CC BY
60
ХИМИЧЕСКИЕ НАУКИ / CHEMICAL SCIENCES Оригинальная статья / Original article УДК 541.64:547.458.87 DOI: 10.21285/2227-2925-2016-6-4-28-33
ИССЛЕДОВАНИЕ ТОКСИЧНОСТИ АЗОТСОДЕРЖАЩЕГО ПОЛИМЕРА И НАНОКОМПОЗИТА С НАНОЧАСТИЦАМИ СЕРЕБРА
© А.А. Иванова®, М.А. Новиков ®®, Е.А. Титов ®®, А.С. Поздняков®, А.И. Емельянов®, Т.Г. Ермакова®, Л.М. Соседова®®, Г.Ф. Прозорова®
® Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского СО РАН ®® Восточно-Сибирский институт медико-экологических исследований
Радикальной сополимеризацией 1-винил-1,2,4-триазола с N-винилпирролидоном синтезированы новые водорастворимые функциональный сополимер и нанокомпозит с наночастицами серебра на его основе. Согласно данным атомно-абсорбционной спектроскопии содержание серебра в нанокомпо-зите составляет 8,0%. Наличие наноразмерной металлической фазы подтверждено данными УФ-спектроскопии и просвечивающей электронной микроскопии. Размеры наночастиц серебра составляют от 1 до 8 нм. Исследована токсичность синтезированного сополимера и серебросодержащего нанокомпозита и установлено, что при внутрижелудочном введении белым мышам летальная доза (LD50) составляет более 5000 мг*кг~\ Макроскопические исследования тканей органов животных не выявили каких-либо структурных изменений.
Ключевые слова: полимерный нанокомпозит, наночастицы серебра, 1-винил-1,2,4-триазол, N-винил-пирролидон, сополимер.
Формат цитирования: Иванова А.А., Новиков М.А., Титов Е.А., Поздняков А.С., Емельянов А.И., Ермакова Т.Г., Соседова Л.М., Прозорова Г.Ф. Исследование токсичности азотсодержащего полимера и нанокомпозита с наночастицами серебра // Известия вузов. Прикладная химия и биотехнология. 2016. Т. 6, N 4. С. 28-33. DOI: 10.21285/2227-2925-2016-6-4-28-33
TOXICITY STUDIES OF NITROGEN-CONTAINING POLYMER AND NANOCOMPOSITE WITH SILVER NANOPARTICLES
A.A. Ivanova®, M.A. Novikov®®, E.A. Titov®®, A.S. Pozdnyakov®, A.I. Emel'yanov®, T.G. Ermakova®, L.M. Sosedova®®, G.F. Prozorova®
® A.E. Favorsky Irkutsk Institute of Chemistry SB RAS ®® East-Siberian Institute of Medical and Ecological Researches
A new functional water-soluble copolymer and its silver-containing nanocomposite have been synthesized by radical copolymerization of 1-vinyl-1,2,4-triazole with N-vinylpyrrolidone. The silver content in the nanocomposite is 8.0% (atomic absorption spectroscopy data). The presence of nanosized metal phase was confirmed by UV spectroscopy and transmission electron microscopy. Dimensions of silver nanoparticles range from 1 to 8 nm. The toxicity studies of the synthesized copolymer and the silver nanocomposite have shown that upon intragastric introducing to white mice its lethal dose (LD50) is more than 5.000 mgxkg1. Macroscopic study of animal organ tissues does not reveal any structural changes.
