Изучение активности суммы тритерпеновых кислот из плодов облепихи и клюквы на модели хронического воспаления Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

ных фармакологических воздействий на клинических моделях. Математическая формализация эффектов иммунокоррекции в виде типовых формул мишеней действия на лимфоидную систему позволяет установить конкретные лабораторные показания для выбора ее отдельных вариантов.

Литература

1. Земсков А.М., Земсков В.М., Караулов А.В. Клиническая иммунология. М.: ГЭОТАР-Медиа, 1999. 603 с.

2. Земсков А.М., Земсков В.М., Караулов А.В. Клиническая иммунология. Учебник для вузов. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. 426 с.

3. Земсков А.М., Земсков В.М., Караулов А.В. Фенотипическая модификация иммунологической реактивности. М.: Триада - Х, 2010. 332 с.

4. Земсков А.М., Земсков В.М., Черешнев В.А. Энциклопедия иммунологии. В 5 томах. М.: ТриадаХ, 2013. 1962 с.

5. Земсков А.М., Земсков В.М., Золоедов В.И., Земскова В.А. Неортодоксальная иммунология. М.: Триада-Х, 2013. 221 с.

6. Руководство по клинической иммунологии, аллергологии, иммуногенетике и иммунофармакологии (для врачейобщеклинической

практики) / Под общей редакцией В.И. Покровского. т. 1 и 2. Тверь: ООО «Издательство Триада», 2005. 1070 с.

References

1. Zemskov AM, Zemskov VM, Karaulov AV. Kli-nicheskaya immunologiya. Moscow: GEOTAR-Media; 1999. Russian.

2. Zemskov AM, Zemskov VM, Karaulov AV. Kli-nicheskaya immunologiya. Uchebnik dlya vuzov. Moscow: GEOTAR-Media; 2008. Russian.

3. Zemskov AM, Zemskov VM, Karaulov AV. Fe-notipicheskaya modifikatsiya immunologicheskoy reak-tivnosti. Moscow: Triada - Kh; 2010. Russian.

4. Zemskov AM, Zemskov VM, Chereshnev VA. Entsiklopediya immunologii. V 5 tomakh. Moscow: Tri-ada-Kh; 2013. Russian.

5. Zemskov AM, Zemskov VM, Zoloedov VI, Zemskova VA. Neortodoksal'naya immunologiya. Moscow: Triada-Kh; 2013. Russian.

6. Rukovodstvo po klinicheskoy immunologii, allergologii, immunogenetike i immunofarmakologii (dlya vrachey obshcheklinicheskoy praktiki) /Pod obshchey redaktsiey V.I. Pokrovskogo. t. 1 i 2. Tver': OOO «Izdatel'stvo Triada»; 2005. Russian.

УДК: 616.72-002.772 DOI: 10.12737/11842

ИЗУЧЕНИЕ АКТИВНОСТИ СУММЫ ТРИТЕРПЕНОВЫХ КИСЛОТ ИЗ ПЛОДОВ ОБЛЕПИХИ И КЛЮКВЫ НА

МОДЕЛИ ХРОНИЧЕСКОГО ВОСПАЛЕНИЯ

Н.О. ГОРБАТЮК, М.В. ЧЕРНИКОВ, А.Ю. ТЕРЕХОВ

Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский

университет» Министерства здравоохранения России, проспект Калинина, 11, Пятигорск, Ставропольский край, Россия, 357532, e-mail: gorn [email protected]

