CC BY
100
Оригинальная статья
60
Е.И. Кондратьева1’ 2, А.А. Терентьева3, Н.В. Тарасенко4, Е.В. Лошкова3, А.И. Тлиф1
1 Кубанский государственный медицинский университет, Краснодар, Российская Федерация
2 Медико-генетический научный центр, Москва, Российская Федерация
3 Сибирский государственный медицинский университет, Томск, Российская Федерация
4 НИИ медицинской генетики СО, Томск, Российская Федерация
Исследование ассоциации полиморфных маркеров генов семейства IL1 (IL1B и ILRA) с клиническими вариантами пиелонефрита
Контактная информация:
Кондратьева Елена Ивановна, доктор медицинских наук, профессор, главный научный сотрудник МГНЦ, профессор кафедры педиатрии с курсом неонатологии ГБОУ ВПО «Кубанский государственный медицинский университет» МЗ РФ Адрес: 115478, Москва, ул. Москворечье, стр. 1, тел.: (495) 612-86-07, e-mail: [email protected] Статья поступила: 29.08.2013 г., принята к печати: 30.01.2014 г.
Цель исследования: изучить распределение аллелей и генотипов полиморфных маркеров генов семейства IL1 (IL1B и ILRA) в развитии различных клинических вариантов хронического пиелонефрита. Пациенты и методы: проанализирована выборка больных хроническим пиелонефритом из 99 человек. Средний возраст пациентов 8,01 ± 3,26 (3,00-15,00) лет. Изучение полиморфных маркеров исследуемых генов проводили с помощью ПДРФ-анализа. Для проведения полимеразной цепной реакции использовали структуры праймеров и условия генотипирования, описанные в литературе. Результаты: анализ ассоциаций двух локусов генов семейства IL1 (IL1B и ILRA) с различными комплексными фенотипами хронического пиелонефрита продемонстрировал, что аллель А2 и генотип А2А2 полиморфизма IL1RN*VNTR ассоциированы с хроническим пиелонефритом, пузырно-мочеточниковым рефлюксом, вторичным пиелонефритом, нарушением функции почек, предрасположенностью к инфицированию кишечной палочкой и клебсиеллой. Генотип А2А2 гена IL1RN*VNTR и аллель А2 гена IL1RN*VNTR ассоциированы с нарушением функции почек OR = 3,07 (р = 0,001). Наиболее высокий риск развития хронической почечной недостаточности установлен для генотипа А1А2 (OR = 22,94; р = 0,001). Выводы: обнаруженные ассоциации требуют дальнейшего подтверждения на выборках большего размера и разной этнической принадлежности.
Ключевые слова: воспаление, хронический пиелонефрит, гены семейства IL1.
(Вопросы современной педиатрии. 2014; 13 (1): 60-64)
ВВЕДЕНИЕ
Хроническое воспаление — это ведущий фактор развития и прогрессирования большинства патологических состояний, в т. ч. аутоиммунных болезней
(сахарный диабет 1-го типа, целиакия, тиреопатии) [1-4], болезней обмена (ожирение, сахарный диабет 2-го типа) [5-7], а также патологического процесса, возникающего на фоне микробной контамина-
E.I. Kondratyeva1, 2, A.A. Terentyeva3, N.V. Tarasenko4, E.V. Loshkova3, A.I. Tlif1
1 Kuban State Medical University, Krasnodar, Russian Federation
2 Medical Genetics Research Centre of RAMS, Moscow, Russian Federation
3 Siberian State Medical University, Tomsk, Russian Federation
4 Research Institute of Medical Genetics, Siberian Branch of RAMS, Tomsk, Russian Federation
Study of the Association of Polymorphous Markers
for IL1 Family Genes (IL1B and ILRA) with Clinical Variants
of Pyelonephritis
Aim: to study the distribution of alleles and genotypes of polymorphic markers for immunoregulatory cytokines in the development of chronic pyelonephritis and its clinical variants. Patients and methods: in this study we analyzed a sample of 99 patients with chronic pyelonephritis. The average age of the patients was 8,01 ± 3,26 (3,00-15,00) years. The study of gene polymorphisms was performed using PDRF analysis. For PCR were used primers structures and genotyping conditions described in the literature. Results: the analysis of associations of 2 loci in the genes of cytokines with different complex phenotypes of chronic pyelonephritis demonstrated that A2 allele and genotype A2A2 of IL1RN*VNTR polymorphism is associated with chronic pyelonephritis, vesicoureteral reflux, secondary pyelonephritis, renal dysfunction, infection with Escherichia coli and Klebsiella. Genotype A2A2 of gene IL1RN*VNTR and allele A2 of gene IL1RN*VNTR are associated with impaired renal function OR = 3,07 (p = 0,001). The highest risk of chronic renal failure development is associated with A1A2 genotype (OR = 22,94; p = 0,001). Conclusions: the discovered associations require further confirmation on larger samples and various ethnicities.
