CC BY
50
УДК 615.9:616.36-085.2
ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ОКСИМЕТИЛУРАЦИЛА В КАЧЕСТВЕ ГЕПАТОЗАЩИТНОГО СРЕДСТВА Мышкин В.А., Бакиров А.Б., Репина Э.Ф., Тимашева Г.В., Хуснутдинова Н.Ю., Смолянкин Д.А.
ФБУН "Уфимский НИИ медицины труда и экологии человека", Уфа, Россия
Проанализированы результаты по экспериментальному (доклиническому) изучению гепатозащитной активности оксиметилурацила (5-гидрокси-6-метилурацила) в сравнении с референтным гепатопротектором силимарином на экспериментальных моделях поражения печени тетрахлорметаном, дихлорэтаном, ПХБ-содержащим препаратом «Совтол-1», 2.4-дихлорэтаном, трихлорметафосом, а также этанолом, парацетамолом, циклофосфаном и комплексом противотуберкулезных препаратов. Установлено, что оксиметилурацил обладает выраженным гепатопротекторным действием сопоставимым по эффективности с силимарином, и превосходящим его на моделях повреждения печени - дихлорэтаном, трихлорметафосом, этанолом и парацетамолом.
Ключевые слова: оксиметилурацил, гепатопротектор, экспериментальные модели токсического поражения печени.
STUDY THE EFFECTIVENESS OF OXYMETHYLURACIL AS A MEANS
HEPATOPROTECTIVE Myshkin V.A., Bakirov A.B., Repina E.F., Timasheva G.V., Khusnutdinova N.Y., Smolyankin D.A.
Ufa Research Institute of Occupational Medicine and Human Ecology, Ufa, Russia
The results of the experimental (preclinical) study of hepatoprotective activity oksimetiluratcila (5-hydroxy-6-methyluracil) compared with the reference hepatoprotector silymarin on experimental models of liver injury carbon tetrachloride, dichloroethane, PCB-containing preparations "Sovtol-1", 2.4-dichloroethane, trihlormetafosom and ethanol, paracetamol, cyclophosphamide and complex anti-TB drugs. It was established that OXYMETHYLURACIL has a strong hepatoprotective action comparable to the effectiveness of silymarin, and his superior models of liver damage - dichloroethane, trihlormetafosom, ethanol and paracetamol.
Key words: OXYMETHYLURACIL, hepatoprotector, experimental models of liver toxicity.
С момента введения в медицинскую практику первых пиримидинов предпринимались попытки использовать их в качестве гепатопротекторов. Производное пиримидина -оксиметилурацил привлекло наше внимание своими выраженными антиоксидантными свойствами, что было показано В.А. Мышкиным в специальных исследованиях [1, 6].
В ходе исследований, проведенных ранее, было установлено, что оксиметилурацил (5-гидрокси-6-метилурацил) стимулирует иммунитет, регенераторные процессы, оказывает
анаболический и антикатаболический эффекты, активирует биоэнергетические процессы, некоторые ферменты антиоксидантной защиты, подавляет альтерацию и экссудацию, регулирует процессы перекисного окисления липидов, стабилизирует мембраны клеток и органелл, усиливает активность АТФ-аз, является «ловушкой радикалов», защищает биоструктуры от активных форм кислорода и токсичных перекисных соединений. Препарат обладает антиоксидантной активностью, стимулирует неспецифическую резистентность организма, оказывает ноотропное, кардиопротекторное, стресспротекторное, деметгемоглобинизирующее действие [2-10]. Установлен был также лечебно-профилактический эффект оксиметилурацила при тяжелых острых отравлениях химическими веществами, обладающими нейротоксическим и гематотоксическим действием. Выявлен положительный эффект от применения препарата в качестве средства коррекции побочного действия лекарственных средств - холинолитиков, реактиваторов холинэстеразы, строфантина, дигоксина, коразола и других [3, 9]. Препарат был синтезирован д.х.н. В.П. Кривоноговым в Институте органической химии Уфимского научного центра РАН (ИОХ УНЦ РАН). Приказом Министра здравоохранения и медицинской промышленности РФ № 302 от 29 июля 1996 года препарат оксиметилурацил разрешен в медицинской практике и к промышленному производству [11].
