CC BY
72
ф
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ИЗУЧЕНИЕ «ОСТРОЙ» ТОКСИЧНОСТИ... 1 51
УДК 615.832.3.099:616-092.9
Н.Ю. Кулъбачевская, О.И. Коняева, М.В. Дмитриева, H.A. Оборотова ИЗУЧЕНИЕ «ОСТРОЙ» ТОКСИЧНОСТИ
ЛИПОСОМАЛЬНОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ БОРХЛОРИНА
ФГБНУ «Российский онкологический научный центр им. H.H. Блохина» ФАНО, Москва
Контактная информация
Дмитриева Мария Вячеславовна, младший научный сотрудник лаборатории разработки лекарственных форм НИИ ЭДиТО
адрес: 115478 Москва, Каширское ш., 24; тел.: +7(499)612-81-86 e-mail: [email protected]
Статья поступила 03.07.2014, принята к печати 08.09.2014. Резюме
В лаборатории разработки лекарственных форм ФГБУ «РОНЦ им. H.H. Блохина» разработана липосо-мальная лекарственная форма фотосенсибилизатора хлоринового ряда Борхлорина (ЛЛФ БХ) для внутривенного введения. Цель исследования - изучение «острой» токсичности ЛЛФ БХ при внутривенном введении мышам и крысам.
Работа проведена на 120 здоровых мышах самцах и самках линии Balb/c, полученных из питомника «Столбовая» РАМН и 110 здоровых неинбредных беспородных крысах-самцах, полученных из разведения ФГБУ «РОНЦ им. H.H.Блохина» РАМН. ЛЛФ БХ вводили в однократных дозах мышам - 20,25; 13,5 и 6,75 мг/кг, крысам - 4,0; 8,0 и 16,0 мг/кг. Дозы препарата 13,5 мг/кг мышам и 16,0 мг/кг крысам были лимитированы объемом вводимого раствора и делились на 2 введения, доза 20,25 мг/кг мышам на 3 введения с интервалом 2-3 ч.
При введении ЛЛФ БХ мышам и крысам самцам и самкам по числу павших животных, срокам гибели, клинической картине интоксикации установлено отсутствие половых различий. Наблюдалась гибель мышей на 1-3 и 8 сутки наблюдения после введения препарата в дозах 20,25 и 13,5 мг/кг на фоне пилоэрекции, учащенного дыхания, сужения глазных щелей. При аутопсии павших животных отмечено: головной мозг - сосуды инъецированы, кровоизлияние под твердую мозговую оболочку, остальные органы - без особенностей. У мышей, получавших препарат в дозах, не вызывающих гибель животных, каких-либо клинических проявлений токсичности и изменений в поведенческих реакциях отмечено не было. ЛД50 ЛЛФ БХ для мышей-самок - 21,38 мг/кг; для мышей самцов- 22,50 мг/кг. При исследовании на крысах введение ЛЛФ БХ гибели животных не вызывало. Через 5-10 минут после введения препарата у животных отмечалась гиподинамия в течение 15-30 мин, других клинических проявлений токсичности и изменений поведенческих реакций не наблюдалось. Расчетные токсические дозы для крыс не установлены в связи с отсутствием гибели животных при максимально возможной концентрации и максимально возможном объеме введенного препарата. При аутопсии умерщвленных в конце опыта животных внутренние органы - без особенностей. На основании полученных результатов ЛЛФ БХ рекомендована для дальнейшего изучения.
Ключевые слова: Борхлорин, липосомы, токсичность.
N.Yu. Kulbachevskav. O.I. Konveva. M. V. Dmitrieva, N.A. Oborotova
THE STUDY OF THE "ACUTE" TOXICITY OF LIPOSOMAL DRUG FORM OF BORCHLORIN
FSBSI «N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center» FASO, Moscow
Abstract
In laboratory development of dosage forms N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center developed liposomal dosage form of a photosensitizer chlorophyll-type of Borchlorin (LDF BCh) for intravenous administration. Purpose of research - the study of the acute toxicity of LDF BCh intravenously in mice and rats.
