Обмен опытом
Изучение антимикробной активности угольсодержащих зубных паст
Циркунова Ж.Ф., Мальковец О.Г., Казакова Ю.М., Богомолова А.А.
Белорусский государственный медицинский университет, Минск
Tsirkunova Zh.F., Malkovets O.G., Kazakova Yu.M., Bogomolova A.A.
Belarusian State Medical University, Minsk
Studying the antimicrobial activity of carbon-containing toothpases Резюме. Зубная паста является одним из наиболее важным средством индивидуальной гигиены полости рта, поэтому врачу-стоматологу необходимо тщательно подбирать ее для каждой конкретной группы пациентов. Пасты, содержащие антисептики, нацелены на пациентов с патологиями периодонта, в развитии которых основную роль играет микробный фактор. Поэтому есть необходимость изучения антимикробной активности зубных паст различного состава.
В статье приводится сравнительная характеристика антимикробной активности угольсодержащих зубных паст, представленных в свободной продаже, в отношении типовых тест-культур микроорганизмов (S. aureus ATCC 6538, Ps. aeruginosa ATCC 15442, C. albicans ATCC 10231).
Ключевые слова: антимикробная активность, угольсодержащие зубные пасты.
Современная стоматология. - 2023. - №1. - С. 47-50.
Summary. Toothpaste is one of the most important products for individual oral hygiene so dentist should carefully select it for each exact group of patients. Toothpastes containing antiseptics are aimed at patients with periodontal pathology. The microbial factor plays a major role in the development of periodontal diseases. That's why it is necessary to study aninicrobal activity of toothpastes of different composition.
The article provides a comparative description of the antimicrobial activity of commercially available charcoal-containing toothpastes in relation to typical microbial test cultures (S. aureus ATCC 6538, Ps. aeruginosa ATCC 15442, C. albicans ATCC 10231).
Keywords: antimicrobial activity, char Sovremennaya stomatologiya. -Одним из требований к зубным пастам является то, что они не должны предоставлять условий для роста и размножения микроорганизмов, которые способствуют деминерализации эмали продуктами своей жизнедеятельности и приводят к развитию кариеса и его осложнений [1]. Для этого в лечебнопрофилактические зубные пасты добавляют различные антисептические вещества (биосол, триклозан, хлор-гексидин, эвгенол, экстракты можжевельника, мяты перечной, ананаса (содержит фермент бромелаин) и др.), а также вещества, оказывающие на микроорганизмы статическое действие (например, ксилит, стевия, соединения фтора и др.). Согласно данным Fortune Business Insights, наиболее востребованными зубными пастами на рынке являются отбеливающие (34,54% от всех зубных паст), а одним из основных трендов на рынке является экологичность [2]. Все эти требования учтены в угольсодержащих зубных пастах.
oal-containing toothpastes.
2023. - N1. - P. 47-50.
Исследования, проведенные на 2-й кафедре терапевтической стоматологии БГМУ, показали, что угольсодержащие зубные пасты имеют хорошие потребительские свойства: они обладают хорошими очищающими свойствами, средней абразивностью и не раздражают слизистую оболочку полости рта [3], однако их антимикробная активность изучена недостаточно.
Однако помимо полезных свойств, на выбор потребителями зубной пасты влияет и цвет: согласно данным С.В. Сысоевой, 60% успеха рекламы зависит именно от грамотно подобранного для него сочетания цветов. [4]
Цель исследования - изучить важность цвета как фактора выбора и исследовать антимикробную активность угольсодержащих зубных паст в отношении типовых тест-культур микроорганизмов.
Объекты и методы
Социологический опрос проводился среди студентов ВУЗов различ
ных направлений (БГМУ, БГУ, МФТИ, СПбГУ и другие) с использованием приложения Google Forms. В опросе приняли участие 300 респондентов. Обработка полученных данных проводилась с использованием Microsoft Excel.
