CC BY
59
УДК 616.346. 2-002. 3/4
ИЗМЕНЕНИЕ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ И АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ У БОЛЬНЫХ ОСТРЫМ ФЛЕГМОНОЗНЫМ И ГАНГРЕНОЗНЫМ АППЕНДИЦИТОМ
© Г.А. Захаров, Г.И. Горохова
Ключевые слова: флегмонозный и гангренозный аппендицит; перекисное окисление липидов; антиоксидантная защита.
При остром флегмонозном и гангренозном аппендиците усиливается перекисное окисление липидов (при снижении активности фермента антиоксидантной защиты - каталазы), более выраженное при гангренозной форме. На 5-е сутки после операции процессы липопероксидации нормализуются в обеих группах.
Несмотря на большое число исследований, посвященных изучению острого и хронического аппендицита, неоднократно подвергавшихся обобщениям, проблема эта далека от окончательного разрешения. В структуре болевого синдрома в правой подвздошной области ведущее место занимает аппендицит [1]. Хорошо известно, что болевой синдром сопровождается стрессорной реакцией, которая характеризуется усилением перекисного окисления липидов (ПОЛ) и снижением антиоксидантной защиты [2-4].
Вместе с тем любое оперативное вмешательство, в т. ч. и на брюшной полости, ведет к активации ПОЛ, особенно на фоне дефицита факторов антирадикальной защиты. А это является одним из важных механизмов, ведущих к повреждению клеток кишечника и других жизненно важных органов. Так, активацию ПОЛ при острой странгуляционной непроходимости наблюдали К.М. Курбатов с соавт. [5], при острых хирургических заболеваниях органов брюшной полости - Г.А. Гаври-ленко с соавт. [6], при оперативном лечении желчнокаменной болезни - Е.В. Размахнин с соавт. [7], более выраженном при лапаротомическом методе, по сравнению с лапароскопическим. Применение в комплексе интенсивной терапии антиоксиданта и антигипоксанта снижало активацию ПОЛ и способствовало улучшению реперфузионных повреждений кишечника при стран-гуляционной непроходимости [5]. В доступной нам литературе мы не встретили работ о состоянии процессов свободнорадикального окисления, антиоксидант-ной защиты и их диагностическом значении при остром аппендиците.
В связи с вышеизложенным целью настоящего исследования являлось определение продуктов ПОЛ (диеновых коньюгатов и малонового диальдегида) и активности ферментов антиоксидантной защиты (су-пероксиддисмутазы и каталазы) при остром флегмо-нозном и гангренозном аппендиците.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Под наблюдением было 40 пациентов с острым аппендицитом, из них у 22 диагностировалась флегмо-нозная и у 18 - гангренозная формы. В качестве кон-
троля исследования выполнены на 15 практически здоровых лицах. Состояние ПОЛ оценивали по концентрации диеновых коньюгатов (ДК) [8] и малонового диальдегида (МДА) [9]. Об антиоксидантной защите судили по активности супероксиддисмутазы (СОД) [10] и каталазы [11] . Анализы выполнены до операции и на 1 и 5 сутки после нее.
Статистическую обработку материала проводили методом вариационной статистики. Вычисляли среднее значение (М), ошибку средней величины (т). Разницу средних величин оценивали по критерию Стьюдента и вероятности Р, которую признавали статистически значимой при Р < 0,05 [12].
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Изучение состояния перекисного окисления липи-дов у здоровых лиц (контрольная группа) показало, что уровень диеновых коньюгатов в крови составлял 0,67 ± ± 0,04 нмоль/мг липидов, а малонового диальдегида с 7,1 ± 0,05 мкм/мл эритроцитов. Активность ключевых ферментов антиоксидантной защиты была равна: супероксиддисмутазы 696 ± 65 усл. ед., а каталазы 324 ± ± 23 усл. ед.
