CC BY
81
10.Шакула А.В., Труханов А.И., Банк В.Л. Применение аппаратно-программных комплексов полирецепторного лечебнооздоровительного действия в восстановительной медицине // Современные технологии восстановительной медицины / Под ред. А.И.Труханова. М.: Медика. 2004. С.234-256.
11 Юрковский О.И. Комплексная система реабилитации пострадавших при чрезвычайных ситуациях и в локальных конфликтах. М., Медицина, 2004, 240 с.
12.Ярошенко В.П. Висцеральная патология у раненых с минно-взрывными ранениями и современная система их медицинской реабилитации: Дисс. док. мед. наук. М. 2006.
13 BlankA.S. Vet.Centers: A new paradigm in delivery for victims and survivors of traumatic stress // In J.P.Wilson., R.Beverly (Eds) International Handbook of traumatic stress syndrome. Plenum Press N.V.1993, p. 913-927.
14. Overcash, Stephen J. The effect of ROSHI protocol and cranial electrotherapy stimulation on a 9-year-old anxious, dyslexic male with attention deficit disorder: A case study. Journal of Neurotherapy, 9(2):63-77, 2005.
APPLICATION OF MULTIPLE RECEPTOR THERAPY IN COMPLEX REHABILITATIVE TREATMENT OF PATIENTS WITH TRAUMATIC
EFFECTS
L.V. SMEKALKINA
The First Moscow State Medical University after I.M. Sechenov
Trauma and its effects occupy one of leading places among the reasons of death rate and population disability. The peculiarity of modern trauma is in its special severity being a powerful acute stress for an organism - physical and mental. The signs of combinative mental maladaptation, not revealed and non-compensated, grow and in course of time are transformed in difficult curabel forms. The work purpose was studying the efficiency of complex treatment at patients with differentiated application of new technologies of psychocorrection in restoration of traumatic illness. For comparative analysis of the used methods psychopathological, psychodiagnostic, electrophysio-logical examination was carried out; the level of adaptation and quality of life of victims were studied as well. The obtained data testify that the most effective method of healthcorrection is a combinative application physio- and psychotherapeutic influence (multiple receptor relaxation). This allows to recommend the given method for inclusion in the system of rehabilitation of patients with traumatic effects.
Key words: mental maladaptation, traumatic illness, psychocorrection.
УДК: 616-009:615, 322
ИЗУЧЕНИЕ ХИМИОПРОФИЛАКТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПОРОШКА БРОККОЛИ НА ВОЗНИКНОВЕНИЕ ОПУХОЛЕЙ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ, ИНДУЦИРОВАННЫХ У КРЫС МНМ
А.Р. ЧОЧИЕВА, Л.З. БОЛИЕВА*
В условиях проведенного эксперимента порошок брокколи оказывал иммуномодулирующее действие, препятствуя развитию индуцированного химическим канцерогеном вторичного иммунодефицитного состояния. Учитывая современные представления о роли иммунной системы в противоопухолевой защите организма, способность восстанавливать сниженный уровень иммунного ответа является важным свойством потенциального химиопрофилактического средства. Ключевые слова: рак молочной железы, химиопрофилактика
Относительно недавно рядом авторов было показано, что растительные индолы и изотиоцианаты (сульфорафан), которыми богаты овощи семейства крестоцветных (капуста брокколи, брюссельская, цветная, белокочанная, турнепс и др.), обладают значительной противоопухолевой активностью. Современные научные данные свидетельствуют, что наблюдается отчетливая обратная корреляция между потреблением в пищу растений семейства крестоцветных и частотой возникновения злокачественных опухолей тонкой и толстой кишки, а также гормонально зависимых опухолей молочной железы и предстательной железы [7,8,9].
Цель исследования - изучение влияния порошка брокколи на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс ^метил-^нитрозомочевиной (МНМ).
