CC BY
21
фометрию ТК осуществляли с помощью лицензионной морфометрической программы «ВидеоТест - Морфология 5,2». Статистическую обработку полученных данных проводили при помощи статистического пакета 81а118Иса 10.0.
Результаты проведенного исследования показали, что легких крыс контрольной группы исследования при окраске толуидиновым синим ТК были видны вокруг бронхиол, бронхов, сосудов и в плевре. Они имели небольшой размер округлую форму и располагались поодиночке. Плотность распределения ТК, в среднем, составила (2,0 ± 0,5) в поле зрения при увеличении х 400. Площадь клеток, в среднем, составила - (82,5 ± 3,6) мкм2. Число ТК компактных форм ТК было равно - (87 % ± 10,1), в состоянии дегрануляции было (23 % ± 10,1).
Сразу после воздействия однократной иммерсионной глубокой гипотермии в ткани легких экспериментальных животных ТК определялись в перибронхиальной ткани. Они были крупного размера, бледно-фиолетового цвета, округлой или овальной формы. Плотность распределения ТК в среднем в 5 полях зрения составила (2,7 ± 0,8), площадь клеток составила (184,5 ± 14,9) мкм2. Большинство ТК находилась в состоянии гранулоцитолиза и опустошения в результате секреции гранул. Число ТК в состоянии дегрануляции составило 75 % ± 17,1. Компактных форм ТК, в которых гранулы содержались компактно, было 25 % ± 17,1.
На 2 сутки эксперимента в ткани легких ТК располагались группами в стенках межальвеолярных перегородок. ТК имели небольшие размеры, были округлой или овальной формы. Плотность распределения ТК на данном сроке исследования составила (6,6 ± 0,5), площадь их составила (84,2 ± 3,5) мкм2. Число компактных форм ТК составило 52,0 % ± 8,9, дегранулирующих форм было 48,0 % ± 8,9.
На 7 сутки эксперимента отмечали миграцию ТК к бронхам и бронхиолам, где они располагались в пери-бронхиальной соединительной ткани, число ТК в межальвеолярных перегородках значительно уменьшалось. На данном сроке исследования по своим морфологическим характеристикам ТК отличались от клеток предыдущего срока исследования: они были темно-фиолетового цвета, более крупных размеров, преобладали клетки удлиненной и неправильной формы. Плотность распределения ТК на данном сроке исследования составила (8,0 ± 1,0), средняя площадь их увеличилась до (107,9 ± 7,35) мкм2. Компактных форм ТК было - 76,0 % ± 8,6, ТК в состоянии дегрануляции было 23,3 % ± 8,6.
На 14-й день эксперимента ТК располагались преимущественно поодиночке вокруг бронхиол и бронхов. По сравнению с предыдущим сроком эксперимента размеры ТК были небольшие, преобладали клетки округлой формы. Плотность распределения ТК на данном сроке исследования составила (4,3 ± 0,3), площадь клеток была равна (90,8 ± 6,2) мкм2. Количество компактных форм ТК составило - 70,7 % ± 13,2, в состоянии дегрануляции было - 29,3 % ± 12,2.
