CC BY
65
УЧЕНЫЕ ЗАПИСКИ КАЗАНСКОЙ ГОСУДАРСТВЕННОЙ АКАДЕМИИ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ им Н.Э.БАУМАНА
Т. 206 2011
УДК:578.823:619
К ВОПРОСУ АНТИГЕННОЙ ИДЕНТИЧНОСТИ ПОЛЕВЫХ ИЗОЛЯТОВ И ЭТАЛОННОГО ШТАММА «52/70-М» ВИРУСА
БОЛЕЗНИ ГАМБОРО
Алиева А.К.* Алиев А.С.**, Юсупова Г.Р.
Санкт-Петербургский Г осударственный университет сервиса и
экономики*
ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины»**
ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: инфекционная бурсальная болезнь, изоляты вируса, эталонный штамм, антигенность.
Key words: infectious bursal disease, virus isolates, reference strain, antigenicity.
Инфекционная бурсальная болезнь (ИББ) или болезнь Гамборо вызывается небольшим безоболочечным вирусом с двуспиральной РНК, относящимся к семейству Birnaviridae.
Хотя прошло более 40 лет с тех пор, как болезнь впервые была описана в 1962 году в США, она до сих пор вызывает серьезные экономические потери в птицеводческой отрасли всего мира.
В конце 80-х годов пошлого столетия в вакцинированных стадах птиц в США появились антигенные варианты, а в Европе и России -высоковирулентные штаммы вируса ИББ (антигенно-сходные с «классическими» штаммами) которые очень быстро распространились по всему миру. Инфекция с участием классических вирулентных штаммов и вариантных американских штаммов проявляется высокой заболеваемостью и обычно низкой смертностью, тогда как высоковирулентные штаммы вируса ИББ могут вызывать до 90% смертности у яичных кроссов птицы (2,8,9,15).
Сообщения многих авторов [4,5,6] указывают на антигенную неоднородность штаммов вируса ИББ, выделенных в России и других странах, с чем связывают неудачи применения существующих живых вакцин при профилактике заболевания.
Целью настоящей работы явилось изучение антигенных различий и родство между вновь выделенными изолятами и ранее известным штаммом возбудителя ИББ, имеющимся в нашей коллекции.
Материал и методы. В опытах использовали эталонный штамм вируса ИББ — «52/70-М», а также эпизоотические штаммы: № 1 — «Синявинский»; № 2 — «Бенедерский»; № 3 — «Дубовляны»; № 4 — «Таллинский»; № 5 — «Раздельнянский». Штаммы вируса ИББ
поддерживали на 11-дневных эмбрионах СПФ-кур и цыплятах восприимчивого возраста.
Антигенное родство штаммов вируса ИББ изучали в РДП путем титрования штаммоспецифических сывороток с каждым исследуемым антигеном, а также в опыте по перекрестному заражению исследуемыми штаммами цыплят, привитых образцами вакцины, полученными на
основе указанных штаммов вируса ИББ. Для этого исследуемые штаммы вируса ИББ предварительно были освежены в соответствующей системе культивирования и после контроля на стерильность, биологическую активность и после инактивации димерэтиленимином (ДЭИ) использованы для получения опытных серий вакцины путем добавления к инактивированной суспензии каждого вируса в качестве адъюванта 3% геля ГОА до конечной концентрации 1,5%. Инактивацию вируса ИББ проводили димерэтиленимином (ДЭИ) [3]. Полноту инактивации проверяли методом
3-х «слепых» пассажей на куриных эмбрионах. РДП ставили по ранее разработанной нами методике (1). В качестве антигена использовали 10%-ый гомогенат фабрициевых цыплят, зараженных в отдельности разными штаммами вируса ИББ. Образцы вакцин использовали при получении штаммоспецифических сывороток на СПФ-цыплятах.
Результаты и обсуждение. Данные, полученные в ходе этих экспериментов приведены в табл. №№ 1 и 2.
1 .Перекрестная активность штаммоспецифических сывороток в РДП (^2)
с разными штаммами вируса ИББ
Штаммоспецифическая сыворотка
Антиген «52/70-М» изолят № 1 изолят № 2 изолят № 3 изолят № 4 изолят № 5 контроль
«52/70-М» 3,6 4,4 3,6 3,5 3,6 3,8 -
изолят № 1 4,1 3,8 4,2 4,4 3,9 3,8 -
изолят № 2 3,8 4,0 4,6 3,8 4,4 4,3 -
изолят № 3 4,5 4,5 4,1 3,6 3,2 4,2 -
изолят № 4 3,8 4,3 4,2 3,5 3,9 4,4 -
изолят № 5 4,2 4,4 4,3 3,4 4,0 4,3 -
Кон троль - - - - -
Результаты опыта показали, что эпизоотические и эталонный штаммы вируса, использованные в работе, обладают одинаковой преципитирующей активностью со всеми штаммоспецифическими сыворотками и образуют одинаковые линии преципитации (табл. 1). Активность иммунных сывороток в перекрестной РДП была почти одинакова в отношении гомо- и гетерологичных антигенов, что свидетельствует о наличии общих вирусоспецифических антигенных детерминант.