Work carried out on 120 healthy mice, males and females of Balb/c received from kennel "Stolbovaya" and 110 healthy weinbrener outbred rats male derived from breeding FGBI "N.N. Blokhin". LDF BCh was administered in single doses, mice - 20.25, 13.5 and 6.75 mg/kg, rats - 4.0, 8.0 and 16.0 mg/kg. Doses of 13.5 mg/kg to mice and 16.0 mg/kg to rats were limited amount of input solution and was divided into 2 introduction, dose of 20.25 mg/kg to mice at 3 injections every 2 - 3 hours.
With the introduction of LDF BCh mice and rats males and females in the number of dead animals, time of death, the clinical picture of intoxication no sex differences. Observed the death of mice on 1-3 and 8 days of observation after the drug in doses 20.25 and 13.5 mg/kg on the background of piloerection, fast breathing, narrowing of eye slits. Autopsy of dead animals noted: brain - the vessels are injected, bleeding under dura, other bodies - without features. In mice treated with the drug in doses do not cause death of animals, of any clinical manifestations of toxicity, and changes in behavioral responses were noted. LD50 LDF BCh for mice-females - 21.38 mg/kg; mice-males - 22.50 mg/kg. In the study on rats introduction LDF BCh death did not cause. 5-10 minutes after the introduction of the drug in animals was noted lack of exercise, continued for 15-30 minutes, other clinical manifestations of toxicity and behavioral changes were observed. Estimated toxic dose in rats is not installed in the absence of mortality at the maximum possible concentration and maximum extent of the drug. Autopsy murdered in the end of the experience of the animal's internal organs - without features. On the basis of the results of liposomal drug form recommended for further study.
Key words: Borchlorin, liposomes, toxicity.
№ 3/tom 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
#
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
ИЗУЧЕНИЕ «ОСТРОЙ.» ТОКСИЧНОСТИ...
Введение
Применение нанотехнологий для создания новых лекарственных форм является одним из ведущих направлений развития фармации. Включение лекарственных веществ в наноструктурирован-ные системы доставки снижает концентрацию свободных препаратов в кровяном русле, благодаря селективному накоплению в месте действия, и препятствует их быстрому выведению из организма. Таким образом, за счет изменения фармакокинети-ки и биораспределения препарата уменьшается его общая токсичность и увеличивается терапевтический индекс [1; 2; 4; 9].
Однако успешное внедрение инновационных препаратов в клиническую практику невозможно без детального изучения безопасности их применения еще на этапе экспериментальных (доклинических) исследований, которые направлены на выявление и оценку выраженности токсических эффектов, возникающих при взаимодействии фармакологически активного вещества с организмом лабораторного животного. Такие исследования обязательно включают изучение общетоксического действия (главным образом - острой и хронической токсичности) и специфических видов токсичности. Особенность изучения «острой» токсичности наност-руктурированного лекарственного препарата заключается в исследовании как самого фармакологического вещества, содержащегося в наночасти-цах, так и его составляющих по отдельности, в том числе - наночастиц [5; 8].
В лаборатории разработки лекарственных форм ФГБУ «РОНЦ им. H.H. Блохина» разработана наноструктурированная ЛЛФ БХ, оригинального фотосенсибилизатора хлоринового ряда. ЛЛФ БХ имеет низкую «темновую» токсичность и обладает высокой цитотоксической активностью в отношении клеток глиомы крысы С6 [3]. Минимально эффективная доза ЛЛФ БХ, приводящая к полной регрессии саркомы М-1 и полному излечению у 100 % животных после ФДТ, составляет 2,5 мг/кг [7]. Кроме того, установлено, что терапевтическая доза ЛЛФ БХ в 4 раза ниже, чем терапевтическая доза свободного Борхлорина [6].
Задачи настоящего исследования:
• изучение «острой» токсичности липосо-мальной ЛЛФ БХ при его однократном внутривенном введении мышам и крысам самцам и самкам.
• определение однократных расчетных токсических и летальных доз (ЛД10, ЛД16, ЛД50 И ЛД84) ЛЛФ БХ.
