CC BY
189
УДК 615.32-616.65-002
В.В. Мантатов, И.С. Башелханов
ИССЛЕДОВАНИЕ ФАРМАКОТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЭКСТРАКТА ГОРЦА ПТИЧЬЕГО ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ХРОНИЧЕСКОМ ПРОСТАТИТЕ
Бурятский государственный университет, Улан-Удэ
На модели хронического простатита установлено, что курсовое введение экстракта горца птичьего в экспериментально-терапевтической дозе, составляющей 200 мг/кг, оказывает, выраженное простатозащитное действие, характеризующееся, нормализацией морфофункционального состояния предстательной железы, крыс. Механизм, простатопротекторного действия данного лекарственного средства обусловлен его выраженными, антиоксидантными свойствами, связанными как с непосредственным, радикалперехватывающим действием, биофлавоноидных соединений фитоэкстракта, так c и. опосредованным, обусловленным активацией системы, антиоксидантной защиты, организма.
Ключевые слова: экстракт горца птичьего, экспериментальный хронический простатит
RESEARCH OF PHARMACOTHERAPEUTIC EFFECTIVENESS OF EXTRACT OF POLYGONUMAVICULAREL. OF EXPERIMENTAL CHRONIC PROSTATITIS
V.V. Mantatov, I.S. Bashelkhanov Buryat State University, Ulan-Ude
On the model of chronic prostatitis it was found that course introduction of extract of Polygonum. Aviculare L. in experimental therapeutic dose 200 mg/kg had strong prostatoprotective effect characterized by normalization of morphofunctional state of rats' prostate gland. The mechanism, of prostatoprotective action of this remedy is caused, by its antioxidant properties connected, with both direct radicalinterceptive action of bioflavonoid compounds of phytoextract and indirect action caused by the activation of the antioxidant defense system of the body.
Key words: the extract of Polygonum Aviculare L., experimental chronic prostatitis
Хронический простатит является распространенным урологическим заболеванием, занимает первое место среди воспалительных патологий мужской половой сферы. Статистика последних лет говорит об увеличении частоты встречаемости данной проблемы [8, 12—15]. Распространенность хронического простатита в развитых странах составляет 15 %, а в России страдает до 35 % мужчин трудоспособного возраста [6]. При этом имеются сведения о том, что количество стертых и скрыто протекающих форм данного заболевания значительно превышает число клинически выраженных форм. Так, по данным Y.C. Nycel (2004), проявления простатита отмечаются у 9 % мужской популяции, из них лишь около двух третей обращаются за медицинской помощью. Подтверждением этому служат сведения патоморфологических исследований 150 мужчин (умерших в репродуктивном возрасте и не предъявлявших при жизни характерных жалоб), показавших у 73 % из них наличие воспалительных изменений в предстательной железе при данной патологии. Это означает, что помимо широкой распространенности хроническим простатитом страдают преимущественно мужчины молодого и среднего возраста, у которых существенно снижается качество жизни вследствие нарушений генеративной и копулятивной функции.
Несмотря на значительные успехи современной медицинской науки, хронический простатит до настоящего времени остается недостаточно
изученным и плохо поддающимся лечению заболеванием. Этиологию хронического простатита связывают с двумя основными факторами: застойным, приводящим к развитию морфофункциональных изменений в предстательной железе, и инфекционным, осложняющим данные изменения [1]. К числу факторов, способствующих развитию простатита, относится также активация процессов перекисного окисления липидов, являющаяся причиной мембранодестабилизирующих процессов, усиления альтеративных тканевых изменений и микробной контаминации предстательной железы [2]. В настоящее время имеется богатый выбор препаратов синтетического происхождения, используемых для лечения простатита. Однако полиэтиологический характер и сложность патогенеза неспецифического хронического простатита объясняют недостаточную эффективность традиционно используемых при этом заболевании фармакологических средств. В этой связи актуальной проблемой остается поиск новых эффективных средств, предназначенных для лечения и профилактики хронического простатита.
