ИЗУЧЕНИЕ СУБХРОНИЧЕСКОЙ ТОКСИЧНОСТИ ПРЕПАРАТА «ПРАЗИЦИД-КОМПЛЕКС» С ПОСЛЕДУЮЩИМ НЕКРОПСИЧЕСКИМ АНАЛИЗОМ Текст научной статьи по специальности «Животноводство и молочное дело»

КУЗНЕЦОВ Юрий Евгеньевич

доктор ветеринарных наук, доцент кафедры паразитологии им. В. Л. Якимова, ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины»

БЕЛОВА Лариса Михайловна

доктор биологических наук, заведующий кафедрой паразитологии им. В. Л. Якимова, ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины»

ГАВРИЛОВА Надежда Алексеевна

доктор ветеринарных наук, профессор кафедры паразитологии им. В. Л. Якимова, ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины»

КУЗНЕЦОВА Надежда Викторовна

кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры фармакологии и токсикологии, ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины»

ЛУНЕГОВ Александр Михайлович

кандидат ветеринарных наук, заведующий кафедрой фармакологии и токсикологии, ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины»

■ 111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111111 ^ УДК 615.285.099 статья поступила 15.09.2023

4.2.1. Патология животных, морфология, физиология, фармакология и токсикология DOI 10.35524/2687-0436_2023_04_97

ИЗУЧЕНИЕ СУБХРОНИЧЕСКОЙ ТОКСИЧНОСТИ ПРЕПАРАТА «ПРАЗИЦИД-КОМПЛЕКС» С ПОСЛЕДУЮЩИМ НЕКРОПСИЧЕСКИМ АНАЛИЗОМ

STUDY OF SUBCHRONIC TONICITY OF THE DRUG «^RAZICME-COMPLEto» WITH SUBSEQUENT NECROPSY ANALYSIS

На начальных этапах исследовательского процесса и разработки ветеринарных препаратов получаемые данные в ходе доклинических исследований становятся крайне важными для принятия решений, связанных с эффективностью и безопасностью. При изучении токсичности препаратов патологоанатоми-ческое и гистологическое исследования являются одними из наиболее информативных и достоверных методов диагностики патологий органов и тканей. Эти методы позволяют оценить не только макроскопические, но и микроскопические структурные изменения в органах и тканях животных, а данные, полученные в ходе патоморфологических исследований, нередко имеют основополагающее значение при изучении токсического влияния лекарственных препаратов на стадии доклинических исследований.

В статье описываются результаты изучения субхронической токсичности (с некропсическим анализом) комбинированного лекарственного препарата «Празицид-комплекс» (в 1 мл препарата содержится празиквантела 102 мг, ивермектина - 5 мг, фипронила - 100 мг и вспомогательные вещества), обеспечивающего широкий спектр противопаразитарного действия у собак и кошек.

В исследовании использованы белые лабораторные крысы линии Wistar. По принципу аналогов сформировали четыре группы, содержащие по 4 самца и 4 самки крыс в каждой. По завершению эксперимента всех подопытных лабораторных животных подвергли эвтаназии и некропсии.

По данным некропсии, описанная макроанатомическая и патоморфологическая картина представленного материала только у животных четвёртой подопытной группы, получавшей препарат в дозе 750,0 мг/кг (предполагаемая трёхкратная терапевтическая дозировка), соответствует признакам острого токсического поражения органов желудочно-кишечного тракта, что сопровождается развитием нейтро-фильно-макрофагального энтерита с частичным некрозом слизистой оболочки, эрозивно-некротическим, преимущественно лимфоцитарным колитом, реактивной гиперплазией селезенки со слабо выраженным спленитом и лимфоцитарным пиелонефритом. Полученные данные позволяют проводить дальнейшие испытания безопасности данного лекарственного препарата для ветеринарного применения.

