CC BY
23
УДК 615.076.9
Ключевые слова: острая и хроническая токсичность, гепакардин, полулетальная доза Key words: acute and chronic toxicity, hepacardin, half-lethal dose
Глотова С. В.
ИЗУЧЕНИЕ ОСТРОЙ И ХРОНИЧЕСКОЙ ТОКСИЧНОСТИ ПРЕПАРАТА ЧИН 3607
(ГЕПАКАРДИН)
ACUTE AND CHRONIC TOXICITY STUDY OF PREPARATION CHIN 3607 (HEPACARDIN)
ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины», Санкт-Петербург Saint-Petersburg State Academy of Veterinary Medicine, Saint-Petersburg
Глотова Светлана Вячеславовна, аспирант кафедры фармакологии и токсикологии. Тел. (812) 232-55-92 Glotova Svetlana V., Pharmacology and Toxicology Dept. Postgraduate. Tel. +7 (812) 232-55-92
Аннотация. Изучена острая и хроническая токсичность препарата ЧИН 3607 (гепакардин). Препарат относится к 4 классу токсичности, полулетальная доза препарата составляет > 2000 мг/кг. Введение препарата гепакардин крысам в течение трех месяцев в дозах 100 мг/кг, 300 мг/кг и 500 мг/кг не выявило гепато-, кардио- и нефротокси-ческого действия, не привело к нарушению фосфорно-кальциевого обмена, не выявило снижения массы тела. Summary. Acute and chronic toxicity of preparation CHIN 3607 (Hepacardin) was studied. The preparation belongs to toxicity class 4. Its half-lethal dose is > 2000 mg/kg. The injection of hepacardin at doses of 100 mg/kg, 300 mg/kg and 500 mg/kg to rats during a three month period didn't show hepato-, cardio- and nephrotoxic effect. It didn't cause phosphate-calcium metabolic imbalance or body weight loss either.
Введение
По мнению большинства исследователей, как в нашей стране, так и за рубежом продолжительное использование животных на фермах служит одним из главных показателей высокой культуры ведения хозяйства. Однако, несмотря на актуальность проблемы увеличения сроков использования животных, систематических и глубоких разработок по ее решению практически не проводилось [2].
Создание гериатрических препаратов, сочетающих в себе кардио-, гепато-, хон-дропротекторные, иммуностимулирующие, антиоксидантные свойства, для домашних животных позволит не только комплексно профилактировать и лечить болезни, возникающие в старости, но и продлевать срок активной и полноценной жизни домашних животных, что, несомненно, является одной из актуальных задач современной ветеринарной фармакологии [3; 4]. Ранее был разработан и создан комплексный препарат ЧИН 3607 (гепакардин), включающий в себя экстракты растительного и животного происхождения, который, на наш взгляд, может способствовать решению поставленной задачи [4].
Любой вновь созданный препарат должен пройти целый ряд доклинических исследований, и одним из самых главных испытаний
является изучение безопасности препарата. Целью настоящего исследования было изучение острой и хронической токсичности препарата ЧИН 3607 (гепакардин).
Материалы и методы
Изучение острой токсичности
Изучение острой токсичности препарата ЧИН 3607 (гепакардин) проводили методом постановки биологической пробы на лабораторных животных, полученных из питомника «Рапполово» Ленинградской области. ЛД50 определяли по методу Кербера [1].
Исследование было выполнено на 60 белых беспородных мышах, самцах, массой 28 - 30 грамм. Животные были разделены на 6 групп по 10 особей. Препарат, предварительно растворенный в 1 % растворе крахмала, вводили внутрь через желудочный зонд в объеме 0,5 мл.
Животным подопытных групп препарат вводили из расчета: 1 группа - 100 мг/кг (стартовая доза); 2 группа - 500 мг/кг; 3 группа - 1000 мг/кг; 4 группа - 1500 мг/кг; 5 группа - 2000 мг/кг. Животным контрольной группы (6 группа) вводили 1 % раствор крахмала (без препарата) в объеме 0,5 мл.