Одним из путей решения этой задачи является исследование лекарственных растений. Терапия препаратами растительного происхождения более предпочтительна, по сравнению с синтетическими, в случаях, не требующих экстренного вмешательства, а также в стадии ремиссии заболевания [2, 4]. К преимуществам растительных
средств относится низкая токсичность, большая широта терапевтического действия, отсутствие негативных побочных эффектов при длительном приеме, что особенно важно при такой хронической патологии, как простатит. Таким образом, проблема профилактики и терапии хронического простатита является актуальной, что обусловливает необходимость поиска и изучения новых эффективных средств, полученных из растительного сырья.
Арсенал растительных средств располагает достаточным количеством эффективных наименований, предназначенных для лечения воспалительных заболеваний мочеполовой сферы. Вместе с этим широкое применение их ограничивается несовершенством лекарственных форм, представленных преимущественно галеновыми формами. Поэтому перевод лекарственного растительного сырья в экстракционные препараты, представляющие собой сумму биологически активных веществ в концентрированном виде и сохраняющие весь спектр фармакологических свойств исходного растения является перспективным направлением в современной медицине [11].
В рамках этого направления с использованием ресурсосберегающей и щадящей технологии, обеспечивающей максимальное извлечение ценных биологически активных веществ из растительного сырья, получен экстракт из травы горца птичьего (Polygonum aviculare L.).
Цель исследования: определение фармакоте-рапевтической эффективности экстракта горца птичьего при экспериментальном хроническом простатите у крыс.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Эксперименты проведены на 90 половозрелых белых крысах-самцах линии Wistar, массой тела 180 — 240 г., содержавшихся на стандартном рационе кормления в виварии Института общей и экспериментальной биологии СО РАН (Приказ МЗ № 1179 от 10.10.83 г.). Эксперименты осуществляли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу МЗ СССР № 755 от 12.08.77 г.). Эвтаназию животных осуществляли методом мгновенной декапитации под легким эфирным наркозом.
В работе использовали сухой экстракт горца птичьего. Способ получения данного экстракта разработан в лаборатории медико-биологических исследований Института общей и экспериментальной биологии СО РАН (патент РФ № 2064300 от 27.07.1996). Экстракт горца птичьего получают из надземной части Polygonum aviculare L. путем экстракции растительного сырья 40% этиловым спиртом, упариванием полученного экстракта в вакууме и последующей быстрой сушкой в вакуум-сушильной установке при t 60 — 70 °С. Полученный экстракт представляет собой хорошо растворимый в воде порошок темно-коричневого цвета, содержащий сумму экстрактивных веществ,
представленную преимущественно веществами полифенольной природы (флавоноиды, фенол-карбоновые кислоты, кумарины и дубильные вещества). Флавоноидный состав в основном представлен гликозидами кверцитина (авикуля-рин, кверцитрин, гиперозид). Стандартизация экстракта осуществляется по сумме флавоноидов в пересчете на рутин.
В качестве препарата сравнения использовали отвар комплексного фитосбора «Бруснивер», выпускаемого АО «Красногорсклексредства», состоящего из листьев брусники, плодов шиповника, травы череды и зверобоя. «Бруснивер» применяют в качестве антимикробного, противовоспалительного, а также диуретического средства. Указанный фитопрепарат рекомендуется больным при хроническом простатите [9].
При исследовании фармакотерапевтической эффективности животным опытной группы экстракт горца птичьего вводили внутрижелудочно зондом в экспериментально-терапевтической дозе 1 раз в сутки в течение всего эксперимента. Приготовленный по требованиям Государственной фармакопеи (XI), «Бруснивер» вводили в форме отвара белым крысам внутрижелудочно, в объеме 10 мл/кг массы. Контрольная группа по аналогичной схеме получала в соответствующем объеме дистиллированную воду.
Экспериментальный хронический простатит вызывали интраоперационной аппликацией ортоксилола на заднюю поверхность предстательной железы предварительно кастрированных половозрелых белых крыс-самцов массой тела 180-200 г.
Для оценки влияния данного средства на интенсивность перекисного окисления липидов определяли концентрацию малонового диальдегида спектрофотометрическим методом по степени образования окрашенного комплекса с 2-тиобарбитуровой кислотой в сыворотке крови [10]. Для оценки влияния на состояние системы антиоксидантной защиты определяли активность каталазы крови. Из показателей крови определяли количество лейкоцитов и СОЭ. Секрет предстательной железы в нативном виде наносили на предметное стекло и накрывали покровным, изучали на микроскопе биологическом исследовательском МБИ-6 при среднем увеличении (об. х 40, ок. х 7) [7].