Keywords: polymer nanocomposite, silver nanoparticles, 1-vinyl-1,2,4-triazole, N-vinylpyrrolidone, copolymer
For citation: Ivanova A.A., Novikov M.A., Titov E.A., Pozdnyakov A.S., Emel'yanov A.I., Ermakova T.G., Sosedova L.M., Prozorova G.F. Toxicity studies of nitrogen-containing polymer and nanocomposite with silver nanoparticles. Izvestiya Vuzov. Prikladnaya Khimiya i Biotekhnologiya [Proceedings of Universities. Applied Chemistry and Biotechnology]. 2016, vol. 6, no 4, pp. 28-33. DOI: 10.21285/2227-2925-2016-6-4-28-33 (in Russian)
ВВЕДЕНИЕ
Создание функциональных полимерных материалов с комплексом ценных свойств является актуальным и перспективным направле-
нием исследований, что обусловлено возрастающей потребностью современного развития высоких технологий и медицины. Интенсивно развиваются направления в современной ме-
дицине с использованием полимерных нано-композитов, содержащих в своем составе нано-размерные металлические частицы. Такие материалы находят широкое применение в качестве антибактериальных препаратов, систем направленной доставки контрастирующих и лекарственных средств, биосенсоров и других материалов медико-биологического назначения [1, 2]. Наиболее важными и необходимыми свойствами таких материалов являются: фармакологическая активность, гидрофильность, нетоксичность, биосовместимость, устойчивость к агрессивным средам, а также наличие функциональных групп, позволяющих связываться с различными веществами, в том числе лекарственными. Подобными свойствами в полной мере обладают полимеры 1-винил-1,2,4-триазола, которые являются перспективными, но малоизученными полимерами медицинского назначения [3-5]. Среди наночастиц различных металлов в борьбе с бактериями и вирусами наиболее эффективными являются наноча-стицы серебра, обладающие широким спектром антимикробного действия [6]. Области медицинского применения металлических наночастиц серебра с каждым годом расширяются, становясь все более инновационными и технологичными. Их используют в качестве компонентов раневых покрытий, хирургических масок, покрытий для медицинских приборов, различных микрофильтрационных мембран и наногелей [7-9]. Широкое медицинское распространение получили нанокомпозиты на основе полимеров Ы-винилпирролидона с наночастицами серебра (антисептики «Повиаргол»1, «Колларгол» и др.), которые применяются в травматологии и хирургии (гнойно-воспалительные раневые инфекции), комбустологии (инфицированные ожоги различной степени), отолорингологии (риниты, гаймориты, фарингиты, отиты и т.д.), офтальмологии (гнойные коньюктивиты, кератит) и т.д. [10-11].
Целью настоящей работы является исследование токсичности водорастворимых сополимера 1-винил-1,2,4-триазола с Ы-винилпир-ролидоном и полимерного нанокомпозита с на-ночастицами серебра на его основе.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
В качестве исходных соединений применяли 1-винил-1,2,4-триазол, синтезированный и очищенный по методике [12]; ^винилпирроли-дон и нитрат серебра фирмы Sigma-Aldrich ис-
1 Копейкин В.В., Родионов П.П. Опыт клинического изучения и применения новейшего отечственного серебросодержащего бактерицидного препарата повиаргол: справ.-инф. пособ. для врачей / Под ред. Е.Ф. Панарина. СПб.: Институт высокомолекулярных соединений РАН, 1998. С. 25.
пользовали без дополнительной очистки; ДМФА, ацетон, этиловый спирт и инициатор азобис-(изобутиронитрил) перегоняли и очищали перед использованием в соответствии с общепринятыми методиками, их качество соответствовало справочным данным.
Элементный анализ выполняли на анализаторе Flash EA 1112 Series. ИК-спектры синтезированных образцов записывали на спектрометре FT-IR Bruker Vertex 70 c микроприставкой неполного внутреннего отражения. УФ-спектры снимали на спектрофотометре Perkin Elmer Lambda 35 UV/VIS. Содержание серебра в нанокомпозите определяли методом атомно-абсорбционного анализа на спектрометре Perkin Elmer модель AAnalyst 200. Микрофотографии получали на просвечивающем электронном микроскопе Leo 906E.
Синтез сополимера. Сополимеризацию 1-винил-1,2,4-триазола с N-винилпирролидоном осуществляли в растворе ДМФА в условиях свободнорадикального инициирования под действием азобис(изобутиронитрила) (АИБН) (2,0 х 10-2 мольхл-1) в запаянных ампулах в атмосфере аргона при 60 оС. Реакцию проводили в течение 1,5 ч при начальном соотношении в исходной реакционной среде 1-винил-1,2,4-триазола и N-винилпирролидона 70 :30 соответственно. Сополимер выделяли и очищали двукратным переосаждением из водного раствора в смесь этанола с ацетоном (1 : 2), сушили в вакууме до постоянной массы при 50 оС. Выход сополимера составил 74%.
