ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОТИВОВИРУСНОГО ДЕЙСТВИЯ КАПЕЛЬ ПЛЕТНЕВА No1В (СЕЛЕНИТА) НА ВИРУСЫ ГРИППА А И В Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2018 - V. 25, № 4 - P. 77-82

УДК: 615.322 Б01: 10.24411/1609-2163-2018-16259

ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОТИВОВИРУСНОГО ДЕЙСТВИЯ КАПЕЛЬ ПЛЕТНЕВА №1В (СЕЛЕНИТА) НА

ВИРУСЫ ГРИППА А И В

В.В. ПЛЕТНЕВ, С.С. ЯМНИКОВА

Институт вирусологии им. Д.И. Ивановского ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, ул. Гамалеи, д. 16, г. Москва, 123098, Россия, e-mail: [email protected]

Аннотация. При изучении противовирусного действия капель Плетнева №1В на вирусы гриппа А и В установлено, что препарат при различных схемах введения проявляет выраженную противовирусную активность в отношении вирусов гриппа А/Н5, A/H3 и В. Капли Плетнева №1В обладают выраженными вирулицидными свойствами. При исследовании противовирусной активности КП №1В было установлено, что цитотоксическая концентрация препарата для вирусов гриппа А и В в культуре МДСК составляет 120 мкг/мл. КП №1В в концентрации 3,0 мкг/мл обладают противовирусной активностью в культуре клеток МДСК в отношении вируса гриппа человека А (А/Калифорния/7/04 (H3N2)) при внесении препарата за 2 ч до инфицирования клеток. КП №1В в концентрации 6,0 мкг/мл оказывают противовирусную активность в культуре клеток МДСК в отношении вируса гриппа человека А (А/Калифорния/7/04 (H3N2)) при внесении препарата одномоментно с инфицированием клеток. КП №1В в концентрации 19,5 мкг/мл проявляют противовирусную активность в культуре клеток МДСК в отношении вируса гриппа человека А (А/Калифорния/7/04 (H3N2)) при внесении препарата через 30 мин после инфицирования клеток. КП №1В в концентрации 60 мкг/мл обладают противовирусной активностью в культуре клеток МДСК в отношении вируса гриппа человека В при внесении препарата в культуру за 2 ч до инфицирования клеток. Показано также, что КП №1В в концентрации 80 мкг/мл ингибируют репликацию вирусов гриппа А/Н5 (A/утка/Приморье/2633/01(H5N3), А/утка/Приморье/2621/01 (H5N2) и A/утка/Алтай/1285/91(H5N3)) в культуре клеток МДСК, снижая инфекционный титр вируса на 2,0-2,5 lg ТЦИД50/мл. В результате проведенных исследований установлено, что КП №1В обладают выраженным противовирусным действием в экспериментах in vitro в отношении изученных патогенных для человека и животных вирусов. Эффективность противовирусного действия КП №1В зависит от способа его применения (профилактически до заражения, с лечебной целью), концентрации и длительности экспозиции.

Ключевые слова: вирусы гриппа А и В, капли Плетнева №1В, селенит.

Введение. Грипп занимает одно из первых мест среди инфекционных болезней по количеству биологических видов, вовлекаемых в инфекционный процесс. Непредсказуемость и не контролируемость гриппозной инфекции связана с изменчивостью возбудителя в естественных условиях. Ситуация осложняется возможностью формирования нового патогенного реассортанта между вирусами гриппа птиц и эпидемическими вирусами гриппа человека с другой стороны. Отсутствие средств специфической профилактики из-за. невозможности приготовления вакцины традиционным способом на куриных эмбрионах в связи с патоген-ностью вируса А/Н5N1 для кур и куриных эмбрионов, ограниченный спектр противовирусных препаратов, делают актуальной проблему поиска препаратов, обладающих противовирусной активностью на вирусы гриппа.