Key words: inflammation, chronic pyelonephritis, IL1 family genes.
(Voprosy sovremennoi pediatrii — Current Pediatrics. 2014; 13 (1): 60-64)
ции мочевыделительной системы (хронический пиелонефрит, ХП) [8]. Благодаря достижениям современной генетики человека познание наследственной основы предрасположенности к инфекционным болезням происходит нарастающими темпами. Картированы многие локусы, в которых находятся гены предрасположенности к инфекционным заболеваниям, изучен полиморфизм и особенности экспрессии многих генов-кандидатов, разработаны модельные объекты. Поток публикаций по изучению генетической предрасположенности к СПИДу, туберкулезу, малярии, кори, вирусным гепатитам, лейшманиозу и другим инфекционным заболеваниям имеет лавинообразный характер, увеличиваясь с каждым годом [9, 10]. Начаты исследования по изучению генетической предрасположенности к грамотрицательной инфекции, и прежде всего к грамотрицательному сепсису [11-13].
Одними из ключевых маркеров воспалительного процесса любой этиологии являются плейотропные белки — цитокины, имеющие ключевое значение в патогенезе хронического пиелонефрита [8]. В настоящее время уделяют большое внимание ассоциативному поиску полиморфных маркеров генов цитокинов с комплексными фенотипами заболеваний различной этиологии, в т. ч. ХП, с целью разработки генетической платформы персонализированной медицины.
В последние годы появились работы, посвященные изучению генетических мутаций, изменению иммунного статуса, гемостаза у больных при патологии почек [14]. И тем не менее сведения о полиморфизме сигнальных молекул при заболеваниях почек у детей немногочисленны, и выводы делают по данным, полученным на небольших выборках пациентов [15]. Научная работа в этом направлении может обеспечить хорошие ресурсы для анализа полиморфных маркеров в ассоциативных исследованиях, углубить представления об иммунном звене патогенеза заболеваний почек и разработать новые эффективные методы прогнозирования течения болезней почек у детей.
Цель исследования: изучить распределение аллелей и генотипов полиморфных маркеров генов иммунорегуляторных цитокинов в формировании ХП и его клинических вариантов.
Выбор локусов для исследования осуществляли в соответствии со следующими критериями: ассоциация с механизмом воспалительного процесса, показанная в работах других авторов (в настоящее время данные по большинству локусов противоречивы), доказанное влияние локуса на функциональную активность, количество конечного продукта.
ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ
Участники исследования
В работе проанализирована выборка больных ХП из 99 человек. Средний возраст пациентов составил 8,01 ± 3,26 (3,00-15,00) лет. Все пациенты проживали на территории Томской обл. и принадлежали к русской этнической группе. В 3 раза чаще микробновоспалительный процесс мочевыделительной системы
диагностирован среди девочек (п = 74; 75%) по сравнению с мальчиками (п = 25; 25%). В качестве контроля использовали группу сравнения из 98 детей, принадлежащих к русскому населению Томской обл., не имеющих хронических микробно-воспалительных заболеваний.