Животные всех испытуемых групп находились под наблюдением 48 часов.
В период наблюдения оценивали общее состояние животных (внешний вид, состояние шерсти и кожных покровов, наличие саливации, падеж), а также изменения в поведении. По истечении 48 часов животных вскрывали и проводили визуальное морфологическое обследование внутренних органов.
Изучение хронической токсичности
Изучение хронической токсичности препарата гепакардин было выполнено на 34 белых крысах линии Wistar, самцах, массой 180-200 г, полученных из питомника «Рап-полово» Ленинградской области. Животные были разделены на 4 группы по 8 крыс в каждой: 1 группа - получали гепакардин в дозе 500 мг/кг живой массы; 2 группа - получали гепакардин в дозе 300 мг/кг живой массы; 3 группа - получали гепакардин в терапевтической (суточной) дозе 100 мг/кг живой массы; 4 группа - контрольная.
Препарат скармливали в течение трех месяцев в смеси с мясным фаршем и хлебом. Животные контрольной группы получали аналогичное количество наполнителя. Помимо препарата, крысы получали комбикорм, доступ к воде был не ограничен.
В течение всего опыта животные находились под наблюдением, при этом учитывали потребление корма и воды, поведение, состояние волосяного покрова и слизистых оболочек. Взвешивание животных проводилось раз в 15 дней.
По истечении периода исследования крысы были декапетированы, были произведены взятие крови для биохимических исследований, вскрытие, визуальный контроль и морфологическая оценка состояния внутренних органов (сердца, печени, почек, желудка и пищевода).
Результаты и обсуждение
Изучение острой токсичности
Как показали проведенные исследования, принудительное скармливание препарата гепакардин в дозах от 100 мг/кг (терапевтическая доза) до 2000 мг/кг (превышение терапевтической дозы в 20 раз) с шагом дозы 500 мг/кг не вызвало гибели ни одного животного ни в одной из подопытных групп. В указанный период (48 часов) все исследуемые
животные имели нормальные поведенческие реакции, хороший аппетит, здоровый внешний вид, гиперсаливации отмечено не было.
По истечении 48 часов вскрытие подопытных мышей и визуальный осмотр внутренних органов патологических отклонений не выявил.
Изучение хронической токсичности
Как показали исследования по изучению хронической токсичности препарата гепа-кардин, на протяжении всего периода (3 месяца) у крыс всех испытуемых групп не было отмечено признаков интоксикации, ни одно из подопытных животных не погибло.
В течение всего эксперимента крысы опытных групп по поведению, потреблению корма и воды, состоянию волосяного покрова и слизистых не отличались от крыс контрольной группы.
Результаты исследования, связанного с контролем веса животных, представлены в таблице 1.
Как представлено в таблице 1, животные всех испытуемых групп равномерно набирали вес, при этом достоверной разницы в изменении массы тела у животных опытных групп (1, 2, 3) в сравнении с контрольной группой не обнаружено. Прибавка в весе у животных всех групп за период исследования составила примерно 30 %, что соответствует физиологическим нормам.
Результаты изучения некоторых биохимических показателей сыворотки крови испытуемых крыс представлены в таблице 2.
Анализируя результаты, представленные в таблице 2, становится очевидным, что испытуемый препарат не оказывает кар-диотоксического, гепатотоксического и не-фротоксического действия ни в одной из используемых доз. Значения трансаминаз (АЛТ и АСТ), белка, щелочной фосфатазы не только не превышали контрольных значений, но в ряде случаев были ниже (АЛТ и АСТ в группах 3 и 2) в сравнении с контролем, что может свидетельствовать от благоприятном воздействии препарата на функцию печени и сердца. Кроме того, показатели фосфорно-кальциевого обмена (содержание в крови кальция, фосфора, активность щелочной фосфатазы), также нарушены не были.
