Искусственно вызванная патология гепатопанкреаса речных раков Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

Искусственно вызванная патология гепатопанкреаса речных раков

Н.Ю. Корягина1, Г.И. Пронина2, А.О. Ревякин2, О.И. Степанова2,

О.В. Баранова2, Г.Д. Капанадзе2, И.Ю. Меньшиков1

1 - Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт ирригационного рыбоводства РАСХН

2 - ФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий ФМБА России», Московская область

Инъекция аллоксана в дозе 100 мг/кг в вентральный синус речных раков приводит к нарушению структуры R-клеток гепатопанкреаса. Отмечается увеличение содержания глюкозы в гемолимфе.

Ключевые слова: моделирование патологии, речные раки, гепатопанкреас, аллоксан (С4Н^204).

Типичные представители беспозвоночных десятиногих - речные раки являются перспективными объектами биомоделирования, обладая сопоставимостью физиологической реакции с высшими животными, а также специфическими свойствами, позволяющими расширить представления о спектре действия тестируемого фактора на биосистему. Они удовлетворяют современным этическим представлениям и нормам, ограничивающим область применения высших животных в экспериментальных исследованиях.

Задачей данного исследования являлось моделирование патологии гепато-панкреаса речных раков как подготовка для трансплантации стволовых клеток с целью их получения путем пассажа через организм рака.

Гепатопанкреас десятиногих ракообразных представляет собой двухлопастной орган, состоящий из множества мелких разветвленных слепых трубочек. Они окружены рыхлой соединительной тканью и содержат железистые клетки. Эпителий гепатопанкреатической тру-

бочки содержит 4 типа клеток (гепато-панкреацитов). Трубочки собираются в пару общих протоков, впадающих в среднюю кишку. Слепой конец каждой трубочки составлен недифференцированными эмбриональными клетками (Е-клетки), которые являются предшественниками всех остальных типов клеток гепатопанкреатической трубочки. Проксимально Е-клеткам располагаются накопительные Я-клетки, вакуоли-зированные В-клетки и фибриллярные F-клетки [7, 8]. При патологии гепатопанкреаса краба-стригуна Chionoecetes орПю, вызванной разного рода естественными инфекциями и инвазиями (хитино-литическими бактериями, простейшими Hematodinium, паразическим грибком Trichomaris invadens), происходит вакуолизация цитоплазмы Я-клеток, уменьшение количества В-клеток, инфильтрация гемоцитами интертубулярной соединительной ткани [4, 5].

У ракообразных (крабов, раков и креветок) гепатопанкреас является органом, совмещающим функции печени и под-

желудочной железы. Из-за особенностей питания отряда Decapoda гепатопанкреас секретирует большое количество пищеварительных ферментов, гидролизующих все классы природных полимеров и обладающих широкой специфичностью и необычно высокой активностью [1]. В частности, в организме ракообразных, как и у высших животных и человека, расщепление гликогена в тканях происходит, в основном, под действием ферментов, специфически гидролизующих 1,4- и 1,6-глико-зидные связи: альфа-глюканфосфорилаза и альфа-амилаза; амило-1,6-глюкозидаза соответственно [2, 3].

Объектами настоящего исследования являлись длиннопалые речные раки Pontastacus leptodactylus L. Патологию вызывали двумя способами:

1. Введением аллоксана путем диффузии в вентральный синус в дозе 50 и 100 мг/кг.

2. Кормлением кормами с содержанием жира выше 17% (комбикорм для форели и сига «craft soft light»).

Кроме того, раков кормили личинками хиронамид по нормам, установленным при проведении трофологических исследований [6].

Продолжительность опыта составляла 1,5 мес. Были взяты клинически здоровые раки. В процессе эксперимента произошло их поражение ржавопятнистым заболеванием (РПЗ), вызванным грибком Saprolegnia parasitica. Вероятно, на фоне развивающейся патологии их организм оказался более подверженным внедрению возбудителей.

Результаты исследований показали, что через 3 дня после введения аллоксана содержание глюкозы в гемолимфе речных раков было невелико, что характерно для здоровых особей (рис. 1). Затем, к 7-му дню, наступает повышение уровня

глюкозы в гемолимфе и не меняется до конца эксперимента.

Г пикша в гемолимфе, ммоль/л

"i;ui “дії I "дм З^діі I'vui —Р Icpt Iks ийлсиївд фепдел IP Iejrt Діг-J и lnhnHfl 5ПМГ-ІГ*

Рис. 1. Динамика изменений уровня глюкозы под действием аллоксана (50 мг/кг) и кормления кормами с повышенным для речного рака содержанием жира.

Наблюдалась гибель речных раков на 3-й и на 23-й день после введения 100 мг/кг аллоксана.

Патологоанатомические изменения гепатопанкреаса: увеличение органа,

дряблая консистенция, серо-зеленоватый цвет (рис. 2). У здорового речного рака гепатопанкреас имеет плотную консистенцию и красновато-коричневый цвет.

Рис. 2. Вскрытие погибшего речного рака Pontastacus leptodactylus L.