Методы исследования
Выделение тотальной ДНК осуществляли из лимфоцитов периферической крови с использованием стандартной фенол-хлороформной методики [16]. Выделенную ДНК замораживали и хранили при -20°C до проведения генотипирования. Определение генотипов полиморфных локусов проводили методом оценки полиморфизма длин рестрикционных фрагментов продуктов полимеразной цепной реакции (ПЦР-ПДРФ). Характеристика исследованных полиморфных маркеров представлена в табл. 1. Для выполнения ПЦР использовали структуры праймеров и условия генотипирования, описанные в литературе [17-19].
СТАТИСТИЧЕСКАЯ ОБРАБОТКА ДАННЫХ
Оценку соответствия наблюдаемого распределения генотипов ожидаемому при равновесии Харди-Вайн-берга проводили с применением критерия х2 Пирсона. Сравнение частот встречаемости аллелей и генотипов с целью выявления ассоциации с заболеванием, а также риском развития осложнений на фоне пиелонефрита осуществляли с использованием критерия х2 Пирсона с поправкой Йейтса или двустороннего точного критерия Фишера. Различия считали статистически значимыми при р ^ 0,05. Для оценки величины относительного риска использовали отношение шансов (OR) с его доверительным интервалом (CI) при уровне значимости 95% [20].
РЕЗУЛЬТАТЫ
Исследование генов семейства IL1 (IL1B и ILRA) в контрольной выборке (группе сравнения) показало, что для VNTR-полиморфизма гена IL1RN имело место отклонение от равновесия Харди-Вайнберга (х2 = 35,40; p = 0,001) за счет недостатка гетерозигот (Hobs = 0,218, Hexp = 0,336, D = -0,378). Для полиморфного маркера (+3953)А1/А2 гена IL1B отклонения от равновесия Харди-Вайнберга в группе сравнения получено не было (табл. 2).
В контрольной выборке отмечена высокая гетеро-зиготность, равная 37% для гена IL1B*+3953A1/A2. Это свидетельствует о высокой информативности исследуемого полиморфного маркера в популяции жителей Томска с точки зрения дальнейшего ассоциативного анализа. В то же время для VNTR-полиморфизма гетеро-зиготность составила 17,7%. При этом следует ожидать, что для VNTR-полиморфизма гена IL1RN ассоциативный анализ может быть релевантным только при относительно сильном эффекте полиморфизма. Полученные результаты совпадают с данными Э. А. Ондар [13], охарактеризовавшей выявленное отклонение как особенность русской популяции Томской обл.
В основной группе (больные ХП) соответствие наблюдаемого распределения генотипов ожидаемому при
61
Таблица 1. Характеристика исследованных полиморфных маркеров
Ген Хромосомный локус/OMIM Полиморфизм Локализация в гене Фермент рестрикции Источник
IL1RN 2q14.2 / 147679 VNTR Интрон 2 - [17]
IL1B 2q14 / 147720 (+3953)А1/А2 Экзон 5 TaqI [18]
ВОПРОСЫ СОВРЕМЕННОЙ ПЕДИАТРИИ /2014/ ТОМ 13/ № 1
Оригинальная статья
Таблица 2. Полиморфные маркеры генов семейства IL1 (IL1B и ILRA) в группе сравнения
Полиморфизм Генотип N.O. N.E. х2 d.f. = 1 Частота аллеля Наблюдаемая, ожидаемая гетерозиготность D
IL1RN *VNTR A1A1 A1A2 A1A3 A2A2 A3A3 65 17 4 8 2 59,38 25,95 6,29 2,84 1,54 d.f. = 3 35,40 p = 0,001 1 = 0,786 2 = 0,171 3 = 0,043 hobs = 0,218 ± 0,002 hexp = 0,336 ± 0,036 -0,378
IL1B *+3953A1/A2 A1A1 A1A2 A2A2 55 37 6 55.13 36,75 6.13 0,003 p > 0,05 1 = 0,750 2 = 0,250 hobs = 0,378 ± 0,002 hexp = 0,375 ± 0,031 0,007
Примечание (здесь и в табл. 3). N.O. — наблюдаемая численность генотипов; N.E. — ожидаемая численность генотипов; * — тест на равновесие Харди-Вайнберга, х2 — критерий Пирсона, D — относительное отклонение наблюдаемой гетерозиготности от ожидаемой.