При проведении патоморфологических исследований предстательные железы экспериментальных животных фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, проводили по этиловым спиртам возрастающей крепости (70-100 %) с последующей заливкой их в парафин. Готовили гистологические срезы толщиной 5-6 мкм на санном микротоме. Затем срезы депарафинировали, проводили по этиловым спиртам убывающей крепости (100-80 %) с дальнейшим просветлением в карбол-ксилоле и ксилоле, далее заключали в полистирол, окрашивали гематоксилин-эозином по Ван-Гизону [3]. Для микрофотографирования использовали микроскоп со встроенной видеокамерой и специ-
альными компьютерными программами «Motic Images-2000» (Германия).
Полученные данные статистически обработаны общепринятыми методами с использованием непараметрического и-критерия Уилкоксона - Манна - Уитни [5]. Различие считали достоверным при вероятности 95 % (р < 0,05).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
На модели хронического простатита установлено, что курсовое введение экстракта горца птичьего в экспериментально-терапевтической дозе 200 мг/кг массы животных оказывает выраженное фармакотерапевтическое действие, характеризующееся нормализацией морфофункционального состояния поврежденного органа на более ранних сроках патологического процесса. Как следует из данных, приведенных в таблице 1, на 7-е сутки исследования у крыс, получавших испытуемый фитоэкстракт, отмечается уменьшение выраженности воспалительной реакции, о чем свидетельствует снижение количества лейкоцитов в крови и СОЭ, соответственно, на 20 и 48 %, по сравнению с аналогичными данными животных контрольной группы. Также выявлена тенденция к уменьшению содержания лейкоцитов в секрете предстательной железы крыс опытной группы.
Установлено, что развитие воспалительного процесса в предстательной железе сопровождается индукцией процессов перекисного окисления липидов. Введение экстракта горца птичьего оказывало выраженное антиоксидантное действие, о чем свидетельствует снижение концентрации малонового диальдегида и повышение активности каталазы в сыворотке крови крыс опытной группы в среднем на 40 % по сравнению с соответствующими показателями у крыс контрольной группы. На 14-е сутки наблюдалась аналогичная картина: СОЭ крови снижалась на 45 %, количество лейкоцитов в крови и в секрете простаты, соответственно, на 23 и 27 %, концентрация малонового диальдегида в сыворотке крови — на 21 % по сравнению с данными в контроле. На 21-е сутки эксперимента у крыс, получавших испытуемый фитоэкстракт, признаков воспалительной реакции в простате обнаружено не было: количество лейкоцитов и СОЭ соответствовало физиологической норме. Также отмечалась нормализация показателей перекисного окисления липидов — концентрация малонового диальдегида и активность каталазы крови к указанному сроку достигали значений интактных животных. При этом установлено, что фармакотерапевтическая эффективность экстракта горца перечного превышала таковую у препарата сравнения «Бруснивер».
