К ВОПРОСУ О ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ СТИМУЛЯЦИИ ПОЛОВОЙ ФУНКЦИИ У СВИНОМАТОК С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПРОБНИКА-КРИПТОРХА
О.Б. Сенн, H.A. Бабанин, Д.О. Сенн
Аннотация. В статье приводятся данные о разработке нового способа подготовки хряка-пробника и его использовании с целью стимуляции половой функции у ремонтных свинок. Показано, что при дозированном контакте пробника со свинками у последних наступает раньше половое созревание, улучшается развитие репродуктивных органов и повышаются воспроизводительные качества.
Ключевые слова: гормоны, крипторх, матка, маточные железы, пробник, свинка, семенник, слизистая оболочка, хряк-пробник, эндометрий, яичники.
Выдающийся русский физиолог И.П. Павлов писал: «Живогный организм как система существует среди окружающей среды благодаря уравновешиванию этой системы с внешней средой, то есть благодаря определенным реакциям живой системы на падающие извне раздражения». Одним из таких внешних раздражителей для самки является самец -специфический врождённый «стимулятор».
О том, что самец оказывает стимулирующее влияние на репродуктивную систему самки, указывают исследования, проведённые как отечественными, так и зарубежными учёными. Экспериментально подтверждено, что дозированный контакт свинок с хряком-пробником повышает функциональную активность аденогипофиза яичников (В.А. Володин, 1986, Д.О. Сеин, 2005), усиливает секрецию желёз слизистой оболочки матки (Е.В. Воронянская, 1988) и положительно влияет на рост и развитие репродуктивных органов в целом (О.Б. Сеин, 1996; Dyck G.W., 1988). В связи с этим многие свиноводы-практики применяют хряков-пробников для стимуляции половой функции у свиноматок.
В практике ветеринарного акушерства и хирургии используется несколько общепринятых способов подготовки хряков-пробников (вазэк-томию, отведение полового члена, сшивание верхнего и нижнего колена полового члена и др.).
Нами был разработан новый метод подготовки хряков-пробников (О.Б. Сеин, H.A. Бабанин. 1990). Принцип предлагаемого способа подготовки хряка-пробника схематически изображен на рисунке 1 и заключается в том, что
отбирают хорошо развитых хрячков 3,5-5-месячного возраста. Перед операцией животному в течение суток назначают голодную диету. Затем после предварительного введения аминазина хрячка фиксируют на операционном столе в спинном положении так, чтобы задняя часть туловища была выше передней, и после обработки операционного поля и инфильтрацион-ной анестезии проводят левостороннюю кастрацию. Далее в месте расположения правого семенника над паховым кольцом делают разрез 5-8 см -рассекают кожу, мускульно-эластическую оболочку и подмускульно-эласгическую фасцию мошонки до общей вла1'алищной оболочки.
Общую влагалищную оболочку отделяют от подлежащих тканей и вместе с семенником через предварительно расширенный тупыми тканевыми крючками паховый канал оттесняют в брюшную полость (рисунок 1а). Затем хирургическую иглу с нитью под контролем пальца протягивают через оба края наружною пахового кольца (рисунок 16) и, сделав 1-2 стежка, стягивают паховое кольцо, что предотвращает возможность смещения семенника обратно в мошонку. При больших разрезах мошонки в верхней ее части накладывают несколько стежков, а спустя 7-10 суток швы снимают. Таким образом искусственно создают крипторха.
Наблюдения показали, что данная операция протекает, как правило, без осложнений, на фоне умеренного кровотечения, легкого останавливающегося после тампонады. На каждую операцию в среднем затрачивалось 20-30 мин.
Информация об авторах
Сеин Олег Борисович, доктор биологических наук, профессор, декан факультета ветеринарной медицины, заведующий кафедрой терапии и акушерства Курской государственной сельскохозяйственной академии имени профессора И.И. Иванова, тел. (4712) 53-14-04, E-mail: [email protected].