У больных флегмонозным аппендицитом (ФА) при поступлении в стационар до операции (табл. 1) наблюдалась значительная активация процессов свободнора-дикального окисления, о чем свидетельствует увеличение в 2 раза уровня диеновых коньюгатов (с 0,67 ± 0,04 до 1,47 ± 0,30 нмоль/мг липидов) и на 43 % малонового диальдегида (с 7,1 ± 0,05 до 10,4 ± 0,43 мкмоль/мл эритроцитов) (Р < 0,001). Активность СОД существенно не отличалась от контрольной и даже несколько превышала ее. Вместе с тем активность другого фермента - каталазы была достоверно снижена на 28 % (Р < 0,05). Через сутки после операции сохранялся достоверно более высокий по сравнению со здоровыми людьми уровень ДК (на 58 %) и МДА (на 32 %), хотя по сравнению с их содержанием до операции он был несколько ниже. В это время отмечалось снижение активности СОД на 28 % (Р < 0,05), а активность ката-лазы нормализовалась. Через 5 суток после удаления флегмонозного аппендицита наблюдалось дальнейшее
Таблица 1
Изменение состояния перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты (М ± т) при остром флегмонозном (ФА) и гангренозном (ГА) аппендиците
Группы Показатели Диеновые коньюгаты (нмоль/мг липидов) Малоновый диальдегид (мкмоль/мл. эр.) Супероксид дисмутаза (усл. ед) Каталаза (усл. ед.)
Контроль n = 15 0,67 ± 0,04 7,1 ± 0,05 696 ± 65 324 ± 23
до опер. 1,47 ± 0,30xx 10,4 ± 0,49xx 785 ± 81 234±33x
ФА n = 22 после опер. 1 сутки 1,06 ± 0,12xx 9,4 ± 0,40xx 504 ± 56x 309 ± 18
5 суток 0,83 ± 0,07x 9,0 ± 0,41xx 471 ± 11xx 371 ± 11
до опер. 1,77 ± 0,21xx 13,1 ± 0,61xx 755 ± 64 203 ± 20x
ГА n = 18 после опер. 1 сутки 1,6 ± 0,28xx 12,8 ± 0,71xx 1031 ± 84xx 281 ± 63
5 суток 0,78 ± 0,20 9,1 ± 0,96 519 ± 95 322 ± 45
Примечание: х - изменения достоверны по сравнению с контролем: x - P < 0,05; xx - P < 0,01.
снижение уровня продуктов ПОЛ, хотя он еще превышал нормальный (содержание ДК было выше на 23 %, Р < 0,05, а МДА на 24 % , Р < 0,01). Сохранялась сниженной на 33 % активность СОД (Р < 0,01), в то время как активность каталазы была даже несколько выше, чем в контрольной группе здоровых лиц.
Нам интересно было проследить, как меняется состояние процессов свободнорадикального окисления при более тяжелой (гангренозной) форме острого аппендицита. Как видно из табл. 1, при поступлении в клинику у больных с этой формой острого аппендицита уровень ДК и МДА был значительно выше нормального: на 264 и 184 % соответственно (Р < 0,001). Активность СОД была нормальной, а каталазы - сниженной на 37 % (Р < 0,01). Интересно отметить, что если при флегмонозном аппендиците уже через сутки после операции заметна тенденция к снижению процессов липопероксидации, то при гангренозной форме они существенно не изменяются и остаются достаточно высокими по сравнению со здоровыми людьми. В это время на 48 % повышается активность СОД с 696 ± 65 до 1031 ± 84 (Р < 0,01), а каталазы почти возвращается к контрольному уровню. Через 5 суток после операции уровень продуктов ПОЛ лишь незначительно превышает контрольный, и он примерно такой же, как на 5 сутки у пациентов с флегмонозным аппендицитом. Активность исследуемых ферментов антиоксидантной защиты нормализуется.
Таким образом, у больных с острым флегмонозным и гангренозным аппендицитом отмечается активация процессов перекисного окисления липидов со снижением активности фермента антиоксидантной защиты -каталазы. Эти изменения более выражены при гангренозной форме. У больных флегмонозным аппендицитом уже через сутки видна тенденция к нормализации ПОЛ при снижении активности СОД. В то время как при гангренозной форме содержание продуктов ПОЛ (ДК и МДА) остается высоким и компенсаторно повышается активность СОД, что, очевидно, способствовало в дальнейшем нормализации процесса. На 5 сутки после операции как при флегмонозном, так и при гангренозном аппендиците показатели пероксидации незначительно превышают нормальный уровень при нормальной активности ферментов антиоксидантной
защиты. Полученные результаты позволяют сделать вывод о том, что уровень ПОЛ может служить маркером флегмонозного и гангренозного аппендицита.
