CC BY
164
УДК 612.017.1: 616.988.15-002.954.2
Г.П. Билалова, Л.Д. Быстрицкий, М.С. Воробьева, И.В. Красильников, Т.Э. Ильченко, Р.Г. Соляник, Н.Х. Ставицкая
ИСТОРИЯ ПРОИЗВОДСТВА ВАКЦИН
ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА В Г. ТОМСКЕ: ОТ МОЗГОВОЙ ВАКЦИНЫ ДО ВАКЦИНЫ ЭНЦЕВИР
ФГУП НПО Микроген МЗ РФ филиал в г. Томске НПО «Вирион», ГНИИСК им. Л.А. Тарасевича, Москва, ФГУП НПО «Микроген» МЗ РФ, Москва
Впервые вакцина против клещевого энцефалита (КЭ) была разработана в Томском НИИ вакцин и сывороток в 1954 г. (с 1988 г. — НПО «Вирион») на основе штамма «Софьин». Технология производства вакцины совершенствовалась: в 1962 г. было освоено культивирование вируса на клетках фибробластов эмбриона курицы (ФЭК), в производство внедрен штамм «Пан»; в 1983 г. культуральная вакцина стала выпускаться на основе штамма вируса КЭ «205» дальневосточного антигенного типа. С 2001 г. НПО «Вирион» перешло на производство новой усовершенствованной вакцины ЭнцеВир® — концентрированного, очищенного препарата, отвечающего современным международным требованиям. Вакцина ЭнцеВир® успешно применяется на всей территории Российской Федерации.
Ключевые слова: клещевой энцефалит, вакцина
Официальное признание Томской области очагом клещевого энцефалита (КЭ) датируется 1939 годом [1]. Однако ретроспективный анализ показывает, что заболевания, сходные по своей клинической картине с КЭ, на территории Томской области были описаны еще в конце XIX века. Первое сохранившееся описание случаев заболевания, датированное 1897 годом, принадлежит ординатору клиники нервных болезней Императорского Томского университета Л.М. Орлеанскому. По описанным симптомам речь шла о кожевни-ковской эпилепсии. Позднее, в 1918-1936 гг. профессор Томского университета Л.И. Омороков, всесторонне изучая случаи кожевниковской эпилепсии, обратил внимание на тот факт, что заболевание чаще возникает у жителей таежных районов, и сделал предположение о связи заболевания с обилием в этих местах таежного гнуса [2, 3].
Ведущее значение в борьбе с инфекционными природноочаговыми заболеваниями принадлежит вакцинопрофилактике [1]. Однако известно, что эффективность вакцинации зависит от ряда условий, в том числе от качественных характеристик профилактического препарата и способа его применения.
Производство вакцины против КЭ в Томском НИИ вакцин и сывороток (ТомНИИВС, с 1988 г. — НПО «Вирион») было начато в 1954 г. Это была «мозговая» вакцина, основным компонентом которой был инактивированный вирус КЭ из мозга белых мышей [3]. Вакцина была полива-
лентной, т.к. изготавливалась на основе нескольких штаммов вируса КЭ — «Софьин», «Обор», «Л3», а с 1959 г. в производстве использовали только один штамм — «Софьин», в связи с убеждением многих специалистов того времени о единстве антигенных и иммуногенных свойств у всех штаммов вируса КЭ. Эта вакцина, приготовленная на основе штамма вируса КЭ восточного типа, хорошо защищала как против эталонных, так и против свежевыделенных штаммов вируса КЭ в разных регионах. Препарат выпускался в лиофилизированном виде — вначале 5%, а позднее — 2,5% суспензии, при этом одна профилактическая доза составляла 2 мл. Вакцина обладала высокими иммуногенными свойствами, но в то же время была достаточно реактогенной, ее применение приводило к развитию аллергических реакций, в том числе демиелинизирующего эцефалита. Это было существенным недостатком мозговой вакцины, снижающим ее практическую ценность.
Необходимо отметить, что еще в 1949 г. А.К. Шубладзе и О.Г. Анджапаридзе разработали технологию производства «яичной» вакцины. Она представляла собой 5% суспензию зараженных вирусом куриных эмбрионов с 0,2% формалина. В июне 1957 г. под непосредственным руководством профессора А.К. Шубладзе производство этого препарата было начато в ТомНИИВС. Для изготовления вакцины использовали штамм <^х» и «Яс„» [3]. Однако препарат обладал слабой ан-
гигенной активностью и по этой причине не получил практического применения.
