Индукция in vitro трансмиссивной устойчивости к тетрациклину, хлорамфениколу и ампициллину у культур Vibrio cholerae не 01/ не 0139 серогрупп, выделенных в 1990-2005 гг Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

Индукция in vitro трансмиссивной устойчивости к тетрациклину, хлорамфениколу и ампициллину у культур Vibrio cholerae не O1/ не O139 серогрупп, выделенных в 1990—2005 гг.

Н. А. СЕЛЯНСКАЯ, И. В. РЫЖКО, Л. М. ВЕРКИНА, А. В. ТРИШИНА, А. В. МИРОНОВА

ФГУЗ Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора, Ростов-на-Дону

In vitro Induction of Transmissive Resistance to Tetracycline, Chloramphenicol and Ampicillin chloramphenicol in Vibrio cholera non-O1/non-O139 Serogroups Isolated Within 1990—2005

N. A SELYNSKAYA, I. V. RYZHKO, L. M. VERKINA, A. V. TRISHINA, A. V. MIRONOVA Rostov-on-Don Research Plague Institute, Rostov-on-Don

Изучен индуцибельный характер устойчивости к тетрациклину, хлорамфениколу, ампициллину у 20 штаммов холерного вибриона не 01/не 0139 серогрупп, выщеленнык от людей в Узбекистане в 1990 г. (10 шт. ctx+), в 2001 гг. (5 шт. ctx-) и в Калмыкии в 2003—2005 гг. (5 шт. ctx-). Для восьми из двадцати взятых в опыты штаммов Vibrio cholerae не 01/не 0139 показана не только способность к индукции антибиотикоустойчивости, но и возможность её самопереноса в штаммы Escherichia coli и в обратных кроссах V.cholerae eltor Р-5879. Установлено, что воздействие антибактериального препарата на фенотипически чувствительные штаммы может повышать экспрессию маркёров резистентности при наличии в геноме штамма участков, ответственных за их экспрессию, что требует проведения постоянного бактериологического контроля эффективности лечения с определением антибиотикограмм выделенных культур со своевременной заменой неэффективного препарата на эффективный. Распространение штаммов холерного вибриона как 01, так и не 01/не 0139 серогрупп с множественной устойчивостью к антибактериальным препаратам, а также наличие у возбудителя генетической потенции к развитию антибиотикорезистентности значительно затрудняет выбор эффективных средств для профилактики и лечения инфекций, вызываемых холерными вибрионами.

Ключевые слова: трансмиссивная устойчивость, тетрациклин, хлорамфеникол, ампициллин, Vibrio cholerae не 01/не 0139 серогрупп.

Inducible character of resistance to tetracycline, chloramphenicol and ampicillin was Investigated In 20 strains of Vibrio cholera non-O1/non-O139 serogroups isolated from inhabitants of Uzbekistan in 1990 (10 strains, ctx+) and in 2001 (5 strains, ctx-) and from inhabitants of Kalmykiya within 2003—2005 (5 strains, ctx-). Eight of the 20 isolates showed not only capacity for induction of the antibiotic resistance, but also its possible self transfer to Escherichia coli and reverse crosses in El Tor V.cholerae P-5879. It was shown that the effect of the antibacterial on the isolates phe-notypic susceptibility could increase the resistance markers expression, when the genomes contained sites responsible for their expression, that required constant bacteriological control of the treatment efficacy and the use of the isolates antibioticograms for early replace of the inefficient drug by the efficient one. The prevalence of V.cholerae O1 and non-O1/non-O13 serogroups with multiple resistance to the antibacterial and the genetic potency for the antibiotic resistance development in the pathogen made difficult the choice of efficient drugs for prophylaxis and treatment of diseases caused by V.cholerae.

Key words: transmissive resistance, tetracycline, chloramphenicol, ampicillin, Vibrio cholera non-01/non-0139 serogroups.

