CC BY
54
Литература
1..Гланц С. Медико-биологическая статистика / Пер. с англ.-М.: Практика, 1999.- 459 с.
2.Дрейпер Н., Смит Г. Прикладной регрессионный анализ: В 2-х кн. Кн. 1. - М.: Финансы и статистика, 1986. - 366 с.
3Методические рекомендации по применению Требований к определению исходной (фоновой) загрязненности компонентов природной среды, проектированию и ведению системы экологического мониторинга в границах лицензионных участков недр на территории ХМАО.- Ханты-Мансийск: Полиграфист, 2004.- 92 с.
4.Постановление Правительства ХМАО от 29 июля 2003 г. № 302-П «Об утверждении требований к определению исходной (фоновой) загрязненности компонентов природной среды, проектированию и ведению системы экологического мониторинга в границах лицензионных участков недр на территории ХМАО».
5.Программа линейной калибровки измерительных комплексов Свидетельство об официальной регистрации программы для ЭВМ № 2006613662 / Беднаржевский С. С. и др. (RU). Заяв. 06.07.2006. Зарег. 20.10.2006.
6.РМГ 54-2002. ГСИ. Рекомендациями по межгосударственной стандартизации. Характеристики градуировочных средств измерений состава и свойств веществ и материалов. Методика выполнения с использованием стандартных образцов. - М.: Изд-во стандартов, 2002.
7.Фомин Г.С., Фомин А.Г. Почва. Контроль качества и экологической безопасности по международным стандартам: Спр-к -М.: Протектор, 2001.- 304 с.
8.International standard ISO 11095 Liner calibration using reference materials.- 1996.- 34 p.
УДК 617-001: 616.24-022.7-039.72
КЛИНИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПЛАЗМАФЕРЕЗА У БОЛЬНЫХ С КЛИМАКТЕРИЧЕСКИМ СИНДРОМОМ
Т.С.ФОТЕЕВА, Э.М. БАКУРИДЗЕ, А.Ю. ДАНИЛОВ*
В современном обществе растет интерес к проблемам здоровья женщин старшей возрастной группы [3]. В климактерии на фоне возрастных изменений особый акцент приходится на клинические симптомы эстроген-дефицитного состояния, первым из которых проявляется климактерический синдром (КС) [ 1, 4]. Основное внимание в лечебной практике КС уделяется медикаментозным методам, причем количество применяемых лекарственных средств в мире уже превысило 50000. Следствием этого явилось прогрессирующее распространение аллергических заболеваний и лекарственной болезни. Сегодня подобными больными занято до 10% коечного фонда. Данная ситуация указывает на необходимость более широкого применения в гинекологической практике нефармакологических методов лечения и профилактики заболеваний, которые базируются на активизации собственных защитных сил организма, его физиологических резервов, определяющих уровень неспецифической резистентности организма, позволяющих восстанавливать функции органов и систем, вовлеченных в патологический процесс. Одним из таких методов является плазмаферез (ПА), который благоприятно воздействует на все системы организма: улучшает микроциркуляцию, реологию крови, активность регуляторных нейрогуморальных систем, нормализует функцию печени и почек, гормональный статус [2, 5]. Эффективность ПА во многом обусловлена его неспецифич-ностью. Это качество особенно важно при лечении больных, имеющих несколько сопутствующих заболеваний или нарушений функций многих систем, что характерно для женщин с КС.
Цель исследования — обоснование применения плазмафе-реза для повышения эффективности лечения больных с КС.
Материалы и методы. Обследовано 186 больных с КС, возраст которых составил 51,95±6,51 лет (от 41 до 70 лет), длительность менопаузы - 4,4±4,69 года. 82 женщины находились в перименопаузальном периоде (48,88±4,48 лет), в постменопаузе -104 больных (53,62±6,74 лет). Для выполнения поставленной цели оценивался клинический эффект плазмафереза на общее состояние больных. Тяжесть климактерического синдрома оценивали по модифицированному менопаузальному индексу (ММИ) Куппермана в модификации Е.В.Уваровой (1982).