Материалы и методы
Получение ЛЛФ БХ
Липосомы с борхлорином получали методом Бенгема (Bangham) в модификации для гидрофобных субстанций. Точные навески лецитина, холестерина и пегелированного дистеароилфосфатиди-лэтаноламина растворяли в хлороформе. К субстанции борхлорина прибавляли 10 мл хлороформа и помещали в УЗ-ванну «Transsonic» на 5-10 мин для ускорения процесса растворения. Смешивали хлороформные растворы компонентов лекарственной формы, фильтровали через нейлоновый мембранный фильтр «Pall» с размером пор 0,22 мкм и переносили в круглодонную колбу вместимостью 2 л. Органический растворитель отгоняли при температуре 37±1 °С с получением полупрозрачной ли-
пиднои пленки, которую досушивали под вакуумом в течение 50 мин. Пленку гидратировали водой для инъекций с образованием дисперсии больших мультиламеллярных липосом. Для получения малых одноламеллярных липосом применяли метод экструзии, последовательно пропуская дисперсию через нейлоновые мембранные фильтры «Pall» с размером пор 1,2 мкм (1 раз); 0,45 мкм (1 раз); 0,22 мкм (5 раз).
С целью стабилизации и увеличения срока хранения липосомальной дисперсии борхлорина применяли метод сублимационной сушки. В качестве криопротектора использовали сахарозу в молярном соотношении лецитин/сахароза 1 : 4 - 1 : 5. К дисперсии малых одноламеллярных липосом добавляли необходимый объем раствора сахарозы, перемешивали и проводили стерилизующую фильтрацию. Полученную стерильную липосо-мальную дисперсию борхлорина разливали во флаконы по 4 мл и лиофилизировали в камере сублимационной сушки.
Изучение «острой» токсичности ЛЛФ БХ
Работа проведена на 120 здоровых мышах, самцах и самках линии Balb/c, полученных из питомника «Столбовая» и 110 здоровых неинбредных беспородных крысах-самцах, полученных из разведения РОНЦ им. Н.Н. Блохина.
Препарат вводили однократно внутривенно в максимально возможной рекомендованной концентрации - 1,08 мг во флаконе в 4 мл воды для инъекций. Мышам ЛЛФ БХ вводили в однократных дозах 20,25; 13,5 и 6,75 мг/кг, крысам в однократных дозах 4,0; 8,0 и 16,0 мг/кг. Дозы препарата 13,5 мг/кг мышам и 16,0 мг/кг крысам были лимитированы объемом вводимого раствора и делились на 2 введения, доза 20,25 мг/кг мышам на 3 введения с интервалом 2-3 часа (максимально возможный объем при максимально возможной концентрации). В качестве контроля использовали 2 группы животных: интактный контроль и животные, получавшие «пустые» липосомы в объеме и режиме, соответствующих максимальной дозе препарата. День введения препарата принимали за 0 (фон). Срок наблюдения за животными составил 30 суток. Критерии оценки «острой» токсичности: число павших животных и сроки их гибели, клиническая картина интоксикации, изменения поведенческих реакций, патологические изменения в тканях и внутренних органах, выявляемые при аутопсии павших и выживших животных, умерщвленных в конце опыта (макроскопическая оценка).
Фиксировали все патологические изменения в поведении и клиническом состоянии животных.
Результаты и обсуждения
При изучении «острой» токсичности на мышах ЛЛФ БХ при внутривенном применении наблюдалась гибель животных на 1-3 и 8 сутки наблюдения после введения препарата в дозах 20,25 и 13,5 мг/кг. Препарат, введенный в дозе 6,75 мг/кг, гибели животных не вызывал (табл. 1). Через 10-15 минут после введения препарата в высоких дозах и перед гибелью у мышей отмечалось: пилоэрекция, учащенное дыхание, сужение глазных щелей. При аутопсии павших животных отмечено: головной мозг - сосуды инъецированы, кровоизлияние под твердую мозговую оболочку, остальные органы -без особенностей.