Ключевые слова: доклинические исследования, комбинированный противопаразитарный препарат, «Празицид-комплекс», токсичность, крысы, гистология, патоморфологические изменения, эвтаназия, микротомия, некропсия

Key words: preclinical studies, combined antiparasitic drug, Prazicide-complex, toxicity, rats, histology, pathomorphological changes, euthanasia, microtomy, necropsy

Введение. При изучении токсичности препаратов патологоанатомическое и гистологическое исследования являются одними из наиболее информативных и достоверных методов диагностики патологий органов и тканей. Эти методы позволяют оценить не только макроскопические, но и микроскопические структурные изменения в органах и тканях животных, а данные, полученные в ходе патоморфологических исследований, нередко имеют основополагающее значение при изучении токсического влияния лекарственных препаратов на стадии доклинических исследований [5, 7, 8].

«Празицид-комплекс» относится к комбинированным лекарственным препаратам (в 1 мл препарата содержится празиквантела 102 мг, ивермектина - 5 мг, фипронила - 100 мг и вспомогательные вещества), обеспечивающим широкий спектр противопаразитарного действия у собак и кошек. Ряд исследователей отмечают преимущества применения комплексных препаратов для лечения животных при болезнях паразитарной этиологии и их профилактике [1]. Однако синергизм действующих веществ требует тщательного изучения возможных побочных действий препарата [3, 4].

Целью настоящих исследований является оценка патоморфологических изменений в органах и тканях животных с целью определения токсичности препарата «Празицид-комплекс».

Материалы и методы исследований. Изучение токсичности препарата «Пра-зицид-комплекс» проводили в лаборатории кафедры фармакологии и токсикологии ФГБОУ ВО СПбГУВМ, согласно руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, а также в соответствии с OECD 407 и OECD 408 [9, 10, 11].

В исследовании использованы белые лабораторные крысы линии Wistar, приобретенные в Федеральном государственном унитарном предприятии «Питомник лабораторных животных «Рапполово». По принципу аналогов сформировали четыре группы, содержащие по 4 самца и 4 самки крыс в каждой. Первая группа являлась интактной (группа биологического контроля). В течение 21 дня животным второй группы ежедневно накожно применяли препарат в дозе 100,0 мг/кг (1/5 от LD50), третьей группе - 50,0 мг/кг (1/10 от LD50), четвёртой группе - 750,0 мг/кг (предполагаемая трёхкратная терапевтическая дозировка) [14].

По завершению эксперимента всех подопытных лабораторных животных подвергли эвтаназии и некропсии. Все манипуляции с животными выполнялись в соответствии с директивой N° 2010/63/EU Европейского парламента и Совета Европейского Союза «О защите животных, использующихся для научных целей» [2].

Гистопатологическому изучению были подвергнуты печень, селезенка, почки, тонкий и толстый кишечник крыс [6, 12]. Зафиксированные в 10% растворе формалина (ООО «БиоВитрум») тканевые фрагменты подвергали общепринятой гистологической проводке. Микротомию полученных парафиновых блоков осуществляли на полуавтоматическом санном микротоме «Ротмик 2», получая толщину срезов 2-3 мкм. Окраску проводили по общепринятой методике гематоксилином Джилла и спиртовым 1%-раствором эозина. После заключения срезов в синтетическую монтирующую среду «Витрогель» полученные гистологические препараты микроскопировали.

Результаты исследований. У всех животных, получающих накожно препарат «Празицид-комплекс» в течение 3-х недель, установили в дорсальной области шеи нарушение целостности кожных покровов, подлежащих мышечных слоев и крупных кровеносных сосудов. Кожа имела бледно-синюшный цвет и умеренный тургор, шерсть хорошо удерживалась в волосяных луковицах. Видимые слизистые были целостные, бледно-цианотичного оттенка, умеренно увлажнены.

Органы грудной полости у животных всех подопытных групп имели схожие посмертные изменения: слизистые пищевода и трахеи бежево-серого цвета, блестящие, влажные; щитовидная железа целостная, красно-коричневого цвета, упругой консистенции; легкие от розового до темно-вишневого цвета с пестрым, пятнистым рисунком, при разрезе выделялось красноватое пенистое содержимое; сердце, магистральные кровеносные сосуды типичной структуры темно-красного цвета; лимфатические узлы бледно-желтого цвета; плевра целостная, ярко-розового цвета, умеренно увлажненная.

Органы брюшной полости в зависимости от группы отличались специфическими макроскопическими признаками.