Исследователями, занимавшимися вопросами разработки технологии вакцин, было выявлено, что основным компонентом, вызывающим негативные реакции при введении вакцин, является мозговая ткань мышей [4]. Наиболее полное освобождение препарата от мозговой ткани достигается культивированием вируса в клеточных культурах, например, клетках куриного эмбриона. Возможность проведения такого культивирования была теоретически доказана и экспериментально подтверждена в 1960 г. работами E.H. Левкович, Г.Л. Засухиной и А.К. Шубладзе.
В 1962 г. Томский НИИВС совместно с Институтом полиомиелита и вирусных энцефалитов и Московским институтом вирусных препаратов приступил к разработке вакцины на основе вируса, продуцированного на культуре клеток — фибробластов эмбриона курицы (ФЭК). В производстве использовали штамм «Пан» западного генотипа. Вирус инактивировали формалином, сорбировали на геле алюминия гидроксида. Вакцину выпускали в лиофилизированном виде. Особенностью разработки томских иследовате-лей было то, что для культивирования использовали нетрипсинизированные клетки, а культивирование вируса КЭ проводили комбинированным методом — в монослое и в виде взвеси, впервые лиофилизировали уже сорбированную вакцину. Итогом этой большой комплексной работы стала разработка технологии изготовления и контроля инактивированной сорбированной культураль-ной вакцины против КЭ жидкой и сухой [3].
Нельзя не упомянуть работы по созданию живой вакцины в Томском НИИВС. Причиной тому явились преимущества живых вакцин, выражающиеся в формировании прочного и длительного иммунитета, приближающегося по напряженности к постинфекционному. Однако первые опыты практического применения живой вакцины имели негативные последствия, и препарат был снят с производства [5].
К 1981 г. Томский НИИВС стал основным производителем и центром исследований по совершенствованию технологии культуральной инактивированной сорбированной вакцины КЭ в стране, ежегодно выпуская 5 млн доз препарата [5].
Наряду с производством препарата и вакцинацией населения продолжалось изучение его иммунологической и эпидемиологической эффективности. Например, анализ эффективности вакцинации населения в Приморском крае позволил выявить, что развитие гуморального иммунитета происходит у 70% привитых (тестирова-
ние сывороток в РТГА), однако обращала на себ} внимание низкая напряженность иммунитета сообщения о случаях заболевания среди лиц, вак цинированных по полной схеме [6]. Факты недо статочной эпидемиологической эффективности вакцины, изготовленной на основе штамма запад ного варианта вируса КЭ, особенно в восточны? регионах страны, предопределили ближайшук задачу, заключающуюся в поиске новых высокс иммуногенных штаммов.
С 1983 г. технология приготовления вакцинного препарата претерпела значительные изменения: в производство был внедрен штамм вирусг КЭ «205» дальневосточного субтипа [7], внесень: коррективы в режимы культивирования вируса и с 1984 г. был начат выпуск нового варианта вакцины против КЭ.
Кроме того, что вакцина на основе штаммг «205» имела стабильно высокие показатели им-муногенности и репродуктивное™, что обеспечивало экономическую эффективность промышленного производства препарата.
На основании результатов комиссионногс испытания вакцин против КЭ, проведенного в 1985-1987 гг. в соответствии с Программой, утвержденной МЗ СССР, был сделан вывод о том, что неконцентрированная вакцина Томского НИИВС, изготовленная на основе штамма «205», характеризуется высокой антигенной активностью — частота сероконверсий у привитых достигала 89,5%. По зафиксированным в ходе испытания результатам томская вакцина не отличалась, а порою даже превосходила по этому показателю концентрированные вакцины против КЭ. В испытании также были определены оптимальные схемы применения вакцины для профилактики КЭ и для иммунизации доноров с целью получения специфического иммуноглобулина [4].
Долгие годы томская вакцина представленной модификации оставалась основным препаратом для профилактики КЭ в нашей стране. Ее массовое применение позволило снизить заболеваемость КЭ и уменьшить число случаев развития тяжелых осложнений и инвалидизации больных КЭ [8].
Однако новое время требовало новых качественных характеристик вакцинных препаратов. Изменились международные требования к качеству вакцин, этические нормы вакцинации, изменилась эпидемиологическая характеристика КЭ, изменился и сам человек как объект вакцинации.