ВЫВОДЫ
Таким образом, динамические изменения в тучно-клеточной популяции, по нашему мнению, были обусловлены адаптационными компенсаторно-приспособительные процессами, происходящими в ткани легкого после воздействия гипотермии. Как известно, в развитии адаптивных реакций выделяют два этапа: 1) срочной, но несовершенной адаптации; 2) долговременной устойчивой адаптации. Этап срочной адаптивной реакции развивается сразу после начала воздействия раздражителя, реализуется на основе ранее сформированных
биологических механизмов и обеспечивает неполный адаптационный эффект, на пределе физиологических возможностей реакций организма. Важнейший компонент срочной адаптации - стресс-реакция со всеми ее проявлениями: повреждением и предельной мобилизацией функциональных возможностей организма, в том числе и популяции ТК. Поэтому обнаруженные нами изменения морфофункциональной активности популяции ТК можно отнести к проявлениям компенсаторно-приспособительных реакций при срочной адаптации на воздействие гипотермии, как закономерного процесса, поскольку ТК экспрессируют большое количество биологически активных веществ, которые стимулируют регенерацию легочной ткани после повреждения. ТК являются важными факторами, которые обеспечивают устойчивость дыхательной системы при ее адаптации к воздействию гипотермии.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ВАКУУМНЫХ ПАКЕТОВ ДЛЯ СОХРАНЕНИЯ ТРУПОВ ПРИ МАССОВОЙ ГИБЕЛИ В ЧЕРЕЗВЫЧАЙНЫХ СИТУАЦИЯХ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)_
У. М. Муратбекова, Н. Р. Рахатбекова, С. М. Орозобакова, А. В. Бородулин, Н. К. Исмаилов Кафедра судебной медицины ГОУ ВПО «Кыргызско-Российский славянский университет», Бишкек, Кыргызстан Доклад посвящен экспериментальной работе по возможности замедления процесса гниения тканей трупа методом ограничения доступа воздуха. Данный метод будет целесообразен при массовой гибели людей при чрезвычайных ситуациях. Ключевые слова: вакуум-пакет, трупные явления, чрезвычайная ситуация
После наступления смерти в трупе происходят закономерно обусловленные определенные обменные изменения. Их развитие и проявление зависят от многих факторов (причины смерти, влажности воздуха, температуры воздуха, скорости ветра, концентрации кислорода в организме, концентрации кислорода в окружающей среде, климатических условиях). Этот разноликий комплекс обменных изменений, являющихся признаком устанавливающего факта смерти, чем пользуются все врачи различных специальностей, а также давность наступления смерти (ДНС) служат достоверными используемыми величинами при осуществлении целевых задач судебными медиками. Эти достоверные признаки смерти делятся на ранние и поздние трупные явления. Все поздние трупные явления по значимости их критериев для установления ДНС в судебной медицине условно подразделяются на две группы: первая - разрушающие (гниение); вторая -консервирующие (жировоск, мумификация, торфяное дубление). Разрушающие (гниение) признаки последуют сразу же за ранними трупными изменениями и поэтому не утрачивают актуальности в использовании его критериев в установлении ДНС.
Гниение представляет собой процесс, суть которого заключается в распаде биологических тканей под влиянием микробов. В целом на развитие всех поздних трупных явлений, в том числе гниения, оказывает влияние большое количество факторов, учесть которые при судебно-медицинском исследовании не всегда возможно. В связи с этим определить ДНС по характеру и выраженности гниения очень сложно и весьма ориентировочно, а так же особым образом усложняется выявление морфологических изменений причины смерти, являющееся основной задачей судебно-медицинского эксперта, критериев идентификации
при судебно-медицинской экспертизе, тождества личности трупа неизвестного при стихийных бедствиях.
Данные обстоятельства свидетельствуют: чтобы достоверно устанавливать ДНС и тождество личности на трупах, находящихся в стадии гниения, необходимо выявить определенные закономерности этих изменений при приостановке гнилостного процесса, что составляет цель представляемого исследования.
Материалом для исследования послужили 24 белые беспородные крысы. Подопытные животные были одного пола (самцы), одного возраста (4-5 месяцев), одного выводка, вес каждой особи составлял (260 ± 10) г. Лабораторных крыс умерщвляли тупым твердым предметом с ограниченной травмирующей поверхностью, чтобы смерть их наступила от одинаковой причины при аналогичных стандартных условиях (обычных). Смерть наступала мгновенно, без мучений, от полного разрушения вещества головного мозга. При проведении опытов на животных руководствовались рекомендацией «Принципы использования животных» (Буреш Я., Бурешова О., Джозеф П. Хьюстон, 1983). Животных разделили на две группы: опытную (12 животных) и контрольную (12 животных).
Как простой метод приостановления гниения в данной работе применялся вакуумный пакет, который представляет собой упаковочный чехол, изготовленный из очень плотного полиэтилена (толщиной до 100 мкм) с застежкой zip-lock и клапаном для удаления воздуха.
Каждую крысу из опытной группы после смерти помещали в вакуумный пакет, затем откачивали воздух с помощью специального устройства, и всю опытную группу из 12 вакуум-пакетов оставляли в безветренном месте при окружающей температуре (27 ± 3) °C, относительной влажности (24 ± 6) % на 9 суток.
Контрольную группу из 12 трупов лабораторных животных оставили в сходных условиях окружающей среды (как и у опытной группы) и на идентичный срок (9 суток).
