УДК 615.4:54+615.43
И.Г. Николаева, Г.Г. Николаева
ИЗУЧЕНИЕ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА ЧАЯ «АРУРА-7», ОБЛАДАЮЩЕГО АДАПТОГЕННЫМ ДЕЙСТВИЕМ
Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН (Улан-Удэ)
Изучен химический состав растительного сбора чай «Арура-7». Различными видами хроматографии обнаружены, индивидуальные фенольные соединения.
Ключевые слова: чай, биологически активные вещества, растительное средство
STUDY OF CHEMiCAL COMPOUND OF VEGETATiVE GATHERING TEA «ARURA-7» HAVING ADAPTOGENIC FEATURES
I.G. Nikolayeva, G.G. Nikolayeva
Institute of general and experimental biology SB RAS, Ulan-Ude
The chemical compound of vegetative gathering tea «Arura-7» has been determined. The research has discovered. individual phenolic compounds by different kinds of chromatography.
Key words: tea, biologically active substances, herbal drug
Нами разработано комплексное растительное средство в виде сбора-чая «Арура-7», используемого для приготовления биологически активного напитка (фиточая). Фармакологическое изучение, проведенное в Институте общей и экспериментальной биологии СО РАН (г. Улан-Удэ) показало, что чай обладает выраженным адаптогенным действием. В состав растительной композиции входят пять видов сырья: корневища и корни родиолы розовой, корневища и корни элеутерококка колючего, корни солодки, побеги черники, трава чабреца, доли каждого компонента выбраны и предложены с учетом многофакторных механизмов адапто-генного действия. Рациональность взятых соотношений ингредиентов в предложенной прописи подтверждена фармакологическими исследованиями. Основные группы биологически активных веществ, оказывающих фармакотерапевтическое влияние чая «Арура-7», представлены флавонои-дами, дубильными веществами, тритерпеновыми сапонинами, фенолами, фенолкарбоновыми кислотами, органическими кислотами полисахаридами и сахарами [1—5].
Целью данной работы явилось определение химического состава растительного сбора — чая «Арура-7».
Объекты исследования — образцы растительного сбора «Арура-7». В качестве исследуемых растворов использовали водные и 50% спиртовые извлечения чая «Арура-7».
Фенолы обнаруживают с помощью 1% раствора железа окисного хлорида, водные извлечения сбора дают зеленое окрашивание. Появляется черно-синее окрашивание при прибавлении нескольких капель раствора железоаммониевых квасцов (дубильные вещества). При прибавлении 5% спиртового раствора алюминия хлорида водное извлечение окрашивается в желтое окрашивание (флавоноиды). Сапонины обнаруживают с по-
мощью реакции на пенообразование: берут две пробирки, в одну наливают 0,1 н раствора кислоты соляной, в другую — 0,1 н раствора натрия гидроокиси, равные количества, затем в обе пробирки добавляют по 2 — 3 капли водного извлечения чая и сильно встряхивают. Образуется пена равная по объему и стойкости, что показывает наличие сапонинов тритерпеноидого типа. Тритерпеноиды открывают также по реакции с раствором ацетата свинца, образуется осадок. При добавлении двукратного количества 95% спирта этилового к упаренному водному извлечению чая, образуется белый осадок (полисахариды).
Для открытия индивидуальных соединений использовали тонкослойную хроматографию с достоверными веществами свидетелями. Извлечение и 1% спиртовые растворы свидетелей, рутина, кверцетина и лютеолин-7-гликозида, наносили капилляром на пластинку кизельгеля (Kieselgel 40 Б Е. Мегк - V, Darmstadt254) на расстоянии 1,5 см от края (извлечение наносят полосой, растворы свидетелей
— в точку). Пластинку подсушивали на воздухе в течение 2 — 3 минут и хроматографировали в системе растворителей «этилацетат : уксусная кислота : вода» (25 : 5 : 5) восходящим способом (предварительное насыщение камеры 1 час). Длина пробега растворителей 15 см. Затем пластинку вынимали из камеры, высушивали на воздухе и просматривали в УФ-свете при длине волны 360 нм. На хроматограмме спиртового извлечения из чая видны 4 пятна различного цвета, из них: на уровне РСО рутина - пятно желтовато-коричневое Rf - 0,28; на уровне ГСО лютеолин-7-гликозида — коричневое R f - 0,48; на уровне РСО кверцетина — желтоватое R f - 0,98. После обработки пластинки 5% спиртовым раствором алюминия хлорида и нагревания ее в течение 2 — 3 минут в сушильном шкафу при температуре 100—105 °С пятна, соответствующие рутину, лютеолин-7-гликозиду и кверцетину при-
обретали желтую окраску в видимом свете и яркожелтую флуоресценцию в УФ-свете.