Бабанин Николай Алексеевич, кандидат ветерннарных наук, доцент кафедры терапии и акушерства Курской государственной сельскохозяйственной академии имени профессора И.И. Иванова.
Сеин Дмитрий Олегович, кандидат биологических наук, ассистент кафедры терапии и акушерства Курской государственной сельскохозяйственной академии имени профессора И.И. Иванова.
Рисунок 1- Схема этапов операции по подготовке хряка-пробника
а- введение семенника в брюшную полость через расширенный паховый канал; б- наложение узловатого шва на края наружного пахового кольца
Рисунок 2- Гистологическая структура семенников пробника-крипторха
а- уменьшение диаметра семенных канальцев в семеннике, извлеченного из брюшной полости; б-семенник, находившийся в мошонке (окраска гематоксилин-эозином, об. 20, ок. 7)
С целью изучения морфофункциональных изменений, происходящих в семенниках проб-ников-крипторхов, были исследованы семенники от 11 половозрелых оперированных хряков. Смежные семенники, которые, в данном случае, оставляли в мошонке каждого самца, являлись контролем. Отбор органов проводили в условиях мясокомбината через 2 месяца после операции.
У извлеченных семенников определяли средний диаметр и длину с использованием
штангенциркуля, массу - путем взвешивания и объем - методом погружения в сосуд с водой (20° С). Из фрагментов тканей семенников и их придатков после фиксации, обезвоживания и заливки в парафин готовили гистосрезы толщиной 6-7 мкм, которые окрашивали гематок-силин-эозинном.
Гормональную активность семенников определяли путем радиоиммунологического анализа содержания тестостерона в сыворотке крови.
Результаты исследований показали, что масса, объем, диаметр и длина семенников, извлеченных из брюшной полости, по сравнению с семенниками, находившимися в мошонке, уменьшались незначительно (таблица 1).
Таблица 1-Показатели развития семенников у хряков с односторонним искусственным крипторхизмом______________________________
Исследусмыс семенники п Показатели
масса, г объем, см’ длина, см диа- метр, см
из брюшной полости 11 105,4±2,7 98,0*2,2 8,5±1,4 14,4±2,7
из мошонки р 11 98,8±2,5 >0,05 92,4±2,6 >0,1 7,8±1,2 >0,05 13,8±2,0 >0,05
Недостоверность различий между опытом и контролем (Р>0,05), с одной стороны, можно объяснить коротким периодом нахождения семенников в брюшной полости после операции, которого, видимо, недостаточно для приобретения ими изменений, встречающихся при естественном крипторхизме. С другой стороны, нами не определялись сравнительные показатели развития семенников до их введения в брюшную полость, а как известно, даже у одного самца они колеблются в значительных пределах.
В то же время со стороны гистологической структуры тканей семенников отмечались характерные изменения. Так, морфометрические исследования показали, что в семенниках, находившихся в брюшной полости, средний диаметр семенных канальцев (рисунок 2) и площадь сечения ядер интерстициальных клеток были меньше соответственно на 15,3 мкм и 4,4 мкм, чем в контрольных семенниках.
В придатках морфологические изменения были менее выраженными, они характеризовались уплощением и уменьшением эпителиальных клеток его канала и снижением их функциональной активности по сравнению с клетками эпителия придатков, находившихся в мошонке.
Радиоиммунологический анализ показал, что гормонсинтезирующая функция в семенниках у пробников-крипторхов после операции резко снижалась. Так, если до операции содержание тестостерона в крови хряков составляло 3,0±0,07 нг/мл, то через 30 и 60 суток после операции его уровень соответственно достигал 1,85±0,09 и 1,90±0,11 нг/мл. Однако, по нашему мнению, это связано не столько с выявленными изменениями в интерстициальных клетках,
сколько с частичной «потерей» источника синтеза андрогенов в организме после кастрации второго семенника. Данное предположение подтверждается тем, что с возрастом пробников содержание тестостерона в их крови не уменьшалось, а увеличивалось, составляя через 90 суток 2,20±0,08 мг/мл.