Известно, что штаммы вируса ИББ имеют общий групповой антиген, который участвует в РДП, реакции иммунофлюоресценции и твердофазном иммуноферментном анализе (10,11,12,13,16,17, 18).
В капсидных белках VP2 и УРЗ содержатся эпитопы, которые ответственны за групповую антигенность вируса ИББ (16).
Кроме общего группового антигена, вирус ИББ содержит антиген или антигены, ответственные за специфичность, связанные c определенным серотипом. Поэтому при серотипировании вируса ИББ используется реакция нейтрализации in vitro со специфической иммунной сывороткой к каждому серотипу или оценка их in vivo (14). С учетом изложенных данных, нами проведен опыт по изучению перекрестной устойчивости цыплят к исследуемым штаммам вируса ИББ (табл. 2). Для этого были сформированы 7 групп, по 60 цыплят в каждой. Цыплятам в 1-5 группах внутримышечно вводили инактивированные антигены эпизоотических штаммов, в 6-й группе - штамм «52/70-М», после инактивации, в объеме 0,5 мл. 7-я группа птиц служила контролем. Протективную активность антигенов вируса ИББ оценивали на 28-е сут опыта серологически (в РДП и ИФА) и заражением по 10 цыплят из каждой группы разными штаммами вируса в дозе 10 ИД50/мл.
2. Перекрестная устойчивость цыплят к различным штаммам вируса ИББ
Антиген Штамм вируса ИББ, взятый для заражения
52/70-М изолят № 1 изолят № 2 изолят № 3 изолят № 4 изолят № 5
«52/70-М» 2/10 1 /10 0 /10 1/10 0/10 2/10
Изолят № 1 1/10 1/10 1/10 0/10 1/10 2/10
Изолят № 2 2/10 1/10 0/10 1/10 0/10 1/10
Изолят № 3 1/10 0/10 2/10 1/10 1/10 0/10
Изолят № 4 2/10 1/10 1/10 0/10 2/10 1/10
Изолят № 5 0/10 2/10 1/10 0/10 1/10 2/10
Контроль 7/10 (4) 10/10 (8) 9/10 (8) 10/10 (9) 9/10 (8) 8/10 (8)
Примечание: числитель — количество заболевших цыплят, знаменатель —
количество зараженных цыплят, в скобках — количество павших цыплят.
Результаты выживаемости птиц после введения разрешающей дозы вируса ИББ приведены в таб. 2, из данных которой следует, что процент защищенных птиц по группам колеблется в пределах 80-100%, независимо от происхождения штамма заражаемого вируса. Данные опыта по оценке резистентности подопытных цыплят согласуются с серологическими исследованиями по выявлению специфических антител в сыворотке крови, взятой на 28-е сутки после введения антигенов. Уровень антител в РДП и ИФА составил 2,5-3,0 log2 и 1:3560 ^ 1:4250, соответственно.
Из данных табл. 2 также следует, что эпизоотические штаммы, циркулирующие в птицехозяйствах стран СНГ, не имеют антигенных различий и обладают родством с известным штаммом вируса ИББ. Гибель цыплят в контрольной группе при заражении эпизоотическими штаммами была в 2-2,5 раза выше, чем в группе птиц, зараженных эталонным штаммом «52/70-М», что свидетельствует о высокой степени патогенности вновь выявленных изолятов по сравнению с ранее выделенным штаммом. Известно, что штамм «52/70» выделен у больных цыплят в Англии и описан A.S. Bygrave и J.T Faragher в 1970 г(7). При проведении данного опыта руководствовались литературными сведениями, согласно которым вирусы в инактивированном состоянии не создают перекрестную защиту даже в отношении штаммов, претерпевших незначительную антигенную изменчивость, и их используют для серотипирования вируса in vivo (16), что послужило дополнительным доводом в пользу высокой степени антигенного родства исследованных штаммов вируса ИББ. Существенное расхождение наших выводов об антигенной идентичности с имеющимися литературными данными об антигенной вариабельности возбудителя ИББ, по-видимому, связано с различием методов исследований и сопоставление штаммов, прошедших разное число пассажей и в разной системе их культивированя, что подтверждается данными отдельных зарубежных авторов [18].
Заключение. Результаты иммунологического анализа показывают, что вновь выделенные эпизоотические штаммы не имеют антигенных различий как между собой, так и с эталонным штаммом вируса ИББ.