Тетрациклин, хлорамфеникол и ампициллин входят в число основных средств, применяемых для экстренной профилактики и лечения не только холеры, но и холероподобных заболеваний, вызываемых штаммами вибрионов не

© Коллектив авторов, 2011 E-mail: plague@aaanet.ru

01/не 0139 серогрупп [1, 2]. Однако, несмотря на доказанную многими исследователями эффективность этих препаратов [3—6], в 80—90-х годах XX столетия резко увеличивается число выделяемых штаммов возбудителей кишечных инфекций с маркёрами резистентности к широко применяемым для экстренной профилактики и лечения антибактериальным препаратам. При этом всё чаще регистрируется

Таблица 1. Антибиотикограммы штаммов У.сЬо!вгае не О1/не О139 (Ctx+), выделенных от людей в Узбекистане в 1990 г., до и после пересевов на агаре Хоттингера, рН 7,2±0,1, с тетрациклином, хлорамфениколом, ампициллином

Антибактериальный Контрольный_Штамм Кско1егае не Р1/не 0139_

препарат штамм 16132 16133 16134 16136 16141 16142 16143 16144 16145 16148

У.ско1егае еНог МПК, мг/л

Р-5879

Пересевы на среде с тетрациклином

Тетрациклин 2 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5

4 128 128 128 128 128 128 128 128 128 128

Хлорамфеникол 2 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5

2 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 32 0,5

Стрептомицин 2 4 16 8 4 4 16 4 32 32 32

2 4 32 16 4 4 64 4 32 32 32

Канамицин 8 8 16 16 4 8 8 8 32 32 4

8 8 16 16 8 8 16 8 16 16 8

Рифампицин 1 16 4 4 4 4 4 4 4 16 16

1 8 8 8 8 8 8 8 8 16 8

Ампициллин 2 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 64 32 0,5

2 8 8 8 8 8 128 128 128 128 64

Фуразолидон 2 8 16 8 8 8 8 16 16 16 8

2 8 32 8 8 8 8 16 32 32 8

Налидиксовая кислота 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 1

1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1

Триметоприм/ 2/10 16/80 16/80 16/80 16/80 64/320 64/320 64/320 64/320 16/80 16/80

сульфаметоксазол 2/10 32/160 32/160 32/160 32/160 32/160 32/160 32/160 32/160 32/160 32/160

Пересевы на среде с хлорамфениколом

Хлорамфеникол 2 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5

2 32 32 32 32 32 16 16 32 32 16

Ампициллин 2 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 64 32 0,5

2 16 16 16 16 16 16 16 64 128 16

Пересевы на среде с ампициллином

Ампициллин 2 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 64 32 0,5

2 64 64 64 64 64 64 64 64 64 64

Тетрациклин 2 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5

4 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 64 0,5 0,5 0,5 0,5

Примечание. Здесь и в табл. 2: Числитель - значение МПК до селективного давления антибиотика, знаменатель - после селективного давления антибиотика.

выделение культур с множественной лекарственной устойчивостью [7—10].

Разнообразие механизмов резистентности и возможность их комбинаций часто делают затруднительной интерпретацию антибиотико-грамм возбудителя, так как даже фенотипически чувствительные штаммы бактерий могут быть источником появления резистентности к используемым в клинике антибактериальным препаратам. Наличие в геноме Vibrio cholerae eltor «молчащих» генов хлорамфениколацетилтрансферазы [11]; доказанный некоторыми авторами индуцибель-ный характер трансмиссивной резистентности к тетрациклинам, хлорамфениколу и другим антибактериальным препаратам у холерных вибрионов 01 серогруппы [12, 13] указывают на необходимость изучения этого феномена у V.cholerae не 01/не 0139 и оценки возможности отнесения некоторых к разряду штаммов с генетической потенцией к развитию устойчивости в силу наличия генов антибиотикорезистентности [14].

Целью настоящего исследования явилась оценка индуцибельности резистентности к тетрациклину, хлорамфениколу и ампициллину у штам-

мов V.cholerae не 01/не 0139, выделенных от людей в 1990—2005 гг., и способности индуцированных маркёров резистентности к конъюгативному переносу другим хозяевам.

Материал и методы

Штаммы. Из музея живых культур РостНИПЧИ было взято 20 штаммов холерного вибриона не 01/не 0139 серо-групп, выделенных от людей: в Узбекистане в 1990 г. (10 шт. ctx+) и в 2001 гг. (5 шт. ctx-), в Калмыкии в 2003—2005 гг. (5 шт. ctx-). Антибиотикочувствительные штаммы V.cholerae eltor P-5879 ctx+ tcpA+ toxR+ (1972 г., г.Таганрог) и V.cholerae non O1/ non O139 Р-9741 (КМ162) использовали в качестве контроля. В опыты конъюгации были взяты штаммы Escherichia coli QD5003 Nalr и V.cholerae eltor P-5879 Rifr.