Цель: изучение гепатопротекторных свойств оксиметилурацила.
Материал и методы исследования. Повреждение печени моделировали путем введения белым крысам-самцам гепатотоксикантов в следующих дозах:
• тетрахлорметан: 2 мл на кг массы тела через день в течение 30 дней;
• дихлорэтан: 0,01 DL50 в течение 3 недель в 10% растворе оливкового масла;
• совтол: 0,25 мл на 100 г массы тела дважды в неделю в течение 28 суток + раствор этанола для питья (Патент РФ № 2197018 от 16.02.2000);
• 2,4-дихлорфенол: 400 мг на кг массы тела (0,8 DL50);
• этанол: 7 мл на кг массы тела ежедневно в течение 7 дней;
• трихлорметафос: 47 мг на кг (0,2 DL50) ежедневно в течение 28 суток;
• парацетамол (ацетаминофин): 2500 мг/кг внутрижелудочно в течение двух дней;
• циклофосфан: 250 мг на кг массы (производство ОАО «Биохимик» г. Саранск);
• противотуберкулезные препараты: изониазид - 50 мг/кг подкожно, рифампицин - 250 мг/кг внутрижелудочно + пиразинамид - 45 мг/кг внутрижелудочно, длительность применения - 14 дней.
В комплекс биохимических исследований входило определение общего белка, холестерина, триглицеридов, билирубина, маркеров цитолиза - по активности ферментов уроканиназы, аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы и маркеров холестаза - по активности щелочной фосфатазы. Биохимическое исследование сыворотки крови выполняли на биохимическом анализаторе.
Препараты коррекции применяли по следующей схеме: оксиметилурацил и препарат сравнения (силимарин) внутрижелудочно в дозах 50 мг/кг массы тела животных за 1,5 часа до введения токсиканта.
Оценку гепатозащитного эффекта оксиметилурацила и препарата сравнения (силимарина) проводили путем определения индекса эффективности гепатозащитного действия исследуемых препаратов - ИЭ (в %) - долевой разницы показателей тяжести
поражения печени в контрольной группе и группах животных, получавших исследуемые препараты. ИЭ гепатопротекторного действия определяли по формуле:
ИЭ = (Ик - Ио)/Икх100,
где Ик и Ио - средние значения показателей в контрольной и опытной группах соответственно. ИЭ вычисляли раздельно по данным функциональных показателей (билирубин общий, общий белок, холестерин и триглицериды) и по показателям ферментативных маркеров повреждения печени (УрН, АлАТ, АсАТ, ЩФ).
Положительное значение ИЭ (плюс-эффект) - указывает на снижение показателя пораженности. Отрицательное значение ИЭ (минус-эффект) - свидетельствует об увеличении показателя пораженности. При оценке результатов использованы параметрические и непараметрические методы статистики.
Обсуждение результатов.
Проведенные исследования показали, что оксиметилурацил действительно проявляет себя как гепатопротектор на моделях поражения печени как промышленными токсикантами, этанолом (модели 1, 2, 3, 4, 5, 6), так и некоторыми лекарственными препаратами (модели 7, 8) (таблица 1). Это проявляется достоверным снижением уровня маркерных ферментов цитолиза и холестаза, а также нормализацией уровня билирубина, холестерина, триглицеридов. Повышение уровня общего белка в сыворотке крови свидетельствует о сохранении белоксинтезирующей функции печени при применении оксиметилурацила. Силимарин оказался менее эффективным в этом отношении на моделях поражения печени тетрахлорметаном, Совтолом-1, трихлорметафосом, а также парацетамолом, что подтверждается соответствующими показателями ИЭ. Оксиметилурацил не проявил гепатозащитного эффекта на модели поражения печени циклофосфаном, усугубляя его повреждающий эффект (модель 9).
