CC BY
30
УДК 616.36:612.014.426
ИММУНОМЕТАБОЛИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ КУЛЬТУРАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ АЛЛОГЕННЫХ ГЕПАТОЦИТОВ, ЭССЕНЦИАЛЕ И ГИПОКСЕНА ПРИ ОСТРОМ ТОКСИЧЕСКОМ ПОРАЖЕНИИ ПЕЧЕНИ
М.С. Разумова, Е.С. Литвинова, А.В. Харченко, Н.А. Быстрова, В.П. Гаврилюк
ФГБОУ ВО КГМУ «Курский государственный медицинский университет» Минздрава России Курск, Российская Федерация
Аннотация. Использование фармакологических препаратов (эссенциале форте Н и гипоксена) и культуральной жидкости аллогенных гепатоцитов в условиях острого токсического поражения печени (ОТПП) позволило корригировать нарушения иммунного и метаболического статусов на системном уровне.
Ключевые слова: аллогенные гепатоциты, эссенциале, гипоксен.
Введение. Отсутствие эффективных средств и способов коррекции нарушений иммунного и метаболического статусов и профилактики морфологических изменений в ткани печени при ее поражениях определяет целесообразность использования культуральной жидкости аллогенных гепатоцитов первоначально в условиях эксперимента как отдельно, так и в сочетании с фармакологическими препаратами (антиоксидантами и мембранопротек-торами) [1—3].
Материал и методы исследования. Острую интоксикацию ЧХУ у 84 крысах-самцах Вистар проводили путем внутримышечного его введения в дозе 3 мл/кг в виде 50% раствора в оливковом масле пятикратно с интервалом 24 ч [2]. Выделение аллогенных гепатоцитов и их культуральной жидкости от новорожденных животных производилась по методике M.N. Berry, D.S. Friend [4]. Полученную КЖАГ вводили с первой инъекцией ЧХУ пятикратного (с 24-часовым интервалом) внутрибрюшинно из расчета 5 мг/кг белка. Гипок-сен животным вводили внутрижелудочно в дозе 15 мг/кг через 25 часа № 5, а эссенциале форте Н по 5 мг/кг в пересчете на фосфатидилхолин, растворенных в 1 мл оливкового масла, внутрижелу-дочно через 24 часа № 5.
Для оценки функционального состояния гепатоцитов в плазме крови определяли активность аспартат- и аланинаминотрансфераз (АСТ, АЛТ), щелочной фосфатазы (ЩФ), гаммаглутаминтранс-пептидазы (ГГТ), содержание билирубина (БР), протромбиновый индекс (ПТИ) и тимоловую пробу концентрацию фибриногена (ФГ). Функционально-метаболическую активность полиморфно-ядерных лейкоцитов крови оценивали по фагоцитарному показателю (ФИ), фагоцитарному числу (ФЧ), реакции восстановления нитросинего тетра-золия (НСТ-тест). Существенность различий оценивали по ^критерию ф < 0,05).
Результаты исследования. Острая интоксикация ЧХУ вызывает развитие основных биохимических синдромов поражения печени: цитолиза (увеличение активности АСТ, АЛТ, снижение коэффициента де Ритиса), внутри- и внепеченочного холестаза (повышение активности ЩФ и ГГТ), внутриклеточного холестаза с желтухой и токсическим поражением гепатоцитов (увеличение содержания БР, активности АЛТ, АСТ, ЩФ, ГГТ, значения коэффициентов де Ритиса и ГГТ/АСТ становятся меньше 1), недостаточности синтетических процессов (снижение ПТИ и ФБ) (табл.).
—--
Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
The Journal of scientific articles "Health and Education Millennium", 2016. Vol. 18. No 12
—--—
Таблица
Иммунометаболические эффекты использования культуральной жидкости аллогенных гепатоцитов, эссенциале и гипоксена при остром токсическом поражении печени (М ± т)
Показатели 1 2 3 4 5
Контроль Отравление ЧХУ и введение:
— Эссенциале, гипоксен КЖАГ КЖАГ, эссенциале, гипоксен
АСТ, Е/л 29,2 + 2,4 55,1 + 4,2* 45,4 + 3,3*1,2 30,3 + 2,7*2,3 28,5 + 1,9*2,3
АЛТ, Е/л 22,4 + 1,9 89,5 + 5,1* 51,2 + 6,3*1,2 34,8 + 3,3*1-3 25,9 + 2,2*2-4
ГГТ, Е/л 5,9 + 0,2 19,6 + 2,2* 12,5 + 2,1*1,2 5,6 + 0,4*2,3 6,1 + 0,3*2,3
БР, мкмоль/л 5,4 + 0,3 18,5 + 1,2* 8,2 + 0,9*1,2 6,3 + 0,3*1-3 5,9 + 0,5*2,3
ПТИ, % 62,3 + 3,8 46,8 + 3,5* 58,1 + 4,2*2 56,1 + 3,1*2 60,7 + 5,1*2
ФГ, г/л 4,1 + 0,1 2,3 + 0,03* 3,7 + 0,1*1,2 3,8 + 0,1*1,2 4,0 + 0,14*2,3
ФИ, % 46,8 + 2,4 74,3 + 2,9* 60,3 + 3,0*1,2 58,4 + 2,8*1,2 48,0 + 1,9*2-4
ФЧ, абс. 2,3 + 0,09 3,1 + 0,06* 3,0 + 0,05* 2,4 + 0,1*2,3 2,2 + 0,12*2,3
НСТ-сп., % 10,4 + 1,3 15,8 + 1,1* 13,5 + 1,0*1,2 12,8 + 1,1*2 12,2 + 1,4*2
НСТ-ст., % 24,2 + 2,1 33,4 + 3,0* 30,5 + 2,7* 25,8 + 17*2,3 24,7 + 1,5*2,3
ФРН, % 13,8 + 1,4 17,6 + 1,3* 17,0 + 1,1* 13,0 + 1,4*2,3 12,5 + 2,0*2,3
Примечание: звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (р < 0,05); цифры рядом со звездочкой — по отношению к показателям какой группы даны эти различия.