Аннотация. Обязательным этапом исследования новых соединений с выраженной фармакологической активностью является изучение возможных механизмов действия. Целью данного исследования явилось изучение противосполительной активности суммы тритерпеновых кислот при их введении по лечебной схеме в условиях адъювант-индуцированного артрита. Исследования выполнены на крысах самцах линии Wistar весом 210-230 г. Модель артрита воспроизводили путем субплантарного введения в правую заднюю лапу крыс 0,1 мл полного адъюванта Фрейнда (Sigma, США). Исследуемые объекты (тритерпеноиды облепихи и тритерпеноиды клюквы) вводили перорально раз в сутки в виде водной суспензии в дозе 100 мг/кг по лечебной схеме (в течение 12 дней, начиная с 14 дня после инъекции адъюванта). В качестве препарата сравнения использовали диклофенак в дозе 8 мг/кг. Интенсивность воспалительной реакции регистрировали онкометрически. Установлено, что введение дик-лофинака сопровождалось уменьшаением интенсивность первичной и вторичной воспалительной реакции, три-терпеноиды клюквы уменьшали первичную реакцию и оказывали слабовыраженное влияние на формирование вторичного воспаления. Применение тритерпеноидов облепихи в данных экспериментальных условиях не оказало достоверно значимого влияния на интенсивность воспалительного процесса.

Ключевые слова: тритерпеновые кислоты, урсоловая кислота, олеаноловая кислота, клюква, облепиха, адъювант-индуцированный артрит, противовоспалительное действие.

THE STUDY OF ACTIVITY OF THE SUM OF TRITERPENE ACIDS FROM FRUITS OF SEA BUCKTHORN AND CRANBERRY ON THE MODEL OF CHRONIC INFLAMMATION

N.O. GORBATYUK, M.V. TCHERNIKOV, A.YU. TEREKHOV

Pyatigorsk Medical-Pharmaceutical Institute, the branch of the Volgograd State Medical University, Kalinin Prospekt, 11, Pyatigorsk, Stavropol, Russia, 357532, e-mail: gorn [email protected]

Abstract. Mandatory stage of the study of new compounds with strong pharmacological activity is the study of possible mechanisms of action. The purpose of this study was to investigate anti-inflammatory activity the amount of triterpene acids when they are used in the medical scheme in terms of adjuvant-induced arthritis. The studies were performed on rats male Wistar weighing 210-230 gr. Model of arthritis was reproduced by subplantar injection of 0.1 ml Freind'scomplete adjuvant (Sigma, USA) into the right hind paw of rats. The researched objects (the triterpenoids buckthorn and cranberry) were administered orally once a day in the form of an aqueous suspension at a dose of 100 mg/kg of the medical scheme (for 12 days, starting 14 days after adjuvant injection). The diclofenac at a dose of 8 mg/kg was used as the comparison drug. The intensity of the inflammatory response was recorded by ecometrics data. The authors found that the introduction of diclofenac was accompanied by a decrease in the intensity of primary and secondary inflammatory response. Triterpenoids cranberry reduced the primary reaction and had a slight influence on the formation of secondary inflammation. The use of triterpenoids buckthorn in these experimental conditions had no reliably significant effect on the intensity of the inflammatory process.

Key words: triterpene acids, ursolic acid, oleanolic acid, cranberry, sea buckthorn, adjuvant-induced arthritis, anti-inflammatory effect.

Введение. Ряд исследований последних лет показывают, что тяжесть течения атеросклероза в определенной степени определяется не только совокупностью дислипидемических сдвигов, но и воспалительными нарушениями в интиме сосудов [2]. Соответственно, в реализации противосклеротического действия большего успеха могут достигнуть вещества, сочетающие как гиполипидемическую, так и противовоспалительную активность. В связи с этим одним из этапов по изучению активности гиполипи-демических и антисклеротических препаратов является оценка противовоспалительной активности на моделях воспаления, воспроизводящих различные варианты воспалительных процессов [3].

В ранее выполненных нами исследованиях была установлена противовоспалительная активность суммы тритерпеноидов облепихи (ТО) и суммы тритерпеноидов клюквы (ТК) на модели острого воспаления, проявляющаяся эффективным сдерживанием каррагенинового отека [1].

Цель исследования - изучение влияния суммы тритерпеновых кислот на течение хронического воспаления.