Синтез нанокомпозита. К полученному сополимеру (10 ммоль), растворенному в биди-стиллированной воде, добавляли водный раствор AgNO3 (0,5 ммоль), интенсивно перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре, затем добавляли NaBH4 (0,5 ммоль) и продолжали перемешивать при комнатной температуре 6 ч. Далее реакционную смесь подвергали диализу в течение 72 ч через мембрану с размером пор 5 КДа (MFPI, Cellu Sep H1). Композит выделяли лиофильной сушкой. В результате синтеза получен водорастворимый нанокомпозит в виде темно-коричневого порошка с выходом 81%.
Определение токсичности сополимера и нанокомпозита с наночастицами серебра на его основе. Исследования проводили на 36 беспородных белых мышах (18 самцах и 18 самках) с массой 18-20 г. Животные были распределены на группы по 12 особей (6 самцов и 6 самок). Животные первой группы получали сополимер, животные второй - серебросодержа-щий нанокомпозит, препаративная доза составляла 5000 мгхкг-1 в 0,5 мл физиологического раствора. Животные третьей контрольной группы получали в эквивалентных дозах физиологический раствор. Животные распределялись по
ИЗВЕСТИЯ ВУЗОВ. ПРИКЛАДНАЯ ХИМИЯ И БИОТЕХНОЛОГИЯ Том 6 N 4 2016
Схема
/
N,
N
N
+
АИБН
ДМФА, 60 °С, 1,5 ч
группам методом рандомизации. В качестве критериев приемлемости рандомизации считали отсутствие внешних признаков заболеваний и гомогенность по весу тела. Введение сополимера и серебросодержащего нанокомпозита белым мышам осуществляли до кормления двукратно внутрижелудочно при помощи зонда. Длительность наблюдений за подопытными животными после введения препаратов составляла 14 дней. Работа с лабораторными животными проводилась согласно протоколу исследований в соответствии с Женевской конвенцией 1985 г. о международных принципах биомедицинских исследований с использованием животных и Хельсинкской декларацией 2000 г. о гуманном отношении к животным.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
В качестве полимерной матрицы для стабилизации металлических наночастиц использовали водорастворимый сополимер 1 -винил-1,2,4-триазола с N-винилпирролидоном, синтезированный методом радикальной сополимери-зации в присутствии азобис(изобутиронитрила) в среде ДМФА (схема).
Состав и структуру сополимера устанавливали с помощью данных элементного анализа, потенциометрического титрования, методов ИК-и ЯМР-спектроскопии. Содержание триазоль-ных звеньев в сополимере составляет 49 мол%,
пирролидоновых - 51 мол%.
Синтез нанокомпозита осуществляли путем восстановления ионов серебра из нитрата серебра в водной среде в присутствии полученного сополимера с использованием боргидрида натрия в качестве восстановителя. Выделенный и очищенный полимерный нанокомпозит хорошо растворим в воде и диполярных органических растворителях (ДМСО и ДМФА). По данным атомно-абсорбционной спектроскопии содержание серебра в нанокомпозите составляет 8,0%. В спектре оптического поглощения водного раствора полученного нанокомпозита, в отличие от водного раствора сополимера, появляется характерная полоса плазмонного поглощения электронов проводимости металлических наночастиц серебра с максимумом при 411 нм (рис. 1).
Согласно данным просвечивающей электронной микроскопии синтезированный нано-композит состоит из изолированных наночастиц серебра преимущественно сферической формы. Характер распределения наночастиц в объеме полимерной матрицы равномерен (рис. 2, а). Размеры наночастиц составляют от 1 до 8 нм, с преимущественным содержанием фракций наночастиц 2-6 нм (97%) (рис. 2, б).
При исследовании токсичности сополимера 1-винил-1,2,4-триазола с N-винилпирролидоном и нанокомпозита с наночастицами серебра на
Рис. 1. УФ-спектры поглощения водных растворов сополимера (1) и полимерного нанокомпозита (2)
»"' Диаметр частицы, нм
Рис. 2. Электронная микрофотография (а) и диаграмма распределения наночастиц серебра по размерам в нанокомпозите (б)
его основе на беспородных белых мышах установлено, что введение исследуемых соединений в препаративной дозе 5000 мг*кг-1 в 0,5 мл физиологического раствора клиническая картина после введения субстанции не отличалась от нормальной. Каких-либо отклонений в поведении и потреблении корма не выявлено. На протяжении всего периода наблюдения (14 дней) общее состояние, внешний вид и поведение животных всех экспериментальных групп соответствовало обычному. Различия в массе, потреблении пищи и воды между опытными и контрольными животными отсутствовали. Также не выявлено половых различий в чувствительности к исследуемым субстанциям при данном способе введения. При вскрытии мышей, умерщвленных в конце эксперимента, не выявлено никаких различий при макроскопическом обследовании между контрольной и экспериментальными группами жи-
Благодарность: Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (грант № 1503-08295). Основные результаты получены с использованием материально-технической базы Байкальского аналитического центра коллективного пользования СО РАН.
