CC BY
1
I ГЕМАТОЛОГИЯ ИТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2024; TOM69; №2 |
Волчков E. B.
ИЗУЧЕНИЕ ЮММЛ И RALD С ПОМОЩЬЮ ТЕХНОЛОГИЙ СЕКВЕНИРОВАНИЯ ЕДИНИЧНЫХ КЛЕТОК
НМИЦДГОИ им. Д. Рогачева
Введение. Ювенильный миеломоноцитарный лейкоз (ЮММЛ) и RAS-ассоциированное аутоиммунное лейкопролиферативное заболевание (RALD) имеют схожие клинические проявления и генетику — мутации в RAS-сигнальном пути, а также высокие риски трансформации во вторичный острый миелоидный лейкоз (втОМЛ). Технологии секвенирования единичных клеток позволили изучать генетические и экспрессионные различия на уровне отдельных клеток. В нашей работе с помощью технологий сцДНК- и сцРНК-секве-нирования мы изучили ЮММЛ и RALD, а также провели сравнение экспрессионного профиля гемопоэтических клеток с контрольными образцами.
Цель работы. Изучить ЮММЛ и RALD с помощью технологий секвенирования единичных клеток.
Материалы и методы. Исследовались образцы костного мозга (КМ) пациентов с ЮММЛ и RALD. Пробоподготовка для сцДНК/ РНК-секвенирование выполнялась на платформах Tapestri (Mission Bio, USA) и Chromium X (10x Genomics, USA). Секвенирование проводилось на секвенаторе Genolab М (GeneMind, China). В качестве контроля были взяты данные сцРНК-секвенирования КМ 3 здоровых детей. Анализ выполнялся с помощью биоинформатических алгоритмов.
Результаты и обсуждение. СцДНК-секвенирование 11 образцов (2 до лечения, 2 после ТГСК и 7 с развитием втОМЛ, из них 2 образца CD34+ популяция) от 8 пациентов с ЮММЛ показало, что появление на терапии клонов с дополнительной мутацией в гене SETBP1 обуславливает трансформацию во втОМЛ. При анализе стволовых клеток (HSC) у 1 пациента из 2-х не была выявлена драйвер-ная мутация, что предполагает наличие у него RALD, а не ЮММЛ.
Дополнительно был проведен анализ НвС еще у 5 пациентов с ранее установленным RALD и 2 с ЮММЛ. У 3 из 5 пациентов с RALD драйверная мутация не была обнаружена, что предполагает наличие диагноза ЮММЛ у остальных пациентов. Также было выполнено сцРНК-секвенирование 3 образцов ЮММЛ и 1 RALD, показавшее значительную пролиферацию предшественников миеломоноцитар-ного ростка при угнетении других ростков по сравнению с контролем, что было подтверждено при иммунофенотипировании. Анализ дифференциальной экспрессии генов показал сходство образцов ЮММЛ и RALD. Изучение сигнальных путей показало повышенную активность МАРК пути В образцах ЮММЛ и RALD за исключением образца ЮММЛ с агрессивным клиническим течением и мутацией РТРШ1. Данная активность была неравномерна в клеточных популяциях и наиболее выражена в НЭС. Анализ НЭС показал их сходство на уровне экспрессии между образцами ЮММЛ и RALD. Интегративный анализ не показал принципиальных различий в экспрессии между ЮMMЛ/RALD и контролями.
Заключение. Прогрессия ЮММЛ во втОМЛ происходит из-за клональной эволюции в процессе лечения, а также выявили генетические различия между ЮММЛ и RALD на уровне НЭС. При экс-прессионном анализе выявлена популяция клеток, обуславливающая гиперпролиферативный синдром при ЮММЛ. Биологическая гетерогенность ЮММЛ может объяснить агрессивное течение при мутации РТРШ1. Интегративный анализ всех клеток на уровне экспрессии генов не показал существенных различий по сравнению с контролем, что согласуется с современными тенденциями об определении ЮММЛ и RALD, как самостоятельной группы заболеваний, а не как подтипа МР^МОЭ.