У животных интактной (контрольной) группы печень имела темно-вишневую окраску, заостренные края и равномерный рисунок паренхимы на разрезе. Желудок имел типичную структуру, слизистую оболочку, равномерно окрашенную с хорошо выраженной зональностью и наложением прозрачной слизи. Тонкая кишка была бледно-розового цвета с небольшим количеством слизи и расширенными участками, заполненными скопившимися в просвете газами. Толстая кишка серо-бежевого цвета с выраженной складчатостью, имеющей содержимое полужидкой консистенции желто-зеленого цвета. Почки типичной формы, от темно-коричневой до коричневой окраски, имеющие на сагиттальном разрезе хорошо выраженную дифференцировку корковой и мозговой зоны. Селезенка, мочевой пузырь, сальник и гонады не имели патологических изменений. Брюшина целостная, ярко-розового цвета, умеренно увлажненная.

Микроскопией гистологических препаратов не выявлено патологических изменений: печень имела типичную архитектонику, где сохранено балочное строение паренхимы органа; гепатоциты - цитоплазму со слабо выраженной зернистостью и хорошо дифференцируемые клеточные границы; ядра округлые, нормохромные с крупнозернистым хроматином и мелкими, центрально расположенными единичными нуклеолами; межбалочная капиллярная сеть была слабо выражена, центральные вены долек и кровеносные сосуды триад незначительно расширены (рис. 1).

Селезенка была сформирована равномерно чередующимися зонами красной и белой пульпы; фолликулярные скопления лейкоцитов белой пульпы распола-

Рис. 1. Гистологический срез печени от животных контрольной группы (окр. гематоксилин-эозин, ув. х400)

гались в периваскулярной области и имели хорошо определяемые границы и дифференцировку герминативных центров и Т-зависимых зон, герминативные центры имели небольшую ширину; строма органа была образована тонкими трабекулами и капсулой (рис. 2).

Рис. 2. Гистологический срез селезенки от животных контрольной группы (окр. гематоксилин-эозин, ув. х100)

Паренхима почек имела типичное строение: клубочки нефрона округлой формы; капсула Шумлянского-Боумана представлена в виде тонкого ободка, практически без видимого просвета; дифференцировка проксимальных и дистальных канальцев была сохранена; канальцевые эпителиоциты имели типичную кубическую форму и слабо выраженную полярность, в цитоплазме хорошо дифференцировалась мелкокапельная вакуолизация; лучистая зона в проекции почечного сосочка была образована интактными протоковыми структурами (рис. 3).

Стенка тонкой кишки характеризовалась типичной стратификацией слоев: крипты имели характерную структуру; ворсинки частично некротизированы; на 1/3-1/2 высоты отмечалась выраженная десквамация энтероцитов; слизистая

Рис. 3. Гистологический срез почки от животных контрольной группы (окр. гематоксилин-эозин, ув. х400)

обильно инфильтрирована нейтрофильно-макрофагальными скоплениями; просветы кровеносных сосудов микроциркуляторного русла в составе ворсинок расширены (рис. 4).

Толстая кишка характеризовалась типичным послойным строением, но на поверхности органа отмечалась эрозия покрывающей эпителиальной пластинки и выраженная десквамация энтероцитов. Дифференцировка клеток эпителиальной пластинки крипт была типичная, определялось умеренное повышение секреторной активности бокаловидных клеток. Собственная пластинка слизистой имела обильную лимфоцитарно-гистиоцитарную и в меньшей степени плазмоцитарную диффузную инфильтрацию; подслизистая основа включала умеренно гиперпла-зированные лимфоидные фолликулы (рис. 5).

а б

Рис. 4. Гистологический срез тонкой кишки, отобранный у животных из контрольной группы (окр. гематоксилин-эозин; а - ув. х100; б - ув. х400)

а б

Рис. 5. Гистологический срез толстой кишки, отобранный у животных из контрольной группы (окр. гематоксилин-эозин, а - ув. х100; б - ув. х400)

У 25% лабораторных животных из 2 и 3 подопытных групп установили увеличение брыжеечных лимфатических узлов в области толстой кишки. В печени отмечали усиление внутриклеточной зернистости, наличие округлых ядер с крупнозернистым хроматином и мелкими, центрально и эксцентрично расположенными единичными нуклеолами. Межбалочная капиллярная сеть слабо выражена, центральные вены долек и кровеносные сосуды триад умеренно эктазированы. В периваскулярной области отмечали мелкие нейтрофильно-лимфоцитарные инфильтраты (рис. 6).