Материалы и методы исследования. Опыты проведены на
* Северо-Осетинская государственная медицинская академия
45 крысах - самках линии Вистар массой 100-120 г, полученных из вивария Пятигорской государственной фармацевтической академии. Животные содержались по 5-6 крыс в клетке в стандартных условиях при температуре 20-22°С и естественном световом режиме, на стандартном рационе вивария и получали питьевую воду без ограничений. В качестве канцерогенного агента использовали N-метил-^нитрозомочевину (МНМ), синтезированную в НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова М3 РФ. Опухоли молочной железы индуцировали по описанной методике [2] путем пятикратного с интервалом в одну неделю подкожного введения MHM в область одной и той же молочной железы у основания левой передней лапки в дозе 2,5 мг на крысу в 0,2 мл воды для инъекций (суммарная доза канцерогена составила 12,5 мг на крысу).
Животные были разделены на 2 группы: 25 крыс 1 группы служили контролем и получали только канцероген; 20 крыс 2 группы получали с первого дня и до конца эксперимента, продолжительность которого составила 36 недель одновременно с канцерогеном в качестве пищевой добавки порошок брокколи. Исследуемое вещество равномерно смешивали с творогом, корм, содержащий исследуемое вещество, поедался животными полностью.
Влияние порошка брокколи на динамику бластомогенеза оценивали по изменению частоты и латентного периода возникновения опухолей и расчетам индекса Айбела. Опухоли выявляли пальпацией, по мере их роста каждые 2 недели производилось измерение и вычисление объема новообразований по формуле: V= axbxc.
Индекс Айбела, характеризующий торможение развития индуцированных опухолей, рассчитывали по формуле:
иА=количество опухолей (%)/ средний латентный период.
Животных, доживших до окончания эксперимента, забивали парами фторотана. Всех павших и забитых животных подвергали полной аутопсии. Опухолевый материал молочной железы, после стандартной гистологической обработки, заливали в парафин. Срезы толщиной 5-7 мкм изучались гистологически. При морфологическом анализе опухолей молочной железы основывались на классификации опухолей лабораторных животных, предложенной Международным агенством по изучению рака.
Для изучения состояния клеточного иммунитета исследовали функциональную активность Т- и В-лимфоцитов в реакции бласттрансформации (РБТЛ) с митогенами ФГА, КонА и ЛПС. Учет проводили морфологически через 72 ч инкубации в полной среде в атмосфере 5% СО2 при 37°С. Все показатели определяли в относительных и абсолютных значениях. Для РБТЛ рассчитывали индекс стимуляции (ИС). Количество NK-клеток определяли путем подсчета больших гранулярных лимфоцитов [1;5].
Оценка фагоцитарной активности нейтрофильных грануло-цитов (НГ) проводилась в тесте бактериального фагоцитоза со Staphylococcus aureus по И.В. Нестеровой [4]. При этом определяли фагоцитарную активность (ФАН), фагоцитарное число (ФЧ), индекс завершенности фагоцитоза (ФИ). Об эффективности кислородзависимой микробицидной системы НГ судили по уровню среднего цитохимического индекса (СЦИ) в спонтанном (НСТ-сп.) и в стимулированном (НСТ-ст.) НСТ-тесте с выведением коэффициента мобилизации (КМ).
Результаты исследований обрабатывали статистически. Для оценки степени достоверности полученных различий в сравниваемых группах использовали t-критерий Стьюдента.
Результаты и их обсуждение. В результате проведенного эксперимента получены следующие данные. В обеих группах физиологическое состояние и поведенческие реакции крыс не имели каких-либо существенных различий.
Введение МНМ индуцировало у крыс развитие опухолей молочной железы, гистологически классифицированных как аденокарциномы.. Ко времени обнаружения первой опухоли показатели выживаемости животных составили в контрольной группе 88%, в опытной- 95%. До завершения опыта в контрольной группе дожило 10% животных, в опытной 84,2 % (p<0,05).