Антибактериальные препараты: доксициклин, тетрациклин, хлорамфеникол (левомицетин), рифампицин, стрептомицин, канамицин, ампициллин, фуразолидон — препараты отечественного производства; налидиксовая кислота (невиг-рамон, Chinoin, Венгрия), ципрофлоксацин (квинтор, Тор-рент Фарм. ЛТД, Индия), триметоприм/ сульфаметоксазол (бикотрим, Adgio, Индия). Выбор препаратов определялся их использованием для этиотропной терапии холеры [2].

Чувствительность/устойчивость изучаемых штаммов к антибактериальным препаратам определяли методом серийных разведений препаратов в плотной питательной среде [агар Мюллера-Хинтон, рН 7,5 (HIMEDIA, Индия)]. Посев-

ная доза взвесей 16-18-часовых агаровых культур составляла nx106 м. к. по отраслевому стандартному образцу ГИСК им. Л. А.Тарасевича (ОСО-42-25-59-86 П). Интерпретацию результатов проводили в соответствии с МУК 4.2.2495-09 [15].

Индукцию in vitro устойчивости к тетрациклину, левоми-цетину и ампициллину осуществляли методом многократных пересевов на агаре Хоттингера рН 7,1+0,1 с возрастающими концентрациями антибактериальных препаратов.

Конъюгативную передачу маркеров антибиотикорезис-тентности от штаммов холерного вибриона клеткам E.coli QD5003 Nalr и в обратных кроссах — V.cholerae eltor Р-5879 осуществляли путем совместного культивирования в течение 3—4 ч 18-часовых бульонных культур штамма-донора и штамма-реципиента при 37°С с последующим высевом на плотные питательные среды, содержащие антибактериальные препараты для селекции трансконъюгантов и контрселекции донора.

Результаты и обсуждение

Изучение антибиотикограмм штаммов холерных вибрионов не О1/не О139, взятых в исследование, показало, что все они устойчивы к триметопри-му/ сульфаметоксазолу (МПК 16/80—64/320 мг/л). Устойчивость к другим препаратам варьировала: некоторые культуры содержали маркёры резистентности к стрептомицину (МПК 32 мг/л), канамицину (МПК 32 мг/л), рифампицину (МПК 16 мг/л), фу-разолидону (МПК 16 мг/л) в разных сочетаниях. V.cholerae не О1/не О139 16144, 16145, 18665, 18830, 18834 оказались устойчивы к ампициллину (МПК 32—128 мг/л). Отсутствие среди изученных нами

штаммов резистентных к тетрациклину и левомице-тину объясняется на наш взгляд значительным снижением фенотипической экспрессии генов, ответственных за проявление устойчивости, в результате длительного хранения и многократных пересевов без селективного давления антибиотиков. Нестабильность антибиотикорезистентности и зависимость её экспрессии от контакта с антибактериальным препаратом у возбудителя холеры 01 серогруппы описана ранее [16—18].

Все штаммы и контрольный антибиотико-чувствительный У.еко1егае еИог Р-5879 были подвергнуты селективному давлению возрастающих концентраций тетрациклина, левомице-тина, ампициллина на плотной питательной среде (агар Хоттингера, рН 7,1±0,1). Результаты представлены в табл. 1, 2.

Было установлено, что у всех штаммов холерного вибриона не 01/не 0139 серогрупп в результате селективного давления тетрациклином, ле-вомицетином и ампициллином (8—10 пересевов) устойчивость к ним повысилась до значений МПК, позволяющих отнести их к разряду устойчивых к этим антибиотикам (МПК 128,0 мг/л, 16,0—32,0 мг/л и 128,0 мг/л соответственно). Для трёх штаммов йх+ (16142, 16143, 16148) и шести с1х"(18640, 18663, 18664, 18666,18667,18833) в ре-

Таблица 2. Антибиотикограммы штаммов V.cholerаe не О1/не О139 (Ctx-) до и после пересевов на агаре Хоттингера, рН 7,2±0,1 с тетрациклином, хлорамфениколом, ампициллином

Антибактериальный препарат

Штамм V.cholerae не 01/не 0139

Контрольный_

штамм 18633 18640 18663 18664 18665 18666 18667 18830 18833 18834 V.cholerae eltor P-5879