а б

Рис. 6. Гистологический срез печени от животных из второй и третьей подопытных групп (окр. гематоксилин-эозин, а - ув. х100; б - ув. х400)

Макроанатомическая и патоморфологическая картина селезенки, почек, тонкого и толстого кишечника крыс подопытных 2 и 3 групп не имели значимых отличий от животных 1 группы (группа биологического контроля).

У животных четвертой подопытной группы (трёхкратная терапевтическая доза) желудок имел типичную структуру, слизистая равномерную окраску с хорошо выраженной зональностью и умеренным наложением слизи. Тонкая кишка от бледно-розового до бежевого цвета, умеренно пневмотизирована на большем протяжении, на разрезе с умеренным количеством слизи. Толстая кишка была от серо-бежевого до коричневого цвета с чередованием умеренной и выраженной пневматизации, выраженной складчатостью, содержимым умеренного объема, слизистой консистенции с включением пузырьков газа, желто-зеленого цвета. Пейеровы бляшки в составе стенки кишки хорошо дифференцировались, у трех крыс отмечали увеличение брыжеечных лимфатических узлов в области толстой и тонкой кишки. Почки имели типичную форму темно-коричневой окраски; на саггитальном разрезе выявлялась хорошо выраженная дифференцировка корковой и мозговой зоны, мозговая зона преимущественно на границе с корковой имела розовый оттенок. Селезенка несколько увеличена в размерах; мочевой пузырь, сальник и гонады имели интактные анатомические признаки. Брюшина целостная, ярко-розового цвета, умеренно увлажненная.

Печень была от коричневого до бледно-бежевого неравномерного цвета с мелкоточечным рисунком по всей поверхности органа; имела заостренные края и равномерный рисунок паренхимы на разрезе, а также обильный соскоб. Балочная структура печени сохранена, наблюдали расширение межбалочного пространства и диффузную слабо выраженную лимфоцитарную инфильтрацию паренхимы органа. Границы гепатоцитов сглажены, цитоплазма приобретала рисунок и виде нерегулярных ацидофильных и базофильно окрашенных глыбок; иногда наблюдали слабую мелкокапельную внутриклеточную вакуолизацию. Ядро имело типичное строение. Также отмечали умеренную эктазию просветов кровеносных сосудов органа и смешанно-клеточную периваскулярную инфильтрацию, включающую нейтрофилы, гистиоциты и лимфоциты (рис. 7).

Г *

" « .

з Л

у р

® $> ¡л - •'. у

V ¿1 •1- э . - V ®»-

Рис. 7. Гистологический срез печени от животных четвертой подопытной группы (а - ув. х100; б - ув. х400)

Селезенка была сформирована нерегулярными чередующимися зонами красной и белой пульпы; фолликулярные скопления лейкоцитов белой пульпы характеризовались выраженной лимфоидной гиперплазией, сопровождающейся увеличением герминативного центра, а также расширением мантийной и маргинальной зоны. В составе красной пульпы отмечали слабо выраженную диффузную нейтрофильно-макрофагальную инфильтрацию (рис. 8).

Рис. 8. Гистологический срез селезенки от животных четвертой подопытной группы (а - ув. х100; б - ув. х400)

Отмечали однотипные воспалительные инфильтраты в составе корковой и мозговой зоны, увеличение просвета капсулы нефрона и слабо выраженное уменьшение размеров капиллярного клубочка (рис. 9).

Стенка тонкой кишки характеризовалась типичной стратификацией слоев. Собственная пластинка слизистой была субтотально некротизирована, в отдельных тканевых фрагментах отмечали сохранность около половины толщины слоя. Также наблюдали плотную нейтрофильно-гистиоцитарную и в меньшей степени лимфоцитарную инфильтрацию, распространяющуюся до мышечной оболочки. Эпителиальная пластинка крипт имела признаки клеточной дистрофии, что сопровождалось сглаживанием клеточных, ядерных границ и структуры цитоплазмы, слабо выраженным набуханием клеток (рис. 10).