Таблица 3. Полиморфные маркеры генов семейства IL1 (IL1B и ILRA) в группе больных хроническим пиелонефритом
Полиморфизм Генотип N.O. N.E. х2 d.f. = 1 Частота аллеля Наблюдаемая, ожидаемая гетерозиготность D
IL1RN *VNTR A1A1 A1A2 A1A3 A2A2 62 12 3 22 48,79 39,31 2,11 7,92 d.f. = 3 48,84 p = 0,001 1 = 0,702 2 = 0,283 3 = 0,015 hobs = 0,152 ± 0,360 hexp = 0,427 ± 0,029 -0,645
IL1B *+3953A1/A2 A1A1 A1A2 A2A2 67 28 4 66.27 29,45 3.27 0,241 p > 0,05 1 = 0,818 2 = 0,182 hobs = 0,283 ± 0,045 hexp = 0,298 ± 0,035 -0,049
Таблица 4. Сравнительный анализ распределения частот аллелей и генотипов полиморфных маркеров генов цитокинов в группе сравнения и у пациентов с хроническим пиелонефритом
Ген, предрасполагающий аллель/генотип Аллели Генотипы
OR CI X2 (p) OR CI х2 (p)
IL1B*+3953A1/A2 (rs1143634) А2, А2А2 0,67 0,40-1,11 2,32 (0,128) 0,65 0,15-2,69 0,12 (0,733)
IL1RN*VNTR А2, А2А2 1,84 1,10-3,09 5,54 (0,019) 3,05 1,20-7,98 5,76 (0,016)
равновесии Харди-Вайнберга не отличалось от такового группы сравнения: для VNTR-полиморфизма гена IL1RN зафиксировано отклонение от равновесия Харди-Вайнберга (х2 = 64,51; p = 0,001) за счет недостатка гетерозигот, для полиморфного маркера (+3953)А1/А2 гена IL1B отклонения от равновесия Харди-Вайнберга зарегистрировано не было (табл. 3).
Сравнительный анализ распределения частот аллелей и генотипов полиморфного маркера VNTR гена IL1RN в группе с ХП и группе сравнения показал наличие статистически значимых различий: для аллеля А2 OR = 1,84 (95% CI 1,10-3,09; х2 = 5,54; p = 0,019); для генотипа А2А2 — OR = 3,05 (95% CI 1,20-7,98; х2 = 5,76; p = 0,016). Увеличение частоты аллеля А2 в группе больных ХП свидетельствуют об ассоциации аллеля А2 и генотипа А2А2 гена IL1RN*VNTR с повышенным риском развития пиелонефрита (табл. 4).
Пиелонефрит развивался на фоне пузырно-мочеточникового рефлюкса (ПМР) у 20 детей (20%), среди которых также преобладали девочки (n = 16; 80%) по сравнению с мальчиками (n = 4; 20%). Средний возраст больных с ПМР составил 8,20 ± 3,75 (4,00-15,00) лет. Сопоставление групп пациентов с наличием и отсутствием ПМР подтвердило связь аллеля А2 гена IL1RN*VNTR с наличием ПМР у больного: OR = 0,02 (95% CI 0,08-0,4; X2 = 6,48; p = 0,011). Аллель A2 в 2 раза чаще встречался
при ХП и ПМР. Следовательно, можно предположить, что присутствие аллеля А2 гена IL1RN*VNTR повышает вероятность наличия ПМР у обследуемого (табл. 5). Больные с генотипами А1А2 и А2А2 чаще имеют ПМР по сравнению с пациентами без него (р < 0,055).