БИБЛИОГР
1. Tiwari. Recent Developments in Bio-Nano-composites for Biomedical Applications. New York: Nova Science Publishers Inc., 2011. 511 p.
2. Broz P. Polymer-Based Nanostructures: Medical Applications. Cambridge: RSC Publishing, 2010. 388 p.
3. Поздняков А.С., Емельянов А.И., Ермакова Т.Г., Прозорова Г.Ф. Функциональные полимерные нанокомпозиты, содержащие триазоль-ные и карбоксильные группы // Высокомолекулярные соединения. 2014. Сер. Б. Т. 56. С. 226-235.
4. Прозорова Г.Ф., Ермакова Т.Г., Кузнецова
вотных. Все внутренние органы были без изменений, кровоизлияний также не наблюдалось.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом установлено, что новые водорастворимые сополимер 1-винил-1,2,4-триа-зола с N-винилпирролидоном и серебросодер-жащий нанокомпозит на его основе являются нетоксичными соединениями (LD50 > 5000 мг*кг1) и, согласно результатам сравнительных исследований, не вызывают нарушений в поведении и внешнем виде белых мышей, а также структурных изменений внутренних органов при макроскопическом обследовании. Полученные водорастворимые нанокомпозиты перспективны для разработки эффективных препаратов медицинского назначения с широким спектром антимикробного действия.
Acknowledgement: The work was supported by the grant from the Russian Foundation of Basic Research (№ 15-03-08295). The main results obtained using facilities of Baikal analytic center of collective users.
ЕСКИЙ СПИСОК
Н.П., Поздняков А.С., Емельянов А.И., Трофимов Б.А. Сополимеры 1-винил-1,2,4-триазола с акриловой кислотой // ДАН. 2014. Т. 454. С. 545-547.
5. Прозорова Г.Ф., Поздняков А.С., Емельянов А.И., Коржова С.А., Ермакова Т.Г., Трофимов Б.А. Водорастворимые нанокомпозиты серебра с сополимером 1-винил-1,2,4-триазола // ДАН. 2013. Т. 449. С. 172-173.
6. Huh A.J., Kwon Y.J. «Nanoantibiotics»: A new paradigm for treating infectious diseases using nanomaterials in the antibiotics resistant era // Journal of Controlled Release. 2011. Vol. 156. P. 128-145.
DOI: 10.1016/j.jconrel.2011.07.002
7. Kim J.S., Kuk E., Yu K.N., Kim J.-H., Park S.J., Lee H.J., Kim S.H., Park Y.K., Park Y.H., Hwang C.-Y., Kim Y.-K., Lee Y.-S., Jeong D. H., Cho M.-H. Antimicrobial effects of silver nanoparticles // Nano-medicine: Nanotechnology, Biology and Medicine. 2007. Vol. 3. P. 95-101. DOI: 10.1016j.nano.2006.12.001
8. Rai M., Yadav A., Gade A. Silver nanoparti-cles as a new generation of antimicrobials // Biotechnology Advances. 2009. Vol. 27. P. 76-83. DOI: j.biotechadv.2008.09.002
9. Mecha C.A., Pillay V.L. Development and evaluation of woven fabric microfiltration membranes impregnated with silver nanoparticles for potable water treatment // Journal of Membrane Science. 2014.
Vol. 458. P. 149-156. DOI: 10.1016/j.memsci.2014.02.001
10. Пат. № 2128047, Российская Федерация, МПК A61K31/79, A61K33/38. Водорастворимая серебросодержащая бактерицидная композиция и способ ее получения / Г.Е. Афиногенов, В.В. Копейкин, Е.Ф. Панарин; патентообладатель Г.Е. Афиногенов; заявлено: 1995-06-21; опубликовано: 27.03.1999.