а б

Рис. 9. Гистологический срез почки от животных четвертой подопытной группы (а - ув. х100; б - ув. х400)

а б

Рис. 10. Гистологический срез тонкой кишки от животных четвертой подопытной группы (а - ув. х100; б - ув. х400)

Морфологическая картина толстой кишки имела схожие признаки со строением у животных в предыдущих группах.

Анализируя полученные данные, был сделан вывод о том, что описанная макроанатомическая и патоморфологическая картина представленного материала от крыс подопытной группы №4 соответствует признакам острого токсического поражения органов желудочно-кишечного тракта, что сопровождается развитием нейтрофильно-макрофагального энтерита с частичным некрозом слизистой оболочки, эрозивно-некротическим, преимущественно, лимфоцитарным колитом, реактивной гиперплазией селезенки со слабо выраженным спленитом и лимфо-цитарным пиелонефритом [13, 15].

Следует отметить, что коэффициенты органов у белых крыс (г/кг массы тела) после использования препарата «Празицид-комплекс» не имеют достоверных отличий от показателей у животных контрольной биологической группы. Данные представлены в таблице 1.

Коэффициент кумуляции не рассчитывался в связи с отсутствием гибели подопытных животных.

Таблица 1

Коэффициенты органов у белых крыс (г/кг веса тела) после использования препарата «Празицид-комплекс»

Исследуемый орган Группа животных

(1-я подопытная группа) (2-я подопытная группа) (3-я подопытная группа) (4-я подопытная группа)

ê ? ê ? ê ? ê ?

сердце 4.5±0.3 4.0±0.5 4.0±0.1 4.2±0.5 3.4±0.4 3.8±0.2 3.5±0.1 3.9±0.1

лёгкие (с трахеей) 6.3±0.1 6.3±0.8 7.1±0.4 6.5±0.8 6.7±0.2 6.2±0.2 6.8±0.2 6.8±0.3

тимус 1.4±0.3 1.4±0.1 1.4±0.3 1.3±0.2 0.92±0.11 1.08±0.10 0.95±0.08 1.07±0.11

печень 28.0±1.5 30.2±2.1 30.9±2.5 28.4±1.8 28.3±2.9 27.2±2.9 28.5±3.1 28.9±3.0

селезёнка 5.4±0.2 5.1±0.3 4.9±0.4 5.7±0.5 5.82±0.39 5.91±0.40 5.60±0.40 5.93±0.40

почки 8.1±0.2 6.8±0.4 7.2±0.3 6.9±0.2 7.0±1.1 8.0±0.7 8.0±0.5 9.7±0.6

надпочечники 0.13±0.02 0.12±0.02 0.16±0.04 0.16±0.03 0.19±0.03 0.18±0.04 0.16±0.04 0.15±0.03

головной мозг 8.3±0.5 8.5±0.5 8.3±0.09 8.4±0.4 8.4±0.4 8.8±0.2 8.5±0.1 8.9±0.1

половые органы 7.28±0.2 0.32±0.03 7.25±0.43 0.35±0.07 6.7±0.2 0.22±0.2 6.8±0.2 0.28±0.3

Достоверное отличие от контрольной группы отсутствует (достоверное отличие от контроля (р>0,05).

Заключение. По данным некропсии у крыс, получавших ежедневно в течение 21 дня препарат «Празицид-комплекс» в дозе 100,0 мг/кг (1/5 от LD50) и 50,0 мг/ кг (1/10 от LD50), патологические изменения в печени, селезенке, почках, толстом и тонком кишечнике не выявлены.

У животных в четвёртой группе, получающих препарат в дозе 750,0 мг/кг (предполагаемая трёхкратная терапевтическая доза), макроанатомическая и па-томорфологическая картина представленного материала соответствует признакам острого токсического поражения органов желудочно-кишечного тракта, что сопровождается развитием нейтрофильно-макрофагального энтерита с частичным некрозом слизистой оболочки, эрозивно-некротическим, преимущественно, лим-фоцитарным колитом, реактивной гиперплазией селезенки со слабо выраженным спленитом и лимфоцитарным пиелонефритом. Полученные данные позволяют проводить дальнейшие испытания безопасности данного лекарственного препарата для ветеринарного применения.