№ 3/том 13/2014
РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ
#
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ИЗУЧЕНИЕ «ОСТРОЙ.» ТОКСИЧНОСТИ... | 53
«Острая» токсичность ЛЛФ БХ на мышах линии Ва1Ь/с
Таблица 1
Доза борхлорина (мг/кг) Пало/всего Сроки гибели
Мыши-самки
6,75 0/6 -
13,5 0/6 -
20,25 4/6 1,2,2,8
«пустые» липосомы 0/6 -
контроль 0/12 -
Мыши-самцы
6,75 0/6 -
13,5 1/6 3
20,25 3/6 1,2,2
«пустые» липосомы 0/6 -
контроль 0/12 -
Расчетные токсические дозы ЛЛФ БХ на мышах линии Ва1Ь/с
Таблица 2
Пол животного ЛД50 (мг/кг)
самцы 22,50
самки 21,38
Таблица 3
Изменения массы тела мышей линии Ва1Ь/с при изучении «острой» токсичности ЛЛФ БХ
Доза, мг/кг Масса тела животных на сутки после введения препарата
Фон (0) 3 7 10 14 21 30
Мыши-самки
6,75 19,7 ± 0,9 19,6 ± 1,0 19,7 ± 1,0 19,5 ± 0,9 20,3 ± 0,7 21,6 ± 0,5 24,1 ± 0,5
13,5 19,2 ± 1,0 19,3 ± 1,5 19,7 ± 1,0 20,1 ± 1,0 20,8 ± 1,1 21,5 ± 0,9 23,4 ± 0,9
*20,25 19,7 ± 0,5 19,6 ± 0,9 18,6 ± 1,6 19,5 ± 0,8 20,1 ± 0,8 20,9 ± 0,4 23,1 ± 0,5
«пустые» липосомы 19,7 ± 0,8 18,9 ± 2,2 18,8 ± 2,8 19,2 ± 1,7 20,0 ± 1,6 21,0 ± 1,4 23,2 ± 1,7
контроль 19,5 ± 1,1 20,0 ± 1,0 20,3 ± 0,8 20,3 ± 0,7 21,3 ± 0,6 22,4 ± 0,5 24,3 ± 0,5
Мыши-самцы
6,75 23,0 ± 0,7 23,3 ± 0,7 23,6 ± 0,9 24,2 ± 0,9 24,6 ± 1,0 25,9 ± 0,7 28,0 ± 0,5
*13,5 23,0 ± 1,4 23,0 ± 1,2 23,6 ± 1,2 24,1 ± 1,0 24,4 ± 1,0 25,3 ± 1,0 26,4 ± 0,6
*20,25 22,7 ± 0,8 23,4 ± 1,2 24,5 ± 1,2 25,1 ± 0,9 25,5 ± 0,7 26,8 ± 0,6 27,8 ± 0,4
«пустые» липосомы 22,2 ± 1,2 21,8 ± 2,1 22,4 ± 1,3 23,0 ± 0,9 23,6 ± 0,8 24,8 ± 0,6 27,0 ± 0,7
контроль 23,9 ± 0,8 24,3 ± 0,8 24,7 ± 0,8 24,8 ± 0,8 25,7 ± 0,8 26,7 ± 0,9 28,8 ± 0,6
*в группах отмечалась гибель животных
Таблица 4
«Острая» токсичность ЛЛФ БХ на неинбредных крысах__
Доза борхлорина(мг/кг) Пало/всего Сроки гибели
самки
4,0 0/6 -
8,0 0/6 -
16,0 0/6 -
«пустые» липосомы 0/6 -
контроль 0/6 -
самцы
4,0 0/6 -
8,0 0/6 -
16,0 0/6 -
«пустые» липосомы 0/6 -
контроль 0/6 -
№ 3/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
Изменения массы тела неинбредных крыс при изучении «острой» токсичности ЛЛФ БХ Таблица 5
Доза, Сутки после введения препарата (масса тел животных) |
мг/кг Фон (0) | 3 | 7 14 21 30 |
Самки |
4 150,8 ± 11,6 161,3 ± 13,6 167,8 ± 17,4 193,8 ± 23,9 217,2 ± 24,8 243,3 ± 21,1
8 146,7 ± 10,8 156,8 ± 13,2 169,8 ± 13,3 195,5 ± 16,0 215,7 ± 13,2 235,0 ± 9,0
16 155,3 ± 10,1 164,8 ± 12,3 200,3 ± 14,7 211,3 ± 14,0 231,8 ± 13,3 248,0 ± 16,2
«пустые» липосомы 142,5 ± 8,2 152,2 ± 9,7 166,3 ± 10,1 183,0 ± 8,9 202,8 ± 7,4 227,0 ± 5,8
контроль 150,0 ± 10,0 153,7 ± 11,3 173,8 ± 9,1 186,8 ± 11,1 205,0 ± 15,2 223,2 ± 9,5
| Самцы |
4 146,7 ± 18,6 168,7 ± 11,8 180,3 ± 8,8 196,2 ± 9,1 226,0 ± 9,2 254,5 ± 8,4
8 135,0 ± 5,5 151,2 ± 8,3 151,2 ± 8,3 164,3 ± 7,0 196,7 ± 11,6 239,2 ± 6,7
16 172,5 ± 16,7 186,0 ± 27,8 186,0 ± 27,8 196,5 ± 31,9 216,7 ± 30,5 247,2 ± 25,7
«пустые» липосомы 170,8 ± 18,0 186,2 ± 18,3 187,8 ± 21,4 204,7 ± 21,5 246,0 ± 42,3 291,3 ± 54,6
контроль 182,0 ± 11,7 197,5 ± 13,9 241,3 ± 21,6 264,8 ± 19,3 293,2 ± 18,6 328,7 ± 16,5
мыши самцы
140
130
я 120 о
(О 110 100 90
-♦—20,25 мг/кг
13,5 мг/кг -а— 6,75 мг/кг
фон 3 7 10 14 21 30 сутки
-*— пустые липосомы
-ж— контроль
Рис.1. «Острая» токсичность ЛЛФ БХ на мышах-самцах линии Ва1Ь/с.
