ИССЛЕДОВАНИЯ ЭПИЗООТИЧЕСКОЙ СИТУАЦИИ ПО ХЛАМИДИЙНЫМ ИНФЕКЦИЯМ СВИНЕЙ
В РЕПРОДУКТИВНЫХ ХОЗЯЙСТВАХ
В.М. Сапегин, А.М. Коваленко, М.А. Паюхина, К.В. Татарников
Аннотация. Изучена динамика развития хламидий-ных инфекций у свиноматок за шесть лет (20062011 гг.) по ретроспективным эпизоотологическим данным. Проведены ПЦР и ИФА исследования проб клинического материала и сыворотки крови, отобранных от поголовья свиней свинокомплекса «Шебекин-ская свинина» ООО «Белгранкорм» Белгородской области. Установлено, что за исследуемый период остается напряженной эпизоотическая ситуация в репродуктивных свиноводческих хозяйствах Белгородской области по хламидийным инфекциям свиней, а количество неблагополучных пунктов ежегодно увеличивается на 3-5%.
Ключевые слова: хламидиоз, антигены, вакцины.
Российская Федерация занимает 5 место по объему производства свинины в мире и 2 место по объему импорта свинины. Поголовье свиней в 2011 г. составило 18776,2 тыс., что на 0,4% (73,7 тыс. гол.) больше, чем в 2010 г. Свиноводство является наиболее динамично развивающейся отраслью сельского хозяйства.
К основным территориальным образованиям (по состоянию на октябрь 2011 г.), в которых сконцентрирована основная доля поголовья свиней, относятся: Белгородская область - 2,5 млн. голов (12,5% от общего показателя), Краснодарский край - 1,1 млн. голов (6%) и Ростовская область - более 4%. На долю Республики Татарстан, Республики Башкортостан, Алтайского края и Омской области приходится около 14% поголовья. Таким образом, в Белгородской области идет наиболее интенсивное развитие свиноводства.
Хламидийные инфекции свиней (лат. CЫamydiosis suum) - хронические инфекционные заболевания, вызывающие у свиноматок аборты во второй половине супоросности, мертворождения, рождение нежизнеспособного приплода; у хряков - уретриты; у молодняка -пневмонии, реже поражения центральной нервной системы, энтериты, артриты и перикардиты [3].
Восприимчивы к хламидийным инфекциям свиньи всех возрастов. Однако в первичных очагах инфекции в первую очередь заболевают беременные свиноматки и поросята первых дней жизни; в дальнейшем заражаются и заболевают животные других возрастов. Для хла-
мидийных инфекций характерна стационарность. На ферме инфекция поддерживается из года в год, что связано с длительным носительством возбудителя у переболевших животных и существованием природного резервуара в виде грызунов и птиц, поселяющихся на фермах. Степень инфицированности животных в неблагополучных хозяйствах зависит от концентрации поголовья. Она высокая в крупных свинокомплексах, что обусловливается многократным пассажированием возбудителя и усилением его вирулентности [3].
Основным источником возбудителя служат больные и переболевшие животные, которые выделяют возбудителей со всеми секретами и экскретами. Наибольшую опасность представляют абортированные плоды, плодные оболочки, воды [1]. Обильно выделяются хла-мидии со спермой зараженных хряков-производителей, причем это может продолжаться в течение 1 года и более. Кратковременно выделяются хламидии с молоком.
Степень напряженности эпизоотической ситуации связана и с санитарно-гигиеническими условиями, полноценностью кормления, отсутствием моциона животных [2]. При несоблюдении правил содержания болезнь протекает тяжелее, с большим охватом поголовья и значительными (до 90%) потерями новорожденных поросят. В летне-осенний период во время лагерного содержания свиней, когда обеспечиваются санитарные разрывы, заболеваемость значительно сокращается, однако энзоотии повторяются зимой, при неудовлетворительных зимних условиях содержания животных. Сложности по проведению оздоровительных противо-эпизоотических мероприятий, своевременному выявлению инфицированных животных с помощью диагностических тест-систем связаны с особенностями развития возбудителей хламидий.
Хламидии отличаются от других бактерий совершенно особым жизненным циклом. Их жизненный цикл существенно отличается от жизненного цикла бактерий. Он состоит из двух фаз — внутриклеточного развития и внеклеточного существования. В жизненном цикле хламидий присутствует две формы: элементарные тельца (ЭТ) и ретикулярные тельца (РТ).
Первая стадия инфекционного процесса начинается с прикрепления метаболически неактивного, но инфекционного, ЭТ к эпителиальной клетке хозяина. Как
правило, хламидии обладают тропизмом к реснитчатому цилиндрическому или кубическому эпителию (конъюнктива, уретра, эндоцервикс, эндометрий, маточные трубы).