Работа выполнена в рамках хоздоговора с ООО «Апиценна» на тему: «Изучение субхронической токсичности, кумуляции, местно-раздражающе-го и кожно-резорбтивного действий, аллергизирующих свойств препарата «Празицид®-комплекс».

Библиографический список

1. Арисов, М. В. Изучение острой токсичности лекарственного препарата для ветеринарного применения «Инспектор квадро» / М. В. Арисов, В. В. Артемов.

- Текст : непосредственный // Ветеринария, зоотехния и биотехнология. - 2018.

- № 11. - С. 25-33.

2. Директива Европейского парламента и Совета Европейского Союза 2010/63/ ЕС от 22 сентября 2010 г. о защите животных, использующихся для научных целей. (European Convention for Protection of Vertebrate Animais Used for Expérimental and

other Scientific Purposes (ETS 123)). - Strasbourg, 1986. - C. 346. - Текст : непосредственный.

3. Изучение острой токсичности лекарственного препарата для ветеринарного применения Ивербутан / Е. Н. Индюхова, Г. Б. Арисова, И. П. Белых, Д. С. Поселов [и др.]. - Текст : непосредственный // Российский паразитологический журнал. - 2021. - Т. 15. - № 3. - С. 76-82.

4. Махватова, Н. В. Изучение переносимости повышенных доз препаратов для наружного применения на основе фипронила, празиквантела, моксидектина и пирипроксифена / Н. В. Махватова, Е. О. Качанова. - Текст : непосредственный // Российский паразитологический журнал. - 2023. - Т. 17. - № 1. - С. 114-123.

5. Особенности диагностики и патоморфологии эймериидозов норок в зверо-хозяйствах Северо-Западного региона Российской Федерации / Ю. Е. Кузнецов, Л. М. Белова, Н. А. Гаврилова [и др.]. - Текст : непосредственный // Сельскохозяйственная биология. - Т. 55. - № 2. - 2020. - С. 378-393.

6. Патент № 2742414 C1 Российская Федерация, МПК A61K 31/198, A61K 31/355, A61K 31/575. Препарат комплексный с гепатопротекторной активностью для крупного рогатого скота : № 2020120624 : заявл. 16.06.2020 : опубл. 05.02.2021 / Понамарев В. С., Андреева Н. Л., Попова О. С., Барышев В. А. - EDNIEKSMY.

- Текст : непосредственный.

7. Понамарев, В. С. Перспективность метаболомических подходов в токсикологических исследованиях / В. С. Понамарев. - Текст : непосредственный // Нормативно-правовое регулирование в ветеринарии. - 2022. - № 3. - С. 78-81.

8. Понамарев, В. С. Фармако-токсикологическая оценка комплексного препарата с гепатопротекторной активностью : специальность 06.02.00 «Ветеринария и зоотехния» : автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук / Понамарев Владимир Сергеевич ; ФГБОУ ВО СПбГУВМ.

- Санкт-Петербург, 2021. - 18 с. - Библиогр.: с. 16-18. - Место защиты : ФГБОУ ВО СПбГУВМ. - Текст : непосредственный.

9. Приказ Министерства сельского хозяйства РФ от 6 марта 2018 года № 101 «Об утверждении Правил проведения доклинического исследования лекарственного средства для ветеринарного применения, клинического исследования лекарственного препарата для ветеринарного применения, исследования биоэквивалентности лекарственного препарата для ветеринарного применения» // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. - 2018. - № 2. - С. 20. - Текст : непосредственный.

10. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под общей редакцией члена-корреспондента РАМН, профессора Р. У. Хабриева. - 2 изд., перераб. и доп. - Москва : Медицина, 2005.

- 832 с. - Текст : непосредственный.

11. Точиева, О. Н. Изучение острой токсичности и кумулятивных свойств комплексного препарата на основе имидаклоприда, пирипроксифена и мокси-дектина / О. Н. Точиева, М. В. Арисов. - Текст : непосредственный // Российский паразитологический журнал. - 2022. - Т. 16. - № 3. - С. 327-334.

12. Baryshev, V. A. New methods for detoxification of heavy metals and mycotoxins in dairy cows / V. A. Baryshev, O. S. Popova, V. S. Ponamarev. - Text : unmediated // Online Journal of Animal and Feed Research. - 2022. - Vol. 12. - № 2. - Pp. 81-88.