Значение МПК, мг/л

Пересевы на среде с тетрациклином

Тетрациклин 2 05 05 05 05 0,5 0,5 05 05 05 05

4 32 32 32 64 32 32 32 32 64 32

Хлорамфеникол 2 1 05 2 2 05 2 2 0,5 05 05

2 1 0,5 2 2 0,5 2 2 0,5 0,5 0,5

Стрептомицин 2 16 4 4 4 4 4 4 4 16 4

2 16 4 4 4 4 4 4 4 32 4

Канамицин 8 8 8 16 16 16 16 16 16 16 16

8 16 8 8 8 8 8 8 32 32 32

Рифампицин 1 4 4 4 4 4 4 4 16 4 4

1 8 4 4 4 4 4 8 16 8 8

Ампициллин 2 4 2 8 4 128 4 4 128 8 64

2 8 16 64 16 64 16 16 128 128 64

Фуразолидон 2 16 8 8 16 8 8 8 8 8 8

2 32 8 8 32 8 8 8 8 8 8

Налидиксовая кислота 1 1 1 1 2 1 2 2 1 1 1

1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1

Триметоприм/ 2/10 32/160 32/160 32/160 32/160 64/320 32/160 32/160 32/160 16/80 16/80

сульфаметоксазол 2/10 32/160 32/160 32/160 32/160 32/160 32/160 32/160 32/160 32/160 32/160

Пересевы на среде с хлорамфениколом

Хлорамфеникол 2 1 05 2 2 05 2 2 05 05 05

2 16 32 32 16 32 16 16 32 32 16

Ампициллин 2 4 2 32 4 128 4 4 128 64 64

2 16 16 32 32 64 16 16 64 64 64

Пересевы на среде с ампициллином

Ампициллин 2 4 2 32 4 128 4 4 128 64 64

2 32 32 64 32 128 32 32 128 64 64

Тетрациклин 2 05 0,5 05 05 05 0,5 05 05 05 0,5

4 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5

Таблица 3. Способность индуцированных маркёров резистентности штаммов V.cholerae не О1/не О139 16144, 16145 к трансмиссивной передаче E.coliQD500з №1г и в обратных кроссах V.cholerae eltor Р-5879 Rifr

Штамм донор Штамм реципиент Селективная среда Частота передачи

Ускокгав не Е.соИ ОП5003 У.сЫвгав не Б.соИ ОП5003 У.сЫвгав не ЕхШ 0О5003 У.сЫвгав не Е.соИ ОП5003 У.сЫвгав не Е.соИ ОП5003 У.сЫвгав не

Есо1' 0^5003 У.сЫвгав не Е.соИ 0П5ооз У.сЫвгав не Е.соИ 0П5ооз У.сЫвгав не

Есо1' 0О5003 У.сЫвгав не Е.соИ 0П5ооз

01/не 0139 16144 (Т)

Ш1Г К-16144 (Т)

01/не 0139 16145 (Т) Ыа1г Я16145 (Т) 01/не 0139 16144 (Л)

Ш1Г К-16144 (Л)

01/не 0139 16145 (Л)

Ш1Г К-16145 (Л)

01/не 0139 16133 (А)

Ыа1г ^6133 (А)

01/не 0139 16136 (А)

Ыа1г К-16136 (А)

01/не 0139 16142 (А)

Ш1Г К-16142 (А)

01/не 0139 18663 (А)

Ш1Г К-18663 (А)

01/не 0139 18664 (А)

Ш1Г К-18664 (А)

01/не 0139 18833 (А)

Ыа1г К-18833 (А)_

Е.соИ ОВ5003Ыа1г Н200Т20 10-'