* ФГУ «НЦ АГ и П им. В.И. Кулакова Росмедтехнологий», г. Москва
Показаниями для проведения ПА у 186 больных с КС явились: неэффективность медикаментозной терапии, наличие ней-ровегетативных и психоэмоциональных симптомов КС по данным клинического исследования, наличие сопутствующих экст-рагенитальных заболеваний, непереносимость медикаментозных средств. Противопоказаниями для проведения ПА у женщин были: гипокоагуляция, тромбоцитопения, выраженная анемия (гемоглобин менее 90 г/л), отсутствие венозного доступа. Всем больным был проведен курс лечебного ПА - 3 сеанса с интервалами в 1-2 дня. Плазмовозмещение велось коллоидными и кри-сталлоидными р-рами в соотношении к удаленной плазме 1,2:1,0. Гепаринизацию проводили из расчета 50-100 ед. на 1 кг веса.
Результаты. Максимальное значение индекса Куппермана равнялось 68 баллам (42,96±12,08 балла). Легкая степень КС (1217 баллов) отмечалась у 3 (1,6%) женщин, средняя (18-34 балла) -у 37 (19,9%) больных, тяжелая (35 и выше баллов) - у 146 (78,5%) пациенток. При этом тяжесть КС определялась в основном за счет нейровегетативных и психоэмоциональных симптомов (средняя степень тяжести - у 49,4% и 60,6% больных, тяжелая - у 28% и 14% соответственно), обменно-эндокринные симптомы у подавляющего большинства отмечались как легкие (93%).
При проведении курса ПА отмечен высокий клинический эффект. Оценка проводимой терапии показала достоверное снижение показателей ММИ у всех больных с КС, которое происходило сразу по окончании курса ПА и в течение следующего месяца. Так, после проведения курса ПА количество больных с тяжелой степенью КС уменьшается в 12,3 раза, больных с легкой степенью - увеличивается в 40 раз, в течение следующего месяца продолжается положительная динамика (р<0,001). При сравнении результатов лечения в подгруппах женщин в пери- и постменопаузе достоверных различий выявлено не было.
Таблица 1
Динамика модифицированного менопаузального индекса на фоне проведения курса лечебного плазмафереза (N=186)
Степень тяжести До ПА После ПА Через месяц
Абс. % Абс. % Абс. %
Легкая 3 1,6 119 64*** 131 69,9***
Средняя 37 19,9 55 29,6* 50 26,9
Тяжелая 146 78,5 12 6,4*** 6 3,2***
Примечание: * - р<0,05; *** - р<0,001. Достоверность результатов представлена по сравнению с исходными данными.
Оценка проведенного лечения показала достоверное снижение показателей ММИ по нейровегетативному и психоэмоциональному синдромам, хотя изменений в обменно-эндокринном синдроме практически не наблюдалось. Число больных с оценкой нейровегетативных симптомов 0-10 баллов в течение курса лечения увеличилось в 45 раз (с 1,6% до 72%) и оставалось таким же в течение последующего месяца. Частота тяжелой степени уменьшилась в 17,5 раз, а через месяц не определялась ни у кого. По окончании курса терапии средняя степень тяжести снизилась в 9,2 раза и в течение месяца практически не изменялась.
Таблица 2
Динамика степени выраженности симптомов по модифицированному менопаузальному индексу на фоне проведения курса лечебного ПА
Показатели Исходно (n=186) После лечения (n=186) Через месяц (n=186)
баллы % баллы % баллы %
Нейровегетативные симптомы 0-10 баллов 3 1,6 134*** 72*** 134*** 72***
11-20 баллов 39 21 39 21 39 21
21-30 баллов 92 49,4 10*** 5,4*** 13*** 7***
>30 баллов 52 28 3*** 1,6*** 0*** 0***
Обменно-эндокринные симптомы 2-7 баллов 173 93 181 97,3 183* 98,4*
8-14 баллов 13 7 4 2,7 3* 1,6*
>14 баллов 0 0 0 0 0 0
Психо-эмоциональные симптомы 2-7 баллов 47 25,4 170*** 91 4*** 176*** 94,6***
8-14 баллов 113 60,6 13*** 7*** 10*** 5,4***
>14 баллов 26 14 3 1,6 0 0
Примечание: ** - р<0,01; *** - р<0,001. Достоверность результатов представлена по сравнению с исходными данными
Тяжелая степень выраженности психоэмоциональных симптомов снизилась в 8,8 раз, средняя - в 8,7 раз, легкая - увеличилась в 3,6 раза, причем в течение месяца после лечения сохраня-
лась положительная динамика. На фоне курса лечебного ПА шло ослабление интенсивности основных симптомов климактерического синдрома. У всех женщин состояние улучшилось: уменьшились число и интенсивность «приливов», головные боли, потливость, изменение настроения, раздражительность, склонность к отекам, частота симпато-адреналовых кризов, боли в мышцах и суставах, наладился сон. В течение месяца после лечения отмечена положительная динамика самочувствия. При этом уменьшение выраженности симптомов или их исчезновение быстрее происходило у женщин, находящихся в перименопаузе.