13. Campbell, W. C. History of avermectin and ivermectin, with notes on the history of other macrocyclic lactone antiparasitic agents / W. C. Campbel. - Text : unmediated // Current Pharmaceutical Biotechnology. - 2012. - № 13 (6). - Pp. 853- 865.

14. Dzhafarov, M. Kh. Ecological, Physiological and Biochemical Adaptation in Helminth: Trends in Evolution of Anthelminthic Chemical Agents / M. Kh. Dzhafarov,

F. I. Vasilevich. - Text : unmediated // Advances in Pharmacology and Pharmacy. -2014. - № 2. - Pp. 30-45.

15. Laffont, C. M. Intestinal secretion is a major route for parent ivermectin elimination in the rat / C. M. Laffont, P. L. Toutain, M. Alvinerie, A. Bousquet-Melou. -Text : unmediated // Drug metabolism and disposition: the biological fate of chemicals.

- 2002. - № 30. - Pp. 626-630.

References

1. Arisov, M. V. Izuchenie ostroj toksichnosti lekarstvennogo preparata dlya veterinarnogo primeneniya «Inspektor kvadro» / M. V. Arisov, V. V. Artemov. - Tekst : neposredstvennyj // Veterinariya, zootekhniya i biotekhnologiya. - 2018. - № 11. - S. 25-33.

2. Direktiva Evropejskogo parlamenta i Soveta Evropejskogo Soyuza 2010/63/ES ot 22 sentyabrya 2010 g. o zashchite zhivotnyh, ispol'zuyushchihsya dlya nauchnyh celej. (European Convention for Protection of Vertebrate Animals Used for Experimental and other Scientific Purposes (ETS 123)). - Strasbourg, 1986. - C. 346. - Tekst : neposredstvennyj.

3. Izuchenie ostroj toksichnosti lekarstvennogo preparata dlya veterinarnogo primeneniya Iverbutan / E. N. Indyuhova, G. B. Arisova, I. P. Belyh, D. S. Poselov [i dr.]. - Tekst : neposredstvennyj // Rossijskij parazitologicheskij zhurnal. - 2021. - T. 15. - № 3. - S. 76-82.

4. Mahvatova, N. V. Izuchenie perenosimosti povyshennyh doz preparatov dlya naruzhnogo primeneniya na osnove fipronila, prazikvantela, moksidektina i piriproksifena / N. V. Mahvatova, E. O. Kachanova. - Tekst : neposredstvennyj // Rossijskij parazitologicheskij zhurnal. - 2023. - T. 17. - № 1. - S. 114-123.

5. Osobennosti diagnostiki i patomorfologii ejmeriidozov norok v zverohozyajstvah Severo-Zapadnogo regiona Rossijskoj Federacii / YU. E. Kuznecov, L. M. Belova, N. A. Gavrilova [i dr.]. - Tekst : neposredstvennyj // Sel'skohozyajstvennaya biologiya. -T. 55. - № 2. - 2020. - S. 378-393.

6. Patent № 2742414 C1 Rossijskaya Federaciya, MPK A61K 31/198, A61K 31/355, A61K 31/575. Preparat kompleksnyj s gepatoprotektornoj aktivnost'yu dlya krupnogo rogatogo skota : № 2020120624 : zayavl. 16.06.2020 : opubl. 05.02.2021 / Ponamarev V. S., Andreeva N. L., Popova O. S., Baryshev V. A. - EDNIEKSMY. -Tekst : neposredstvennyj.

7. Ponamarev, V. S. Perspektivnost' metabolomicheskih podhodov v toksikolo-gicheskih issledovaniyah / V. S. Ponamarev. - Tekst : neposredstvennyj // Normativno-pravovoe regulirovanie v veterinarii. - 2022. - № 3. - S. 78-81.

8. Ponamarev, V. S. Farmako-toksikologicheskaya ocenka kompleksnogo preparata s gepatoprotektornoj aktivnost'yu : special'nost' 06.02.00 «Veterinariya i zootekhniya» : avtoreferat dissertacii na soiskanie uchenoj stepeni kandidata veterinarnyh nauk / Ponamarev Vladimir Sergeevich ; FGBOU VO SPbGUVM. - Sankt-Peterburg, 2021.