В результате наших экспериментальных исследований установлено, что в 1-3 сутки не были выявлены значительные внешние изменения, как в опытной, так и в контрольной группе. На 4-5 сутки в контрольной группе отмечался синий цвет с зеленоватым оттенком на кончике носа, ушах и конечностях животных. В опытной группе такие изменения не были обнаружены. На 6-9 сутки в опытной группе были отмечены изменения кожных покровов, они приобрели темно-зеленой оттенок. В контрольной группе животные стали раздутыми от накопления газов и жидкости в организме (гнилостная эмфизема), в результате интенсивной деятельности размножившихся бактерий (углекислый газ и вода), что является разрушающей функцией гниения, мешает установлению ДНС и установлению тождества личности по ее установленным критериям.
ВЫВОДЫ
Таким образом, на основании полученных данных, можно сделать заключение о том, что из-за отсутствия соответствующей концентрации кислорода в вакуум-пакете замедляется процесс гниения в видимых тканях на трупе, что является актуальным основанием для продолжения этого исследования по выявлению объективных показателей закономерности снижения процессов гниения в зависимости от числовых концентраций кислорода на специально разработанных высокочувствительных аппаратурах, а в последующем трансформировать эти показатели в вид способа хранения трупов при чрезвычайных ситуациях в целях установления ДНС и верной идентификации личности.
РЕГУЛИРУЕМАЯ КЛЕТОЧНАЯ СМЕРТЬ И ЕЕ ЗНАЧЕНИЕ ДЛЯ СУДЕБНО-МЕДИЦИНСКОЙ ОЦЕНКИ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ_
А. М. Никитин, Ю. Е. Квачева
ФГБУ «РЦСМЭ» МЗ РФ, Москва В сообщении говорится об известных проблемах морфологической оценки алкогольной интоксикации в судебно-медицинской экспертной практике, а также о нововведениях, касающихся клеточной смерти и возможности применения этой информации для судебной медицины. Ключевые слова: алкогольная интоксикация, клеточная смерть, иммуногистохимическое исследование
В Российской Федерации при судебно-медицинском исследовании (экспертизе) трупа нередким является обнаружение этилового спирта в биологических жидкостях и тканях.
Оценка токсического действия этанола на организм производится путем суммирования данных материалов дела, секционного, судебно-гистологического, судебно-химического и судебно-биохимического исследований. При этом значимость морфологических изменений зачастую уступает данным количественного определения этанола в биологических жидкостях и тканях. Причинами этому являются: отсутствие высокоспецифичных методов исследования в судебно-медицинской гистологии; отсутствие патогномоничных признаков отравления этанолом.
Морфологическая диагностика в судебной медицине ограничивается тканевым уровнем, а выявляемые изменения порой могут оказаться артефактами приготовления гистологических препаратов. Современная наука диктует требования по изучению тех или иных процессов не на тканевом, а на клеточном и даже молекулярном уровнях.
С момента появления на свет «клеточной теории» произошло много интересных открытий, в частности было определенно, что некоторые клетки могут умирать по заранее предусмотренной внутриклеточной программе в рамках естественных процессов созревания многоклеточных организмов. Этот биологическое явление сейчас обозначается как программируемая клеточная смерть (далее - ПКС). Более того, выяснилось, что клетки могут умирать не только в созревающем, но и во взрослом организме, при этом такая смерть тоже будет регулироваться (регулируемая клеточная смерть - РКС). РкС (ПКС входит в РКС) называется так ещё и потому, что на неё можно воздействовать как фармакологически, так и генетически, что в свою очередь может изменять морфологию клеточной смерти. Информация же о том, что клетка может погибнуть «случайно» - в результате чрезмерных воздействий (физического, химического, механического) на нее, когда регулирующие механизмы не успевают активироваться, известна давно (т.н. случайная клеточная смерть - СКС).
Важную работу по систематизации наших знаний о клеточной смерти проводит большой коллектив ученых из разных стран мира, которые объединились в Номенклатурный Комитет по Клеточной Смерти (Nomenclature Committee on Cell Death - NCCD). NCCD был организован в 2005 году. С тех пор была выпущена не одна статья с рекомендациями (guidelines) по основным морфологическим, биохимическим и генетическим аспектам клеточной смерти. По состоянию 2018 год на основании того, каким путем активировалась и какими молекулярными изменениями сопровождалась РКС у млекопитающих, предлагается выделять 12 типов РКС (внутренний апоптоз, внешний апоптоз, аутофагия, не-кроптоз и др.).