Задачей настоящего исследования явилось изучение противовирусного действия капель Плетнева №1В (КП №1В) в отношении текущих эпидемических и возможных пандемических вирусов гриппа.

Цель исследования - экспериментальное изучение фармакологических свойств лекарственного растительного препарата «Капли Плетнева №1В», его противовирусное действие на вирусы гриппа А и В.

Материалы и методы исследования. Для проведения исследований использовали комплексный растительный препарат КП №1В, запатентованный в России. Для его получения используются листья крапивы двудомной -Folia Urticae dioicae, семейство крапивные -Urticaceae. Препарат представляет собой прозрачную жидкость зеленого цвета и имеет в

своем составе p-каротин, витамины Р, Е, галловую кислоту и хлорофилл [2].

Исследование противовирусного действия препарата №1В на вирусы гриппа А и В проведено в лаборатории отдела экологии вирусов (руководитель отдела д.б.н., С.С. Ямникова) Института вирусологии им. Д.И. Ивановского ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России в соответствии с требованиями Руководства по проведению доклинических исследований лекарственных средств от 2012 года [1].

Для проведения данных исследований использовали эпидемические вирусы гриппа человека А/НШ1, А/Н3Ы2 и В, а также штаммы вирусов А/Н5Ы2, А/Н5Ы3, выделенные от диких птиц на границе с Китаем, но близкородственные по антигенной и первичной структуре патогенным вариантам, обусловившим инфицирование людей и эпизоотии среди кур 1997-2003 гг. в странах Юго-Восточной Азии, полученные из коллекции штаммов вирусов гриппа Института вирусологии им. Д.И. Ивановского ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России.

Противовирусную активность КП №1В в отношении вирусов гриппа А и В учитывали по снижению инфекционного титра вируса в культуре перевиваемых клеток почки спаниеля (МДСК) и снижению уровня подавления оптической плотности (ОП450) в тест-системе на основе ИФА в многоцикловых опытах.

Оценка вирулицидного действия КП №1В проведена на интактных вирусах эпидемических штаммов вируса гриппа А и В. Вируссо-держащую жидкость в отсутствие и в присутствии КП №1В инкубировали в течение 1 и 17 ч при температуре 37° С, после чего определяли инфекционный титр путём заражения куриных эмбрионов или культуры клеток МДСК.

Перед инфицированием культуру клеток МДСК 2 раза промывали средой без сыворотки, для снижения возможной неспецифической реакции. Инфицирование проводили 10-кратными разведениями вирусов на питательной среде Игла МЕМ с добавлением трипсина (Sigma) в концентрации 2 мкг/мл. Адсорбцию вируса проводили в течение 40 мин при температуре 37° С.

Не сорбировавшийся вирус удаляли 3-кратной промывкой средой без сыворотки. Контроль вирусов и клеток культивировали в этой же среде. Далее планшеты инкубировали в термостате с СО2 в течение 72 ч при температуре 37°С. Результаты учитывали по цитопатиче-

скому действию (ЦПД) вируса на культуру клеток и определению гемагглютинина в надоса-дочной жидкости в реакции гемагглютинации (РГА) через 72 ч.

Результаты и их обсуждение. Изучение цитотоксического действия препарата №1В на вирусы гриппа А и В проведено на МДСК, монослой которых культивировали в присутствии КП №1В в течение 48-72 ч при температуре 37° С. Затем клетки 2 раза промывали фосфатным буфером, окрашивали 0,5% раствором нейтральро-та в концентрации 33 мг/мл. После 3-х часового инкубирования при 37°С раствор красителя удаляли, затем его экстрагировали 50% спиртовым раствором ЫаНР04 из живых окрашенных клеток. При определении ОП, концентрацию препарата, ингибирующую значение ОП на 50% по сравнению с клеточным контролем, приняли за 50% цитотоксическую дозу (ЦТД50).

