УДК 615.322
А. М. Мартынов (к.фарм.н., доц.)1, К. А. Пупыкина (д.фарм.н., доц., проф.)2, Т. Д. Даргаева (д.фарм.н., гл.н.с., проф.) 3
Изучение качественного состава жирорастворимого комплекса, полученного из растительного сбора
1 Иркутский государственный институт усовершенствования врачей,
кафедра фармации 664041, г. Иркутск, м-он Юбилейный, 100; тел. (395) 2465386 2Башкирский государственный медицинский университет, кафедра фармакогнозии с курсом ботаники и основ фитотерапии 450000, г.Уфа, ул.Ленина,3; тел. (347) 2724173, e-mail: [email protected] 3Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений,
отдел стандартизации и сертификации ВИЛР 117216, г. Москва, ул. Грина, 7; тел. (495) 3827377
A. M. Martynov1, K. A. Pupykina2, T. D. Dargaeva3
The study of qualitative composition of fat-soluble complex received on the basis of plant composition
1 Irkutsk State Institute of Physicians Advance 11, m-on Jubilee, 664041, Irkutsk, Russia; ph. (395) 2465386 2 Bashkir State Medical University 3, Lenin's Str, 450000, Ufa, Russia; ph. (347) 2724173 3 Russian Institute of Medicinal and Aromatic Plants 7, Green's Str., 117216, Moscow, Russia; ph. (495) 3827377
Проведены исследования по изучению качественного состава жирорастворимого комплекса, полученного из растительного сбора, рекомендуемого при лечении бронхолегочных заболеваний. Установлено присутствие 33 соединений, среди которых наиболее важными являются миристиновая, 9-тетрадеценовая, пальмитиновая, линолевая, линоленовая жирные кислоты, компоненты эфиромасличной фракции (кариофиллен, у-кадинен, ^ис-а-бисаболен, ¿8-бисаболен, сквален), фитол, витамин Е, производные бензойной кислоты и др.
Ключевые слова: жирорастворимый комплекс; растительный сбор; химический состав.
The studies on the development of qualitative structure fats soluble complex received from plant composition, recommended at treatment bronho-legochnih diseases. The presence of 33 copounds amongst which the most important are miristic, 9-tetradecenoic, palmitinic, linoleic, linolenic fat acids; as well as components of ether-oil fraction (caryophyllene, y-cadinene, cis-a- and /3- bisabo-lene, squalene), phytole, vitamin E, benzoic acid derivatives and so on is established.
Key words: fats soluble complex; plant composition; chemical composition.
Заболевания органов дыхания широко распространены среди населения и лечение их является актуальной задачей современной медицины. Наряду с синтетическими препаратами в терапии этих заболеваний значительное место занимают лекарственные растения. Лекарственные растения оказывают общее регулирующее действие на весь организм, влияют на различные звенья патологического процесса, что особенно важно для профилактики и лечения хронических заболеваний.
Дата поступления 02.12.10
Цель настоящего исследования — изучение компонентного состава жирорастворимого комплекса, полученного из растительной композиции, рекомендуемой для лечения бронхо-легочных заболеваний.
Экспериментальная часть
Объектом исследования служил растительный сбор, состоящий из трех видов лекарственного растительного сырья, разрешенного для применения в медицине на территории РФ (трава фиалки одноцветковой, трава чабреца,
корни солодки уральской). Из сбора получали
1
жирорастворимый комплекс по методике и изучали его качественный состав. Идентификацию соединений осуществляли методом масс-спектрометрии в сочетании с хроматогра-фическим способом разделения компонентов смеси.
