CC BY
17
^ Изменение копийности генов при раке шейки матки
Ключевые слова: CNV, рак шейки матки, эндофитная и экзофитная форма роста
Keywords:
CNV, cervical cancer, exophytic and endophytic growth form
Петрусенко Н.А., Никитина В.П., Спиридонова Д.А., Кечерюкова М.М.
ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Министерства здравоохранения Российской Федерации
344037, Российская Федерация, г. Ростов-на-Дону, 14-я линия, д. 63 E-mail: [email protected]
Changes in the copy number of genes in cervical cancer
Petrusenko N.A., Nikitina V.P., Spiridonova D.A., Kecheryukova M.M.
Rostov Research Institute of Oncology (RRIO)
14th line, 63 Rostov-on-Don, 344037, Russian Federation
E-mail: [email protected]
Рак шейки матки является второй наиболее распространенной формой рака у женщин, во всем мире ежегодно регистрируется 528,000 новых случаев. Хотя ранний рак шейки матки можно лечить хирургическим путем или облучением, метастатический рак шейки матки неизлечим и необходимы новые терапевтические подходы. Изменение числа копий участков ДНК (CNV), как полиморфизм генома, играет важную роль в канцерогенезе.
Цель. Анализ относительной копийности генов, ответственных за рецепцию и метаболизм эстрогенов в тканях шейки матки при эндофитной и экзофитной формах роста опухоли для поиска предиктивных маркеров малигнизации.
Пациенты и методы. Исследование включало 44 пациента в возрасте 28-65 лет (с преобладанием женщин в возрасте 36-55 лет) с диагнозом рак шейки матки эндофитной (n=22) и экзофитной (n=22) формами роста, проходивших плановое лечение в ФГБУ «РНИОИ» Минздрава России. Всем пациенткам был морфологически подтвержден диагноз плоскоклеточный рак шейки матки T1 б-2 аN0M0, стадия I-II. Экстракцию ДНК из парафиновых блоков опухолевой и условно здоровой ткани проводили набором Thermo Scientific Gene JET Ffpe DNA Purification Kit. Методом RT-qPCR. (CFX96, Bio-Rad, USA) проводили оценку относительной копийности 8-ми генетических локусов: ESR1, ESR2, GPER1, STS, SULT1A1, SULT1E1, CYP1A1, CYP1A2. В качестве референсных использовали генетические локусы GAPDH, B2M. Оценку достоверности различий проводили с использованием критерия Манна-Уитни.
Результаты. Для всех генетических локусов было отмечено изменение относительной копийности генов в опухолевых клетках шейки матки относительно нормальных. Преобладала тенденция увеличения копийности в обеих группах пациентов. Статистически достоверное увеличение копийности (р<0,05) в опухолевых тканях у пациентов с раком рейки матки выявлено для трех генов: GPER1, SULT1A1, CYP1A1 в 33%, 35% и 43% случаев соответственно. Однако, копийность гена GPER1 достоверно повышалась в 1,41 раз только в группе эндофитной формы роста. В целом при сравнении двух групп по уровню копийности исследованных локусов различий
не выявлено. Тем не менее, анализ групп пациенток разных возрастов позволил идентифицировать различия. В группе пациенток 36-55 лет с эндофитной формой роста опухоли отмечено достоверное увеличение (р<0,05) копийности генов GPER1 и CYP1A1 с частотой 42% и 67% соответственно. Также в этой возрастной группе отмечалось увеличение амплификации гена CYP1A2 у 42% пациенток. В возрастной группе 56-75 лет с эндофитной формой роста опухоли наблюдалось увеличение копий генов ESR2, GPER1, SULT1A1 с частотой 50%, 100% и 75% соответственно. В группе 20-35 лет с эндофитной формой роста опухоли изменения дозы генов не отмечено. У пациенток с экзофитной формой роста опухоли в возрастной группе 20-35 и 36-55 лет выявлено достоверное увеличение (р<0,05) копийности гена CYP1A1 в 33,33% и 45,45% случаев соответственно. По остальным генетическим локу-сам в разных возрастных группах изменения копийности не наблюдалось.
Заключение. Получены результаты по изменению копийности генов GPER1, SULT1A1, CYP1A1 в опухолевой ткани по сравнению с условно нормальной тканью в обеих группах пациенток с раком шейки матки. Исследуемые гены вовлечены в процессы онкотрансформации, которые связаны с функциями кодируемых белков. Ген GPER1 кодирует мембранный белок, посредством которого реализуются клеточные и физиологические реакции на действие эстрогенов. Активация GPER1 запускает множественные внутриклеточные каскады, связанные с пролиферацией, инвазией и миграцией. Ген SULT1A1, кодирующий одну из двух фенолсульфотрансфераз, участвует в различных патофизиологических процессах, таких как метаболизм лекарств, рак, гормональная регуляция и биология нейротрансмиттеров. Ген CYP1A1, кодирующий фермент из суперсемейства цитохромов Р450, не только участвует в метаболизме эстрогена, ксенобиотиков, но и играет важную роль в прогрессировании рака. Таким образом, на основании полученных нами результатов, можно предложить использование генов GPER1, SULT1A1, CYP1A1 в качестве биомаркеров малигнизации тканей при плоскоклеточном раке шейки матки.
218 Proceedings of the First International Forum of Oncology and Radiology, Moscow, September 23-27 2019