Материалы и методы исследования. Исследования выполнены на крысах самцах линии Wistar весом 210-230 г. Животные были распределены в следующие группы (по 6 в каждой): интактные животные, контрольные (нелеченые) животные, животные с лечебной схемой введения ТО, животные с лечебной схемой введения ТК, животные с лечебной схемой введения препарата сравнения (диклофенак 8 мг/кг). Препарат диклофенак выбран для сравнения как наиболее популярное противовоспалительное средство, широко применяемое при хронических воспа-

лительных заболеваниях [4]. Воспаление воспроизводили путем субплантарного введения в правую заднюю лапу крыс 0,1 мл полного адъюванта Фрейнда (Sigma, США).

Исследуемые объекты (ТО и ТК) представляют собой аморфные порошки - концентраты тритерпе-новых кислот, полученные из шрота плодов облепихи и из шрота плодов клюквы соответственно; и содержат сумму урсоловой и олеаноловой кислот в количестве не менее 75%. Обе субстанции вводили перорально раз в сутки в виде водной суспензии в дозе 100 мг/кг по лечебной схеме (в течение 12 дней, начиная с 14 дня после введения адъюванта). Интенсивность воспалительной реакции регистрировали онкометрически. Измерение объема правой и левой лапки производили перед инъекцией адъюванта и на 25 сутки. Количество лейкоцитов в крови и лейкоцитарную формулу определяли на ветеринарном гематологическом анализаторе BS2800vet (Mindray). Для гематологических исследований кровь отбирали из подъязычной вены.

Статистическая обработка проводилась с использованием t-критерия Стьюдента и U-критерия Манна-Уитни с предварительным анализом выборки на нормальность распределения. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимали равным 0,05.

Результаты и их обсуждение. После введения адъюванта наблюдалось развитие гиперемии и отека задней правой конечности, изменение походки, эффект «оберегания» при движении.

При исследовании лечебного действия ТО и ТК на 25 сутки в группе контрольных животных отмечали увеличение объема правой лапки на 114% и левой

на 60%. Ведение ТК по лечебной схеме привело на 25 сутки к достоверному снижению прироста объема правой лапки - 52%. Влияние на вторичное воспаление - отмечали тенденции к снижению отека (12% относительно контроля), но данные изменения не носили достоверный характер. Использование дик-лофенака сопровождалось достоверным уменьшением объема правой и левой лапки на 43 и 18%, соответственно. При введении ТО достоверных изменений объемов снижения правой и левой лапки выявлено не было (табл. 1).

Таблица 1

Влияние суммы тритерпеноидов из плодов облепихи и клюквы на степень адъювантного отека лапы крыс при лечебном применении (объем, см3)

ДНИ исх 25 с

ГРУППЫ M±m Д% M±m Д%

Контроль, прав 1,95±0,08 4,18±0,09° +114

n=6 лев 1,9±0,06 3,04±0,11° +60

ТО, 100 мг/кг, n=6 прав 1,85±0,07 3,76±0,09° -11

лев 1,92±0,07 2,95±0,14° -6,4

ТК, 100 мг/кг, n=6 прав 1,96±0,09 3,18±0,09 -52

лев 1,98±0,07 2,93±0,15° -12

Диклофенак, прав 1,82±0,07 3,12±0,12°* -43

8мг/кг, n=6 лев 1,90±0,10 2,69±0,19°* -18

Примечания: ТО - тритерпеноиды облепихи, ТК - тритер-

пеноиды клюквы, n - количество животных в группе, * - достоверная разница по отношению к контролю, ° - достоверная разница по отношению к исходным значениям, М - выборочное среднее, m - ошибка среднего

Таблица 2

Влияние суммы тритерпеноидов из плодов облепихи и клюквы на лейкоцитарную формулу крови при лечебном применении

Исследования показали, что на 25 сутки адъю-вантный артрит сопровождался гематологическими сдвигами (табл. 2) - увеличением содержания лейкоцитов, которое было наиболее выраженным в контрольной группе и группе, получавшей ТО. Достоверное снижение данного показателя отмечали при введении ТК и диклофенака. Сдвига лейкоцитарной формулы не было отмечено.