Пробы с помощью микрошприца дозировали в газовый хроматограф Hewlett-Pac-сагё 5890 с масс-селективным детектором MSD HP-5973A и системой обработки данных «HP Chem Station», содержащей библиотеку спектров на 200 тысяч соединений 2. Разделение компонентов смеси проводили в соответствии с рекомендациями каталога Hewlett-Рассагё-Chemical Analysis Columns and Supplies на кварцевой капиллярной колонке Ultra-2 (50 м х 0.2 мм) с привитой фазой 5% метилфенилсиликона, 95% диметилсилоксана, при программировании температуры от 50 °С до 280 °С со скоростью 10 °С/мин. Масс-спектры получали при ионизации электронным ударом 70 eV, сканирование спектров от 33 до 450 а.е.м. Обработка данных включала анализ спектров, контроль интерпретации на основа-
« 3
нии спектро-структурных корреляций и построения селективных ионных масс-хроматог-рамм по отдельным ионам, специфичным для определяемых веществ. Количественное определение осуществляли по площади пиков на масс-хроматограмме и их отношению к полному ионному току (TIC).
Обсуждение результатов
При интерпретации масс-спектров жирных кислот необходимо было: зарегистрировать пики молекулярных ионов (М+) по соотношениям интенсивностей М+ и изотопных
ионов (М+1, М+2); определить брутто-состав (под изотопным составом понимают относительную распространенность изотопа данного элемента, выраженную в виде отношения малораспространенного изотопа к более распространенному 13С/12С, например, 160/180); выявить диагностический фрагмент молекулы, который образуется в результате специфичной перегруппировки М+.
HO'
HO'
OH
А
m/z go
Для каждого типа соединений существуют свои характерные осколочные ионы, то есть масс-спектр — «отпечаток пальцев».
При анализе соединений терпеновой природы учитывали аналитические параметры компонентов эфирных масел, разработанные для идентификации моно- и сесквитерпеновых углеводородов 4.
Результаты исследования жирорастворимого комплекса, выделенного из сбора, представлены на рис. 1. Анализируя полученные данные, можно отметить, что в липофильной фракции идентифицировано 33 соединения, относящиеся к следующим группам: а) высокомолекулярные жирные кислоты и их производные (кислоты миристиновая, 9-тетрадеце-новая, пальмитиновая, линолевая, линолено-вая и др.); б) соединения терпеновой природы, являющиеся составной частью эфиромаслич-ной фракции (кариофиллен, у— кадинен, цис-
Time-> 7.00 7.50 8.00 8.50 9.00 9.50 10.00 1050 11,00 11,50 12.00 12.50 13.00 13.50 14.00 14,50 15,i)0 15.50 16.00 16.50 17 00 17.50 18.00 1850
Рис.1. Хроматограмма компонентного состава жирорастворимого комплекса, выделенного из сбора
о
R
+
+
R
+
M
а-бисаболен, ^—бисаболен, сквален); в) дитер-пеновый спирт фитол — соединения № 17;
г) производные аминов — соединение № 21, 22;
д) жирорастворимый витамин Е — соединение № 33; е) производное бензойной кислоты № 15; ж) высшие алифатические углеводороды и другие органические вещества (№ 1, 7, 9, 12, 13, 20, 21, 24-27, 29, 30, 32).
Таким образом, анализ спектров, библиотечный поиск и корреляция со временами удерживания свидетельствовали об очень хорошем, в большинстве случаев, совпадении спектров (индекс сходства — Match qulity более 90%), и последующий анализ таких спектров был не нужен. Опираясь на наилучшие значения вышеперечисленных показателей и учитывая результаты масс-спектрометрическо-го изучения, нам удалось однозначно идентифицировать компонентный состав липофиль-
ной фракции сбора. Исключение составляет пик со временем удерживания 11.32 мин. Он составной и в спектре кроме характерных фрагментов, регистрируются пики молекулярных ионов, которые принадлежат линолевой и линоленовой кислотам. На рис. 1 видно, что основной вклад принадлежит линолевой кислоте — масс-хроматограмма полностью описывает хроматографический пик (TIC), а масс-хрома-тограмма линоленовой кислоты составляет 40% от его площади.
Литература
1. Плешков Б. П. Практикум по биохимии растений.- М., 1976.- 256 с.
2. Hill H. C., Read R. I., Robert - Lopes M. T. // J Chem. Sol (c) 1968 (1).- P 93.
3. Лебедев А. Т. Масс-спектрометрия в органической химии. - М.:БИНОМ, 2003.- 493 с.
4. Зенкевич И. Г. // Растительные ресурсы.-1997.- Т.33, №1.- С.16.