Далее ЭТ проникает в эпителиальную клетку путем фагоцитоза, который оно же и индуцирует. Внутри клетки элементарное тельце хламидии существует в цитоплазматической вакуоли — фагосоме, где хламидии остаются весь жизненный цикл роста. Для своего размножения, роста и развития хламидии используют энергию АТФ клетки-хозяина. Защищаются от разрушения оболочкой цитоплазматической вакуоли — так называемой фагосомной мембраной. Поверхностные антигены хламидий ингибируют распад и лизис фаго-сомы.
Затем ЭТ превращается в фагосоме зараженной клетки в метаболически активное (способное к делению), но неинфекционное РТ. По размеру РТ в три раза больше ЭТ и обладают высокой метаболической активностью (способны к делению и размножению). РТ хла-мидий также не образуют своей энергии и живут за счет энергии клетки хозяина. Способностью к инфицированию РТ не обладают, не могут они выжить и вне клетки-хозяина.
РТ делятся бинарно всего 8-12 циклов деления, причем некоторые из дочерних РТ начинают уменьшаться в размерах, конденсируются, уплотняются, преобразуются в промежуточные тельца и далее трансформируются в новые ЭТ второго поколения. Вновь образованные ЭТ хламидий заполняют клетку.
В завершение жизненного цикла хламидий из ЭТ внутри клетки формируется микроколония хламидий -так называемые, хламидийные включения, состоящие из ретикулярных и элементарных телец. В клетке может проникнуть несколько ЭТ, то есть в цитоплазме клеток может образоваться несколько микроколоний хламидий. В дальнейшем ЭТ разрушают зараженную клетку, выходят в межклеточное пространство и заражают новые клетки. Весь цикл развития продолжается 48-72 часа и заканчивается образованием 200-1000 новых ЭТ. Передача хламидий от больных животных здоровым может осуществляться путем прямого контакта при случке свиноматок, а также алиментарным путем [3]. Основной путь заражения - внутриутробный, когда у инфицированных свиноматок хламидии проникают через плацентарный барьер. В дальнейшем свиньи, у которых зарегистрированы аборты или мертво-рождения, могут стать бесплодными, у них отмечают перегулы [2]. Больные хламидийными инфекциями хряки длительное время (до 20 мес.) выделяют возбудителей со спермой и становятся причиной возникновения новых вспышек хламидийных инфекций при завозе их в благополучные хозяйства [1].
Хламидийные инфекции наносят значительный экономический ущерб свиноводству. Поэтому необходимо постоянное мониторинговое изучение эпизоотической обстановки в Белгородской области по хлами-дийным инфекциям свиней.
В ходе исследований использовали ретроспективные эпизоотологические данные по динамике развития хламидийных инфекций свиноматок за последние шесть лет в период с 2006 по 2011 гг. При этом учитывали:
— уровень заболеваемости свиноматок хламидий-ными инфекциями,
— динамику выявления новых неблагополучных пунктов,
— клинические признаки, характерные для хлами-дийных инфекций свиней (гипофертильность, хронические эндометриты, аборты, рождение мертвых или нежизнеспособных поросят),
— частоту выявления свиноматок, больных хлами-дийными инфекциями, в сельскохозяйственных предприятиях методами ПЦР и ИФА.
Использовали данные литературы о пространственно-временной динамике интенсивности эпизоотического процесса при хламидийных инфекциях свиней.
Для проведения исследований использовали 920 проб клинического материала (конъюнктивальные и влагалищные смывы и сыворотка крови), полученного от свиноматок (10% всего поголовья свиней свинокомплекса) с клиническими признаками хламидийных инфекций (хронические эндометриты, аборты, перегулы) репродуктивный комплекс с. Маломихайловка «Шебе-кинская свинина» ООО «Белгранкорм». Проводили исследование сыворотки крови на наличие антител (иммуноглобулинов 1^0) к возбудителям хламидийных инфекций с помощью ИФА тест-системы ХламиБест-производства ЗАО Вектор-Бест. Влагалищные смывы исследовали на наличие ДНК хламидий с помощью ПЦР тест-системы Хла-ком производства ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора.
Для сравнительной оценки интенсивности эпизоотического процесса (уровня заболеваемости) на свинокомплексе «Шебекинская свинина» определяли индекс заболеваемости свиноматок (ИЗ) - отношение числа заболевших свиноматок к общему числу восприимчивых свиноматок (в %) - по формуле:
З
ИЗ = — х100%,
з С
сп
где З - количество заболевших свиноматок за год,
СП - среднегодовое поголовье свиноматок.