Возможность прогнозирования развития при ХП таких грозных осложнений, как вторичная гипертензия почечного генеза и хроническая почечная недостаточность, является важным. Артериальная гипертензия была зарегистрирована у 9% пациентов с пиелонефритом. Сравнение с контрольной выборкой продемонстрировало ассоциацию аллеля А2 гена IL1RN*VNTR с развитием артериальной гипертензии на фоне пиелонефрита: OR = 3,71 (95% CI 1,22-11,20; х2 = 4,373; p = 0,037) (см. табл. 5).
Нарушение функции почек встречается у больных как с острым, так и с хроническим воспалительным процессом в паренхиме, что влияет на дальнейший прогноз заболевания и тактику ведения пациента. В зависимости от степени нарушения функции почек пациенты распределились следующим образом: сохранная функция почек (СФП) была зарегистрирована у 79 больных [17 (22%) мальчиков и 62 (78%) девочек], нарушенная функция почек (НФП) отмечена в 20 случаях [8 (40%) мальчиков и 12 (60%) девочек]. Исход в хроническую почечную недостаточность (ХПН) наблюдали у 7 детей (6 мальчиков
Таблица 5. Ассоциация полиморфных локусов генов цитокинов с риском развития осложнений на фоне хронического пиелонефрита в Томской популяции
Локус Фенотип Частота аллеля/генотипа в изучаемой выборке/группе контроля OR, CI, х2, Р
IL1RN*VNTR Пиелонефрит без НФП (n = 79) и ПМР (n = 20; 20%) Аллель А2 (ХП + ПМР) — 19 (47%) Аллель А2 (ХП без ПМР) — 37 (25%) OR (А1 vs А2) = 0,02 (0,08-0,48), X2 = 6,48, р = 0,011
Генотип А2А2 (ХП + ПМР) — 8 (40%) Генотип А2А2 (ХП без ПМР) — 14 (17%) OR (А1А1 vs А2А2+А1А2) = 0,34 (0,11-1,02), X2 = 3,66, р = 0,055
IL1RN*VNTR Пиелонефрит и АГ (n = 9; 9%) Аллель А2 (ХП + АГ) — 8 (44%) Аллель А2 (контроль) — 33 (18%) OR (А1 vs А2) = 3,73 (1,22-11,20), X2 = 4,37, р = 0,034
IL1RN*VNTR Пиелонефрит без НФП (n = 79) и с НФП (n = 20; 20%) Генотип А2А2 (ХП + НФП) — 9 (45%) Генотип А2А2 (контроль) — 8 (3%) OR (А1А1 vs А2А2) = 12,9 (2,94-53,50), X2 = 16,18, р = 0,001 OR (А1А2 vs А2А2) = 6,38 (1,11-41,37), X2 = 4,45, р = 0,035
Аллель А2 (ХП + НФП) — 21 (57%) Аллель А2 (контроль) — 33 (18%) OR (А1 vs А2) = 2,65 (2,53-12,70), X2 = 2,41, р = 0,001
Генотип А2А2 (ХП + НФП) — 9 (45%) Генотип А2А2 (ХП без НФП) — 13 (17%) OR (А1А1 vs А2А2) = 6,46 (1,70-25,48), X2 = 8,77, р = 0,003
Аллель А2 (ХП + НФП) — 21 (57%) Аллель А2 (ХП без НФП) — 35 (23%) OR (А1 vs А2) = 4,31 (1,93-9,76), X2 = 16,76, р = 0,001
IL1RN*VNTR Пиелонефрит без ХПН и с ХПН (n = 7) Генотип А1А2 (ХП без ХПН) — 12 (40%) Генотип А1А2 (ХП + ХПН) — 6 (85%) OR (А1А2 vs А2А2) = 31,00 (3,14-749,7), X2 = 14,08, р = 0,001
IL1B A13953 A2 Пиелонефрит + E. coli (n = 30; 30%) Аллель А2 (ХП + E. coli) — 7 (12%) Аллель А2 (контроль) — 47 (25%) OR (А1 vs А2) = 0,40 (0,15-0,99), X2 = 3,97, р = 0,046
IL1RN*VNTR Пиелонефрит + Klebsiella (n = 17; 17%) Генотип А2А2 (ХП + Klebsiella) — 5 Генотип А2А2 (контроль) — 2 (1%) (36%) OR (А1А1 vs А2А2) = 20,31 (2,76-186,6), X2 = 13,01, р = 0,001 OR (А1А2 vs А2А2) = 42,50 (2,34-1841,7), X2 = 8,65, р = 0,003
Аллель А2 (ХП + Klebsiella) — 11 (39%) Аллель А2 (контроль) — 33 (18%) OR (А1 vs А2) = 2,96 (1,17-7,46), X2 = 6,14, р = 0,013
Примечание. ХП — хронический пиелонефрит, ПМР — пузырно-мочеточниковый рефлюкс, АГ — артериальная гипертензия, НФП — нарушение функции почек, ХПН — хроническая почечная недостаточность, E. coli — кишечная палочка.