Введение животным эссенциале и гипоксена на фоне отравления ЧХУ позволило нормализовать ПТИ и корригировать, но не до уровня нормы, активность АСТ, АЛТ, ГГТ, концентрацию билирубина и фибриногена. Одновременное с отравлением ЧХУ введение КЖАГ нормализует активность АСТ, ГГТ, ПТИ и корригирует в сторону нормы остальные показатели, характеризующие функционально-метаболическую активность гепатоцитов. Введение животным с ОТПП одновременно КЖАГ и эссенциале с гипоксеном нормализует изученные биохимические показатели в крови, отражающие функциональную активность гепатоцитов (см. табл.).
Интоксикация ЧХУ приводит к повышению всех показателей фагоцитарной и кислород-зависимой активности нейтрофилов периферической крови. Введение эссенциале и гипоксена животным, отравленных ЧХУ, корригирует ФИ нейтрофилов периферической крови и значения НСТ-теста спонтанного. Применение КЖАГ как отдельно, так и в сочетании с эссенциале и гипоксеном, привело к нормализации всех показателей функционально-метаболической активности нейтрофи-лов периферической крови за исключением ФИ (см. табл.).
Выводы. При острой интоксикации ЧХУ установлено развитие основных биохимических
синдромов поражения печени, активация функционально-метаболической активности нейтрофилов периферической крови. Введение культуральной жидкости гепатоцитов интактных крыс алло-генным реципиентам в условиях интоксикации ЧХУ в сочетании с фармакологическими препаратами (эссенциале форте Н и гипоксеном) более эффективно, по сравнению с их раздельным использованием, корригирует системные метаболические нарушения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гаврилюк В.П., Белоконова О.П., Конопля А.И., Быстрова Н.А. Эффективность различных лекарственных форм «Фосфоглива» в коррекции структурно-функциональных нарушений мембраны эритроцитов при остром токсическом поражении печени // Системный анализ и управление в биомедицинских системах. 2011. № 10(2). С. 269—273.
2. Литвинова Е.С., Терехова С.В., Быстрова Н.А., Гаврилюк В.П. Иммунометаболический статус у ин-тактных животных при введении культуральной жидкости аллогенных гепатоцитов, гептрала и мексикора // Врач-аспирант. 2012. № 3.2 (52). С. 315—319.
3. Сомова Л.М., Беседнова Н.Н., Плехова Н.Г. Апоптоз и инфекционные болезни // Инфекция и иммунитет. 2014. Т. 4, № 4. С. 303—318.
4. Berry M.N., Friend D.S. High-Yield preparation of isolated rat liver parenchymal cells // The Journal of Cell Biology. 1969. Vol. 43. P. 506—520.
—--
Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
Разумова М.С. и др. Иммунометаболические эффекты использования культуральной жидкости...
—----
IMMUNE AND METABOLIC EFFECTS
OF CULTURE FLUIDS OF ALLOGENEIC HEPATOCYTES,
ESSENTIALE AND HYPOXEN IN ACUTE TOXIC LIVER INJURY
M.S. Razumova, E.S. Litvinova, A.V. Harchenko, N.A. Bystrova, V.P. Gavriliouk
Kursk state medical university Kursk, Russian Federation
Annotation. The study of hepatocytes in hepatitis of various etiologies has not only fundamental, but also important clinical significance. The aim of the study was to investigate the influence of the culture fluids of allogeneic hepatocytes, Essentiale Forte H and Hypoxen, immune and metabolic disorders, in conditions of poisoning with carbon tetrachloride.
Key words: allogenic hepatocytes, Essentiale, Hypoxen.
REFERENCES
1. Gavrilyuk V.P., Belokonova O.P., Konoplya A.I., Bystrova N.A. Efficiency of various dosage forms «Fosfo-gliv» in correction of structural and functional disturbances of a membrane of erythrocytes at an acute toxic lesion of a liver. Sistemnyy analiz i upravlenie v biomeditsinskikh sistemakh, 2011, no. 10(2), pp. 269—73 (in Russian).
2. Litvinova E.S., Terekhova S.V., Bystrova N.A., Gavrilyuk V.P. The immunometabolic status at intact ani-
mals at introduction of cultural liquid of allogenic hepatocytes, a geptral and a meksikor. Vrach-aspirant, 2012, no. 3.2 (52), pp. 315—9.
3. Somova L.M., Besednova N.N., Plekhova N.G. Apoptosis and infectious disease. Russian Journal of Infection and Immunity, 2014, vol. 4, no. 4, pp. 303—318.
4. Berry M.N., Friend D.S. High-Yield preparation of isolated rat liver parenchymal cells. The Journal of Cell Biology, 1969, vol. 43, pp. 506—20.