Таблица 1.
Индексы эффективности (ИЭ) гепатопротекторного действия оксиметилурацила (I) и силимарина (II), рассчитанные по ферментативным и функциональным маркерам
повреждения печени гепатотоксическими веществами
№ Гепатотоксиканты, ИЭ (в %)
п/п модели ферментативные маркеры функциональные маркеры
I II I II
1 Тетрахлорметан +29,9 +36,2 +33,2 +27,6
2 2-дихлорэтан +38,9 - +41,0 -
3 Совтол-1 +15,5 +11,7 +24,4 +5,8
4 2,4-дихлорфенол +16,2 - +17,8 -
5 Этанол +28,5 +15,5 +14,4 +15,7
6 Трихлорметафос +33,3 +26,2 +35,9 +9,8
7 Парацетамол +32,5 +28,3 +18,5 +16,2
8 Комплекс противотуберкулезных препаратов +17,3 +15,1 +9,6 +10,6
9 Циклофосфан -4,9 +18,0 -1,1 +6,2
Сопоставление ИЭ гепатопротекторного действия оксиметилурацила и силимарина (эталонный гепатопротектор) позволяет заключить, что оксиметилурацил не уступает силимарину в способности нормализовать биохимические показатели сыворотки крови крыс, а, следовательно, и функционально-метаболическое состояние печени при ее повреждении модельными гепатотоксикантами.
По влиянию на величину показателей, отражающих функциональное состояние печени (общий билирубин, общий белок, холестерин, триглицериды) максимальный эффект был достигнут при использовании комплекса «оксиметилурацил + сукцинат», когда индекс эффективности составил +33,13%, менее значительные результаты получены на фоне применения оксиметилурацила (+19,9%) и натрия сукцината (+5,7%). На модели поражения печени «совтол + этанол» максимальный эффект был достигнут на фоне применения перорального комплекса: «оксиметилурацил + сукцинат» и достигал только +29,3%. Эффекты оксиметилурацила и сукцината - ниже и составили +12,6% и +3,9% соответственно (табл. 2).
Таблица 2.
Индексы эффективности гепатопротекторного действия (в %): комплекса «оксиметилурацил + сукцинат» (I), оксиметилурацила (II) и натрия сукцината (III), рассчитанные по функциональным маркерам [7, 12] повреждения печени ПХБ -
содержащим препаратом «Совтол-1» и «Совтол 1 + этанол»
Гепатотоксиканты ИЭ (в %)
I II III
Совтол-1 +33,13 +19,90 +5,70
Совтол-1 + этанол +29,30 +12,60 +3,90
Таблица 3.
Эмпирическая целесообразность комбинации оксиметилурацила и гепатопротекторов при поражении печени
Гепатопротекторы
Препараты животного происхождения
Экстракт листьев артишока
Тыквеол
Лив 52
Эссенциальные фосфолипиды
Липоевая кислота
Урсофальк
Гепа-мерц
Лактулоза
Гептрал
Метадоксил
Гепабене
Оксиметилурацил
+
+
+
+
+
+
Примечание: + комбинация возможна
± целесообразность комбинации сомнительна - комбинация нецелесообразна
Совместное применение оксиметилурацила с известными гепатопротекторами с целью повышения их эффективности малоисследовано, хотя, с нашей точки зрения, весьма перспективно, поскольку оксиметилурацил повышает эффективность многих известных лекарственных средств и одновременно снижает их токсичность, побочное действие, повышает переносимость [3, 9]. В заключение приводим таблицу 3, в которой систематизированы наши представления по этому вопросу.