В ряде хозяйств Курской области разработанным способом было подготовлено 48 хря-ков-пробников. За животными с послеоперационного периода и до хозяйственного использования вели постоянные наблюдения. Эксплуатацию пробников проводили с 6-месячного возраста: сначала для выявления половой охоты у ремонтных свинок, а затем и у взрослых маток. При умеренном режиме использования хряки-пробники в течение длительного времени обладали выраженными половыми рефлексами, были активны, легко контактировали с самками, у них хорошо выявлялась половая охота. Оплодотворения маток после спаривания не происходило.
Для выявления влияния пробников-крипторхов на половое созревание и становление репродуктивной функции ремонтных свинок были проведены научно-производственные опыты. С этой целью было отобрано три группы свинок-аналогов крупной белой породы по 15 голов в каждой. Животные 1 группы с 5-месячного возраста ежедневно и до включения в репродуктивный процесс в течение одного часа контактировали с пробником-крипторхом. Свинки 2 группы также имели ежедневное одночасовое общение с пробником, подготовленным методом иссечения участка спермиопро-вода. Животные 3 группы контакта с самцами не имели (контроль).
Опытные и контрольные свинки содержались в одном помещении и получали одинаковый рацион, сбалансированный по питательным и минеральным веществам. В течение эксперимента их периодически взвешивали, регулярно измеряли температуру тела, учитывали продолжительность половых циклов охоты, следили за поведенческими реакциями.
Для выяснения дозированного общения ремонтных свинок с пробником-крипторхом на рост и развитие репродуктивных органов, а также на воспроизводительные и продуктивные качества свинок была проведена вторая серия научно-производственных опытов. С этой целью по вышеописанному принципу сформировали группы свинок-аналогов. В 8-месячном возрасте в каждой группе на 7 сутки после на-
чала половой охоты было убито по пять животных, имевших одинаковую массу тела. При контрольном убое определяли длину и площадь рогов матки, массу и объем матки и яичников, а также подсчитывали число желтых тел прошлого полового цикла. Из середины рогов матки брали участки для изготовления гистологических срезов, которые окрашивали гематоксилин-эозином. После этого окулярмикрометром измеряли толщину оболочек матки яйцеводов (окуляр х 7, объектив х 8), а также определяли высоту эпителия и количество срезов желез в слизистой матки (окуляр х 7, объектив х 20) в десяти полях зрения микроскопа. Наиболее характерные изменения в половых органах фотографировали под микроскопом.
Оставшиеся после контрольного убоя свинки были включены в воспроизводительный процесс, в течение которого проводили сравнительный анализ их продуктивности (по первым трем опоросам).
Научно-производственные испытания разработанного способа биологической стимуляции становления репродуктивной функции ремонтных свинок показали, что у животных 1 группы половое созревание наступало в 177-суточном (164-190) возрасте, 2 группы - в 181-суточном (173-190) возрасте и 3 группы - в 197 сут (185-210), соответственно при массе тела 72,4±0,8; 74,7±0,8 и 85,7±1,3 кг. При этом установлено, что первые половые циклы у свинок всех трех групп были аритмичными и колебались в пределах 9-38 сут. По мере роста животных половые циклы становились более регулярными, повторялись через относительно равные промежутки времени и их продолжительность составляла 19-24 сут. Однако, если у свинок, имевших контакт с пробником-
крипторхом и вазэктомированным хряком, ритмичные половые циклы наблюдались, начиная со второго и третьего циклов, то у животных контрольной группы стабилизация половой цикличности растягивалась на 3-4, а у некоторых животных и на 5 циклов. В то же время у свинок 1 группы за период эксперимента было зарегистрировано на 16%, а у 2 на 18% меньше неполноценных циклов, чем у животных 3 группы.
Следовательно, дозированное общение свинок с пробником-крипторхом позволяет в среднем сократить период полового созревания на 4 сут по сравнению с животными, контактирующими с вазэктомированным хряком, и на 20 сут по сравнению с контрольными свинками, а также положительно воздействует на рост и развитие их репродуктивных органов (таблица 2; рисунок 3).