В работе были использованы 6 угольсодержащих зубных паст, представленных в свободной продаже: черная отбеливающая зубная паста R.O.C.S.® Blackstar (R.O.C.S.); зубная паста SPLAT® Blackwood® древесный уголь (SPLAT Global); зубная паста Colgate® Charcoal Clean Bamboo Charcoal & Mint (Colgate-Palmolive); зубная паста «Black clean отбеливание + укрепление эмали с микрочастицами активированного угля и минералами Мертвого моря» (Витэкс); зубная паста «32 Жемчужины natural Уголь и прополис» (MODUM); зубная паста «Biomed® White complex с углем» (SPLAT Global).
Пасты использовались в виде суспензий с массовой долей зубной пасты 16,7%. Объектами исследования являлись типовые культуры
№1 • 2023
СОВРЕМЕННАЯ СТОМАТОЛОГИЯ
к
Обмен опытом
S. aureus ATCC 6538, Ps. aeruginosa ATCC 15442, C. albicans ATCC 10231.
Чувствительность микроорганизмов к исследуемым средствам оценивали путем диффузии суспензий зубных паст в агар и суспензионным количественным методом. В работе были использованы следующие питательные среды: триптон-соевый агар (ТСА) (для бактерий) и агар Сабуро (для грибов).
Суспензии микроорганизмов готовили с использованием 24-часовых культур, суспендируя их в стерильном 0,85% растворе NaCl до соответствия стандарту мутности 0,5 McFarland (1х106 - 5х106 клеток/ мл). Полученными суспензиями «газоном» засевали питательные среды. Суспензии зубных паст в количестве 100 мкл вносились в лунки, проделанные в агаре (рис. 1А). Чашки Петри инкубировали в термостате при температуре 35±2 °С в течение 24 ч. При учете результатов определения чувствительности типовых культур к зубным пастам диффузионным методом ориентировались на зоны полного ингибирования роста микроорганизмов, определяемую невооруженным глазом (рис. 1Б). Измерение зон проводили с использованием линейки и с учетом диаметра лунок.
После определения антимикробной активности зубных паст методом диффузии в агар была выбрана одна наиболее эффективная в условиях опыта паста для каждой культуры и изучена ее антимикробная активность по фактору редукции (FR), который определяется по разнице количества КОЕ/мл в опыте по сравнению с контролем. Для этого к суспензии зубной пасты (массовая доля зубной пасты 16,7%) добавляли раствор типовой культуры (концентрация м/о равна 109) в отношении 10 к 1 и перемешивали в течение 1 и 3 минут. После перемешивания полученную суспензию серийно десятикратно разводили до разведения 10-7. Затем на питательные
рИСУн0к|1
Суспензии зубных паст, внесенные в лунки (А) и зоны ингибирования
роста тест-культур микроорганизмов (Б)
ОабЛОЦмИ Антимикробные вещества в составе исследуемых зубных паст
Зубная паста
Вещества с антимикробной активностью R.O.C.S.® Blackstar SPLAT® Blackwood Colgate® Charcoal Clean Black clean (Витэкс) 32 Жемчужины natural Уголь и прополис Biomed® White complex с углем
Ксилит Бромелаин О-cymen- 5-ol Стевия Стевия Биосол Экстракт можжевельника Эвгенол - Экстракт прополиса Масло мяты колосистой Ксилит Ксилит Эфирное масло лемонграсса Экстракт ананаса Масло кедра Экстракт листьев березы Масло подорожника
Антимикробная активность угольсодержащих зубных паст
РИСУн0к|2
в отношении типовых культур микроорганизмов
е 1 - R.O.C.S.® BLACKSTAR
2 - SPLAT® Blackwood
■ 3 - Colgate® Charcoal Clean Bamboo Charcoal & Mint
4 - BLACK CLEAN (Витэкс)
■ 5 - 32 ЖЕМЧУЖИНЫ NATURAL Уголь и прополис
среды (ТСА и среду Сабуро) на чашки Петри высевали микроорганизмы из 100 мкл суспензии. Чашки инкубировали в термостате
при температуре 35±2 °С в течение 24 ч. После инкубирования производился визуальный подсчет КОЕ на чашке для двух последовательных
СОВРЕМЕННАЯ СТОМАТОЛОГИЯ
№1 • 2023
Обмен опытом
р и СУн рк|з
Зоны ингибирования роста Ps. aeruginosa ATCC 15442
под действием исследуемых зубных паст не образовались
Р и СУн рк|4
Зоны ингибирования роста S. aureus ATCC 6538, образовавшиеся
под действием исследуемых зубных паст
Р и СУн рк|5
Зоны ингибирования роста C. albicans ATCC 10231, образовавшиеся
под действием исследуемых зубных паст
разведений для каждой культуры и длительности действия зубной пасты.