У.сЫвгав ейог Р-5879 Щг Р100Т8 7,5х10-

Е.соИ £>В5оозЫа1г Н200Т20 5,2х10-

У.сЫвгав ейог Р-5879 Щг Р100Т8 7,4х10-

Е.соИ £>В5оозЫа1г Н200Л20 4,3х10-

У.сЫвгав ейог Р-5879 Щг Р100Л10 8,3х10-

Е.соИ £>В5оозЫа1г Н200Л20 8х10-8

У.сЫвгав ейог Р-5879 Щг Р100Л10 1,2х10-

Е.соИ £>В5оозЫа1г Н200А8 5,7х10-

У.сЫвгав ейог Р-5879 Щг Р100А8 2,8х10-

Е.соИ £>В5оозЫа1г Н200А8 3,5х10-

У.сЫвгав ейог Р-5879 Щг Р100А8 1,3х10-

Е.соИ £>В5оозЫа1г Н200А8 3,4х10-

У.сЫвгав ейог Р-5879 Щг Р100А8 1,8х10-

Е.соИ £>В5оозЫа1г Н200А8 4,2х10-

У.сЫвгав ейог Р-5879 Щг Р100А8 10-7

Е.соИ £>В5оозЫа1г Н200А8 3,4х10-

У.сЫвгав ейог Р-5879 Щг Р100А8 1,9х10-

Е.соИ 0О5ооз Ыа1г Н200А8 2,7х10-

У.сЫвгав ейог Р-5879 Щг Р100А8 1,6х10-

Примечание. * Р100А8 - содержание рифампицина (100 мг/л) и ампициллина (8 мг/л) в селективной среде; Н200А8 - налидиксовой кислоты (200 мг/л) и ампициллина (8 мг/л); Р100Л10 - рифампицина (100 мг/л) и хлорамфеникола (10 мг/л); Р100Т8 рифампицина (100 мг/л) и тетрациклина (8 мг/л); Н200Т20 - налидиксовой кислоты (200 мг/л) и тетрациклина (20 мг/л); Н200Л20 - налидиксовой кислоты (200 мг/л) и хлорамфеникола (20 мг/л).

зультате селективного давления тетрациклином также повысились значения МПК ампициллина (МПК 64—128 мг/л), для штамма 16145 — лево-мицетина (МПК 32 мг/л), 16142 и 16133 — стрептомицина (МПК 64 мг/л). Пересевы штаммов на левомицетине также привели к увеличению значений МПК ампициллина (16—128 мг/л). Селективное давление ампициллина не изменило анти-биотикограмм штаммов в отношении других препаратов, за исключением штамма 16142, у которого выросли значения МПК тетрациклина (МПК 64 мг/л).

Для контрольного штамма Р-5879 значения МПК этих антибиотиков при этом не изменились (см. табл. 1, 2).

Таким образом, селективное давление тетрациклина, хлорамфеникола, ампициллина на чувствительные к ним культуры возбудителя может привести к индукции антибиотикорезистентности не только к этим препаратам, но дополнительно и к другим, если в его геноме сохраняются участки, ответственные за экспрессию этого признака.

Установив возможность перехода штаммов холерного вибриона от чувствительного к устойчивому к антибиотикам фенотипу, необходимо было изучить их способность передавать маркёры резистентности другим хозяевам в опытах конъюгации (табл. 3), для чего было отобрано по три штамма йх+ и Сх-, значения МПК антибиотиков которых после воздействия были наиболее высокими.

Два штамма с устойчивостью к левомицетину и тетрациклину (16144, 16145 Лх+) передавали признак тетрациклино- или хлорамфениколоус-

тойчивости в кроссах с реципиентом Е.соИ ОБ5003Ма1г и в обратных кроссах к У.скокгав еНог Р-5879 с частотой пх10-7—10Л

Все штаммы, взятые в конъюгацию из числа проявивших устойчивость к ампициллину (16133, 16136, 16142 с1х+ и 18663, 18664, 18833 ^х"), оказались способны передавать этот признак Е.соИ и в обратных кроссах к У.скокгав еНог Р-5879 с частотой пх10-7—10Л

Сравнительное изучение антибиотикограмм доноров, реципиентов, Я+-трансконъюгантов (табл. 4) показало, что вместе с индуцированными маркёрами антибиотикорезистентности все взятые в исследование культуры передавали устойчивость к триметоприму/ сульфаметоксазолу, стрептомицину и ампициллину, но не к фуразолидону.

Способность к конъюгативному переносу г-детерминант устойчивости может служить доказательством наличия у данного штамма-донора холерного вибриона генетического материала, ответственного не только за экспрессию резистентности, но и определяющего способность к самопереносу другим бактериям. Решение этого вопроса имеет не только научное, но и практическое значение, т. к. применение антибактериального препарата, к которому зарегистрирована чувствительность, в случае наличия у возбудителя генетической потенции к реверсии резистентности может оказаться неэффективным.