Достоверные различия отмечались и со стороны гистологических показателей. Так, у свинок 1 группы эпителиальный и мышечный слои матки были развиты лучше, а слизистая оболочка содержала больше маточных желез, чем у животных контрольной группы (таблица 3, рисунок 4).
Все вышеперечисленные изменения в репродуктивных органах свинок, по-видимому, связаны не только с воздействием специфических нейросексу ал ьных раздражителей, исходящих от самца, но и с непосредственным влиянием биологически активных веществ (гормонов, простагландинов, ферментов, вазаг-ландина) эякулята пробника-крипторха.
В свою очередь, у свинок, контактирующих с пробником-крипторхом, отмечены более высокие потенциальные воспроизводительные возможности, чем у контрольных животных (таблица 4).
Таблица 2 - Развитие репродуктивных органов ремонтных свинок, имевших в период
Группа
Показатели 1 контакт с пробником-крипторхом 2 контакт с вазэктомированным хряком 3 ко»проль
п 15 15 15
Масса матки, г 397,8±4,2* 383,8±4,8 371,0±11,0
Длина рогов матки, см 206,7±2,0* 199,5±2,6 193,5±5,6
Площадь рогов матки, см2 995,8±4,2* 977,5±7,1 956,9±9,8
Объем рогов матки, см3 373,8±4,6* 361,0±5,2 348,0±8,8
Длина яйцеводов, см 38,9±0,6 37,9±0,8 37,1±1,7
Масса яичников, г 8,7±0,4 8,2±0,4 7,5±0,4
Объем яичников, см3 7,6±0,4 7,1 ±0,3 6,6±0,4
Количество желтых тел прошлого полового цикла 16,0±0,7* 14,0±0,5* 10,3±0,8
- при Р<0,05, достоверность различий по сравнению с показателями контрольной группы
1 группа
2 группа
контроль
1 группа
2 группа
контроль
Рисунок 3 - Развитие матки (а) и яичников (б) у свинки, контактировавшей с пробником-крипторхом (1 группа), с вазектомированным хряком (2 группа) и не имевшей контакта с самцом (3 группа)
Таблица 3 - Гистологическая структура репродуктивных органов свинок, имевших в период выращивания дозированный контакт с хряками-пробниками
Группа Толщина мышечной оболочки, мкм Толщина слизистой оболочки, мкм Число желез в слизистой оболочке Высота покровного эпителия, мкм Толщина мышечной оболочки, мкм Толщина слизистой оболочки, мкм
в поверхностной части слизистой в глубокой части слизистой
1 724,8±28,0* 1773,6±63,4* 25,6±1,3 70,0±3,6* 40,8±2,5 126,0±12,8 58,8±3,3
2 668,7±27,1 1658,8±55,1* 22,7±1,1 64,7±3,3 34,0±1,2 119,2±9,7 54,0±3,3
3 609,7±18,7 1395,8±42,4 21,8±1,3 . . 58,1±3,0 34,4±2,0 116,4±9,2 49,2±2,8
* - при Р<0,05, достоверность различий по сравнению с показателями 3 (контрольной) группы
Рисунок 4 - Слизистая оболочка матки у свинки контактировавшей в период выращивания с пробником-крипторхом, (а) - увеличение количества маточных желез; и не имевшей контакта с самцом, (б) - уменьшение маточных желез
Таблица 4 - Воспроизводительные и продуктивные качества свинок (по трем опоросам), имевших в период выращивания дозированный контакт с хряками-пробниками
Г руппа Оплодотворяе- мостъ, % Многоплодие Масса поросенка при рождении, кг Число мертворожденных поросят Молочность, кг Число поросят к отъему Масса поросенка к отъему
По первому опросу
1 88 9,5±0,2* 1,14±0,02* 10 50,1*1,0* 9,0*0,2* 13,7*0,1 *
2 84 9,2±0,2* 1,07±0,02* 12 48,4*1,2* 8,6*0,1 * 13,5*0,3
3 78 8,6±0,1 1,03*0,01 17 45,1*0,6* 8,0*0,1 13,1±0,1
По второму опросу