Результаты изучения цитотоксического действия препарата №1В, проведенного в культуре клеток МДСК, используемых при работе с вирусами гриппа, представлены в табл. 1.

Таблица 1

Результаты изучения цитотоксического действия КП №1В в культуре клеток МДСК

Таким образом, при визуальной оценке состояния контрольных не инфицированных клеток, культивируемых с испытуемым препаратом в течение 72 ч, установлено, что ЦТД50 для КП №1В составляет 120 мкг/мл. Результаты цитотоксического действия КП №1В при использовании окраски клеток нейтральротом показали, что препарат ингибирует значение ОП-525 на 50% по сравнению с клеточным контролем при концентрации 120 мкг/мл.

Для изучения влияния КП №1В на репликацию вирусов гриппа А человека был использован эталонный эпидемический штамм: А/Калифорния/7/04 (ШЫ2). Противовирусную активность КП №1В в отношении вируса гриппа А учитывали по снижению инфекционного титра вируса в культуре клеток МДСК и снижению уровня подавления оптической плотности (ОП450) в тест-системе на основе ИФА в многоцикловых опытах.

Препараты ЦТД50 ( мкг/мл/)

Метод визуального определения Метод с использованием нейтральрота

КП №1В 120 120

КП №1В в концентрации 3,0 мкг/мл эффективно ингибировали репликацию вируса при внесении препарата за 2 ч до инфицирования, при этом накопление вируса гриппа Ä(H3N2) снижалось на 100%. Внесение КП №1В одномоментно с инфицированием в концентрации 6,0 мкг/мл и через 30 мин после инфицирования в концентрации 19,5 мкг/мл сопровождалось снижением накопления вируса гриппа Ä(H3N2) на 57% и 60% соответственно, при более низких концентрациях КП №1В процент ингибирова-ния снижался или отсутствовал. Оптимальной оказалась схема предварительного введения КП №1 В.

МИК50 КП №1В для вируса гриппа A(H3N2) при различных режимах добавления препарата представлена в табл. 2 и составила 3,0 мкг/мл за 2 ч до инфицирования, 6,0 мкг/мл одновременно с инфицированием и 19,5 мкг/мл через 30 мин после инфицирования культуры клеток МДСК.

Таблица 2

Минимальная ингибирующая концентрация (МИК50) препарата №1В для вируса гриппа А человека при различных режимах инфицирования

Таким образом, КП №1В обладают противовирусной активностью в культуре клеток МДСК в отношении вируса гриппа человека А/Н3N2 при внесении препарата в концентрации 3,0 мкг/мл в культуру за 2 ч до инфицирования клеток, при одномоментном внесении препарата в концентрации 6,0 мкг/мл в культуру, при внесении препарата в концентрации 19,5 мкг/мл в культуру через 30 мин после инфицирования клеток.

Для изучения влияния КП №1В на репликацию вирусов гриппа В человека был использован эталонный эпидемический штамм: В/Гонконг/330/01. Противовирусную активность КП №1В в отношении вируса гриппа В учитывали по снижению инфекционного титра вируса в культуре клеток МДСК и снижению уровня подавления ОП450 в тест-системе на основе ИФА в многоцикловых опытах.

КП №1В в концентрации 60 мкг/мл эффективно (100%) ингибировали репликацию вируса гриппа В при введении препарата за 2 ч до инфицирования культуры клеток МДСК. Другие схемы введения КП №1В не выявили выраженного противовирусного эффекта.

МИК50 КП №1В для вируса гриппа В при различных режимах добавления препарата составила более 60 мкг/мл за 2 ч до инфицирования, одномоментно с инфицированием и через 30 мин после инфицирования культуры клеток МДСК (табл. 3).

Таблица 3

Минимальная ингибирующая концентрация (МИК50) КП №1В для вируса гриппа В человека при различных режимах инфицирования

Таким образом, КП №1В в концентрации 60 мкг/мл обладают противовирусной активностью в культуре клеток МДСК в отношении вируса гриппа человека В при внесении препарата в культуру за 2 ч до инфицирования клеток.