Таким образом, для восьми из двадцати взятых в опыты штаммов У.скокгав не 01/не 0139 показана не только способность к индукции ан-тибиотикоустойчивости, но и возможность её са-

Таблица 4. Экспрессия маркёров индуцированной in vitro антибиотикорезистентности штаммов V.cholerae не О1/ не О139 в клетках E.coli и V.choleraeО1 Р-5879

№ Штамм микроорганизма Количество Маркёры резистентности

опыта исследованных донор реципиент трансконъюгант

культур

1 Донор V.cholerae не О1/ О139 16144 (Т)* Реципиент E.coli QD5003 Nalr Трансконъюгант E.coli QD5003 Nalr R.16144(t) 1 FurrTcSm ApTmpSmz 1 Nalr NalrTcApSm TmpSmz

2 Донор V.cholerae не О1/ О139 16145 (Т)* Реципиент E.coli QD5003 Nalr Трансконъюгант E.coli QD5003 Nalr R-16145(t) 1 FufApSmCmTc TmpSmz 1 Nalr NalrApSmTc TmpSmz

3 Донор V.cholerae не О1/ О139 16144 (Л)* Реципиент E.coli QD5003 Nalr Трансконъюгант E.coli QD5003 Nalr R-16144^) 1 FurrApSmCmTmpSmz 1 Nalr NalrApSm CmTmpSmz

4 Донор V.cholerae не О1/ О139 16145 (Л)* Реципиент E.coli QD5003 Nalr Трансконъюгант E.coli QD5003 Nalr R-16145^) 1 FurrApCmSmTmpSmz 1 Nalr NalrApSmCm TmpSmz

5 Донор V.cholerae не О1/не О139 16133(A)* Реципиент E.coli QD5003 Nalr Трансконъюгант E.coli QD5003 Nalr R-16133(a) 1 FurrApSmTmpSmz 1 Nalr NalrApSmTmpSmz

6 Донор V.cholerae не О1/ О139 16136 (A)* Реципиент E.coli QD5003 Nalr Трансконъюгант E.coli QD5003 Nalr R-16136(A) 1 ApTmpSmz, 1 Nalr NalrApTmpSmz

7 Донор V.cholerae не О1/не О139 16142(A)* Реципиент E.coli QD5003 Nalr Трансконъюгант E.coli QD5003 Nalr R-16142(A) 1 ApTcTmpSmz 1 Nalr NalrApTcTmpSmz

8 Донор V.cholerae не О1/не О139 18663 (A) Реципиент E.coli QD5003 Nalr Трансконъюгант E.coli QD5003 Nalr R-18663(A) 1 FurrApTmpSmz 1 Nalr NalrApTmpSmz

9 Донор V.cholerae не О1/не О139 18665 (A) Реципиент E.coli QD5003 Nalr Трансконъюгант E.coli QD5003 Nalr R-18665(A) 1 ApTmpSmz 1 Nalr NalrApTmpSmz

10 Донор V.cholerae не О1/не О139 18833 (A) Реципиент E.coli QD5003 Nalr 1 ApTmpSmz 1 Nalr

Трансконъюгант E.coli QD5003 Nalr R-18833(A) 6 NalrApTmpSmz

Примечание. * - (А), (Л), (Т) - обозначение антибиотика (ампициллин, левомицетин, тетрациклин), воздействие которого in vitro привело к восстановлению устойчивости; Nalr - обозначение мутации к налидиксовой кислоте; Furr -устойчивость к фуразолидону; Sm, Ap, Cm, Tc, TmpSmz - трансмиссивная устойчивость к стрептомицину, ампициллину, хлорамфениколу (левомицетину), тетрациклину, триметоприму/сульфаметоксазолу

мопереноса в штаммы E.coli и в обратных кроссах V.cholerae eltor Р-5879.

Заключение

Результаты настоящего исследования свидетельствуют об индуцибельном характере устойчивости к тетрациклину, левомицетину, ампициллину у штаммов холерного вибриона не О1/ не О139 серогрупп и способности индуцированных маркёров к трансмиссивному самопереносу другим хозяевам. При этом в клетках могут экс-прессироваться и другие маркёры антибиотико-

ЛИТЕРАТУРА

1. Санитарно-эпидемиологические правила СП 3.1.1086-02. Профилактика холеры. Общие требования к эпидемиологическому надзору за холерой. М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2002; 85.

2. Методические указания 3.4.2552-09 Организация и проведение первичных противоэпидемических мероприятий в случаях выявления больного (трупа), подозрительного на заболевания инфекционными болезнями, вызывающими чрезвычайные ситуации в области санитарно-эпидемиологического благополучия населения: Методические указания. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009; 151.

резистентности к антибиотикам, воздействию которых культуры не подвергались.