и 1 девочка). Сравнение группы пациентов с НФП и популяционным контролем подтвердило полученные ассоциации (см. табл. 3). Сравнение группы без нарушения функции почек и группы с НФП на фоне пиелонефрита еще раз продемонстрировало существующую ассоциацию между генотипом А2А2 гена IL1RN*VNTR (OR = 5,67; 95%CI 1,76-18,67; x2 = 11,76; p = 0,003) и аллелем А2 гена IL1RN*VNTR (OR = 4,31; 95% CI 1,93-9,67; X2 = 16,6; p = 0,001) и неблагоприятным течением заболевания (см. табл. 5).
Сравнение группы пациентов, страдающих ХПН на фоне пиелонефрита, с общей выборкой больных и с группой сравнения позволило установить ассоциацию генотипа А1А2 гена IL1RN*VNTR с неблагоприятным исходом в ХПН: OR = 31,00 (95% CI 3,14-749,7; х2 = 20,55; p = 0,001) и OR = 22,94 (95% CI 2,42-541,4; х2 = 13,38; p = 0,001), соответственно (см. табл. 5).
Изучение микробиологического пейзажа мочи больных с пиелонефритом показало, что Escherichia coli была обнаружена в моче 30% больных, Klebsiella species — у 14%, Proteus spp. — у 11%, другая флора — у 45%; отрицательный бактериологический посев зарегистрирован у 43% пациентов общей группы.
Показано, что аллель А2 полиморфизма IL1B*+3953 реже наследуется детьми, у которых пиелонефрит вызван E. coli (OR = 0,40; 95% CI 0,15-0,99; х2 = 3,979; p = 0,046), продемонстрирована ассоциация генотипа А2А2 полиморфизма IL1RN*VNTR с колонизацией E. coli на фоне пиелонефрита (OR = 13,71; 95% CI 2,37-102,8; X2 = 19,34; p = 0,001) (см. табл. 5).
Генотип А2А2 (OR = 24,17; 95% CI 3,38-215,8; X2 = 24,30; p = 0,001) и аллель А2 (OR = 2,96; 95% CI 1,17-7,46; х2 = 6,141; p = 0,013) гена IL1RN*VNTR предрасполагают к повышенной частоте носительства
K. species у пациентов с хроническим воспалением почек при сопоставлении с группой сравнения (см. табл. 5).
ОБСУЖДЕНИЕ
Общетеоретический аспект в изучении генетических основ предрасположенности к распространенным инфекционным заболеваниям и патологии почек тесно пересекается с практическим, медицинским. Во-первых, эти исследования способствуют лучшему пониманию патогенеза инфекционных болезней, вызванных различной микрофлорой, что в свою очередь открывает новые перспективы в поиске высокоэффективных лекарственных препаратов для их лечения, действие которых направлено на ключевые звенья инфекционного процесса в почечной ткани и профилактику фибротических изменений. Во-вторых, определение «структуры» наследственной подверженности к инфекционным заболеваниям в терминах генетического полиморфизма, генотипического и аллельного набора у отдельного индивида может стать основой предиктивного молекулярного тестирования индивидуальной предрасположенности к отдельным инфекциям. Известно, что в становлении и стабилизации контактов между взаимодействующими в ходе реализации противоинфекционной защиты клетками макроорганизма важная роль принадлежит цитокин-рецепторной сети [8-12].