Всего проведено 560 сеансов ПА, частота осложнений составила 1,8% - это были аллергические реакции на введение коллоидных плазмозаменителей. Тяжелых осложнений при проведении ПА не было ни в одном случае. После проведения курса лечебного ПА отмечается выраженный клинический эффект, причем наиболее значимые изменения происходят в нейро-вегетативном и психоэмоциональном синдромах, тогда как изменений в обменно-эндокринном синдроме практически нет.
Литература
1.Вихляева Е.М. и др. Руководство по эндокринной гинекологии.- М. МИА. 1997.- С.603-650.
2.Воинов В.А. Эфферентная терапия. Мембранный плазма-ферез.- СПб:. Эскулап. 2002.- 272 с.
3.Здоровье женщины и менопауза / Пер. с англ.- М.: ГЭО-ТАР-МЕД, 2004.- 528 с.
4.Кулаков В.И. и др. Руководство по климактерию.- М. МИА. 2001.- 685с.
5.Постников А.А. Прямое очищение крови (лабораторный контроль).- М. Триада-фарм. 2003.- 182 с.
УДК 612.017+615.399
АНТИОКСИДАТНОЕ И ИММУНОПРОТЕКТОРНОЕ ДЕЙСТВИЕ ЭКСТРАКТА ЛИЧИНОК ВОСКОВОЙ МОЛИ
ПРИ ОКИСЛИТЕЛЬНОМ СТРЕССЕ У КРЫС, ВЫЗВАННОМ ПОТРЕБЛЕНИЕМ КОРМА, ОБОГАЩЕННОГО ЖЕЛЕЗОМ
А.А. ОВСЕПЯН, Н.И. ВЕНЕДИКТОВА, М. В. ЗАХАРЧЕНКО, Р.Е. КАЗАКОВ, М.Н. КОНДРАШОВА, Е.Г. ЛИТВИНОВА, И.Р. СААКЯН,
Т.В. СИРОТА, И.Г. СТАВРОВСКАЯ, П.М. ТТТВАРТТБУРД
Антиоксидантное и иммунопротекторное действие экстракта личинок восковой моли Galleria mellonella — биологически активной добавки, разработанной нами на основе старинного противотуберкулезного средства народной медицины, исследовалось на модели окислительного стресса, вызванного пищевой перегрузкой железом. Длительное потребление крысами корма, обогащенного железом в дозах, близких к принятым в ветеринарии, вело к развитию окислительного стресса и нарушениям иммунных и митохондриальных функций. Одновременное с железом добавление экстракта устраняло или снижало окислительный стресс и патологические изменения, вызванные длительным потреблением железа
Наряду с созданием новых высокоэффективных синтетических лекарств накапливаются данные о неблагоприятных побочных действиях при их применении, что заставляет обратиться к немедикаментозным природным лечебным средствам, которые, к сожалению, становятся уже малоизвестными. Одним из таких средств является экстракт личинок большой восковой моли, использовавшейся в народной медицине при лечении туберкулеза. Биологические исследования препарата проводили Мечников, его ученики и др. Особенно большой вклад в клиническое изучение препарата внес крупный московский кардиолог и врач широкого профиля С.А. Мухин. Помимо успешного применения препарата для лечения туберкулеза он открыл его лечебное действие при сердечных заболеваниях и общеукрепляющее действие на лиц пожилого возраста. В личном контакте С.А.Мухина и М.Н. Кондрашовой начались исследования в нашей лаборатории механизмов биологического действия препарата, который при поддержке ОАО ДИОД мы разрабатываем в качестве БАД, названной в знак уважения к С. А. Мухину «Натуральным экстрактом доктора Мухина». Разработанный препарат защищен патентом и имеет разрешение на применение.
Это остро востребованное средство не находит до сих пор широкого применения из-за недостаточных знаний механизмов его действия. Ранее мы показали, что спиртовый экстракт личинок восковой моли (ЭВМ) улучшает состояние туберкулезных
больных и людей с ослабленным иммунитетом [1—4]. В экспериментах на животных было показано, что ЭВМ повышает физическую активность, силу сердечных сокращений и устойчивость изолированного сердца крыс к высоким дозам строфантина. Прием ЭВМ также вел к повышению уровня гликогена в сердце и к аэробному сдвигу окислительного метаболизма в ткани сердца и аорты, что проявлялось в увеличении числа пирувата [5]. ЭВМ повышает эффективность энергетических процессов в митохондриях, особенно в сердце. Было обнаружено в опытах на стареющих крысах, что прием ЭВМ повышает устойчивость сердечной мышцы к искусственной ишемии [6]. Показано, что ЭВМ стимулирует рост и дифференцировку культивируемых клеток [7].