Применение производимой ранее вакцины против КЭ — культуральной инактивированной сорбированной жидкой, — бесспорно, повлияло на уровень заболеваемости КЭ в стране в целом. Но обладая высоким уровнем иммунологической
и эпидемиологической эффективности, вакцина все же имела в своем составе остаточное количество формалина, что вызывало болезненность в момент инъекции и негативную реакцию у вакцинированных лиц, а также содержала вещества, способные вызывать аллергические реакции. Длительность курса вакцинации также усложняла ее практическое применение. Все перечисленные недостатки вакцины требовали совершенствования препарата [9].
Еще в 1998 г. в НПО «Вирион» были начаты исследования по очистке вакцины от балластных белков. Работы проводились коллективом авторов, совместно с сотрудниками Томского государственного университета. Образцы полученной очищенной вакцины были направлены на контрольные испытания в ГНИИСК им. Л.А. Тарасе-вича — Национальный Орган Контроля (НОК). Однако испытаний представленный препарат не выдержал.
На новом этапе работы по усовершенствованию технологии вакцины были заняты сотрудники предприятия НПО «Вирион», консультативную помощь в этой работе оказывал И.В. Красильников. За основу были взяты методы очистки вакцины, используемые в Институте полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова РАМН, которые в процессе работы были модифицированы [9].
Для снижения вероятности аллергических реакций на введение вакцины последняя должна была быть максимально очищена от технических примесей и, в идеале, содержать только целевой продукт — антиген вируса КЭ. Так как основной причиной возможных аллергических реакций является присутствие в вакцине белкового субстрата, необходимого для репродукции вируса на клетках куриного эмбриона, то главным критерием оценки степени очистки препарата стало снижение содержания белков куриного эмбриона до уровня не более 1 мкг/мл [10].
Взяв за основу современные требования Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ) и НОК к вакцинным препаратам, в частности, к вакцинам против КЭ, а также опыт отечественных и зарубежных разработок и собственный опыт по промышленному производству вакцины, коллектив разработчиков дополнил имевшуюся ранее технологическую схему производства вакцины новыми стадиями и сопровождающими их контрольными тестами [10].
В экспериментальных работах по концентрации и очистке полуфабриката вакцины КЭ, изготовленного по оригинальной технологии НПО «Вирион», использовали известные и общепринятые методы ультра- и микрофильтрации, адсорб-
ционной хроматографии и гель-хроматографии на макропористых кремнеземах. Эффективность очистки контролировали по содержанию куриного белка, общего белка, остаточного формальдегида, антибиотика канамицина в конечном продукте.
В результате проведенных экспериментальных работ была разработана следующая схема изготовления вакцины:
1. Репродукция вируса в первично-трипсини-зированной суспензионной культуре клеток куриных эмбрионов по оригинальной технологии.
2. Инактивация вируса КЭ формальдегидом.
3. Очистка инактивированного вирусного сбора. Эта стадия включает в себя:
— осаждение клеточного детрита в вирусном сборе протаминсульфатом;
— проточное центрифугирование с последующей микрофильтрацией;
— концентрирование полуфабриката методом ультрафильтрации;
— очистка концентрата от низкомолекулярных примесей методом гель-хроматографии на авторских модифицированных макропористых кремнеземах.
Разработанная технология приоритетна и защищена патентом № 2203089.
Описанные процедуры позволили достичь значительной чистоты полуфабриката вакцины: в одной дозе вакцины в соответствии с требованиями НОК содержание куриного белка не превышало 0,5 мкг, а содержание общего белка — 65 мкг. Для определения содержания примесных белков на стадиях производства и в очищенном полуфабрикате в технологии используется метод встречного иммуноэлектрофореза (ВИЭФ).
4. Приготовление вакцины. Эта стадия включает следующие операции:
— стандартизация вирусного полуфабриката по концентрации вирусного антигена;
— стабилизация вирусного антигена;
— стерилизующая фильтрация полуфабриката;
— сорбция на алюминия гидроксиде.
Все стадии технологического процесса контролировались в соответствии с проектом Регламента производства № 1147-01. Требования к готовому препарату были изложены в проекте ФСП 42-42-0135179001 [И].
Таким образом, разработанная технологическая схема новой вакцины позволила:
1. Максимально сохранить антигенную активность первичного вирусного сбора.
2. Производить эффективную очистку от гете-рологичного белка куриного эмбриона, что стало главным критерием оценки эффективности технологии очистки.