Таким образом, воздействие антибактериального препарата в ходе эпидемического процесса может повышать экспрессию маркёров резистентности к ряду препаратов при наличии в геноме V.cholerae не О1/не О139 участков, ответственных за их экспрессию, что требует проведения постоянного бактериологического контроля эффективности лечения с определением антибиотикограмм выделенных культур со своевременной заменой неэффективного препарата на эффективный.

3. Бароян О. В. Холера Эль-Тор. М.: 1971; 255.

4. Бургасов П. Н. Холера Эль-Тор. Руководство для врачей. М.: 1971; 264.

5. Islam M R Single dose tetracycline in cholera. Gut 1987; 28: 8: 1029—1032.

6. Pallet A. P., Smyth E. G. Clinicians guide to antibiotics. Tetracycline. Brit J Hosp Med 1988; 40: 5: 385—390.

7. Марамович A. С, Погорелое В. И., Урбанович Л. Я, Шкаруба T. T. Холера Эльтор в Латинской Америке. Журн микробиол эпидеми-ол иммунобиол 2001; 5: 82—90.

8. Даеиденко С. Н, Хайтович А. Б., Ильичев Ю. А. и др. Мониторинг чувствительности к антибиотикам холерных вибрионов 01, выде-

ленных в Украине // Холера и патоген. для человека вибрионы: Мат. пробл. комиссии. Ростов на/Д, 2004; вып.17.

9. Ehara M, Nguyen B. M, Nguyen D. T. et al. Drug susceptibility and its genetic basis in epidemic Vibrio cholerae O1 in Vietnam. Epidemiol Infect 2004; 132: 4: 595—600.

10. Iwanaga M, Toma C., Miyazato T. et al. Antibiotic resistance conferred by a class I integron and SXT constin in Vibrio cholerae O1 strains isolated in Laos. Antimicrob Agents Chemother 2004; 48: 7: 2364—2369.

11. Rowe-Magnus P. A., Guerout A. M, Mazel D. Bacterial resistance evolution by recruitmend of super-integron gene cassettes. Mol Microbiol 2002; 43: 6: 1657—1669.

12. Рыжко И. В., Шутъко А. Г., Ломов Ю. М. и др. Индукция in vitro трансмиссивной устойчивости к тетрациклину, левомицетину, ампициллину, стрептомицину у культур Vibrio cholerae eltor, выделенных от людей в 1986—1992 г. //Холера и патоген. для чел. вибрионы: Матер. пробл. комиссии науч. совета по сан.-эпид. охране территории РФ. Ростов н/Д., 2006; вып 19: 73—78.

13. Шутъко А. Г., Дудина Н. А., Рыжко И. В. и др. Индуцибельная трансмиссивная резистентность к тетрациклинам и гентамицину у множественноустойчивого штамма Vibrio cholerae eltor, выделенного от больного в 2005 г. Мат. Всероссийской науч.-практ. конф. «Антибиотикорезистентность и антимикробная химиотерапия», Махачкала. 2006; 99—100.

14. Lewis J. S, Jorgensen J. H. Inducible clindamycin resistance in staphylococci: should clinicians and microbiologists be concerned? Clinical Infectious Diseases. 2005; 40: 280—285.

15. Методические указания 4.2.2495-09 Определение чувствительности возбудителей опасных бактериальных инфекций (чума, сибирская язва, холера, туляремия, бруцеллёз, сап, мелиоидоз) к антибактериальным препаратам. М.: 2009; 59.

16. Фецайлова О. П. Миронова А. В., Подосинникова Л. С. Сравнительная характеристика штаммов холерных вибрионов, выделенных на Украине (г.Вилково) в 1991г. и в Дагестане (г. Изербаш) в 1994 г. Эпидемиологические и клинико-иммунологические аспекты профилактики важнейших инфекционных заболеваний (материалы конференции). Астрахань. 1996; 147—148.

17. Подосинникова Л. С. Чувствительность к антибиотикам вибрионов Эль-Тор, выделенных в СССР в период VII пандемии. Холера в СССР в период VII пандемии / Под ред. В. И. Покровского. М.: 2000; 237—245.

18. Рыжко И. В., Дудина Н. А., Ломов Ю. М, Цураева Р. И. Нестабильность экспрессии антибиотикорезистентности как одна из причин вариабельности маркёров устойчивости у холерного вибриона биотипа эльтор. Холера и патоген. для чел. вибрионы: Мат. пробл. комиссии науч. совета по сан-эпид. охране территории РФ. Ростов н/Д., 2007; вып. 20: 82—87.