Затем рассчитывался КОЕ/мл с использованием формулы
КОЕ/мл =
где n - КОЕ на чашке; N - показатель разведения; V - посевная доза, мл.
Фактор редукции для каждой пары разведений культуры определяли с использованием формулы
FR — 1 о g ( К О Е / м л ) к — 1 од ( К О Е / м л) о ,
где к - контроль; о - опыт.
Результаты и обсуждение
По результатам социологического опроса было установлено, что при
выборе зубной пасты исключительно на основании цвета упаковки наиболее популярным цветом выбора является белый (47%), наименее популярным - черный (6%). Белый цвет респонденты считают минималистичным, спокойным, свежим, чистым. Черный цвет респонденты описывают как серьезный, солидный, привлекательный, минималистичный. При выборе цвета самой зубной пасты 80% респондентов между белой и черной отдадут предпочтение белой пасте.
Более того, нами было выяснено, что цвет зубной пасты в большей мере влияет на настроение, чем на длительность чистки зубов.
Перед началом лабораторных исследований мы изучили составы исследуемых зубных паст с целью поиска выявления в них антимикробных веществ. Установлено, что во всех зубных пастах, за исключением зубной пасты Black clean от Витэкс, содержатся различные антимикробные вещества, представленные в таблице 1.
Из данных, представленных на рисунке 2, видно, что все изученные пасты оказались неэффективными в отношении Ps. aeruginosa (зона ингибирования роста отсутствует, рис. 3). Максимальная зона ингибирования роста S. aureus образовалась под действием зубной пасты Colgate® Charcoal Clean (22 мм, рис. 4), а C. albicans - под действием зубной пасты SPLAT® Blackwood (17 мм, рис. 5).
Далее в количественном суспензионном тесте было изучено влияние времени воздействия наиболее эффективных зубных (Colgate® Charcoal Clean - для S. aureus и SPLAT® Blackwood - для C. albicans) на фактор редукции микроорганизмов.
Показано, что в условиях опыта фактор редукции S. aureus при обработке суспензией зубной пасты Colgate® Charcoal Clean Bamboo Charcoal & Mint в течение 1 минуты составил 1,73 и 1,92 для двух последовательных разведений, в течение 3 минут - 4,02 и 4,1 (рис. 6).
№1 • 2023
СОВРЕМЕННАЯ СТОМАТОЛОГИЯ
Обмен опытом
рИ С Ун Ок|б
КОЕ на чашке S. aureus, образовавшиеся под действием зубной пасты
Colgate® Charcoal Clean Bamboo Charcoal & Mint в течение 1 (А) и 3 (Б) минут
рИ С Ун Ок|7
КОЕ на чашке C. albicans, образовавшихся под действием зубной
пасты SPLAT® Blackwood в течение 1 (А) и 3 (Б) минут
Фактор редукции C. albicans при обработке суспензией зубной пасты SPLAT® Blackwood в течение 1 минуты составил 2,34 и 2,1 для двух последовательных разведений, в течение 3 минут - 4,56 и 5,04 (рис. 7).
