ИСПЫТАНИЯ ДЕЗИНФЕКТАНТОВ ДЛЯ УНИЧТОЖЕНИЯ МИКОБАКТЕРИЙ
А.П. Палий, А.И. Завгородний, Е.П. Евглевская
Аннотация. Представлены результаты исследований бактерицидных свойств дезинфицирующих препаратов «Петролайт», «Петроксин», «Гексадекон» относительно быстрорастущих атипичных микобактерий M. fortuitum и возбудителя туберкулеза M. bovis. Установлено, что среди изученных препаратов только «Гек-садекон» проявляет туберкулоцидные свойства и может применяться для профилактики и борьбы с туберкулезом сельскохозяйственных животных в концентрации 2 % при экспозиции 24 часа или в концентрации 3 % при экспозиции 5 часов.
Ключевые слова: дезинфицирующий препарат, концентрация, экспозиция, бактерицидные свойства, мико-бактерии.
Сегодня, в результате изменений хозяйственно -экономических, природно-географических условий, межгосударственных торговых и политических отношений, ухудшение эпизоотической и эпидемической ситуации, перед ветеринарными специалистами возникла актуальная задача профилактики инфекционных и инвазионных болезней животных, в том числе зооан-тропонозных. Поэтому в современных условиях производства все большего значения приобретает ветеринарная санитария [1].
Туберкулез является одним из наиболее распространенных и экономически значимых инфекционных заболеваний среди людей [2] и сельскохозяйственных животных [3, 4]. Несовершенство противотуберкулезных мероприятий связано, в первую очередь, с недостаточной изученностью экологии возбудителя заболевания, эпизоотических особенностей инфекции, низкой информативностью существующих методов прижизненной диагностики туберкулеза, способностью мико-бактерий длительное время находиться в окружающей среде и проявлять устойчивость к действию неблагоприятных факторов [5]. Микобактерии также являются высокоустойчивыми к действию разных химических соединений, что обуславливает необходимость проведения дезинфекционных мероприятий с использованием высокоэффективных туберкулоцидных композиций [6].
Что касается дезинфектантов, которые предлагаются для проведения противотуберкулезных мероприятий, то большинство из них действуют на микобактерии только бактериостатически и не уничтожают их в окружающей среде [7, 8]. Потому часто в хозяйствах с высоким уровнем контаминации объектов животноводства микобактериями существующие мероприятия профилактики и борьбы с туберкулезом не достигают цели, инфекция длительное время поддерживается, выделение реагирующих на туберкулин животных не прекращается, несмотря на своевременное удаление источника инфекции.
В связи с вышесказанным чрезвычайно актуальным остается вопрос относительно усовершенствования существующих и поиска новых, более эффективных, экологически чистых, дешевых, простых и доступных для применения дезинфицирующих средств с высокими бактерицидными свойствами относительно микобакте-рий.
Целью нашей работы было провести сравнительное изучение бактерицидных свойств новых дезинфектантов относительно микобактерий.
Для исследований использовали препараты «Петроксин» и «Петролайт» (ЗАО «Петроспирт» (Российская Федерация) и «Гексадекон» (ЗАО «БелАсептика» (Республика Беларусь).
Исследования по определению бактерицидных свойств дезинфицирующих препаратов проводили с помощью суспензионного метода определения бактерицидной активности химических дезинфектантов относительно атипичных микобактерий (Mycobacterium fortuitum) и возбудителя туберкулёза (Mycobacterium bovis), которые имели типичные культуральные и биологические свойства.
Результаты определения бактерицидных свойств дезинфектантов относительно M. fortuitum суспензионным способом представлены в таблице 1.
При анализе результатов, представленных в таблице 1, видно, что дезинфектанты «Петроксин» и «Петролайт» при применении в концентрации 1,0 - 5,0 % при экспозиции от 1 до 24 часов не уничтожают микобактерии M. fortuitum, поэтому дальнейшие опыты с ними не проводились. Дезинфектант «Гексадекон» в концентрации 1,0 % (1 - 24 часа), 2,0 % (1 - 5 часов), 3,0 - 5,0 % (1 - 3 часа) проявляет бактериостатическое действие на быстрорастущие атипичные микобактерии, а в концентрации 3,0 - 5,0 % при экспозиции 5 - 24 часа полностью их обезвреживает.
Следующим этапом наших исследований было проведение опытов с использованием тест-культуры возбудителя туберкулеза M. bovis, нанесенного на тест-объекты с применением биологической нагрузки, что приближает проведение опыта к производственным условиям (таблица 2).
При анализе результатов, представленных в таблице 2, видно, что препарат «Гексадекон» полностью обеззараживает тест-объекты, контаминированные возбудителем туберкулеза M. bovis в концентрации 2,0 % при экспозиции 24 часа и в концентрации 3,0 % при экспозиции 5 - 24 часа.