Таблица 1
Влияние ЭГП на количество лейкоцитов (L) в крови и в секрете простаты, СОЭ, концентрацию МДА и активность каталазы в сыворотке крови белых крыс при экспериментальном простатите
Показатели Группы животных
Интактная Контрольная Экстракт горца перечного Бруснивер
7-е сутки
L в крови, x 109/л 6,6 ± 0,61 20,4 ± 1,34 16,5 ± 1,37* 18,7 ± 1,91
L в секрете простаты, в полях зрения 7,4 ± 0,64 24,9 ± 1,98 22,8 ± 1,64 21,2 ± 2,08
СОЭ, мм/ч 6,4 ± 0,55 34,8 ± 2,79 16,7 ± 1,58* 20,8 ± 1,73*
Малоновый диальдегид, мкмоль/мл 2,04 ± 0,18 3,96 ± 0,28 2,54 ± 0,23* 2,77 ± 0,21
Каталаза, мкат/л 4,9 ± 0,34 2,6 ± 0,24 3,7 ± 0,33* 3,1 ± 0,31
14-е сутки
L в крови, x 109/л 6,6 ± 0,61 17,4 ± 1,47 13,4 ± 0,97* 14,8 ± 1,29
L в секрете простаты, в полях зрения 7,4 ± 0,64 16,8 ± 1,69 12,3 ± 1,05* 15,0 ± 1,63
СОЭ, мм/ч 6,4 ± 0,55 18,5 ± 1,79 10,2 ± 0,93* 13,8 ± 0,91*
Малоновый диальдегид, мкмоль/мл 2,04 ± 0,18 2,8 ± 0,24 2,21 ± 0,19* 2,32 ± 0,22*
Каталаза, мкат/л 4,9 ± 0,34 2,7 ± 0,19 4,0 ± 0,33* 3,3 ± 0,42
21-е сутки
L в крови, x 109/л 6,6 ± 0,61 10,4 ± 0,97 8,2 ± 0,44* 8,6 ± 0,75
L в секрете простаты, в полях зрения 7,4 ± 0,64 12,8 ± 1,09 8,1 ± 0,45* 8,9 ± 0,91*
СОЭ, мм/ч 6,4 ± 0,55 7,6 ± 0,54 6,0 ± 0,39* 6,3 ± 0,74
Малоновый диальдегид, мкмоль/мл 2,04 ± 0,18 2,5 ± 0,18 2,0 ± 0,11* 2,2 ± 0,16*
Каталаза, мкат/л 4,9 ± 0,34 3,5 ± 0,27 4,7 ± 0,28* 3,0 ± 0,44
Примечание: * - значения, достоверно отличающиеся от данных контрольной группы при Р< 0,05.
Результаты патоморфологического исследования показали, что аппликация ортоксилола на заднюю поверхность предстательной железы сопровождается развитием воспалительного процесса, клиническая картина которого соответствует хроническому простатиту. Так, при исследовании ткани предстательной железы у крыс контрольной группы на 7-е сутки эксперимента обнаружены следующие признаки воспалительного процесса: отечность стромы, расширение концевых отделов желез за счет избыточного скопления секрета, альтерация железистого эпителия. В частности наблюдали расслоение мышечных волокон и разрыхление соединительной ткани за счет интерстициального отека. Полости желез были расширены, в их просвете часто обнаруживали массы секрета с десквамированным эпителием. Большая доля клеток железистого эпителия были с признаками дистрофии и некроза.
На микропрепаратах предстательной железы животных опытной группы, получавших экстракт горца перечного, на 7-е сутки эксперимента указанные изменения были менее выраженными, чем в контроле: железы с выраженной деструкцией эпителия встречаются значительно реже; воспалительные явления выражаются умеренной отечностью капсулы; доля клеток эпителиальных желез с признаками некроза и дистрофии была меньше, чем в контроле; отек интерстициальной и мышечной ткани также был менее выраженным. Скоплений секрета в полостях желез простаты не обнаруживали.
На 14-е и 21-е сутки эксперимента у животных контрольной группы отмечали усиление явлений воспалительной реакции. Так, отечность и инфильтрация соединительной ткани и секреторных отделов предстательной железы гистиоцитами и лимфоцитами были более выраженными по сравнению с предыдущим сроком исследования; перегородки в альвеолярно-трубчатых железах большей частью атрофированы с образованием булавовидных окончаний. Альтеративные изменения простаты характеризовались некрозом и некробиозом; наблюдали изменения формы внутренних перегородок желез простаты.