3. Получать качественный готовый продукт без внесения антибиотиков и консервантов на заключительных стадиях. Антибиотик канамицин, используемый на стадии получения первичного вирусного сбора, разрешен требованиями ВОЗ к вакцинам КЭ и удаляется на стадии очистки. Его отсутствие контролируется на стадии готовой лекарственной формы.
4. Гарантировать отсутствие инактиватора формальдегида в готовом препарате, что также подтверждается контрольным тестом.
5. Выпускать вакцину в виде жидкой лекарственной формы по 0,5 мл (одна доза) в ампуле. Эта форма выпуска дает ряд преимуществ: точность дозирования и защиту от программных ошибок, гарантию соблюдения правил асептики и сокращение манипуляций при вакцинации. Кроме того, эта дозировка является важным фактором экономической эффективности, поскольку при мультидозном варианте выпуска потери вакцины достигают 51% [12].
Все вышеперечисленные факторы дали возможность использовать препарат для вакцинации взрослых, подростков и детей.
Согласно разработанной технологии в конце 2000 г. были получены экспериментально-производственные серии очищенной вакцины. Новый препарат получил коммерческое название ЭнцеВир® — вакцина клещевого энцефалита культуральная очищенная концентрированная инактивированная сорбированная жидкая [4].
Разработанная технология обеспечила высокую безопасность препарата, поскольку резко уменьшилась вероятность побочных реакций на его введение. Более высокая степень очистки полученного препарата, а также отсутствие в нем остаточного формальдегида позволяют вводить его внутримышечно (в дельтовидную мышцу). Такой метод введения обеспечивает большую биодоступность препарата и этим увеличивает имму-ногенность вакцины по сравнению с подкожным способом введения. Более высокая концентрация антигена вируса КЭ в вакцине ЭнцеВир позволила снизить объем вводимого препарата до 0,5 мл и перейти от громоздкой 3-кратной схемы вакцинации к 2-кратной: основной 0-5 мес. и экстренной 0-2 мес. с однократной ревакцинацией через год и затем отдаленными ревакцинациями через каждые три года [4].
По результатам доклинического испытания препарата в ГНИИСК им Л.А. Тарасевича было дано разрешение на проведение государственных клинических испытаний с целью определения реактогенности, безвредности и иммунологической эффективности вакцины. Испытания проводились по Программе, разработанной ГНИИСК
им Л.А. Тарасевича и утвержденной комитете МИБП в несколько этапов: первый этап — на о раниченной группе лиц; второй — на расшире] ном контингенте лиц в возрасте от 18 до 60 ле третий — при вакцинации подростков и детей возрасте от 18 до 3 лет. К клиническим испыт ниям были привлечены 745 волонтерлов. И пытания проводили с соблюдением требованг Хельсинкской декларации. В качестве препара-сравнения был применен препарат, назначеннь: комитетом МИБП — вакцина клещевого энцеф лита культуральная очищенная концентрирова) ная инактивированная сухая производства Ин титута полиомиелита и вирусных энцефалите им. М.П. Чумакова (Москва).
В ходе клинических испытаний была доказа! иммунологическая эффективность и слабая р> актогенность новой вакцины ЭнцеВир, что яв] лось основанием для разрешения использованг ее в качестве иммунобиологического препарат Технологические стандарты производства ва! цины ЭнцеВир, ее качественные характеристик: назначение и предложенные схемы вакцинаци позволяют осуществлять взаимозаменяемость < с другими вакцинами против КЭ, зарегистрир< ванными в стране, а также совмещать с вакцин; ми Календаря профилактических прививок.
Проведенная сравнительная оценка зарегис рированных в России вакцин против КЭ, вклк чая вакцины импортного производства, показал, что они не имеют существенных различий по ре актогенности и иммуногенности и подтвердил возможность взаимозаменяемости [13].
В 2001 г. в НПО «Вирион» было начато прс мышленное производство вакцины ЭнцеВир. Вь бранная схема производства позволила выпускат высокоэффективную, качественную и удобну] в применении вакцину. За прошедшие с начал производства годы объемы выпуска вакцины во: росли с 400 тыс. доз в 2001 г. до 2 млн доз в 20061 а всего выпущено, реализовано и использов; но в здравоохранении более 5 млн доз вакцин ЭнцеВир. Действующая на предприятии систем управления качеством гарантирует соответстви технологии нормативным требованиям и станда{ там, распространяющимся как на сырье, матери; лы, так и технологические процессы. В процесс производства и при выпуске вакцина тестируете по 26 химическим, биохимическим, иммунохим* ческим и биологическим параметрам. По таки показателям, как вирусная безопасность, иммунс генность, стерильность тестирование проводите неоднократно на разных стадиях процесса.