Первые опухоли у животных контрольной группы были обнаружены на 105 сутки после инъекции канцерогена, появление новых опухолей прекратилось на 245 сутки эксперимента. Средний латентный период развития опухолей в данной группе составил 154,0±9,0 суток. У опытных животных первая пальпируемая
опухоль возникла несколько позже - на 119 сутки эксперимента, появление новых опухолей прекратилось на 252 сутки эксперимента. Средний латентный период развития опухолей в опытной группе составил 200,2±15,2 суток (р<0,01). К концу эксперимента неопластические изменения были зарегистрированы у 20 (90,9%) из 22 животных контрольной группы и у 10 (52,6%) из 19 животных опытной группы (табл. 1) (р<0,05). Индекс Айбела в группе, получавшей порошок брокколи, был значительно ниже и равен
0,26 против 0,59 в контрольной группе (р<0,01).
Таблица 1
Влияние «Брокколи» на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс МНМ
Группа воздей- ствие Эф- фек- тив- ное число жи- вот- ных Число животных с опухолями молочной железы на день эксперимента абс./ % на день эксперимента
105 119 133 147 161 175 189 203 217 231 245 252
МНМ 22 4/1 8 6/2 7 8/3 6 9/4 0 13/59 16/72 18/81 18/81 19/86 19/86 20/90, 9 20/90, 9
MHM +«Брокк оли» 19 1/ 5,3 1/ 5,3 2/ 10,5 2/ 10,5* 3/ 15,8* 5/ 26,3* 6/ 31,6* 6/ 31,6* 7/ 36,8** 8/ 42,1** 10/ 52,6*
Примечания: * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001
В опытной группе продолжительность жизни животных статистически достоверно увеличивалась относительно аналогичных показателей в контрольной группе и составляла 61,5±7,7 суток против 31,8 ±1,9 суток в группе контроля (р<0,001).
В условиях данного эксперимента также было выявлено достоверное снижение темпов роста новообразований в опытной группе по сравнению с контролем. Средний размер опухолей в группе, получавшей брокколи, через два месяца после их выявления был равен 5,6±1,3 см3; в контрольной группе - 12,0±3,06 см3 (р<0,01).
Таким образом, в условиях проведенного эксперимента показана достоверная антиканцерогенная активность порошка брокколи, которая проявлялась в снижении частоты возникновения опухолей, увеличении латентного периода их развития, а также увеличении продолжительности жизни и выживаемости животных опытной группы по сравнению с контролем.
В качестве одного из возможных механизмов реализации химиопрофилактической активности данного соединения нами изучены его иммуномодулирующие свойства.
При использовании порошка брокколи выявлены достоверные изменения нарушенных параметров клеточного иммунитета в динамике канцерогенеза. У животных, получавших исследуемое вещество, в ходе эксперимента не наблюдалось значимого снижения функциональной активности Т- и В-лимфоцитов и количества натуральных киллеров. Оцениваемые параметры к концу исследования достоверно не отличались от показателей у интактных животных. При этом применение данного биологически активного соединения препятствовало развитию иммунологических нарушений со стороны системы НГ. Процент активно фагоцитирующих нейтрофилов соответствовал значениям в группе интактных животных и составил 59,6±1,9 (р<0,05).
Таблица 2
Влияние порошка брокколи на показатели иммунной защиты и естественной резистентности крыс в условиях канцерогенеза молочной железы, индуцированного МНМ
Показатель Г руппа животных
Интактные МНМ (контроль) МНМ + брокколи
Спонтанная трансформация, % 4,7±0,49 2,1±0,04* 3,8±0,76
ФГА, % 12.6±0,72 4,9±1,67* 12,0±1,09
ИС ФГА / Спонтанная трансформация 2,68±0,22 2,3±0,12 3,2±0,20
Кон А, % 7,98±0,68 4,4±0,80* 8,5±0,68
ИС Кон А/ Спонтанная трансформация 1,69±0,12 2,1±0,22 1,77±0,12*
ФГА / Кон А 1,60±0,1 1,1±0,08* 1,81±0,11#
ЛПС, % 10,0±0,84 7,6±1,2* 11,2±0,90
ИС ЛПС / Спонтанная трансформация 2,12±0,06 3,61±0,11* 2,94±0,09
БГЛ, % 4,62±0,38 1,9±0,21* 3,9±0,23#
Таким образом, в условиях проведенного эксперимента порошок брокколи оказывал иммуномодулирующее действие, препятствуя развитию индуцированного химическим канцерогеном вторичного иммунодефицитного состояния. Учитывая современные представления о роли иммунной системы в противоопухолевой защите организма, способность восстанавливать сниженный уровень иммунного ответа является важным свойством потенциального химиопрофилактического средства. Механизм иммуномодулирующего действия природных соединений до конца не изучен, хотя весьма аргументированным является предположение о том, что в его основе лежат антиоксидантные свойства, препятствующие иммунотоксическому действию продуктов ПОЛ [3; 6].