Для обнаружения глицирризиновой кислоты использовали пластинку Silufol —УФ 254 (20 х 20 см). Извлечение и 5 мкл стандартного раствора глицирризиновой кислоты наносили на линию старта и пластинку помещали в хроматографическую камеру. Элюировали в смеси растворителей «хлороформ : метанол : вода» (61 : 32 : 7), фронт растворителя поднимался на 10 см, затем после высушивания пластинку рассматривали в видимом и ультрафиолетовом свете при длинах волн 254 и 360 нм. В УФ-свете проявляется синим цветом пятно глицирризиновой кислоты с Rf -0,1.
При храматографировании пластинок «Сорб-фил УФ-254» с нанесенными пробами спиртового извлечения в смеси растворителей «хлороформ : спирт этиловый : вода» (26 : 14 : 3) восходящим способом обнаружено четыре пятна с Rf - 0,05; Rf - 0,62; Rf - 0,92 и Rf - 0,98. Идентификацию проводили в УФ-свете при длине волны 254 нм.
Обнаружение арбутина выполняли с помощью химической реакции с кристалликом сульфата закисного железа, извлечение из чая окрашивается сначала в сиреневый, затем в темно-фиолетовый цвет с образованием осадка. Хроматографически арбутин обнаруживали на пластинках Silufol — УФ 254 в системе растворителей «хлороформ : метанол : вода» (61 : 32 : 7) и «хлороформ : спирт этиловый» (7 : 3). Пятна проявляли обработкой пластинок 10% водно-спиртовым раствором едкого натра и свежеприготовленным диазореактивом. Арбутин идентифицировали в виде ярко-красного пятна на уровне свидетеля арбутина (арбутин).
На пластинках Silufol — УФ 254, хроматографируя восходящим способом, обнаружили салидро-зид в системе растворителей «хлороформ : метанол : вода» (26 : 14 : 3). Пятно салидрозида проявляли обработкой 10% раствором натрия карбоната и далее диазотированным сульфацилом. На хрома-
Сведения об авторах
тограмме проявляется пятно красноватого цвета с ^ = 0,42.
Нами разработаны методики количественной стандартизации сбора. Сбор содержит различные группы соединений. Нами предложены методики стандартизации по содержанию полисахаридов, сумме флавоноидов, глицирризиновой кислоты, салидрозиду спектрофотометричеким методом. Для нормативной документации эти показатели нормируются не менее 5,0 %, 0,7 %, 1,0 %, 1,3 % соответственно.
В результате проведенного качественного анализа в чае «Арура-7» обнаружены дубильные вещества, фенолы, флавоноиды, полисахариды, тритерпеноидные сапонины, индивидуальные вещества — кверцетин, рутин, лютеолин-7-гикозид, глицирризиновая кислота, арбутин, салидрозид. Полученные данные использованы при разработке нормативной документации на чай «Арура-7».
ЛИТЕРАТУРА
1. Биологически активные вещества растительного происхождения / Б.Н. Головкин [и др.].
- М., 2001. -Т. 1. - 350 с.; 2002. - Т. 2. - 764 с.; 2002. - Т. 3. - 216 с.
2. Краснов К.А. Выделение и анализ природных биологически активных веществ / К.А. Краснов, Т.П. Березовская, Н.В. Алексюк. - Томск, 1987. - 184 с.
3. Лекарственные растения Бурятии. - Улан-Удэ, 1974. - 207 с.
4. Лекарственные растения Государственной фармакопеи: фармакогнозия / И.А. Самылина [и др.]. - М. : АНМИ, 2003. - 534 с.
5. Максютина Н.П. Методы выделения и исследования флавоноидных соединений //Фенольные соединения и их биологические функции / Н.П. Максютина, В.И. Литвиненко. - М. : Наука, 1968. - С. 7-26.
Николаева И.Г. - лаборатория экспериментальной фармакологии Института общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ (670047, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, д. 6.; тел.: 8 (3012) 43-34-63
Николаева Галина Григорьевна - ведущий научный сотрудник, д.фарм.н., 670047, г Улан-Удэ, ул. М. Сахьяновой, д. 6, ИОЭБ СО РАН, лаб. мед.-биол. исследований