Изучение противовирусной активности и действия КП №1В на репликацию вируса гриппа А/Н5: А/утка/Приморье/2633/01(Н5М3), А/утка/Приморье/ 2621/01(H5N2) и A/утка/ Ал-тай/1285/91(Н5^) проведено в культуре клеток МДСК.

Изучение противовирусной активности КП №1В in vitro проведено с использованием двух методов: 1) по влиянию на развитие вирусин-дуцированного патологического процесса; 2) по влиянию на величину инфекционного титра вируса.

Результаты изучения влияния различных концентраций КП №1В на репликацию вирусов гриппа А/Н5 представлены в табл. 4. КП №1В в концентрации 80 мкг/мл ингибировали репликацию всех трёх вирусов гриппа птиц А/Н5, снижая инфекционный титр вируса на 2,0-2,5 lg ТЦИД50/мл. Противовирусное действие КП №1В выражалось в снижении инфекционного титра вируса гриппа птиц на 2,0-2,5 lg ТЦИД50/мл в культуре клеток МДСК во всех трёх случаях.

Далее было изучено действие различных концентраций КП №1В на репликацию вирусов

Режимы инфицирования ткани культуры клеток МДСК МИК50 Вирус гриппа A(H3N2)

Внесение препарата за 2 ч до инфицирования КП №1В, 3,0 мкг/мл

Внесение препарата одно-моментно с инфицированием КП №1В, 6,0 мкг/мл

Внесение препарата через 30 мин после инфицирования КП №1В, 19,5 мкг/мл

Режимы инфицирования ткани культуры клеток МДСК МИК50 Вирус гриппа В

Внесение препарата за 2 ч до инфицирования КП №1В, >60,0 мкг/мл

Внесение препарата одно-моментно с инфицированием КП №1В, >60,0 мкг/мл

Внесение препарата через 30 мин после инфицирования КП №1В, >60,0 мкг/мл

гриппа А/Н5 птиц при одинаковой множественности заражения культуры клеток в тест-системе на основе ИФА. Активность КП №1В в отношении традиционного лабораторного штамма вируса гриппа человека А/А1сЫ/68(Н3Ы2) исследована при тех же условиях с целью выяснения специфичности его действия на различные подтипы вирусы гриппа, то есть различающихся по антигенной структуре поверхностных белков.

Полученные результаты, представленные графически на рис. 1, демонстрируют зависимость действия препарата от концентрации. КП №1В ингибировали репликацию всех трёх штаммов вируса гриппа А/Н5 в системе ИФА, причём ингибирующий эффект препарата находился в прямой зависимости от его концентрации.

120

а -<-1-1-\-1—

1,6 75 15 3t> 00

КонпсЕпраши препарата >13 (isrfus)

Рис. 1. Влияние КП №1В на репликацию вирусов гриппа А/Н5, выделенных от птиц в культуре клеток МДСК.

МИК50 КП №1В для ВГ А/утка/Алтай/ 1285/91(Н5№3), А/утка/Приморье/2621/01 (Н5Ы2) и А/утка/ Приморье/2633/01(Н5№3) представлена в табл. 5 и составила 13,8, 12,8, 12,0 мкг/мл соответственно. Для стандартного лабораторного штамма вируса гриппа А/АкЫ/68(ШЫ2) МИК50 КП №1В составляла 11,5 мкг/мл.