Аналитические данные, полученные, за пят лет производства вакцины ЭнцеВир, позволяю говорить о стандартности получаемого препарг
та. Содержание и иммунологическая сохранность вирусных белков и полипептидов, ответственных за выработку протективных антител, определяемая методом титрования в ИФА, имеет среднее значение 1:256 при нормативном 1:128. Анализ результатов контроля специфической активности и подлинности вакцины, определяемой в тесте протективной активности на мышах, по 50% предельному разведению вакцины и показателю МИД, показал, что среднее значение минимальной иммунизирующей дозы равно 0,005 мл при нормативном показателе 0,0125 мл [11].
Динамическое наблюдение за лицами, привитыми вакциной ЭнцеВир, проводимое в разных регионах, подтверждает результаты клинических испытаний и позволяет говорить о безопасности, низкой реактогенности и высокой иммунологической активности вакцины. За весь период наблюдения не было зарегистрировано случаев поствакцинальных осложнений. Полный цикл вакцинации, состоящий из трех инъекций, вызывает сероконверсию у 99,3+0,4% привитых. Более чем у 80% привитых лиц антитела определяются в интервале 1:1600 — 1:3200, при защитном титре 1:100 [14].
В 2006 г. нами была проведена работа по выявлению отдаленных последствий вакцинации и определению сохранности специфического иммунитета при применении вакцины ЭнцеВир. К исследованию были привлечены волонтеры, принимавшие участие в клинических испытаниях вакцины в 2001 г. Результаты опроса волонтеров и анализа их сопутствующей заболеваемости за период времени, прошедшего после проведения первичного курса вакцинации, показал, что вакцинация не оказала отрицательного влияния на уровень их здоровья и качество жизни. Уровень антител к вирусу КЭ определялся в сыворотках крови в ИФА до введения бустерной дозы вакцины и через 30 дней после ее введения. Было отмечено, что перед введением бустерной дозы вакцины уровень антител снизился на одно-два разведения, относительно достигнутого первичным циклом вакцинации. Введение бустерной дозы приводит к выработке антител до прежнего уровня, либо превышает его. Специфичность вырабатываемых на введение вакцины ЭнцеВир антител подтверждается результатами исследований в реакции биологической нейтрализации (РБН) сывороток крови вакцинированных.
Вакцина успешно применяется для иммунизации доноров с целью получения иммунной плазмы, используемой для производства специфического иммуноглобулина [4]. Это подтверждено наблюдением за донорами, вакцинированными как только вакциной ЭнцеВир (550 человек), так
и донорами, ранее вакцинированными неконцентрированной вакциной (80 человек).
Кроме того, выявленная длительность сохранения иммунитета при вакцинации взрослых вакциной ЭнцеВир служит предпосылкой для пересмотра существующих схем вакцинации. В настоящее время, в условиях новых экономических отношений как никогда ощутимо, что здоровье это не только социальная, но и экономическая категория. Профилактика с помощью вакцинации — реальный способ планирования как собственного здоровья, так и здоровья нации. Фармако-экономические аспекты вакцинации наглядно и однозначно говорят о преимуществах этой процедуры [15]. Сегодня охват населения вакцинацией в некоторых регионах, признанных природными очагами КЭ, не превышает 5-15%. При этом доказано, что достижение 50% уровня вакцинации населения вакциной ЭнцеВир способно обеспечить снижение заболеваемости КЭ в природных очагах практически в два раза, а увеличение уровня вакцинации до 80% — снизить заболеваемость в 4-5 раз и практически исключить смертность. Такой подход к профилактике КЭ можно отнести к стратегии, при которой дополнительные затраты оправданы дополнительными клиническими преимуществами, что приобретает особую социальную значимость.
Таким образом, деятельность и дальнейшее развитие НПО «Вирион» необходимо связывать с развитием производства и реализацией современных высококачественных иммунобиологических препаратов, каким является вакцина ЭнцеВир. Вакцина сегодня востребована как в России, так и в странах ближнего зарубежья, что требует значительного увеличения объемов ее производства.