Для подтверждения результатов культуральных исследований было проведено биологическое исследование бактерицидного действия дезсредства «Гексаде-кон». Для этого использовали 10 морских свинок живой массой 300 - 350 г, которые перед началом опыта не реагировали на внутрикожное введение туберкулина ППД для млекопитающих и аллергена из атипичных
Таблица 1 - Бактерицидное действие дезинфектантов на M.. fortuitum
Экспозиция действия Дезинфицирующий препарат, концентрация
«Петроксин» «Петролайт» «Гексадекон»
1,0 % 2,0 % 3,0 % 5,0 % 1,0 % 2,0 % 3,0 % 5,0 % 1,0 % 2,0 % 3,0 % 5,0 %
1 час + + + + + + + + + + + +
3 часа + + + + + + + + + + + +
5 часов + + + + + + + + + + - -
24 часа + + + + + + + + + - - -
Примечание: «+» - наличие роста тест-культуры на поверхности питательной среды;
«-» - отсутствие роста тест-культуры на поверхности питательной среды.
Режим Тест-объект
применения дерево батист металл плитка стекло
2,0 % - 5 часов + + + + +
2,0 % - 24 часа - - - - -
3,0 % - 3 часа + + + + +
3,0 % - 5 часов - - - - -
3,0 % - 24 часа - - - - -
Примечание: «+» - наличие роста тест-культуры на поверхности питательной среды;
«-» - отсутствие роста тест-культуры на поверхности питательной среды.
микобактерий (ААМ). Лабораторных животных разделяли на 2 группы (опытная и контрольная) и раздельно вводили под кожу, в области паха, в дозе 1 см3 суспензию осадка, который получали после обработки опытных и контрольных тест-объектов с культурой M. bovis. За лабораторными животными вели наблюдение на протяжении 3-х месяцев. В этот срок животных один раз в месяц исследовали на туберкулез аллергическим методом. Животных, погибших во время опыта и подвергнутых эвтаназии после его завершения, исследовали патологоанатомическим и культуральным методами на туберкулез.
В результате проведенных исследований было подтверждено наличие бактерицидных свойств относительно микобактерий дезинфектанта «Гексадекон». На введение туберкулина реагировали только животные контрольной группы, а при патологоанатомическом исследовании у них были выявлены характерные для туберкулеза поражения внутренних органов. Культу-ральным исследованием отобранного от опытных и контрольных морских свинок патологического материала возбудитель туберкулеза M. bovis был выделен только от животных контрольной группы.
Выводы:
1. Дезинфицирующие препараты «Петроксин» и «Петролайт» при применении в концентрации 1,0 -5,0 % при экспозиции от 1 до 24 часов действуют на микобактерии M. fortuitum суббактерицидно.
2. Дезинфектант «Гексадекон» проявляет бактерицидные свойства относительно быстрорастущих атипичных микобактерий M. fortuitum и возбудителя туберкулеза M. bovis.
3. Дезинфектант «Гексадекон» можно применять для проведения профилактических и оздоровительных мероприятий при туберкулезе сельскохозяйственных животных в концентрации 2,0 % при экспозиции 24 часа и в концентрации 3,0 % при экспозиции 5 - 24 часа.
Список использованных источников
1 Аржаков В., Ермакович М., Аржаков П. Особенности проведения дезинфекционных мероприятий на объектах ветеринарного надзора // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2008. - № 5. - С. 68-69.
2 Етзоотолопчний мониторинг. Туберкульоз / В. Бусол, В. Постой, В. Ситнж, А. Коваленко та ш. // Ветеринарна медицина Украши. - 2002.- № 1. - С.8-10.
3 Найманов А.Х. Проблемы диагностики и профилактики туберкулеза крупного рогатого скота в современных условиях // Ветеринарная патология. - 2004. - № 1-2. - С. 18-23.
4 Донченко Н.А. Усовершенствование средств и методов диагностики и профилактики туберкулеза крупного рогатого скота: автореф. дис. ... док. вет. наук: 16.00.03, 16.00.04. -Новосибирск, 2008. - 36 с.
5 Дзьомбак Д.В. Бюлопчш властивосп та виживашсть патогенних i атипових мжобактерш у молочних продуктах та довкшлг автореф. дис. ... канд. вет. наук: 16.00.03 / Д.В. Дзьомбак. - Харкв, 2011. - 24 с.
6 Попов Н.И., Чеснокова П.В. Новый подход к дезинфекции при туберкулезе животных // Ветеринария. - 2009. -№ 6. - С. 45-47.
7 Кошечкин В.А. К проблеме выбора туберкулоцидных дезинфицирующих средств // Матер. VIII Рос. съезда фтизиатров. - М., 2007. - С. 26-27.
8 Даулетбакова А.М. Изучение чувствительности штаммов микобактерий туберкулеза к дезинфицирующим препаратам // Журнал гигиены, эпидемиологии, иммунологии. - 2006. - № 3. - С. 138-140.
Информация об авторах
Палий Анатолий Павлович, кандидат ветеринарных наук, докторант лаборатории изучения туберкулеза Национального научного центра «Институт экспериментальной и клинической ветеринарной медицины», тел.: +38066-225-34-34, е-mail: [email protected]
Завгородний Андрей Иванович, доктор ветеринарных наук, профессор, член-корреспондент НААН Украины, заведующий отделом изучения туберкулеза и бруцеллеза Национального научного центра «Институт экспериментальной и клинической ветеринарной медицины».
Евглевская Елена Павловна, кандидат сельскохозяйственных наук, доцент кафедры ВСЭ и биотехнологии ФГБОУ ВПО «Курская ГСХА», тел. 8(4712) 53-15-55.