Выводы:
1. По статистике, 6% респондентов предпочтут зубную пасту в черной упаковке; 20% выберут зубную пасту черного цвета.
2. Исследованные угольсодер-жащие зубные пасты, за исключением зубной пасты Black clean (Ви-тэкс), обладают антимикробным активностью разной степени выраженности в отношении S. aureus (грамположительная бактерия) и C. albicans (гриб). Исследованные зубные пасты не обладают антимикробной активностью в отношении Ps. aeruginosa (грамотрицательная бактерия).
3. Максимальная зона задержки роста у S. aureus отмечалась под действием зубной пасты Colgate® Charcoal Clean Bamboo Charcoal & Mint, у C. albicans - под действием зубной пасты SPLAT® Blackwood® древесный уголь.
4. Фактор редукции при обработке S. aureus зубной пастой Colgate® Charcoal Clean Bamboo Charcoal & Mint в течение 1 минуты составил 1,92, при обработке в течение 3 минут - 4,10. Фактор редукции при обработке C. albicans зубной пастой SPLAT® Blackwood® древесный уголь в течение 1 минуты составил 2,34, при обработке в течение 3 минут - 5,04.
5. Показано, что для обеспечения антимикробного эффекта необходимо чистить зубы данными зубными пастами не менее 3 минут.
6. Проведенное исследование позволяет врачам-стоматологам
рекомендовать исследованные угольсодержащие зубные пасты пациентам с патологиями периодонта для курсового применения. Постоянное применение исследованных зубных паст не рекомендуется, поскольку антисептики в их составе воздействуют не только на периодонтопатогенную микрофлору, но также и на нормальную микрофлору, приводя к дисбактериозу полости рта.
ЛИТЕРАТУРА
1. ГОСТ 7983-99 Пасты зубные. Общие технические условия (с Поправкой) [Электронный ресурс] / АО «Кодекс» - Электронный фонд правовых и нормативно-технических документов. - Электрон. дан. - Режим доступа: https://docs.cntd.ru/document/1200006990. (дата обращения: 31.01.2022).
2. Toothpaste Market Size, Share and COVID-19 Impact Analysis, By Type (Teeth Whitening, Herbal, Sensitive Teeth and Others), End-Users (Adults and Children) and Distribution Channel (Supermarket/Hypermarket, Connective Stores, Pharmaceutical and. Drug Stores, and Online), and Regional Forecast, 2020-2027 [Электронный ресурс] / Fortune Business Insights. -Электрон. дан. - Режим доступа: https:// www.fortunebusinessinsights.com/toothpaste-market-104484. (дата обращения: 01.02.2022).
3. Оценка потребительских свойств черной отбеливающей зубной пасты R.O.C.S Blackstar [Электронный ресурс] / Е.А. Мирная, А.Д. Ширшова, М.М. Галыня, Н.В. Яроцкая // Актуальные вопросы медицинской профилактики, диагностики и лечения стоматологических заболеваний: сб. ст. междунар. науч.-практ конф. / Под общ. ред. Т.Н. Манак, Л.Г. Борисенко, Л.Н. Полянской. - Минск, 2019. - С.119-131. - Режим доступа: http://rep.bsmu.by/handle/ BSMU/23955 (дата обращения: 28.01.2022).
4. Сысоева, С.В. Использование цвета в рекламе [Электронный ресурс] / Научная электронная библиотека «КиберЛенинка». -2011. - Режим доступа: https://cyberleninka. ru/article/n/ispolzovanie-tsveta-v-reklame. (дата обращения: 24.12.2022).
Поступила 20.04.2022 г.
Принята в печать 23.03.2023 г.
Адрес для корреспонденции Белорусский государственный медицинский университет
г. Минск, пр. Дзержинского, 83 220116, Республика Беларусь Казакова Юлия Михайловна, e-mail: [email protected]
50|
СОВРЕМЕННАЯ СТОМАТОЛОГИЯ
№1 • 2023