THE HISTORY OF VACCINES PRODUCTION FOR PROFILACTICS OF TICK-BORNE ENCEPHALITIS IN TOMSK: FROM BRAIN VACCINE TO ENCEVIR VACCINE
G.P. Bilalova, L.D. Bistritskij, M.S. Vorobiova, I.V. Krasilnikov, Т.Е. Ilchenko, R.G. Soliynik, N.Ch. Stavitskaya
In the first time Tomsky Research Institute of Vaccines and Sera (since 1988 — SPC Virion) launched TBE vaccine production in 1954 using the Sofjin strain. The technology was modified and developed over time. In 1962 a technique on the base of a chicken embryo fibroblast (CEF) cell culture was adopted employing the Pan strain; in 1983 the company elaborated a cultivated vaccine with 205 far-eastern TBE virus strain. In 2001 SPC Virion set up the manufacturing of EnceVir® — a concentrated purified vaccine that meets modern international
Standards. Since EnceVir® Vaccine has been suc-cessfully used on the territory of the Russian Federa-tion.
Литература
1. Жукова, Н.Г. Клещевой энецефалит в Томской области / Н.Г. Жукова, Н. И. Команденко, Л.Е. Подоп-лекина. — Томск, 2002.
2. Карпова, М.Р. История изучения клещевого энцефалита в г. Томске / М.Р. Карпова, Н.Г. Жукова, H.H. Команденко // Бюл. сиб. мед. — 2006. — Т. 5. — Приложение 1. — С. 6-15.
3. Мендрина, Г.И. Томская школа микробиологов / Г.И. Мендрина. — Томск, 1986.
4. Билалова, Г.П. Вакцина клещевого энцефалита ЭнцеВир: иммунобиологические и клинические испытания: Автореф. дис.... канд. мед. наук / Г.П. Билалова.
- Уфа, 2003. - 150 с.
5. Быстрицкий, Л.Д. Бактериологический институт: Опыт столетия / Л.Д. Быстрицкий, М.А. Гаврилова.
- Томск, 2004. - 253 с.
6. Леонова, Г.Н. Вакцинопрофилактика клещевого энцефалита / Г.Н. Леонова, Е.В. Павленко, Н.В. Крылова. — Владивосток, 2006. — 100 с.
7. А. с. 669742 СССР. Штамм № 205 для приготовления вакцины против клещевого энцефалита / М.Н. Левина, М.С. Воробьева, Р.Н. Воробьева; кл. С 12 К 5/00, 1977.
8. Злобин, В.И. Клещевой энцефалит. Этиология, эпидемиология и специфическая профилактика / В.И. Злобин, О.З. Горин. — Новосибирск, 1996. — 177 с.
9. Ставицкая, Н.Х. Федеральному Государственному предприятию Научно-производственному объединению «Вирион» 95 лет / Н.Х. Ставицкая, С.К. Яков-
лев, Р.Г. Соляник // Сиб. мед. журн. — 2001. — 1 -С. 105-108.
10. Красильников, И.В. Разработка и внедрение; нологии очищенной вакцины клещевого энцефа. / И.В. Красильников, И.А. Мищенко, О.И. Ulapoi Актуальные вопросы разработки, производства и менения иммунобиологических и фармацевтиче< препаратов. — Томск, 2001. — С. 9-12.
11. Мищенко, И.А. Разработка технологии вакц клещевого энцефалита «ЭнцеВир». Изучение ее ф ко-химических и иммунобиологических свойств: А реф. дис. ... канд. мед. наук / И.А. Мищенко. — С.-2003. - 162 с.
12. Таточенко, В.К. Иммунопрофилактика-! / В.К. Таточенко, H.A. Озерецковский. — М., 200 174 с.
13. Сурова, Ю.Ю. Характеристика реактогенж безопасности и иммунологической эффектив» инактивированных вакцин клещевого энцефалита: тореф. дис.... канд. мед. наук / Ю.Ю. Сурова. — С.-2003.
14. Прохорова, О.Г. Сравнительная характери ка иммунологической активности вакцин клеще энцефалита, используемых в ходе компании ма вой вакцинации населения Свердловской облас-О.Г. Прохорова, В.В. Романенко, В.И. Злобин // i демиол. и вакцинопрофилакт. — 2006. — № 4 (29 С. 33-36.
15. Ильченко, Т.Э. Фармакоэкономический анал научно-методическое обоснование вакцинопрофи тики клещевого энцефалита как основа обеспеч« стратегии развития фармацевтического предпрю (на примере НПО «Вирион»): Автореф. дис. ... к фарм. наук / Т.Э. Ильченко. — Курск, 2005. — 175 с