У крыс опытной группы к указанному сроку признаки воспаления в простате были выражены в меньшей степени по сравнению с таковыми в контроле. В частности, явления отека и клеточной инфильтрации отмечались лишь в одном случае из шести; железы сохраняли близкую к нормальной форму и структуру. При этом к 21-м суткам исследования отмечали явления регенерации паренхимы простаты, характеризующиеся разрастанием эпителия желез, которые имели вид ветвящихся трубок, покрытых цилиндрическим или кубическим эпителием.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, исследование фармакоте-рапевтической эффективности экстракта горца перечного показало, что его курсовое введение в
экспериментально-терапевтической дозе, составляющей 200 мг/кг, на фоне экспериментального хронического простатита оказывает выраженное простатозащитное действие, характеризующееся нормализацией морфофункционального состояния предстательной железы животных. В частности, на фоне введения испытуемого средства отмечается существенное уменьшение выраженности воспалительного процесса, о чем свидетельствует снижение СОЭ и явлений лейкоцитоза. Морфологические исследования простаты показали, что курсовое введение испытуемого средства на фоне экспериментального хронического простатита сопровождается активацией процессов регенерации в простате, вследствие чего нормализация её функциональной состоятельности происходит на более ранних сроках патологического процесса. Механизм простатопротекторного действия экстракта горца перечного обусловлен его выраженными антиоксидантными свойствами, связанными как с непосредственным радикалперехватывающим действием биофлавоноидных соединений фитоэкстракта, так и с опосредованным, обусловленным активацией системы антиоксидантной защиты организма.
Полученные данные аргументируют целесообразность применения экстракта горца птичьего в урологической практике для профилактики и лечения хронического простатита у мужчин в комплексе с другими лечебными средствами.
ЛИТЕРАТУРА
1. Аль-Шукри С.Х., Бобков Ю.А., Горбачев А.Г. и др. Наш опыт применения простатилена в урологии // Урология. - 2003. - №6. - С. 32-36.
2. Арнольди Э.К. Хронический простатит. Проблемы, перспективы, опыт. - Ростов-на-Дону: Феникс, 1999. - 317 с.
3. Киселёва А.Ф., Житников А.Н., Кейсе-вич Л.В. и др. Морфофункциональные методы в норме и при патологии. - Киев, 1983. -161 с.
4. Корсун В.Ф., Суворов А.П., Суворов С.А. Простатит. Современные и старинные методы лечения. - Минск: Белорусская наука, 2001. - 200 с.
5. Лакин Г.Ф. Биометрия. - М., 1990. - 352 с.
6. Лопаткин Н.А. Руководство по урологии. -М., 1998. - Т. 1. - 304 с.
7. Мантатов В.В. Влияние комплексного средства «Фитопрост» на течение экспериментального хронического простатита: автореф. дис. ... канд. мед. наук. - Улан-Удэ, 1999. - 23 с.
8. Сивков А.В., Бедретдинова Д.А. Об эффективности и безопасности препарата Цернилтон® при хроническом абактериальном простатите и ДГПЖ // Экспериментальная и клиническая урология. - 2010. - № 3. - С. 47-52.
9. Суворов А.П., Тюренков И.Н., Богословская
С.И. и др. Фитотерапия воспалительных заболеваний мочеполовой системы. - Саратов, 1994. - 39 с.
10. Темирбулатов Р.А., Селезнёв Е.И. Метод повышения интенсивности свободнорадикального
266
П11111111111111111П111111 1111ГП □ I I I I I I 1111 □ П1 11111
окисления липидсодержащих компонентов крови и его диагностическое значение // Лаб. дело. — 1981. - № 4. - С. 209-211.
11. Шантанова Л.Н. Морфофункциональная характеристика повреждений почек и их фармакотерапия: автореф. дис. ... докт. биол. наук. — Улан-Удэ, 1998. - 35 с.
12. Krieger J.N., Ross S.O., Riley D.E. Chronic prostatitis:epidemiology and role of infection // Urology. - 2002. - Vol. 60. - P. 8-12.
13. McNaughton Collins M., Barry M.J. Epidemiology of chronic prostatitis // Curr. Opin. Urol. - 1998. - Vol. 8. - P. 33-37.
14. Pontari M.A. Chronic prostatitis - chronic pelvic pain syndrome // Urol. Clin. North Am. -2008. - Vol. 35. - P. 81-89.
Сведения об авторах
Мантатов Владимир Вячеславович - кандидат медицинских наук, старший преподаватель кафедры факультетской хирургии медицинского факультета Бурятского государственного университета (670002, г. Улан-Удэ, ул. Октябрьская, 36а; тел.: 8 (902) 169-70-75; e-mail: [email protected])
Башелханов Иннокентий Степанович - кандидат медицинских наук, старший преподаватель кафедры анатомии и физиологии медицинского факультета Бурятского государственного университета (670002, ул. Октябрьская, 36а; тел.: 8 (3012) 44-82-55)