Выводы. Порошок брокколи тормозил развитие опухолей молочной железы, индуцированных МНМ и препятствовал развитию вторичного иммунодефицита.
Литература
1. Андреева И.И., Чумакова ЕА. Принципы и методы диагностики функциональных параметров лимфоцитов: Методические рекомендации / Ростов-на-Дону. 2007. 32 с.
2.Джиоев Ф.К. О влиянии зитазониума и двухсторонней овариэктомии на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс N - нитрозо - N - метилмочевиной.// Сборник научных трудов СОГМИ под ред. проф. Р.Д. Хубецовой. Краснодар. 1989. С. 112-114.
3. Лебедев В.В. Молекулярные механизмы патогенеза им-мунодефицитных состояний и принципы их терапии // Успехи клинической иммунологии и ал-лергологии. Под ред. А.В. Караулова. М.: Издательство «Региональное отде-ление РАЕН». 2002. С. 34-55.
4. Нестерова И.В., Колесникова Н.В., Чудилова Г.А., Светличная М.А. Комплексное трехуровневое исследование системы нейтрофильных гранулоцитов с возможной диагностикой имму-нодефицитных состояний при различной патологии // Метод. рекомендации. Краснодар. 1996. 20 с.
5. Потемкина Е.Е., Позднякова Р.З., Манукян ЛМ. Пособие по лабораторной клинической иммунологии. М.: Изд-во РУДН, 2003. 283 с.
6. Вendich A. Carotenoids and the immune system // Krinsky N.I., Mathews-Roth M.M. & Taylor R.F., eds. Carotenoids Chemistry and Biology. 1990. New York-Plenum Press- P. 323-335.
7. Epplein M., Wilkens L.R., Tiirikainen M. Urinary isothiocy-anates; glutathione S-transferase M1, T1, and P1 polymorphisms; and risk of colorectal cancer: the Multiethnic Cohort Study // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 2009. Vol. 18(1). P. 314-20.
8. Lee S.A. Fowke J.H., Lu W. Cruciferous vegetables, the GSTP1 Ile105Val genetic polymorphism, and breast cancer risk // Am. J. Clin. Nutr. 2008. Vol. 87(3). P. 753-60.
9. Moore L.E., Brennan P., Karami S. Glutathione S-transferase polymorphisms, cruciferous vegetable intake and cancer risk in the Central and Eastern European Kidney Cancer Study // Carcinogenesis. 2007. Vol. 28(9). P. 1960-1964.
STUDYING CHEMICAL AND PROPHYLACTIC ACTIVITY OF BROCCOLI POWDER ON OCCURANCE OF TUMOURS OF MAMMARY GLAND INDUCED AT RATS
F.R. CHOCHIEVA, L.Z. BOLIEVA Northern Ossetia State Medical Academy
In the experimental conditions the broccoli powder produced immunomodulating activity, preventing from the development of the secondary immunodeficiency state induced by the chemical carcinogen. Consideration modern conceptions of the role of immune system in antitumoral protection, ability to restore the decreased level of the immune response is an important property of this potential chtmical and prophylactic means.
Key words: mammary gland cancer, chemical prophylaxis.
Примечания: * - р<0,05; # - р<0,05.