269
ИЗ =-Х100% = 29%
З 920
Для количественной оценки эпизоотической ситуации проведен расчёт коэффициента напряженности эпизоотической ситуации за 2006-2011 гг.
Значение коэффициента (НЭП) определяли по формуле:
Нэп = Д Х Иэ Х Ки ,
где Д - показатель доли неблагополучных пунктов (отношение числа неблагополучных по болезни пунктов к общему числу неблагополучных пунктов на определенной территории),
ИЭ - индекс эпизоотичности (отношение числа дней, месяцев, лет, в течение которых регистрировалась данная болезнь к числу дней, месяцев, лет наблюдения),
КИ - коэффициент интенсивности заболеваемости (отношение числа выявленных больных к числу исследованных, восприимчивых животных или число больных к стандартному показателю на 100, 1000, 10000, 100000 голов).
В результате проведенных исследований установлено, что эпизоотическая ситуация за исследуемый период по хламидийным инфекциям свиней остается напряженной. Зараженность свиноматок возбудителями хламидийных инфекций составляет 15-19% в разных хозяйствах.
В Ракитянском районе коэффициент напряженности эпизоотической ситуации за исследуемый период составлял 0,045±0,003, в Шебекинском районе -0,058±0,001, в Яковлевском районе - 0,038±0,002. В среднем по области коэффициент напряженности эпизоотической ситуации за исследуемый период увеличивался с 0,038 в 2006 г. до 0,058 в 2011 г.
Данные, представленные на рисунке 1, свидетельствуют о тенденции увеличения числа новых неблагополучных пунктов (с 17 до 24 при увеличении общего количества свиноводческих хозяйств с 131 до 157) в
разрезе районов Белгородской области и не отражают в полном объеме эпизоотическую ситуацию по хлами-дийным инфекциям.
131 135 141 146 155 157
[—I -
17 18 19 20 22 п 24 п
1 2 3 4 5 6
□ Кол-во пунктов ■ Кол-во неблагополучных пунктов
Рисунок 1 - Количество неблагополучных пунктов по хламидийной инфекции в Белгородской области в 20062011 гг.
При исследовании 920 проб клинического материала, отобранного от 10% поголовья свиней репродуктивного комплекса «Шебекинская свинина», методом ПЦР выявлено 282 положительные пробы, из которых методом ИФА выявлено только 55 положительных проб, что свидетельствует о низкой чувствительности методов ИФА в сравнении с молекулярно-генетическими методами ПЦР соответственно как 1:5.
За исследуемый период остается напряженной эпизоотическая ситуация в Белгородской области по хла-мидийным инфекциям свиней. Коэффициент напряженности эпизоотической ситуации за период 20062011 гг. Увеличивался с 0,038 до 0,058. Сохраняется незначительная тенденция к увеличению количества неблагополучных пунктов по хламидийным инфекциям. Проведенными нами исследованиями установлена
корреляционная зависимость методов ИФА и ПЦР как 1:5.
Количество неблагополучных пунктов ежегодно увеличивается на 1-3%, что свидетельствует о недостаточной эффективности проводимых противоэпизооти-ческих мероприятий. Низкая чувствительность ИФА тест-систем подтверждается большим количеством положительных проб в ПЦР-исследованиях, повышающих в пять раз выявляемость инфицированных особей. Считаем необходимым проведение ежегодных и ежеквартальных мониторинговых исследований с использованием ПЦР тест-систем всего маточного поголовья.
Список использованных источников
1 Структурно функциональные особенности жизненного цикла хламидий in vivo / Е.Е. Братина и др. // Вестник дерматологии. — 1995. — №6. — С. 18-21.
2 Коваленко А. М. Хламидиозы животных. - Белгород: БелГСХА, 2008. -С. 3-19.
3 Клиника, диагностика и лечение хламидийной инфекции: пособие для врачей / Л.В. Кудрявцева и др. — М., 2005. — 61 с.
Информация об авторах Коваленко Анатолий Михайлович, доктор ветеринарных наук, профессор кафедры инфекционной и инвазионной патологии ФГБОУ ВПО «Белгородская ГСХА», e-mail: [email protected]
Сапегин Виктор Михайлович, аспирант ФГБОУ ВПО «Белгородская ГСХА», e-mail: [email protected]
Паюхина Марина Александровна, кандидат биологических наук, преподаватель кафедры физиологии и химии ФГБОУ ВПО «Курская ГСХА» им. проф ИИ. Иванова. [email protected]
Татарников Кирилл Викторович, аспирант ФГБОУ ВПО «Курская ГСХА».