Выводы:
1. Оксиметилурацил проявляет выраженное гепатозащитное действие на моделях поражения печени тетрахлорметаном, дихлорэтаном, этанолом, трихлорметафосом, парацетамолом и комплексом противотуберкулезных препаратов.
2. Гепатозащитное действие оксиметилурацила на моделях поражения печени тетрахлорметаном, дихлорэтаном, этанолом, трихлорметафосом, парацетамолом, комплексом противотуберкулезных препаратов, а также ПХБ-содержащим препаратом «Совтол-1» проявляется в предотвращении гиперферментемии, нормализации уровня билирубина, холестерина, общего белка и триглицеридов.
3. Оксиметилурацил не уступает по выраженности гепатозащитного действия эталонному гепатопротектору силимарину на моделях поражении печени тетрахлорметаном, Совтолом-1, этанолом, трихлорметафосом, а также парацетамолом и комплексом противотуберкулезных препаратов.
4. Комплексное соединение: «оксиметилурацил + натрия сукцинат» по выраженности гепатозащитного действия превосходит оксиметилурацил и натрия сукцинат на моделях поражения печени ПХБ-содержащим препаратом «Совтол-1» и при сочетанном ее поражении: Совтол-1 + этанол.
5. Оксиметилурацил не проявляет гепатозащитного эффекта на модели поражения печени циклофосфаном, усугубляя его повреждающий эффект.
Список литературы:
1. Мирсаев Т. Р. Гепатопротекторная активность оксиметилурацила : дис. ...канд. мед наук. - Уфа, 2002. - 178 с.
2. Мышкин В. А. Коррекция алкогольных повреждений печени оксиметилурацилом / В. А. Мышкин, Е. С. Волкова // Здравоохранение Башкортостана. - 1997. - № 1. - С. 18 - 20.
3. Мышкин В. А. Оксиметилурацил. Очерки экспериментальной фармакологии / В. А. Мышкин, А. Б. Бакиров. - Уфа, 2001. - 218 с.
4. Мышкин В. А. Экспериментальная коррекция химических поражений печени производными пиримидина. Эффективность и механизм действия / В. А. Мышкин, А. Б. Бакиров. - Уфа, 2002. - 150 с.
5. Патент РФ № 2197018. Способ моделирования цирроза печени / В. А. Мышкин, Р. Б. Ибатуллина Р.Б. и др. - 2003.
6. Мышкин В. А. Поражение печени химическими веществами. Функционально-метаболические нарушения, фармакологическая коррекция / В. А. Мышкин, А. Б. Бакиров, Р. Б. Ибатуллина. - Уфа: Гилем, 2007. - 177 с.
7. Мышкин В.А. Гепатозащитное действие оксиметилурацила, сукцината и мексидола, применяемых раздельно и в комбинации / В.А. Мышкин, Д.А. Еникеев, А.И. Савлуков, Р.Б. Ибатуллина, ДВ Срубилин // Медицинский вестник Башкортостана. - 2008. - № 2 (Приложение). - С. 51-53.
8. Мышкин В. А. Окислительный стресс и повреждение печени при химических воздействиях / В. А. Мышкин, А. Б. Бакиров. - Уфа, 2010. - 176 с.
9. Мышкин В. А. Коррекция перекисного окисления липидов при экспериментальных интоксикациях различными химическими веществами / В. А. Мышкин. - Уфа-Челябинск, 2010. - 393 с.
10. Мышкин В. А. Коррекция перекисного окисления липидов при повреждающих воздействиях (гепатотропные яды, гипоксия, стресс) / В. А. Мышкин, А. Б. Бакиров, Э. Ф. Репина. - Уфа, 2012. - 161 с.
11. Приказ Министерства здравоохранения и медицинской промышленности РФ от 29 июля 1996 г. № 302.
12. Черешнев В.А. Гепатопротекция при химических воздействиях / В.А. Черешнев, В.А. Мышкин, Д.А. Еникеев. - Москва-Уфа, 2012. - 202 с.