В следующих опытах было изучено действие различных концентраций КП №1В на репликацию вирусов гриппа А/Н5 в зависимости от времени (2 ч, 0,5 ч, 0 ч и -0,5 ч) добавления препарата в культуру клеток МДСК. Из данных, представленных в табл. 6 видно, что КП №1В в различных концентрациях 15, 30 и 60 мкг/мл оказывали существенное действие на репликацию вируса гриппа А/утка/Алтай/1285/91(Н5№3) и этот эффект зависел от времени добавления препарата. Наибольший эффект наблюдался при внесении КП №1В за 2 часа до инфицирования и уменьшался в зависимости от времени контакта (0,5 ч, 0 ч, -0,5 ч) исследуемого препарата с клетками МДСК. При внесении КП №1В

после адсорбции вируса отмечено наименьшее его действие на репликацию вируса гриппа.

Таблица 4

Влияние КП №1В на репликацию различных штаммов вируса гриппа птиц А/Н5 в культуре клеток МДСК

Вирусы Титр вируса (lg)

Вирусный контроль КП №1В, 80 мкг/мл

А /утка/Алтай/1285/91(Я5Ю) 7,0 4,5

А/утка/Приморье/2633/01(Я5Ю) 6,5 5,0

А/утка/Приморье/2621/01(Я5#2) 3,0 0,5

Таблица 5

Минимальная ингибирующая концентрация (МИК50) КП №1В в отношении различных штаммов вируса гриппа А

Вирусы МИК50 (мкг/мл)

КП №1В

А/утка/Алтай/12 85/91(H5N3) 13,8

Л/утка/Приморье/2633/01(Я5М3) 12,8

Л/утка/Приморье/2621/01(Я5М2) 12,0

А/ЛШ/68 (H3N2) 11,5

Таблица 6

Влияние КП №1 В на репликацию вирусов гриппа птиц А/Н5 в клетках МДСК в зависимости от времени добавления препарата

Таким образом, КП №1В в концентрациях 15, 30 и 60 мкг/мл обладают противовирусным действием на вирус гриппа А/Н5: А/утка/ При-морье/2633/01(Н5М3), А/утка/Приморье/2621/ 01(Н5Ш) и А/утка/Алтай/1285/91(Н5М?) в культуре клеток МДСК за 2 и 0,5 ч до инфицирования, одномоментно с инфицированием и через 0,5 ч после инфицирования. Наибольший эффект наблюдается при внесении КП №1В за 2 часа до инфицирования и уменьшается в зависимости от времени контакта (0,5 ч, 0 ч, -0,5 ч) исследуемого препарата с клетками МДСК.

Время добавления препарата Процент ингибирования ОП-450

А/утка/Алтай/12 85/91(H5N3)

Концентрация КП №1В, мкг/мл

60 30 15

За 2 ч до инфицирования 97 79 37

За 0,5 ч до инфицирования 100 57 47

Одномоментно с инфицированием 71 59 19

Через 0,5 ч после инфицирования 37 10 0

Для оценки вирулицидного эффекта КП №1 В вируссодержащий материал, содержащий препарат, инкубировали при 25° С в течение 1 ч и 24 ч, затем определяли снижение инфекционного титра вируса в материале по сравнению с контролем, инкубируемого в тех же условиях, однако без препарата.

В табл. 7 представлены результаты действия КП №1В в концентрации 100 мкг/мл на вирусы гриппа А/Калифорния/7/04(Н3^) и В/Гонконг/330/01 при контакте в течение 1 ч и 24 ч инкубирования. Инкубирование в течение 1 ч сопровождалось снижением титра вируса на 1,9 ^ и 6,0 ^ соответственно, в то время как после 24 часового инкубирования вирус гриппа А был инактивирован полностью, а вирус гриппа В инактивировался на 6,8 ^.

Таблица 7

Результаты изучения вирулицидного действия

КП №1В при 1 часовом и 24 часовом инкубировании с вирусами гриппа Л(И3Ы2) и В в культуре клеток МДСК

Таким образом, КП №1В в концентрации 100 мкг/мл оказывают вирулицидное действие на вирусы гриппа А/Калифорния/7/04(Н3^) и В/Гонконг/330/01 при контакте в течение 1 ч и 24 ч инкубирования в культуре клеток МДСК.