Габеева Н. Г., Королева Д. А., Бадмажапова Д. С., Смольянинова А. К., Щецова О. О., Иевлева А. А., Обухова Т. Н., Ковригина А. М.,
Звонков Е. Е., Джулакян У. Л.
РЕЗУЛЬТАТЫ ТЕРАПИИ БОЛЬНЫХ ДВККЛ Ш^СВ ВАРИАНТ И ФОЛЛИКУЛЯРНОЙ ЛИМФОМЫ ЗВ (ФЛЗВ) ПО ПРОТОКОЛУ
Я-тШЬ-ВЕМ-90 В КОМБИНАЦИИ С ЛЕНАЛИДОМИДОМ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Белок MUM1 является ключевым белком активации каскада сигнального пути NF-kB и принимает непосредственное участие в регуляции дифференцировки, пролиферации и апопто-за В-лимфоцитов. Высокая экспрессия белка MUM1 характерна для ДВККЛ постгерминального этапа дифференцировки (non-GCB ДВККЛ) и в большинстве случаев ФЛЗВ. Прогноз при этих опухолях на терапии по программе R-CHOP неблагоприятный. У больных из группы высокого риска 5—лет БПВ составляет от 28% до 42% (Visco 2012). Леналидомид в комбинации с R-CHOP позволил улучшить результаты терапии, однако у 40% б-х опухоль остается резистентной. Мы предположили, что интеграция леналидомида в блоковую терапию R-mNHL-BFM-90 позволит значительно улучшить результаты в этой группе больных неблагоприятного прогноза.
Цель работы. Оценить эффективность терапии по протоколу R-mNHL-BFM-90 в комбинации с леналидомидом у больных поп-GCB ДВККЛиФЛЗВ.
Материалы и методы. С 051.2019 по 10.2023 в исследование было включено 11 б-х. Из них 20 с ФЛЗВ градации и7с non-GCB ДВККЛ. Медианавозраста 56 (27-69) лет; М/Ж=13/14; 1Р1>2у 12 (44%); «bulky disease» у 15 (56%); множественные очаги экстранодального поражения у 7 (26%); поражение костного мозга у 5 (14%); экспрессия MUM127(100%), Ki67>80%y8 (29%). При цитогенетическом исследовании у 7 (26%) выявлен комплексный кариотип. Перестройки гено BCL2 и МУС не выявлены ни водном случае, гена BCL6 обнаружена в 3 (20%) случаях. У 2(11%) из 18 обнаружена mutTP53. Больные с ограниченными стадиями получали 2 блока (А, В) по протоколу R-mNHL-BFM-90 и 2 курса R-CHOP в комбинации с леналидомидом. При III-IV стадии проводили 4 блока (А, В) по протоколу R-mNHL-BFM-90 с леналидомидом. Ауто-ТГСК в качестве консоли-дациипровели4 (15%) б-м.
Результаты и обсуждение. У всех 27 (100%) больных была достигнута ПР. У 1 больного через 2 мес после окончания лечения развился ранний рецидив; у него выявлялся комплексный кариотип, ти1;ТР53 и ¿е117р13. Больной погиб от прогрессии заболевания через 4 мес. Еще у 1 больного рецидив развился через 6 мес. В результате противорецидивной терапии и ауто-ТГСК была достигнута ПР. В настоящее время ремиссия сохраняется 22 мес. У всех 27 б-х токсичность курсов не превышала таковую, при лечении по протоколу R-mNHL-BFM-90 без применения таргетов. При медиане наблюдения 30 (5—46) месу 26 (96%) из 27 б-х сохраняется ПР.
Заключение. Терапия по программе R-mNHL-BFM-90 в комбинации с леналидомидом продемонстрировала высокую эффективность в группе больных с поп-ОСВ ДВККЛ и ФЛЗВ, в том числе из группы высокого риска развития рецидива.
Рис
