CC BY
7
94
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
как основного свободного радикала кислорода, образующимся в митохондриях в результате передачи электрона по ЭТЦ, с помощью флуоресцентного зонда MitoSox Red. Однако нам не удалось выявить значимой разницы между индукторами, только в случае LPS наблюдалась тенденция к усилению генерации АФК. Также мы оценили концентрацию молочной кислоты в среде культивирования МСК, как еще один параметр метаболизма, отражающий интенсивность процессов гликолиза в клетках. Полученные данные создают предпосылку к выяснению механизмов, опосредующих влияние воспалительного окружения на свойства мезенхимальных клеток, а также к разработке подходов активного воздействия на начальные этапы репаративных процессов, связанные с контролируемой воспалительной реакцией. Кроме того, приобретает актуальность дальнейшее исследование механизмов, сопрягающих аутофагию (в данном случае — митофагию) с со свойствами клеток, участвующими в реализации их биологической функции. Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ № 20-015-00405.
Литература: 1. Cadwell K. Nat Rev Immunol 16, 661-675 (2016).
ИЗОФОРМНЫЙ СОСТАВ МРНК А1А-АДРЕНОРЕЦЕПТОРОВ, ИНДУЦИРУЕМЫХ ПРИ ДЕЙСТВИИ НОРАДРЕНАЛИНА НА МСК
А.М. Иванова, Р.А. Чанышев, К.Ю. Кулебякин, П.А. Тюрин-Кузьмин
Факультет фундаментальной медицины, МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: мезенхимные стромальные клетки (МСК), норадреналин, а7А-адренорецептор, гетерологиче-ская сенситизация.
Мультипотентные мезенхимные стромальные клетки (МСК) входят в состав стромы соединительной ткани, где играют ключевую роль в ее репарации, регенерации и поддержании гомеостаза. МСК участвуют в этих процессах благодаря секреции различных паракринных факторов и способности дифференцироваться в ряд направлений. Важными компонентами стромы также являются кровеносные сосуды и нервные окончания, получая гормональные сигналы от которых МСК координируют свою активность с целым организмом [1]. Одним из ключевых регуляторов функций МСК является норадреналин. Ранее мы показали, что норадреналин регулирует функциональную активность МСК, изменяя их чувствительность к норадреналину. При стимуляции норадрена-лином сигнального пути ß-адренорецепторы/Gs-белок/ аденилатциклаза/cAMP через 6 часов происходит повышение уровня экспрессии белка а1А-адренергических рецепторов и, как следствие, повышение чувствительности клеток к этому гормону. Данный феномен был назван гетерологической сенситизацией [2].
Для выяснения механизмов повышения белка а1А-адренорецепторов мы изучили влияния данного механизма на транскрипцию гена а1А-адренорецептора, как одного из основных способов повышения белка в клетке. Для этого мы исследовали изменение уровня мРНК после стимуляции норадреналином. При использовании праймеров, таргетирующих начальный фрагмент мРНК а1А-адренорецепторов, уровень мишени не изменялся, а при использовании праймеров, таргетирующих район
мРНК, имеющийся в составе 1-4 транскрипционных вариантов, уровень матрицы снижался. Эти результаты могут свидетельствовать о том, что в процессе прохождения гетерологической сенситизации происходит изменение изоформного состава мРНК а1А-адренорецепторов в МСК. При изучении литературы мы выяснили, что с единственного гена а1А-адренорецепторов в результате альтернативного сплайсинга считывается 7 транскрипционных вариантов с различными комбинациями экзонов. Для изучения изменений уровня экспрессии различных изоформ мы подобрали праймеры, специфичные для каждого транскрипционного варианта. Путем полуколичественного ПЦР-анализа мы исследовали изменение уровеня экспрессии каждой изоформы через 1 и 3 часа после стимуляции норадреналином относительно клеток контроля. Таким образом, в процессе осуществления гетерологической сенситизации МСК происходит изменение изоформного состава мРНК а1А-адренергических рецепторов. Исследование выполнено при поддержке РНФ в рамках проекта № 21-15-00311.
Литература:
1. Н.И. Калинина, В.Ю. Сысоева и др. Acta Naturae. — 2011. —
T. 1. — C. 32-39.
2. Tyurin-Kuzmin P.A., Fadeeva J.I.. et al. Sci. Rep. — 2016. — Vol.
6, N 1. — P. 32835.
МОДЕЛЬНЫЕ НАНОКОРПУСКУЛЯРНЫЕ
НОСИТЕЛИ ДЛЯ ВНУТРИЯДЕРНОЙ ДОСТАВКИ
ФИЗИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ
Е.В. Ивановская1, В.А. Дятлов1, 2
1 Российский химико-технологический университет им. Д.И. Менделеева, Москва, Россия
2 Институт тонких химических технологий им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: генная терапия, нанокорпускулярные носители, аддукт, этил-2-цианакрилат, внутриклеточный транспорт, доксорубицин.
Эффективная генная терапия возможна только при использовании носителей, способных доставлять лекарственные препараты или гены внутрь клетки и ее орга-неллы на разных стадиях развития. Целью настоящей работы было изучение возможности доставки лекарственного средства внутрь ядра живых клеток на стадии их митоза.
В качестве модельного соединения использовали доксорубицин — противоопухолевый антибиотик, проникновение которого внутрь клетки легко регестрировать методом конфокальной лазерной флуоресцентной микроскопии при экспериментах in vitro. Синтезированные полици-анакрилатные частицы, полученные из аддукта этил-2-цианакрилата и жирных кислот, использовали в качестве носителя. Этил-2-цианакрилатные мономеры обладают рядом уникальных свойств, главным из которых является, способность к полимеризации, в отсутствие радикальных инициаторов, с образованием полимеров, способных к биодеградации внутри организма (гидролизом и ферментативным гидролизом) [1]. Поверхность частиц была покрыта слоем полисахарида (реополиглюкина) и фос-фатидилхолина с целью обеспечения трансмембранного проникновения системы внутрь клетки.
Наилучший результат был получен при использовании нанокорпускулярных полимерных носителей малого
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