11. Gorbunova M.N., Kisel'kov D.M., Nebogatikov V.O. New water-soluble silver nano-composites // Russian Journal of Applied Chemistry. 2015. Vol. 88, N 2. P. 320-324.
12. Ермакова Т.Г., Татарова Л.А., Кузнецова Н.П. Винилирование 1,2,4-триазола // Журнал общей химии. 1997. Т. 67, N. 5. C. 859-861.
1. Tiwari. Recent Developments in Bio-Nano-composites for Biomedical Applications. New York, Nova Science Publishers Inc., 2011, 511 p.
2. Broz P. Polymer-Based Nanostructures: Medical Applications. Cambridge, RSC Publishing, 2010, 388 p.
3. Pozdnyakov A.S., Emel'yanov A.I., Erma-kova T.G., Prozorova G.F. Functional polymer nano-composites containing triazole and carboxyl groups. Vysokomolekulyarnye soedineniya [Polymer science Ser. B (Int. Ed.)]. 2014, vol. 56, pp. 226-235. DOI: 10.1134/S1560090414020122
4. Prozorova G.F., Ermakova T.G., Kuznetsova N.P., Pozdnyakov A.S., Emel'yanov A.I., Trofimov B.A. Copolymers of 1-vinyl-1,2,4-triazole with acrylic acid. Dolkady Akademii Nauk [Doklady Chemistry (Int. Ed.)]. 2014, vol. 454, pp. 545-547. DOI: 10.1134/S0012500814020050
5. Prozorova G.F., Pozdnyakov A.S., Emel'yanov A.I., Korzhova S.A., Ermakova T.G., Trofimov B.A. Water-soluble silver nanocomposites with 1 -Vinyl-1,2,4-triazole copolymer. Dolkady Akademii Nauk [Doklady Chemistry (Int. Ed.)]. 2013, vol. 449, pp. 172-173. DOI: 10.1134/S0012500813030051
6. Huh A.J., Kwon Y.J. «Nanoantibiotics»: A new paradigm for treating infectious diseases using nanomaterials in the antibiotics resistant era. Journal of Controlled Release. 2011, vol. 156, pp. 128-145. DOI: 10.1016/j.jconrel.2011.07.002
Критерии авторства
Иванова А.А., Новиков М.А., Титов Е.А., Поздняков А.С., Емельянов А.И., Ермакова Т.Г., Соседо-ва Л.М., Прозорова Г.Ф. выполнили экспериментальную работу, на основании полученных результатов провели обобщение и написали рукопись. Иванова А.А., Новиков М.А., Титов Е.А., Поздняков А.С., Емельянов А.И., Ермакова Т.Г., Соседова Л.М., Прозорова Г.Ф. имеют на статью авторские права и несут равную ответственность за плагиат.
7. Kim J.S., Kuk E., Yu K.N., Kim J.-H., Park S.J., Lee H.J., Kim S.H., Park Y.K., Park Y.H., Hwang C.-Y., Kim Y.-K., Lee Y.-S., Jeong D. H., Cho M.-H. Antimicrobial effects of silver nanoparticles. Nano-medicine: Nanotechnology, Biology and Medicine. 2007, vol. 3, pp. 95-101. DOI: 10.1016j.nano.2006.12.001
8. Rai M., Yadav A., Gade A. Silver nanoparti-cles as a new generation of antimicrobials. Biotechnology Advances. 2009, vol. 27, pp. 76-83. DOI: j.biotechadv.2008.09.002
9. Mecha C.A., Pillay V.L. Development and evaluation of woven fabric microfiltration membranes impregnated with silver nanoparticles for potable water treatment. Journal of Membrane Science. 2014, vol. 458, pp. 149-156. DOI: 10.1016/j.memsci.2014.02.001
10. Afinogenov G.E., Kopeikin V.V., Panarin E.F. Vodorastvorimaya serebrosoderzhashchaya bakteritsidnaya kompozitsiya i sposob ee polucheniya [The water-soluble silver-containing composition and method for its preparation]. Patent RF, no. 2128047, 1999. (in Russian)
11. Gorbunova M.N., Kisel'kov D.M., Nebogatikov V.O. New water-soluble silver nano-composites. Russian Journal of Applied Chemistry. 2015, vol. 88, no. 2, pp. 320-324.