63
ВОПРОСЫ СОВРЕМЕННОЙ ПЕДИАТРИИ /2014/ ТОМ 13/ № 1
Оригинальная статья
64
Исследователями НИИ клинической иммунологии опубликован ряд работ, посвященных анализу связи полиморфизмов генов цитокинов (IL2, IL4, IL10, TNFA) с предрасположенностью к таким инфекциям, как ВИЧ и вирусные гепатиты [16]. Показано, что ВИЧ и герпетическая инфекция ассоциированы с генотипом АА промоторного региона G-308А гена TNFA и генотипом АА промоторного региона +874A/T гена IFNG [10]. Установлена положительная ассоциация генотипа А2А2 (OR = 1,27) полиморфизма +3953А1/А2 гена IL1B с туберкулезом легких. При этом протективным эффектом обладал генотип А1А1 (OR = 0,79) полиморфизма +3953А1/А2 гена IL1B, что совпадает с полученными данными [10]. В проведенном нами исследовании выявлена ассоциация полиморфных маркеров генов иммунорегуляторных цитокинов с предрасположенностью к инфицированию основными видами возбудителей инфекционного процесса при ХП (E. coli). Показано, что повышенный риск колонизации E. coli при ХП имеют носители генотипа А2А2 полиморфизма IL1RN*VNTR (OR = 13,71; 95% CI 2,37-102,8; X2 = 19,34; p = 0,001) (см. табл. 5).
В настоящее время уже предприняты попытки поиска генетических маркеров для прогноза течения ХП. Обнаружено неблагоприятное влияние полиморфизма С589Т гена IL4 на течение острого постстрептококкового гломерулонефрита и ассоциация генотипа АА промоторного региона G-308А гена TNFA со скоростью развития склеротических осложнений при пиелонефритах обструктивного генеза на небольшой выборке больных (24 ребенка с острым постстрептококковым гломерулонефритом, 36 детей с первичными и вторичными пиелонефритами) [15]. В нашем исследовании с нарушением функции почек был ассоциирован генотип А2А2 гена IL1RN*VNTR.
Полученные данные раскрывают новые иммуногенетические аспекты развития ХП и бактериального процесса. Результаты исследования полиморфных маркеров генов иммунорегуляторных цитокинов представляются важными для формирования новых знаний о генетически детерминированной предрасположенности или резистентности человека к развитию бактериальных
инфекций, вызванных грамотрицательной микрофлорой, позволяют глубже проникнуть в молекулярные механизмы инфекционной патологии и могут послужить основой не только для дальнейшего изучения этиопатогенеза патологических процессов, вызванных данной микрофлорой, но и открыть новые подходы к терапии.
Таким образом, с привлечением современных иммуногенетических методов исследования, охарактеризована распространенность ряда полиморфных маркеров генов семейства IL1 (про- и противовоспалительных цитокинов) у пациентов с различными фенотипами хронического пиелонефрита, в т.ч. с развитием артериальной гипертензии и нарушением функции почек. Полученные результаты могут иметь прогностическую и клиническую значимость для данной категории больных, учитывая достаточно высокие показатели отношения шансов. Это диктует необходимость продолжения поиска, расширения числа наблюдений и проверки на выборках с другими моделями воспаления.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В исследовании проанализированы ассоциации двух локусов генов семейства IL1 с различными комплексными фенотипами хронического пиелонефрита. Установлено, что аллель А2 и генотип А2А2 полиморфизма IL1RN*VNTR ассоциированы с хроническим пиелонефритом, пузырно-мочеточниковым рефлюксом, вторичным пиелонефритом, нарушением функции почек, склонностью к инфицированию кишечной палочкой и клебсиел-лой. Генотип А2А2 и аллель А2 гена IL1RN*VNTR ассоциированы с нарушением функции почек. Наиболее высокий риск развития ХПН обнаружен для генотипа А1А2. Идентифицированные ассоциации требуют дальнейшего подтверждения на выборках большего размера и разной этнической принадлежности.
