAL INDICATORS IN WHITE RATS IN THE TREATMENT OF EXPERIMENTAL GENERALIZED PARODONTITIS
Yu.I. Silenko, M.V. Khrebor, Y.M. Silenko, O.A. Pisarenko
Higher State Educational Establishment of Ukraine «Ukrainian Medical Stomatological Academy»
Summary
A number of scientists put forward and confirmed the assumption of the presence in the body of biological regulators, polypeptides, carrying out the transfer of information necessary for the functioning, development and interaction of cell populations. The problem of studying the mechanism of action and clinical application of polypeptides is key in modern medicine.
The aim of the research is to examine the clinical parameters and the state of free radical oxidation in blood and periodontal tissues of white rats in the treatment of spontaneous generalized periodontitis with the use of polypeptides.
Materials and methods of the research. Experiments were performed on 280 six-month-old of rats Wistar line of both sexes weighing 120-130 g. During the study, the animals were kept under vivarium conditions in individual cells, food and water were not limited.
All animals were divided into the following groups:
Group I - intact animals (70),
Group II - animals with spontaneous periodontitis (70),
Group III - animals with spontaneous periodontitis, treated with thymalin polypeptide preparation in a dose of 0.1 mg / kg i / m daily, for 10 days (70),
Group IV - animals with spontaneous paradontitis, treated with parodontylin polypeptide preparation at a dose of 1 mg / kg i / m, daily for 10 days (70).
Blood for research in rats was taken against the background of hexenalum anesthesia with a syringe from the heart into a plastic syringe. Subsequently, it was mixed with sodium citrate (3.8% solution) in a ratio of 9:1 and centrifuged at 1500 rpm for 10 min. Periodontal tissues and jaws of animals were taken and examined immediately after euthanasia. For the study, the collection of periodontal tissues (gums with periosteum) was performed in the area of the upper and lower molars, since periodontitis often affects these tissues. Indicators of free radical oxidation were determined in blood and periodontal tissues. Resorption of bone tissue of the alveolar process was evaluated.
Results and discussion. In the treatment of experimental spontaneous periodontitis using thymalin on the 7th day of observations, regression of symptoms of the disease in animals was observed. Hyperemia and edema, bleeding gums remitted. Whereas under the influence of thymalin there is a regression of dental symptoms by 3.8 times, under the influence of parodontylin - by 7.2 times. The condition of periodontal tissues in animals improved more significantly on the 20th day of observation, the scale assessment of dental status indicates that in animals, treated with thymalin, it is 1.1, and by parodontylin - 0.3 points per animal.
In studying the processes of lipid peroxidation in periodontal tissues, their significant reduction in rats with spontaneous periodontitis after administering parodontylin has been established. We also observed an increase in the activity of antioxidant enzymes. Hence, the activity of SOD was twice as high, catalase - by 1.95 times.
Reactions of lipid peroxidation had the same dynamics in the blood of animals after administering periodontal polypeptides and thymalin, as in periodontal tissues. We observed a significant decrease in the level of conjugated dienes, the concentration of the latter reaches the value of indices of intact animals. Similar results were obtained with regard to the level of TBA-active products, accumulation of MDA, spontaneous hemolysis of erythrocytes. Attention is drawn to the fact that parodontylin reduced lipid peroxygenation of blood to a greater extent than thymalin. We also observed increased activity of SOD, and, on the other hand, the concentration of ceruloplasmin decreased by 25.4%.
Thus, administering periodontal polypeptides during spontaneous periodontitis leads to a decrease in the responses of lipid peroxidation in periodontal tissues and blood. To a greater extent this effect is characteristic of parodontylin in comparison with thymalin.