12. Ermakova T.G., Tatarova L.A., Kuznetsova N.P. Vinylation of 1,2,4-Triazole. Zhurnal obshchei khimii [Russian Journal of General Chemistry. (Int. Ed.)]. 1997, vol. 67, no. 5, pp. 859-861.
Contribution
Ivanova A.A., Novikov M.A., Titov E.A., Pozdnyakov A.S., Emel'yanov A.I., Ermakova T.G., Sose-dova L.M., Prozorova G.F. carried out the experimental work, on the basis of the results summarized the material and wrote the manuscript. Ivanova A.A., Novikov M.A., Titov E.A., Pozdnyakov A.S., Emel'yanov A.I., Ermakova T.G., Sosedova L.M., Prozorova G.F. have equal author's rights and bear equal responsibility for plagiarism.
Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ Принадлежность к организации
Анастасия А. Иванова
Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского СО РАН 664033, Россия, г. Иркутск, ул. Фаворского, 1 Аспирант
^апоуаАА[email protected] Михаил А. Новиков
Восточно-Сибирский институт медико-экологических исследований
665827, Иркутская область, г. Ангарск, 12а м/н, д. 3. М.н.с.
[email protected] Евгений А. Титов
Восточно-Сибирский институт медико-экологических исследований
665827, Иркутская область, г. Ангарск, 12а м/н, д. 3.
К.б.н., с.н.с.
Александр С. Поздняков
Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского СО РАН 664033, Россия, г. Иркутск, ул. Фаворского, 1 К.х.н., с.н.с.
[email protected] Артём И. Емельянов
Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского СО РАН 664033, Россия, г. Иркутск, ул. Фаворского, 1 К.х.н., м.н.с. [email protected]
Тамара Г. Ермакова
Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского СО РАН 664033, Россия, г. Иркутск, ул. Фаворского, 1 К.х.н., с.н.с. ermakova@irioch .irk.ru
Лариса М. Соседова
Восточно-Сибирский институт медико-экологических исследований
665827, Иркутская область, г. Ангарск, 12а м/н, д. 3.
Д.м.н., профессор
Галина Ф. Прозорова
Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского СО РАН 664033, Россия, г. Иркутск, ул. Фаворского, 1 Д.х.н., зав. лабораторией. prozorova@irioch. irk.ru
Поступила 02.11.2016
Conflict of interest
The authors declare no conflict of interests regarding the publication of this article.
AUTHORS' INDEX Affiliations
Anastasiya A. Ivanova
A.E. Favorsky Irkutsk Institute of Chemistry SB RAS 1, Favorsky St., Irkutsk, 664033, Russia Postgraduate student [email protected]
Mikhail A. Novikov
East-Siberian Institute of Medical and Ecological Researches
3, 12A mikrodistrict, Angarsk, 665827, Irkutsk region, Russia
Junior researcher [email protected]
Evgenii A. Titov
East-Siberian Institute of Medical and Ecological Researches
3, 12A mikrodistrict, Angarsk, 665827, Irkutsk region, Russia
PhD of Biology, Senior researcher [email protected]
Aleksandr S. Pozdnyakov
A.E. Favorsky Irkutsk Institute of Chemistry SB RAS 1, Favorsky St., Irkutsk, 664033, Russia PhD of Chemistry, Senior researcher [email protected]
Artem I. Emel'yanov
A.E. Favorsky Irkutsk Institute of Chemistry SB RAS 1, Favorsky St., Irkutsk, 664033, Russia PhD of Chemistry, Junior researcher [email protected]
Tamara G Ermakova
A.E. Favorsky Irkutsk Institute of Chemistry SB RAS 1, Favorsky St., Irkutsk, 664033, Russia PhD of Chemistry, Senior researcher [email protected]
Larisa M. Sosedova
East-Siberian Institute of Medical and Ecological Researches
3, 12A mikrodistrict, Angarsk, 665827, Irkutsk region, Russia
Doctor of Medicine, Professor [email protected]
Galina F. Prozorova
A.E. Favorsky Irkutsk Institute of Chemistry SB RAS 1, Favorsky St., Irkutsk, 664033, Russia Doctor of Chemistry, Head of the Laboratory prozorova@irioch. irk.ru
Received 02.11.2016