Работа выполнена при поддержке гранта ФЦП: 16.740.11.04821.2.1 «Изучение эффектов генов-модификаторов иммунного ответа на различных моделях воспаления».
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Кондратьева Е. И., Пузырев В.П., Назаренко Л. П., Рудко А. А., Янкина Г. Н., Лошкова Е. В. Вопр. дет. диетол. 2008; 5: 11-16.
2. Kondratieva E. I., Rudko A. A., Loshkova E. V., Puzyrev V. P., Yankina G. N. Mol. Biol. 2008; 1: 42-49.
3. Kondratieva E. I., Tarasenko N., Puzyrev V. Eur. J. Hum. Gen. 2008; 2: 293.
4. Тарасенко Н. В. Якутский медицинский журнал. 2009; 2: 135-139.
5. Cave M. C., Hurt R. T., Frazier T. H. Nutr. Clin. Pract. 2008; 23 (1): 16-34.
6. Tilg H., Moschen A. R. Mol. Med. 2008; 3-4: 222-231.
7. Кондратьева Е. И., Янкина Г. Н., Лошкова Е. В., Тарасенко Н. В. Кубанский научн. мед. вестн. 2011; 6: 12-17.
8. Чупрова А. В., Лоскутова С. А., Трунов А. Н., Пекарева Н. А., Пантелеева Е. Ю. Педиатрия. 2008; 3: 23-27.
9. Гончарова И. А., Фрейдин М. Б., Рудко А. А., Напалкова О. В., Колоколова О. В., Ондар Э. А., Дунаева Л. Е., Белобородова Е. В., Пузырев В. П. Вестник ВОГиС. 2006; 3: 540-552.
10. Naslednikova I. O., Urazova O. I ., Voronkova O. V. Bull. Exp. Biol. Med. 2009; 2: 175-180.
11. Шевченко А. В., Голованова О. В., Коненков В. И., Стрельцова Е. И. Мед. иммунол. 2007; 2: 114-118.
12. Курганова Е. В., Голованова О. В., Шевченко А. В., Ракова И. Г., Стрельцова Е. И., Останин А. А., Черных Е. R, Коненков В. И. Цитокины и воспаление. 2007; 2: 40-45.
13. Ондар Э. А. Туберкулез в Республике Тыва: эпидемиология, клинико-социальные особенности и генетические основы подверженности. Автореф. дис. ... докт. мед. наук. Новосибирск. 2007. 47 с.
14. Петросян Э. К., Цыгин А. Н., Шестаков А. Е. Нефрология. 2006; 3: 48-54.
15. Батаева Е. П. Автореф. . дис. канд. мед. наук. М. 2012. 21 с.
16. Коненков В. И., Смольникова М. В. Бюлл. эксп. биол. и медицины. 2002; 4: 449-451.
17. Tarlow J. K., Blakemore I. F., Lennard A. et al. Polymorphism in human IL-1 receptor antagonist gene intron 2 is caused by variable number of an 86-bp tandem repeat. Hum. Genet. 1993; 91: 403-404.
18. Wilkinson R. J., Patel P., Llewelyn M. et al. Influence of polymorphism in the genes for the interleukin (IL)-1 receptor antagonist and IL1-p on tuberculosis. J. Exp. Med. 1999; 189 (12): 1863-1873.
19. Patel R., Lim D. S., Reddy D. et al. Variants of trophic factors and expression of cardiac hypertrophy in patients with hypertrophic cardiomyopathy. J. Mol. Cell. Cardiol. 2000; 32 (12): 2369-2377.
20. Bland J. M., Altman D. G. Statistics notes. The odds ratio. BMJ. 2000; 320 (7247): 1468.