Заключение. При исследовании противовирусной активности КП №1В было установлено, что цитотоксическая концентрация препарата для вирусов гриппа А и В в культуре МДСК составляет 120 мкг/мл.

КП №1В в концентрации 3,0 мкг/мл обладают противовирусной активностью в культуре клеток МДСК в отношении вируса гриппа человека А (А/Калифорния/7/04 (H3N2)) при внесении препарата за 2 ч до инфицирования клеток.

КП №1В в концентрации 6,0 мкг/мл оказывают противовирусную активность в культуре клеток МДСК в отношении вируса гриппа человека А (А/Калифорния/7/04 (H3N2)) при внесении препарата одномоментно с инфицированием клеток.

КП №1В в концентрации 19,5 мкг/мл проявляют противовирусную активность в культу-

ре клеток МДСК в отношении вируса гриппа человека А (А/Калифорния/7/04 (H3N2)) при внесении препарата через 30 мин после инфицирования клеток.

КП №1В в концентрации 60 мкг/мл обладают противовирусной активностью в культуре клеток МДСК в отношении вируса гриппа человека В при внесении препарата в культуру за 2 ч до инфицирования клеток.

Показано также, что КП №1В в концентрации 80 мкг/мл ингибируют репликацию вирусов гриппа А/Н5 (А/утка/Приморье/ 2633/01(H5N3), А/утка/Приморье/2621/01

(H5N2) и Д/утка/Алтай/1285/91(Н5^)) в культуре клеток МДСК, снижая инфекционный титр вируса на 2,0-2,5 lg ТЦИД50/мл.

При этом минимальная ингибирующая концентрация (МИК50) КП №1В для вирусов гриппа Д/утка/Алтай/1285/91(Н5^),

А/утка/Приморье/2621/01 (H5N2) и А/утка/ Приморье/2633/01(Н5^ составляет 13,8, 12,8, 12,0 мкг/мл соответственно. В то время как для стандартного лабораторного штамма вируса гриппа A/Aichi/68(H3N2) МИК50 КП №1В установлена на уровне 11,5 мкг/мл.

Противовирусное действие КП №1В в концентрациях 15, 30 и 60 мкг/мл на вирусы гриппа A/(H5N3) и A/(H5N2) в культуре клеток МДСК проявляется при внесении препарата за 2 и 0,5 ч до инфицирования, одномоментно с инфицированием и через 0,5 ч после инфицирования. Наибольший противовирусный эффект регистрируется при внесении КП №1В за 2 часа до инфицирования и уменьшается в зависимости от времени контакта (0,5 ч, 0 ч, -0,5 ч) препарата с клетками МДСК.

Установлено также, что КП №1В в концентрации 100 мкг/мл оказывают вирулицидное действие в отношении вирусов гриппа A/(H3N2) и В/Гонконг/330/01 при инкубировании в течение 1 ч и 24 ч в культуре клеток МДСК. Инкубирование в течение 1 ч сопровождается снижением титра вируса на 1,9 lg и 6,0 lg соответственно, в то время как после 24 часового инкубирования вируса гриппа А инакти-вируется полностью, а вирус гриппа В инакти-вируется на 6,8 lg.

В результате проведенных исследований установлено, что КП №1В обладают выраженным противовирусным действием в экспериментах in vitro в отношении изученных патогенных для человека и животных вирусов. Эффективность противовирусного действия КП №1В зависит от

Препарат, Инфекционные титры вирусов гриппа/исходные титры вирусов (lg)

концентрации А/Калифорния/7/04(Н3 N2) В/Гонконг/330/01

1 ч инкубации 24 ч инкубации 1 ч инкубации 24 ч инкубации

КП №1В, 100 мкг/мл 6,4/8,3 0/8,5 2,5/8,5 1,5/6,0

JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2018 - V. 25, № 4 - P. 77-82