Таблица 2.
Некоторые биохимические показатели крови крыс на фоне трехмесячного употребления препарата гепакардин в различных дозах (№п)
Таблица 1.
Вес крыс на фоне трехмесячного употребления препарата гепакардин
в различных дозах (№п)
На начало опыта, г В конце опыта, г Разница от первоначальной массы
г %
1 (500 мг/кг) 190±12 268±21 + 78 + 29,1
2 (300 мг/кг) 196±14 287±19 + 91 + 31,7
3 (100 мг/кг) 188±9 261±17 + 73 + 27,9
4 (контроль) 191±11 263±21 + 72 + 27,4
■—№ группы Показатель " "— 1 500 мг/кг 2 300 мг/кг 3 100 мг/кг 4 Контроль
АЛТ (мкмоль/мл) 2,48±0,29 2,61±0,67 1,77±0,34 2,9±0,25
АСТ (мкмоль/мл) 3,05±0,22 2,42±0,42 2,77±0,16 3,17±0,17
Щелочная фосфатаза (ЕД/л) 74,9±4,93 79,2±5,1 67,62±2,41 66,95±3,20
Креатинин (мкмоль/л) 70,65±6,56 63,72±1,43 72,45±2,63 63,67±3,87
О. белок (г/л) 52,65±6,87 59,37±2,24 61,2±5,55 60,5±5,08
Кальций (ммоль/л) 1,95±0,22 1,82±0,11 1,72±0,22 1,32±0,14
Фосфор (ммоль/л) 2,27±0,06 2,22±0,22 2,20±0,17 2,37±0,22
Вскрытие и визуальный осмотр внутренних органов (легкие, сердце, печень, почки, желудок) каких-либо патологических изменений не выявили. Внутренние органы были нормального размера, формы и топографического расположения, признаков отечности и кровоизлияний обнаружено не было. Осмотр слизистых оболочек пищевода, желудка и кишечника у крыс всех испытуемых групп не выявил признаков раздражения и воспаления.
Выводы
1. Полулетальная доза (ЛД50) для препарата гепакардин (ЧИН 3607) составляет более 2000 мг/кг, что позволяет отнести данный препарат к IV классу токсичности.
2. Трехмесячное ежедневное введение (внутрь) препарата гепаркардин крысам в дозах 500 мг/кг, 300 мг/кг и 100 мг/кг не привело к увеличению активности АЛТ, АСТ, щелочной фосфатазы в сыворотке крови, а также значимо не повлияло на содержание кальция, фосфора, общего белка и креа-тинина. Все исследованные показатели были в пределах физиологических норм, характерных для здоровых, интактных животных.
3. Трехмесячное ежедневное введение (внутрь) препарата гепаркардин крысам в дозах 500 мг/кг, 300 мг/кг и 100 мг/кг не вызвало видимых патологических изменений в состоянии жизненно важных внутренних органов - сердца, легких, печени, почек, желудка.
Масса тела животных, получавших гепа-кардин, также была в пределах физиологических норм.
Список литературы
1. Беленький, М. Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / М. Л. Беленький. - Л. : Медицина, 1963. - 262 с.
2. Сивольський, А. В. Продолжительность хозяйственного использования коров и эффективность селекции по этому признаку : автореферат ... канд. вет. наук, Рязанская ГСХА, 2002.
3. Чуваев, И. В. Необходимость изыскания гери-артрических средств для плотоядных / И. В. Чуваев, В. Д. Соколов, С. В. Глотова // 19-я Международная научно-практическая конф. по фармакологии и токсикологии: материалы. - СПб, 2007. - С. 34.
4. Чуваев, И. В. Гериартрические направление в ветеринарии / И. В. Чуваев // 1 Международный конгресс ветеринарных фармакологов : материалы. -
СПб, 2008. - С. 58.