ЛИТЕРАТУРА
1. Сажин А.В., Мосин С.В., Коджоглян А.А. и др. Эпидемиологические аспекты хронического аппендицита // Хирургия. 2011. № 4. С. 4-8.
2. Костюченко Л.С. Изменение перекисного окисления липидов и антиоксидантоа при стрессовых состояниях в условиях среднего-рья: автореф. дис. ... канд. биол. наук. Бишкек, 1991.
3. Шилов А.М. Антигипоксанты и антиоксиданты (актовегин) в профилактике и лечении сердечно-сосудистых осложнений // Фарматека. 2013. № 9. С. 42-48.
4. Чурикова М.С. Коррекция перекисного стресса как важный элемент патогенетического лечения воспалительных заболеваний органов малого таза // Российский вестник акушера гинеколога. 2013. № 5. С. 8-11.
5. Курбанов К.М., Шарипов Х.Ю., Абдулмажитзода А. Фармакологическая коррекция свободно-радикальных нарушений и эндоток-сикоза у больных острой кишечной непроходимостью в послеоперационном периоде // Хирургия. 2013. № 5. С. 49-52.
6. Гавриленко Г.А., Кубышкин В.А. и др. Перекисное окисление липидов при острых хирургических заболеваниях органов брюшной полости // Хирургия. 1999. № 9. С. 6-21.
7. Размахнин Е.В., Хашиктуев Б.С., Лобанов СЛ. Перекисное окисление липидов и антиоксидантная защита у больных после хирургического лечения желчнокаменной болезни // Клиническая лабораторная диагностика. 2009. № 1. С. 5-7.
8. Plazer Z., Kuzela L. Lipoperoxidatyon sistem in biologychen material // Nahrung. 1968. Bd. 12. № 16. S. 679-684.
9. Теселкин Ю.О., Бабенкова И.В., и др. Ингибирование сывороточными антиоксидантами окисления люминола в присутствии гемоглобина и перекиси водорода // Вопросы мед. химии. 1997. Т. 43. Вып. 2. С. 87-93.
10. Чумаков В.Н., Осинская Л.Ф. Количественный метод определения активности цинк-медь-зависимой супероксиддисмутазы в биологическом материале // Вопросы мед. химии. 1977. № 5. С. 712-716.
11. Конвай В.Д., Лукошкин Л.В. Способ определения активности каталазы // Изобретательство и рационализация в медицине. Омск, 1988. С. 10-13.
12. Боровиков В.П., Боровиков И.П. Статистический анализ и обработка данных в среде Windows. М., 1998. 552 с.
Поступила в редакцию 30 марта 2015 г.
Zakharov G.A., Gorokhova G.I. CHANGES OF PEROXIDE OXIDATION OF LIPIDS AND THE ACTIVITY OF ANTIOXIDANT DEFENSE ENZYMES IN PATIENTS WITH AN ACUTE PHLEGMONOUS AND GANGRENOUS APPENDICITIS
At an acute phlegmonous and gangrenous appendicitis the peroxide oxidation of lipids (when there is a decreased activity of antioxidant protection enzyme - catalase) increases and it is more expressed at the gangrenous form. The fifth day after a
surgery processes of lipoperoxidation normalize in both groups.
Key words: phlegmonous and gangrenous appendicitis; peroxide oxidation of lipids; antioxidant defense.
Захаров Геннадий Алексеевич, Тамбовский государственный университет им. Г.Р. Державина, г. Тамбов, Российская Федерация, доктор медицинских наук, профессор кафедры патологии, e-mail: [email protected]
Zakharov Gennadiy Alekseyevich, Tambov State University named after G. R. Derzhavin, Tambov, Russian Federation, Doctor of Medicine, Professor of Pathology Department, e-mail: [email protected]
Горохова Галина Ивановна, Кыргызско-Российский Славянский университет, г. Бишкек, Кыргызская Республика, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, ведущий методист лаборатории экспериментального моделирования патологических процессов, кафедра нормальной и патологической физиологии, e-mail: [email protected]
Gorokhova Galina Ivanovna, Kyrgyz-Russian Slavic University, Bishkek, Kyrgyz Republic, Candidate of Biology, Senior Scientific Worker, Leading Methodologist of Experimental Modeling of Pathological Processes Laboratory, Normal and Pathological Physiology Department, e-mail: [email protected]