Анализ данных показал, что при использовании лечебной схемы введения диклофенак уменьшал интенсивность первичной и вторичной воспалительной

реакции, ТК уменьшали первичную реакцию и оказывали слабовыраженное влияние на формирование вторичного воспаления. Применение ТО в данных условиях не оказало достоверно значимого влияния на воспалительный процесс.

Выводы:

1. Введение тритерпеноидов клюквы и облепихи по лечебной схеме в дозе 100 мг/кг сопровождалось развитием противовоспалительного эффекта, более выраженного у тритерпеноидов клюквы и проявляющегося уменьшением первичного и вторичного отека.

2. Введение тритерпеноидов клюквы сопровождалось достоверным снижением лейкоцитоза по сравнению с контрольной группой животных.

Литература

1. Атрощенко Е.А., Карпова И.А. Атеросклероз и воспаление // «Медицинский вестник». 2009. №21(907). URL: http://medvestnik.by/ru/issues/a_ 2995.htm]. (Дата обращения: 15.01.2014).

2. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / Миронов А.Н., Бунатян Н.Д. [и др.] - Часть первая. М.: Гриф и К, 2012. 944 с.

3. Сергеева Е.О., Назарова Л.Е., Саджая Л.А., Горбатюк Н.О. Изучение противовоспалительного действия суммы тритерпеноидов из плодов клюквы // Университетская наука: взгляд в будущее. Материалы итоговой научной конференции сотрудников КГМУ, Ц.-Ч. науч. центра РАМН и отделения РАЕН 2-3 февраля 2011 года, Т 2. Курск, 2011. С.276-278

4. Gan T.J. Diclofenac: an update on its mechanism of action and safety profile // Current Medical Research & Opinion. 2010. Vol. 26, No. 7. Р. 1715-1731.

References

1. Atroshchenko EA, Karpova IA. Ateroskleroz i vospalenieyu «Meditsinskiy vestnik» [Internet]. 2009 [cited 2014 Jan 15];21(907). Russian. Available from: http://medvestnik.by/ru/issues/a_2995.htm].

2. Mironov AN, Bunatyan ND, et al. Rukovodstvo po provedeniyu doklinicheskikh issledovaniy lekarstvennykh sredstv. Chast' pervaya. Moscow: Grif i K; 2012. Russian.

3. Sergeeva EO, Nazarova LE, Sadzhaya LA, Gorbatyuk NO. Izuchenie protivovospalitel'nogo deystviya summy triterpenoidov iz plodov klyukvy. Universitetskaya nauka: vzglyad v budushchee. Materialy itogovoy nauchnoy konferentsii sotrudnikov KGMU, Ts.-Ch. nauch. tsentra RAMN i otdeleniya RAEN 2-3 fevralya 2011 goda, T 2. Kursk; 2011. Russian.

4. Gan TJ. Diclofenac: an update on its mechanism of action and safety profile. Current Medical Research & Opinion. 2010;26(7):1715-31.

Показатели Группы животных, n = 6

Интактные Конт роль ТО, 100 мг/кг ТК, 100 мг/кг Диклофе нак, 8 мг/кг

WBC, 109кл/л 7,69±0,33 16,28±0,90 14,78±0,99 12,69±0,88* 11,48±0,73*

Lymph, % 61,73±3,74 66,62±3,11 62,76±2,54 63,57±1,78 59,26±1,92

Mon, % 5,29±0,32 5,47±0,20 5,59±0,32 4,70±0,25 5,55±0,30

Gran, % 32,98±3,45 27,9±3,02 31,65±2,48 31,73±1,72 35,19±1,92

Примечание: * - достоверная разница по отношению к контролю; п - количество животных в группе