мыши самки
(О
о о
(О 2
140 130 120 110 100 90
фон 3 7 10 14 21 30 сутки
20,25 мг/кг
13,5 мг/кг
6,75 мг/кг
-к— "пустые" липосомы
-ж— контроль
Рис. 2. «Острая» токсичность ЛЛФ БХ на мышах-самках линии Ва1Ь/с.
№ 3/том 13/2014
РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ
ф
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ИЗУЧЕНИЕ «ОСТРОЙ» ТОКСИЧНОСТИ... | 55
крысы самцы
190
^ 170
8 150 о
§ 130 110 90
фон 3
7 14 21 сутки
30
— - 4 мг/кг
—■— 8 мг/кг
—А- 16 мг/кг
—х- "пустые"
ЛИПОСОМЫ
—ж- контроль
Рис. 3. «Острая» токсичность ЛЛФ БХ на крысах-самцах.
#
крысы самки
190
^ 170
8 150 | 130 110 90
фон 3
7 14 сутки
21 30
—♦— - 4 мг/кг
—■— 8 мг/кг
—А- 16 мг/кг
—X- "пустые"
ЛИПОСОМЫ
—ж- контроль
#
Рис. 4. «Острая» токсичность ЛЛФ БХ на крысах-самках.
Показано, что у животных, получавших препарат в дозах не вызывающих гибель животных, каких-либо клинических проявлений токсичности и изменений в поведенческих реакциях отмечено не было.
На основании полученных результатов проведена статистическая обработка данных методом Кербера (МЛ. Беленький «Элементы количественной оценки фармакологического эффекта», 1963 г.).
По величине расчетных токсических доз ЛЛФ БХ половых различий в количественной токсичности препарата у мышей не обнаружено (табл. 2).
У мышей-самцов, получавших ЛЛФ БХ, на протяжении всего срока наблюдения уменьшения массы тела животных во всех изученных дозах не наблюдалось, масса тела не отличалась от изменений массы тела животных контрольных групп и колебалась в пределах физиологических норм для данного вида животных. У мышей-самок, получавших ЛЛФ БХ в дозе 20,25 мг/кг и «пустые» липо-сомы в эквиобъеме, отмечено статистически недостоверное (<5%) снижение массы тела на 7 сутки
№ 3/том 13/2014
наблюдения с восстановлением к 10 суткам; в остальных группах на протяжении всего срока наблюдения уменьшения массы тела животных не наблюдалось, масса тела не отличалась от изменений массы тела интактных животных и колебалась в пределах физиологических норм для данного вида животных (табл. 3, рис. 1 и 2).
При аутопсии умерщвленных в конце опыта животных внутренние органы - без особенностей.
При изучении «острой» токсичности на крысах ЛЛФ БХ гибели животных не наблюдалось. Через 5-10 мин после введения препарата у животных отмечалась гиподинамия, продолжающаяся в течение 15-30 мин, других клинических проявлений токсичности и изменений поведенческих реакций не наблюдалось (табл. 4).
Расчетные токсические и летальные дозы ЛЛФ БХ при максимально возможных концентрациях и максимально возможных объемах определены не были в связи с отсутствием гибели животных.