Наиболее серьезную проблему в системе профилактических мероприятий против ИББ в промышленном птицеводстве представляет формирование иммунитета у молодняка птиц, полученных от вакцинированных кур-несушек. Наличие пассивных антител у них препятствует формированию поствакцинального иммунитета.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Алиев А.С. Лабораторная диагностика
инфекционного бурсита кур // Ветеринария. — 1990. — № 5. — С. 31-33. 2. Алиев А.С. Инфекционная бурсальная болезнь птиц (эпизоотология, этиология, диагностика и профилактика.: Автореф. дис. докт. вет. наук. — СПб., 1993. 3. Алиев А.С. Инактивирующее действие ДЭИ и
формальдегида на вирус ИББ. / Ветеринарная профилактика в
промышленном птицеводстве: Сб. науч. трудов ВНИВИП. — СПб., 1996. 4. Бирман Б.Я. и др. Оценка эффективности живых вакцин против инфекционного бурсита (Болезни Гамборо) // Ветеринарная наука — производству. Минск: 1996. — Вып. 32. — С. 56-5. Борисов А.В. Профилактика бурсальной болезни птиц. // Уральские Нивы. — 1995. — №
4-6. — С. 23-26. 5. Щербакова Л.О. и др. Сравнительный анализ вариабельной области гена VP2 вируса инфекционной бурсальной болезни // Мол. Генетика,вирусология и микробиология. - 1998. -№1. -С.35 - 40. 6. Bygrave A.C. Faragher J.T.Mortality associated with Gumboro disease // Veter. Rec.,1970, - Vol. 86. -№ 25, - P. 758-759. 7. Brown M.D., et al. VP2 sequencis of European “very virulent” isolates of infections bursal disease virus are closely related to eash other but are distinct from those of “classical” strains.. // J. Gener. Virol. -1994, - Vol. -75, № 4. - P. 675-680. 8.Chettle, N.J. Comparison of virus neutralizing and precipitating antibodies to infectious bursal disease virus and their effect on susceptibility to challenge / N.J. Chettle, P.K. Eddy, P.J. Wyeth // Br. Vet. J. - 1985. - Vol. 141. -N 2. -P. 146-150. 9.Chettle N.J.et al. Outbreaks of virulent infections bursal disease in East Anglia/ // Veter. Rec, 1998, - Vol. . 42, p. 271-272. 10. Ismail,
N.M. Immunogenicity of infectious bursal disease viruses in chickens / N.M. Ismail, Y.M. Saif // Avian Dis. - 1991. - Vol. 35. - №3.-P. 450-469.
11 .Wood, G.W. Standardization of the quantitative agar gel precipitation test for antibodies to infectious bursal disease / G.W. Wood, J.C. Muskett, C.N. Hebert et al. // J. Biol. Stand. - 1979. - Vol. 7, N 2. - P. 89-96. 12. Wyeth, P.J. The use of inactivated infectious bursal disease oil emulsion vaccine in commercial broiler parent chickens / P.J. Wyeth, G.A. Cullen // Vet. Rec. - 1979. -Vol. 104, N 9. - P. 188-193.
К ВОПРОСУ АНТИГЕННОЙ ИДЕНТИЧНОСТИ ПОЛЕВЫХ ИЗОЛЯТОВ И ЭТАЛОННОГО ШТАММА «52/70-М» ВИРУСА БОЛЕЗНИ ГАМБОРО
Алиева А.К., Алиев А.С., Юсупова Г.Р.
Резюме
По результатам иммунологического анализа вновь выделенных эпизоотических и эталонного штаммов вируса ИББ установлено, что они не имеют антигенных различий как между собой, так и с известным штаммом «52/70-М» вируса ИББ.
ON THE ANTIGENIC IDENTITY OF FIELD ISOLATES AND REFERENCE STRAINS OF "52/70-M" GUMBORO DISEASE VIRUS
Alieva A.K., Aliev A.S., Yusupova G.R.
Summary
The results of immunological analysis of newly isolated both epizootic strains and reference strain of IBD are established that they have no antigenic differences between themselves and with the known strain “52/70-M” of IBD virus.
УДК 619:616.99
ВЛИЯНИЕ ИНВАЗИРОВАННОСТИ ЖИВОТНЫХ ТРЕМАТОДОЗАМИ НА ПОКАЗАТЕЛИ МЯСНОЙ ПРОДУКТИВНОСТИ
Амиров Д.Р., Мкртчян М.Э.*
ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э.Баумана»
ФГОУ ВПО «Ижевская государственная сельскохозяйственная академия»*
Ключевые слова: паразиты, ассоциации, убойный выход, субпродукты. Key words: parasite, the association, slaughter yield, offals.
Моноинвазии и ассоциации трематодозов влияют на мясную продуктивность, убойный выход и размерно-весовые показатели субпродуктов, полученных от инвазированных животных.
Трематодозы жвачных характеризуются широким распространением и тяжелыми органическими и функциональными нарушениями систем организма. Данные инвазии приводят к снижению мясной, молочной и других видов продуктивности животных (М.М. Бочарова, 1995; А.М. Биттиров,1999; В.М. Шамхалов, 2002; Ю.А. Кумышева, 2009; У.В. Багаева и др., 2010 и др.). Однако вопросы воздействия ассоциаций паразитозов на организм животных и их продуктивность мало изучены.
Исходя из вышесказанного, мы задались целью провести сравнительный анализ влияния моно- и смешанных инвазий на мясную продуктивность крупного рогатого скота.
Материалом для исследований служили продукты убоя (туши и внутренние органы) бычков 18 месячного возраста: 3 группы по 5 туш в каждой, объединенные в группы в зависимости от инвазированности. В объектах исследования отмечалась средняя степень пораженности