способа его применения (профилактически до длительности экспозиции. заражения, с лечебной целью), концентрации и

RESEARCH OF ANTI-VIRAL ACTION OF THE PLETNEV No. 1B DROPS (SELENITE) ON INFLUENZA A

AND B VIRUSES

V.V. PLETNEV, S.S. YAMNIKOVA

Institute of Virology named after D.I. Ivanov of the FSBI "Institute of Epidemiology and Microbiology named after N.F. Gamaley " of the Ministry of Health of Russia, Gamaley St., 16, Moscow, 123098, Russia,

e-mail: [email protected]

Abstract. When studying the antiviral effect of the Pletnev drops No. 1B on influenza A and B viruses, it was found that the drug with different administration regimens exhibits pronounced antiviral activity against the A / H5, A / H3 and B viruses. In the study of the antiviral activity of the Pletnev drops No. 1B, it was found that the cytotoxic concentration of the preparation for influenza A and B viruses in the culture of MDSC is 120 pg / ml. The Pletnev drops No. 1В at a concentration of 3.0 pg / ml have antiviral activity in the culture of MDSC cells against human influenza virus A (A / California / 7/04 (H3N2)) when the preparation was administered 2 hours before infection of the cells. The Pletnev drops No. 1B at a concentration of 6.0 pg / ml have antiviral activity in the culture of MDSC cells against the human influenza A virus (A / California / 7/04 (H3N2)) when the preparation is administered simultaneously with infection of the cells. The Pletnev drops No. 1B at a concentration of 19.5 pg / ml exhibit antiviral activity in the culture of MDSCs against the human influenza A virus (A / California / 7/04 (H3N2)) when the preparation is administered 30 minutes after infection of the cells. The Pletnev drops No. 1B at a concentration of 60 pg / ml have antiviral activity in the MSCK cell culture against human influenza virus B when the preparation is introduced into the culture 2 hours before the cells are infected. It was also shown that The Pletnev drops No. 1B at a concentration of 80 pg / ml inhibits the replication of influenza A / H5 viruses (A / duck / Primorye / 2633/01 (H5N3), A / duck / Primorye / 2621/01 (H5N2) and A / duck / Altai / 1285/91 (H5N3)) in cell culture MDSC, reducing the infectious titer of the virus by 2.0-2.5 lg TCID 50 / ml. As a result of the conducted research, it was established that CP No. 1B have a pronounced antiviral effect in vitro experiments with respect to the studied viruses that are pathogenic for humans and animals. The effectiveness of the antiviral effect of The Pletnev drops No. 1B depends on the method of its use (prophylactically before infection, for therapeutic purposes), concentration and duration of exposure.

Key words: influenza A and B viruses, Pletnev drops No. 1B, selenite.

Литература

1. Миронов А.Н., Бунатян Н.Д. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. М.: Гриф и К, 2012. 944 с.

2. Плетнев В.В. Капли Капли Плетнева, обладающие противовирусным и иммуномодулирующим эффектами. Патент РФ на изобретение №2553308, 2014.

References

1. Mironov AN, Bunatyan ND. Rukovodstvo po pro-vedeniyu doklinicheskih issledovanij lekarstvennyh sredstv [Guidelines for pre-clinical trials of drugs]. Moscow: Grif i K; 2012. Russian.

2. Pletnev VV, inventors. Kapli Kapli Pletneva, ob-ladayushchie protivovirusnym i immunomoduli-ruyushchim ehffektami [Pletnev Drops with antiviral and immunomodulatory effects]. Russian Federation patent RU №2553308; 2014. Russian.

Библиографическая ссылка:

Плетнев В.В., Ямникова С.С. Исследование противовирусного действия капель Плетнева №1В (селенита) на вирусы гриппа А и В // Вестник новых медицинских технологий. 2018. №4. С. 77-82. Б01: 10.24411/1609-21632018-16259.