Многие заболевания, включая кардиологические, воспалительные и инфекционные, как острые, так и хронические сопровождаются развитием окислительного стресса. Умеренная перегрузка пищевым железом может служить моделью таких патологических состояний. При этом такая модель имитирует реальные состояния, сопровождающиеся избытком железа в организме. Широкая практика обогащения многих пищевых продуктов, напитков и лекарств железом с целью оздоровления может приводить к перегрузке железом у людей, потребляющих такие продукты длительное время. Мы предположили, что ЭВМ содержит антиоксиданты и что антиоксидантная активность (АОА) препарата определяет широкий спектр его биологического действия. Ранее мы обнаружили АОА в ЭВМ in vivo с использованием нескольких модельных систем [8]. Мы использовали модель окислительного стресса и иммуносупрессии у крыс, вызванных длительным приемом пищи, обогащенной ветеринарным препаратом железа, чтобы определить, проявляет ли ЭВМ АОА in vivo и чтобы выявить связь между АОА и иммунопротекторными свойствами ЭВМ. Препараты железа используют для предотвращения анемии у растущих животных. Окислительный стресс будет резко выраженным у взрослых животных, так как они менее нуждаются в железе, чем растущие. Поэтому мы провели сравнительные исследования на молодых и взрослых животных.
Материалы и методы. В работе использовали ветеринарный препарат железа «Ферроглюкин-75», содержащий 75 мг/мл железо-декстрана производства «Белмедпрепарат» (НПК Биогель, Белорусь). Компоненты буферных растворов, субстраты и ингибиторы дыхания - Sigma. ЭВМ готовили из личинок большой восковой моли путем экстракции 40% этанолом. Личинки выращивали в стандартных условиях, как описано в [9]. В работе использовались крысы Wistar, содержащиеся в виварии ИТЭБ РАН. Было проведено две серии экспериментов: на растущих и взрослых животных. В первой серии использовали 1,5 месячных самцов (начальный вес 100-130 г.). Животные были разделены на три группы: I - контрольная группа - получала стандартный рацион; II группа вместе с основным рационом ежедневно в течение 10 недель получала препарат железа (1 мл/жив/сут); III группа получала препарат железа (1мл/жив/сут) а также ЭВМ (100 мкл/жив/сут). Добавки давались отдельно с небольшим объемом пищи. Во второй серии использовали 3-месячных самок крыс Wistar (вес 180-200 г.). Группы животных были такие же, как в первой серии, добавки давались в течение 12 недель.
В конце эксперимента животных декапитировали и исследовали состояние внутренних органов, уровень малонового диальдегида (МДА) в тканях, антиоксидантную активность (АОА) в крови, размер ассоциатов и дыхательную функцию митохондрий, иммунную активность нейтрофилов. Митохондрии сердца выделяли по методу Чанса и Хагихары за исключением добавления протеиназ к среде. После декапитации животных сердце быстро извлекали и помещали в охлажденную среду выделения, содержащую 250 мМ сахарозы, 10 мМ HEPES 1 мМ ЭГТА, 0,5% альбумин, рН 7,4. Ткань измельчали, отмывали от крови и гомогенизаровли (соотношение ткани и среды 1:10). Гомогенат центрифугировали 7 мин при 400g. Супернатант центрифугировали в течение 10 мин при 12000g. Осадок суспензировали в среде, содержащей 250 мМ сахарозы, 10 мМ HEPES рН 7,4 и центрифугировали 12 минут при 12000g. Осадок суспендировали в той же среде в соотношении 1 : 0,1. Митохондрии хранили в ледяной бане. Митохондрии мозга выделяли как описано у Lai & Clark [10] с небольшими изменениями. Размельченную ткань мозга гомогенизировали на льду в 14 мл среды выделения, содержащей 250 мМ сахарозы, 10 мМ HEPES, 0,5 мМ ЭГТА, рН 7,4 и центрифугировали 3 мин при 2000 g. Супернатант центрифугировали 10 мин при 2000g и полученный суперна-