Гистологические исследования показали, что в ткани гепатопанкреаса происходит вакуолизация цитоплазмы R-клеток после введения аллоксана в дозе 100 мг/кг (рис. 3).

Таким образом, при введении аллоксана в дозе 100 мг/кг отмечается патология гепатопанкреаса длиннопалых речных ра-

A Б

Рис. 3. Гистологическая картина гепатопанкреаса длиннопалого речного рака Pontastacus leptodactylus L. Окраска гематоксилин-эозином. Вакуолизация цитоплазмы R-клеток.

А — увеличение 10x10; Б — увеличение 10x40.

ков. Это обнаружено по динамике уровня глюкозы в крови, а также по результатам гистологических исследований.

Список литературы

1. Артюков АА, Мензорова НИ, Козловская Э.П, Кофанова Н.Н., Козловский А.А., Рассказов ВА.

Ферментный препарат из гепатопанкреаса промышленных видов крабов и способ его получения. Патент № 2280076, заявка № 2004135771 от 20.07.2006 г.

2. Джунковская А.В., Захарова Н.В. Панкреатическая эластаза - новая сериновая протеаза, выделенная из гепетопанкреаса камчатского краба // Всесоюз. совещ. «Биологически активные вещества гидробионтов - новые лекарственные, лечебнопрофилактические и технические препараты»: Тез. Докладов. - Владивосток: ТИНРО. 1991. 8 с.

3. Калчугина Е.П, Леваньков С.В, Купина Н.М. Динамика изменения содержания гликогена в гепатопан-креасе камчатского краба в результате автолитических процессов // Известия ТИНРО (Тихоокеанского научно-исследовательского рыбохо-

зяйственного центра). Владивосток. 2001. Т. 129: Биохимия и биотехнология гидробионтов. С. 203-214.

4. Пономарев А.К. Гистологический и гистохимический анализ гаметоге-неза и состояния гепатопанкреаса у Procambarus Clarkii при различных вариантах кормления // Дисс. канд. биол. наук. - М., 2003. 120 с.

5. Рязанова Т.В. Патологические изменения органов и тканей у краба-стригуна опилио (Chionoecetes opilio) на западно-камчатском шельфе Охотского моря // Исследования водных биологических ресурсов Камчатки и Северо-западной части Тихого океана - 2006. Вып. 8. С. 207-216.

6. Тамкявичене Е.А. Некоторые количественные закономерности питания широкопалого рака. Литв.: Сб. научн. тр. // Ин-т зоол. и паразитол. АН Лит. ССР. - 1979. - С. 67-76.

7. Harrison F.W, Humes A.G. Microscopic anatomy of invertebrates. Decapoda Crustacea. - New York: Willey-Liss Inc., 1992. Vol.10. 459 p.

8. Johnson P.T. Histology of the blue crab, Callinectes sapidus: a model for the Decapoda. - New York: Praeger. 1980. 440 p.

Artificially caused hepatopankreas's pathology of river crayfish

N.Yu. Koryagina, G.I. Pronina, A.O. Revyakin, O.I. Stepanova, O.V. Baranova, G.D. Kapanadze, I.Yu. Menshikov

The injection of alloxan in a dose of 100 mg/kg in a ventral sine of river crayfish leads to violation of structure of R-cages of hepatopancreas. The increase of glucose content in a hemolymph is noted.

Key words: pathology modeling, river crayfish, hepatopancreas, alloxan (C4H2N2O4).

Влияние мелаксена на функциональную активность тромбоцитов в условиях экспериментальной гипо- и гиперагрегации

Е.Н. Лазарева, Х.М. Галимзянов, М.А. Самотруева

ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразви-тия России

Контактная информация: Лазарева Елена Николаевна, [email protected]

В работе представлены данные, полученные при экспериментальном изучении регулирующего действия синтетического аналога мелатонина — мелаксена — на процессы функционирования тромбоцитов в условиях их гипо- и гиперагрегации. Гипоагрегационную модель нарушений функции тромбоцитов индуцировали введением ацетилсалициловой кислоты (per os в дозе 20 мг/кг). Гиперагрегация была вызвана внутрибрюшинным введением 0,1мл 10% раствора кальция хлорида. Изучали активность мелаксена при применении в дозах 1 мг/кг и 10 мг/кг. Установлено, что мелаксен в дозе 1 мг/кг обладает корригирующей способностью, уменьшая формирующиеся в условиях экспериментальной гипо- и гиперагрегации нарушения функциональной активности тромбоцитов.

Ключевые слова: мелаксен, тромбоциты, нарушения гемостаза, ацетилсалициловая кислота, кальция хлорид.

Введение

Одним из ключевых механизмов гемостаза является сбалансированное функционирование тромбоцитов, где повышение их агрегационной способности может спровоцировать усиление тромбообразования, а снижение — развитие геморрагического синдрома [4].

Многочисленными экспериментальными и клиническими данными показано, что гиперагрегация тромбоцитов имеет причинно-следственную связь с развитием таких тяжелых патологических состояний как инфаркт миокарда, нарушения мозгового кровообращения, сахарный диабет, гипертоническая болезнь и др.,