- 18 s. - Bibliogr.: s. 16-18. - Mesto zashchity : FGBOU VO SPbGUVM. - Tekst : neposredstvennyj.

9. Prikaz Ministerstva sel'skogo hozyajstva RF ot 6 marta 2018 goda № 101 «Ob utverzhdenii Pravil provedeniya doklinicheskogo issledovaniya lekarstvennogo sredstva dlya veterinarnogo primeneniya, klinicheskogo issledovaniya lekarstvennogo preparata dlya veterinarnogo primeneniya, issledovaniya bioekvivalentnosti lekarstvennogo preparata dlya veterinarnogo primeneniya» // Voprosy normativno-pravovogo regulirovaniya v veterinarii. - 2018. - № 2. - S. 20. - Tekst : neposredstvennyj.

10. Rukovodstvo po eksperimental'nomu (doklinicheskomu) izucheniyu novyh farmakologicheskih veshchestv / pod obshchej redakciej chlen-korrespondenta RAMN,

professora R. U. Habrieva. - 2 izd., pererab. i dop. - Moskva : Medicina, 2005. - 832 s. - Tekst : neposredstvennyj.

11. Tochieva, O. N. Izuchenie ostroj toksichnosti i kumulyativnyh svojstv kompleksnogo preparata na osnove imidakloprida, piriproksifena i moksidektina / O. N. Tochieva, M. V. Arisov. - Tekst : neposredstvennyj // Rossijskij parazitologicheskij zhurnal. - 2022. - T. 16. - № 3. - S. 327-334.

12. Baryshev, V. A. New methods for detoxification of heavy metals and mycotoxins in dairy cows / V. A. Baryshev, O. S. Popova, V. S. Ponamarev. - Text : unmediated // Online Journal of Animal and Feed Research. - 2022. - Vol. 12. - № 2. - Pp. 81-88.

13. Campbell, W. C. History of avermectin and ivermectin, with notes on the history of other macrocyclic lactone antiparasitic agents / W. C. Campbel. - Text : unmediated // Current Pharmaceutical Biotechnology. - 2012. - № 13 (6). - Pp. 853- 865.

14. Dzhafarov, M. Kh. Ecological, Physiological and Biochemical Adaptation in Helminth: Trends in Evolution of Anthelminthic Chemical Agents / M. Kh. Dzhafarov, F. I. Vasilevich. - Text : unmediated // Advances in Pharmacology and Pharmacy. -2014. - № 2. - Pp. 30-45.

15. Laffont, C. M. Intestinal secretion is a major route for parent ivermectin elimination in the rat / C. M. Laffont, P. L. Toutain, M. Alvinerie, A. Bousquet-Melou. -Text : unmediated // Drug metabolism and disposition: the biological fate of chemicals. - 2002. - № 30. - Pp. 626-630.

KUZNETSOV Yury Evgenievich

Associate professor of the department of parasitology V.L. Yakimova, St. Petersburg State University of Veterinary Medicine, 5, Chernigovskaya street, St. Petersburg, 196084, Russian Federation E-mail: [email protected]

BELOVA Larisa Mikhailovna

Head of the department of parasitology V.L. Yakimova, St. Petersburg State University of Veterinary Medicine, 5, Chernigovskaya street, Saint-Petersburg, 196084, Russian Federation E-mail: [email protected]

GAVRILOVA Nadezhda Alekseevna

Professor of the department of parasitology V.L. Yakimova, St. Petersburg State University of Veterinary Medicine, 5, Chernigovskaya street, Saint-Petersburg, 196084, Russian Federation E-mail: [email protected]

KUZNETSOVA Nadezhda Viktorovna

associate professor, department of pharmacology and toxicology, St. Petersburg State University of Veterinary Medicine, 5, Chernigovskaya street, Saint-Petersburg, 196084, Russian Federation E-mail: [email protected]

LUNEGOV Alexander Mikhailovich

Head of the department of pharmacology and toxicology, St. Petersburg State University of Veterinary Medicine, 196084, Russian Federation, St. Petersburg, st. Repishcheva 13 E-mail: [email protected]