1 94 10,0±0,2* 1,18*0,01* И 51,5±1,1 * 9,5*0,3* 14,0±0,1
2 88 9,7±0,2 1,12*0,02 11 50,2*1,0 9,1*0,3* 13,7*0,1
3 76 9.1 ±0,3 1,09*0,01 15 47,6*1,0 8,4±0,2 13,0±0,6
По третьему опросу
1 94 9,8±0,2* 1,08*0.02* 10 48,7*1,2 9,2*0,2* 13,8*0,1 •
2 90 9,4±0,2 1,04±0,02 9 48,1*0,9 8,8*0,2* 13,2±0,1
3 82 8,9±0,2 1,0*0.01 15 45,5*1,2 8,0*0,2* 13,2*0,1
* - при Р<0,05, достоверность различий по сравнению с показателями 3 (кокгрольной) группы
Анализ проведённых нами исследований свидетельствует, что пробник-крипторх, как «стимулятор», имеет определенные преимущества перед вазэктомированным хряком, так как в этом случае, помимо воздействия на сексуальный центр самки зрительных, слуховых, обонятельных и тактильных раздражителей, оказывают непосредственное влияние на её репродуктивные органы гормоны, простагланди-ны и ферменты, которые поступают с эякулятом пробника-крипторха во время полноценного коитуса. Под воздействием этих компонентов эякулята в матке активизируются морфофункциональные процессы, ускоряются её рост и развитие.
Следует отметить, что способность пробника-крипторха совершать полноценный коитус также оказывает положительное влияние на половую функцию ремонтных свинок. Во-первых, под влиянием коитуса происходит ускорение овуляции. Во-вторых, коитус стимулирует моторику матки, усиливает ее антипери-стапьтические сокращения и «засасывающую» функцию, что способствует более быстрому и в большем объеме продвижению спермы в рога матки. В-третьих, эякулят самца положительно воздействует на внутреннюю среду матки, подготавливает ее к принятию полноценной спермы после естественного или искусственного осеменения, создает благоприятные условия для сперматозоидов, обеспечивая их дополнительной энергией и питательными веществами.
Разумеется, положительное влияние коитуса ремонтных свинок с пробником-крипторхом не ограничивается перечисленными выше при-
мерами. Не исключено, что в этом случае имеют место и другие, более сложные физиологические процессы, затрагивающие не только половую систему, но и весь организм самки в целом.
Таким образом, полученные результаты позволяют рекомендовать разработанный нами способ подготовки хряка-пробника и его использование, в качестве биологического «стимулятора», (патент на изобретение №1738195, 1993), к широкому использованию в практике ветеринарной медицины.
Список используемых источников
1 Володин, В.А. Влияние физиологической стимуляции на половую функцию ремонтных свинок / В.А. Володин // Сельскохозяйственная биология. - 1987. - №6. -С. 111-116.
2 Сеин, Д.О. Морфофункциональное состояние аденогипофиза у ремонтных свинок в период становления половой функции / Д.О. Сеин // Автореф. канд. биол. наук. - Орёл, 2005. - 22с.
3 Воронянская, Е.В. Влияние пробника на половое развитие ремонтных свинок / Е.В. Воронянская // Ветеринария. -1988. - №9. -С. 4546.
4 Сеин, О.Б. Способ подготовки хряка-пробника / О.Б. Сеин, Н.А. Бабанин // Ветеринария. - 1990. -№7. -С. 50-51.
5 Сеин, О.Б. Становление половой функции у свиней / О.Б. Сеин // Научно-техн. бюл. ВИЖ. - 1989.-В.95.-С. 53-57.
6 Dyck, G.W. Factors influencinq sexual maturation, puberty and reproductive efficiency in the qilt / G.W. Dyck//J. Anim. Sc.- 1988.-V. 68.-№1. -P. 1-13.