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
У крыс-самцов получавших ЛЛФ БХ в дозе 16,0 мг/кг отмечено статистически недостоверное отставание в приросте массы тела начиная с 7 сут наблюдения. К 30 суткам наблюдения (конец опыта) статистически недостоверное отставание в приросте массы тела составило -25%. В группах получавших ЛЛФ БХ в дозе 8,0 мг/кг и «пустые» липосомы отмечено незначительное отставание в приросте массы тела на 7-21 сут наблюдения с восстановлением к 30 сут. В группе животных получавших ЛЛФ БХ в дозе 4,0 мг/кг на протяжении всего срока наблюдения уменьшения массы тела крыс не наблюдалось, она не отличалась от таковой интактных животных и колебалась в пределах физиологических норм для данного вида. У крыс-самок, получавших ЛЛФ БХ на протяжении всего срока наблюдения, уменьшения массы тела животных во всех изученных дозах не наблюдалось, масса тела не отличалась от изменений массы тела контрольных групп и колебалась в пределах физиологических норм для данного вида животных (табл. 5, рис. 3 и 4).
При аутопсии умерщвленных в конце опыта животных внутренние органы - без особенностей.
Литература
Заключение
Таким образом, изучена «острая» токсичность ЛЛФ БХ при однократном внутривенном применении в диапазоне доз на мышах и крысах самках и самцах.
Установлено отсутствие половых различий для мелких лабораторных животных при применении ЛЛФ БХ. Установлено, что гибель мышей при применении ЛЛФ БХ наступает на 1; 2; 3 и 8 сутки после введения препарата на фоне ярко выраженных сосудистых нарушений. Получены расчетные токсические дозы ЛЛФ БХ при однократном внутривенном применении мышам: для мышей-самок ЛД50 - 21,38 мг/кг; для мышей самцов ЛД50 - 22,50 мг/кг; для крыс расчетные токсические дозы не установлены в связи с отсутствием гибели животных при максимально возможной концентрации и максимально возможном объеме введенного препарата. Установлено, что у мышей-самок и у крыс-самцов, получавших ЛЛФ БХ в высоких дозах, на протяжении всего срока наблюдения отмечено статистически недостоверное колебание массы тела.
1.
2.
3.
5.
6.
7.
9.
Барышников А.Ю. Наноструктурированные липосомальные системы как средство доставки противоопухолевых препаратов // Вестник РАМН. - 2012. - №3. - С. 23-30.
Гуревич Д.Г., Меерович И.Г., Меерович Г.А. и др. Влияние размеров липосом на уровень и селективность накопления тиосенса в опухоли // Российский биотерапевтический журнал. - 2007. - Т. 6, № 2. - С. 45-9.
Дмитриева М.В., Оборотова Н.А., Орлова О.Л. и др. Липосомальная лекарственная форма Борхло-рина // Российский биотерапевтический журнал. - 2014. - Т. 13, № 1. - С. 31-6.
Дмитриева М.В., Оборотова Н.А., Санарова Е.В., Бунатян Н.Д. Наноструктурированные системы доставки противоопухолевых препаратов // Российский биотерапевтический журнал. - 2012. - Т. 11, № 4. - С. 21-7.
Меньшикова Л.А., Печенкина И.Г., Береза Н.С. Особенности доклинических исследований инновационных лекарственных препаратов // Научно-производственный журнал «Разработка и регистрация лекарственных средств». - 2013. - Т. 2, № 1. - С. 62-4.
Осипч_ук Ю.С., Каплан М.А., Дрожжина В.В. Оценка противоопухолевой активности фотосенсибилизаторов борированного хлорина и липосомального борированного хлорина после фотодинамической терапии саркомы М-1 крыс // Сибирский онкологический журнал. - 2014. - Приложение №1. -С. 96-7.
Осипчук Ю.С., Дрожжина В.В. Фотодинамическая терапия саркомы М-1 крыс с использованием нового фотосенсибилизатора Борхлорин липосомальный лиофилизат // Российский биотерапевтический журнал. - 2013. - Т. 12, № 4. - С. 47-50.
Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть 1. - М.: Гриф и К., 2012. - 944 с.
Ranganathan R., Madanmohan S., Kesavan A. et al. Nanomedicine: towards development of patient-friendly drug-delivery systems for oncological applications // International Journal of Nanomedicine. -2012. - 7. - P. 1043-60.
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИИ
ЛЛФ БХ
- липосомальная лекарственная форма Борхлорина
№ 3/том 13/2014
РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ
