CC BY
62
Медицинская Иммунология 2003, Т.5, №3-4 ©2003, СПб РОРААКИ
ИММУНОЛОГИЯ АТЕРОСКЛЕРОЗА
АНТИТЕЛА К ВИРУСУ ПРОСТОГО ГЕРПЕСАУ БОЛЬНЫХ С ОСЛОЖНЕННЫМ ТЕЧЕНИЕМ КОРОНАРНОГО АТЕРОСКЛЕРОЗА
Барышева A.C.. Бородин А.Г., Шилова О.В., Вдовенко О.В.*
Кафедра терапии педиатрического факультета Ярославской государственной медицинской академии; Лаборатория клинической иммунологии
МУЗ «Городская поликлиника №3 им. H.A.Семашко», Рыбинск*
Инициальные механизмы повреждения сосудистой стенки и развития атеросклероза являются предметом мно-гочисленных дискуссий [R.Ross,1999; С.К.Glass, J.LWitztum, 2001]. Обсуждается роль активации иммунных реакций и/или прямого повреждающего воздействия наэндотелий инфекционных агентов [K.W.Minetal.,1987; S.E.Epstein et al.;1996, S.Kubo et al.,1994]. Имеются указания на то, что персистенция вирусов способна вызывать дегенерацию интимы коронарных сосудов с развитием атеросклероза.
Целью настоящей работы явилось изучение инфицированное™ вирусом простого герпеса больных с клиническими проявлениями осложненного коронарного атеросклероза и определение клинико-инструментальных корреляционных соотношений.
В исследование были включены 37 больных (22 мужчины (59,5%) и 15 женщин (40,5%)) в возрасте от 34 до 77 лет (в среднем 62,9±3,28 лет). ОИМ диагностирован у 21 пациента (56,7%). Мелкоочаговый инфаркт миокарда отмечен у 9 (24,3%) больных, крупноочаговый у 12 (32,4%). У11 (29,7%) больных текущий ОИМ был первым, повторным у 10 (27,0%), в 1 случае отмечалось рецидивирующее течение. У 16 больных (43,2%) имелось нестабильное течение стенокардии. Из 37 обследованных больных двое (5,4%) умерли в течение первых трех суток от начала развития ОКС. В ходе работы изучались IgG-антитела к вирусу простого герпеса методом иммуноферментного анализа с использованием диагностикумов «Вектор-Бест» (г.Новосибирск). В качестве критериев повышения рассматривался показатель выше 0,175 ед.опт.пл. в соответствии с рекомендациями фирмы-производителя.
При анализе полученных результатов в группе пациентов с ОКС средний уровень (М±8) IgG-антител к вирусу простого герпеса составил 1,502±0,35 ед.опт.пл. (от 0,799 до 2,261) и был достоверно повышен (р<0,05). Увеличенный уровень IgG-антител (>0,175 ед.опт.пл.) обнаружен у всех 37 больных (100%). При корреляционном анализе уровня IgG-антител к вирусу простого герпеса в сыворотке крови обнаружена прямая зависимость с уровнем общего холестерина г = 0,53 (р < 0,05), С-реактивного белка г = 0,402 (р<0,05)иСОЕ г = 0,756 (р< 0,001). Данные литературы свидетельствуют о высокой частоте ИБС среди лиц с наличием IgG-антител к вирусу простого герпеса [B.N.Fields,1996, A.Blum,1998]. Проведенное нами исследование указывает на участие герпетической инфекции в развитии хронической ИБС, что подтверждается прямой зависимостью соответствующих антител с уровнем обще-
го холестерина, а также роли вирусов простого герпеса в развитии локальной или общей воспалительной реакции в течении острых коронарных событий.
Полученные данные свидетельствуют о патогенетической связи инфицированности вирусом простого герпеса с прогрессированием клинических проявлений коронарного атеросклероза.
ЦИТОХИМИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ МОНОЦИТОВ КРОВИ У БОЛЬНЫХ СТАБИЛЬНОЙ СТЕНОКАРДИЕЙ ПОСЛЕ ИНФРАКРАСНОЙ ЛАЗЕРОТЕРАПИИ
Демидов A.A.
Астраханская государственная медицинская академия
Важную роль в развитии атеросклероза играют проникающие в интиму макрофаги, в которых появляется большое количество биологически активных веществ (протеа-зы, гидролазы, факторы роста и др.) и рецепторов липоп-ротеинов низкой плотности, отсутствующих в этих клетках в период циркуляции моноцитов в крови. В ряде работ было проведено определение эстерифицированного холестерина в моноцитах. Отмечено, что у больных ИБС более высокое общее количество холестерина и эстерифицированного холестерина в моноцитах. Высокий уровень эстерифицированного холестерина в моноцитах был связан с концентрациями в плазме холестерина липопротеидов низкой плотности. Нами проведено исследование цитохимической активности лизосомальных ферментов - эсте-раз у больных стабильной стенокардией в моноцитах крови. Было обследовано 89 больных стабильной стенокардией (I-IV ФК), 37 из которых дополнительно к стандартной терапии получали накожную инфракрасную лазеротерапию (НИКЛ) аппаратом «МИЛТА». В качестве контроля обследовано 49 здоровых лиц. На мононуклеарных мазках, полученных по общепринятым методикам, изучалась активность следующих ферментов: а-нафтилацетат эстеразы (АЭ), н афто л - А S - х л о ра цетат эстеразы (ХЭ), а-нафтилбутират эстеразы (БЭ) и кислой эстеразы (КЭ). Подсчет продукта реакции проводился в световом микроскопе полуколичественным методом Kaplow. Полученные результаты представлены в таблице.
После НИКЛ активность исследованных ферментов изменяется следующим образом: активность АЭ существенно снижается, достоверно не отличаясь от показателей контрольной группы (р>0,05). При сравнении показателей до лечения и после лечения различие достоверно (р<0,05). Активность ХЭ, до лечения существенно сниженная, после НИКЛ значительно повышается и достоверно не отличается от контрольной группы (р>0,05), при сравнении показателей до и после лечения различия достоверны (р<0,05). Активность БЭ, практически не изменяющаяся после стандартной терапии, после НИКЛ снижается даже ниже показателей контрольной группы, отличие от которой недостоверно (р>0,05). При сравнении показателей до и после лечения различия достоверны (р<0,05). Активность КЭ остается на том же уровне, как после стан-
Табл. 1. Динамика эстеразной активности в моноцитов крови больных стенокардией после различных видов терапии (СЦПусл.ед. М±т)
Фермент контроль до лечения после лечения
стандартная терапия НИКЛ
АЭ 112,82±2,13 137,40±3,71* 129,12±0,12* ** 115,02±3,94‘*
ХЭ 98,53±1,88 79,61 ±2,57* 86,44±2,21* ** 95,18±2,54**
БЭ 108,12±1,82 118,55±1,82* 114,74±2,76* 104,28±2,43*‘
КЭ 92,8013,06 99,75±1,16* 96,44±2,25 96,89±2,23
Примечание: *р<0,05 по сравнению с контрольной группой;
**р<0,05 по сравнению до и после лечения.
дартной терапии, так и после НИКЛ, достоверных отличий при сравнении до и после лечения не выявлено.
Полученные результаты показывают возможность немедикаментозной коррекции липолитической активности моноцитов крови, что в перспективе должно привести к более широкому использованию этих методов в клинической практике.
ИММУНОКОРРЕКЦИЯ ПРИ ИБС ПОСЛЕ ОПЕРАЦИИ РЕВАСКУЛЯРИЗАЦИИ МИОКАРДА
Добродеева Л.К.. Миролюбова O.A., Сенькова Л.В., Лютфалиева Г.Т., Шошина О.В.
Институт физиологии природных адаптаций УРО РАН, МК «Биокор»,
Архангельск, Россия
Иммунный статус у больных с ИБС с компонентами метаболического синдрома отличается повышенным содержанием в крови CD3, CD4, CD8, CD10, CD25, CD71, CD95, антикардиолипиновых антител и ЦИК. Установлены корреляционные взаимосвязи между маркером апоп-тоза, атерогенной дислипидемией и уровнем содержания в крови антикардиолипиновых антител. Найдены параллели содержания данных аутоантител с прокоагулянтной активностью, а также концентраций CD8+ и ферментов КФК, ЛДГ (маркеров тканевого повреждения). Открытая операция на сердце в условиях искусственного кровообращения обусловливает повышение содержания в крови CD16 , HLA DR и антител к ds-DNA, повышение содержания IgE, TNF-a и IL-2. Чрезмерное увеличение содержания CD8+, CD10+ и CD95+ в первые сутки после операции ассоциируется с изменениями концентраций КФК и ACT, с тяжелыми осложнениями коронарной хирургии и полиорганной недостаточностью. Проведено динамическое обследование до и после иммунокоррекции 25 больных, перенесших операцию реваскуляризации с тяжелыми осложнениями коронарного шунтирования. Практически у всех больных, перенесших операцию от 3 до 9 месяцев назад и обратившихся в медицинскую компанию «Биокор», регистрировали повышенные концентрации антикардиолипиновых антител (в среднем 79,5+11,3 ед. мл), ЦИК (93,8+18,6 %), TNFa (0,91±0,2 нг/мл), IL-2 (0,66±0,11 нг/мл), IgE (155,8±32,5 ед/мл), CD95 (1,2±0,2х 109 кл/л) на фоне резкого снижения функциональной активности фагоцитоза (34,5±2,7%). В комплекс иммуномодулирующей терапии были включены стимулятор фагоцитарной активности суполан (фукоидан) в дозе 5 мг/ кг массы тела один раз в сутки за 30 мин до завтрака, альгинат калия в дозе 15 мг/кг во время обеда и альгинат кальция (15 мг/кг) вместе с 0,6 г тюленьего или рыбьего жира. Сочетание интенсивной сорбционной терапии и стимулятора фагоцитоза обеспечило в течение 4 недель при-
менения заметные изменения ряда иммунных параметров и объективных данных, отражающих состояние сердечнососудистой системы. К данному периоду обследования наблюдали резкое снижение содержания до физиологических уровней, IgE (у 23 больных), ЦИК (у 21), TNF-a (17 случаев), CD95 (16) и повышение фагоцитарной защиты (у 13). Все больные отмечали улучшение самочувствия: отсутствие постоянных болей в области сердца отмечали 23 больных, одышки не было у 19, нарушений сердечного ритма не замечали 20 человек. Включение в курс лечения суполана, обладающего пролонгированным гепариноподобным эффектом, дало возможность значительно снизить дозировку аспирина, а в 6 случаев отказаться от него.
ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ ИММУННОГО СТАТУСА У БОЛЬНЫХ ИНФАРКТОМ МИОКАРДА
Козлов В.В.. Смолянинов А.Б., Цыган В.Н.
Военно-медицинская академия, городская больница № 20, г.Санкт-Петербург, Россия
Целью нашего исследования явилось изучение иммунного статуса больных острым инфарктом миокарда (ОИМ). Обследовано 25 больных ОИМ (средний возраст 55,1 ±6,3 лет). В контрольную группу вошли 10 здоровых доноров - мужчин (средний возраст 35,6±3,7 года). У всех больных в первой группе имелся острый трансмуральный инфаркт миокарда, у 16 с задней локализацией, у 9 с локализацией в области верхушки левого желудочка. В анамнезе у 14 больных имелась гипертоническая болезнь, а у 3 пациентов сахарный диабет II типа, среднетяжелое течение. Иммунологический статус исследовался на проточном цитометре «FACScan» фирмы «Becton Dickinson» с использованием различных комбинаций прямых моноклональных антител и изотипических контролей.
У пациентов ОИМ были диагностированы изменения показателей состояния клеточного иммунитета: CD3 (Т-лимфоциты) 74,3±3,2% (р<0,05); CD3 CD4+ (Т-лимфоци-ты хелперы/индукторы) 35,1±2,8% (р<0,05); CD3CD8 (цитотоксические Т-лимфоциты) 34,1±1,8% (р<0,001); CD4 CD8 (незрелые Т-лимфоциты) 4,5±0,8% (р<0,05); индекс CD3 CD4/CD3 CD8 1,21+0,02% (р<0,01); CD3-CD16 CD56+ (истинные NK - клетки) 11,8±1,7% (p<0,01)j CD3 CD16 CD56+ (Т-киллеры) 8,8±1,1% (p<0,01); CD19 (В-лимфоциты) 14,2±1,1% (р<0,01); CD3 HLA-DR (активированные Т-лимфоциты) 18,3±2,2% (р<0,05); CD3-HLA-DR (активированные В-лимфоциты и NK-клетки) 20,1+1,9% (р<0,01); CD3 CD25+ (активированные Т-лим-фоциты, a-цепь рецептора интерлейкина-2) 26,7+1,6% (р<0,01). При ОИМ наблюдалось увеличение содержания циркулирующих иммунных комплексов, так среднемолеку-
лярные составили 152,3+5,4 ед. (р<0,01); а низкомолекулярные 375,4+15,9% (р<0,001). У больныхОИМ в первые сутки повышается содержание CD3 CD8 (Т-цитотокси-ческих лимфоцитов), CD4 CD8 (незрелых Т-лимфоцитов), усиливается плотность экспрессии активационных маркеров CD3 HLA-DR, CD3 CD25+ на поверхности Т-лимфоцитов, что свидетельствует об избирательной активации отдельных субпопуляций Т-лимфоцитов, в сыворотке крови наблюдается выраженное увеличение содержания средне- и низкомолекулярных иммунных комплексов.
Таким образом, у больных ОИМ в первые сутки заболевания имеется нестабильность иммунологического фенотипа, возрастает плотность экспрессии маркера ранней активации, CD3 CD25 и поздней активации CD3-HLA-DR.
НАРУШЕНИЯ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ И МЕТАБОЛИЧЕСКИЙ СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТЫЙ СИНДРОМ
Красильникова Е.И.. Шляхто Е.В., Благосклонная Я.В., Сергеева Е.Г., Фрейдлин И.С.
Кафедра факультетской терапии СПбГМУ им. акад. И.П.Павлова
Первые работы, посвященные изучению механизмов развития заболеваний, входящих в понятие «Метаболический сердечно-сосудистый синдром» (МС), относятся к началу XX века, было показано, что ожирение, артериальная гипертензия (АГ), сахарный диабет (СД) тип 2, гиперлипи-демия (ГЛ) чрезвычайно часто сочетаются и ведут к ускоренному развитию атеросклероза. При этом было высказано предположение об общности их патогенеза. В 1988 г.
G.Reaven объединил все вышеперечисленные заболевания в единый «синдром X», указав, что инсулинорезистентность (ИР) и гиперинсулинемия (ГИ) являются связующими звеньями этих болезней. Позднее понятие «синдром X» было дополнено нарушениями со стороны свертывающей системы крови и гиперурикемией. Однако нарушения иммунной системы до сих пор не включены в понятие МС, в то время как их значение в механизмах развития атеросклероза в настоящее время не вызывает сомнений.
В связи с изложенным представлялось актуальным изучить состояние некоторых показателей иммунной системы у больных с заболеваниями, составляющими МС. В качестве объекта исследований были выбраны моноциты (Мн) крови, роль которых в атерогенезе хорошо документирована.
Было обследовано 132 больных, страдающих ожирением, из которых у 122 имела место АГ, 66 - страдали СД тип 2,32 - имели клинические проявления ишемической болезни сердца (ИБС). Оценивали адгезивную и фагоцитарную активность Мн крови, содержание в них липидов и лизосом. Определялся липидный спектр сыворотки крови и содержание в ней инсулина.
Установлено значительное повышение адгезивной способности Мн крови, снижение их фагоцитарной активности, значительное увеличение содержания в них липидных включений и уменьшение содержания лизосом. Получены данные, свидетельствующие о существенных изменениях функционального состояния Мн как у больных с полным МС, так и у больных с отдельными его компонентами. Проведенный многофакторный анализ свидетельствует о наличии тесных взаимосвязей между выявленными нарушениями функциональных характеристик
Мн крови и атерогенными изменениями липидного спектра крови, а также имеющейся ГИ. Складывается впечатление, что ИР, ГИ и ГЛ, имеющиеся у больных ожирением, способствуют развитию выраженных изменений в системе мононуклеарных фагоцитов. В свою очередь, выявленные нами изменения со стороны Мн крови могут принимать непосредственное участие в механизмах возникновения и прогрессирования атеросклероза и его клинических проявлений. Предлагается включить изменения в иммунной системе в понятие «Метаболический сердечно-сосудистый синдром».
КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАЛЛЕЛИ И ЦИТОКИНОВАЯ РЕГУЛЯЦИЯ АТЕРОГЕНЕЗА
Мишланов В.Ю.. Сидоров Д.В., Обухова О.В., Дубровина В.В.
Пермская медицинская академия, курорт “Усть-Качка”, Пермь
Ранее нами были опубликованы результаты исследования, продемонстрировавшие взаимосвязь между клиническими критериями течения ИБС, распространенностью атеросклероза магистральных сосудов и способностью к стресс-индуцированному высвобождению холестерина нейтрофилами в процессе культивирования в неполной питательной среде.
Цель исследования: изучить механизмы регуляции липидвысвобождающей способности лейкоцитов (ЛВСЛ) под влиянием биологически активных веществ, а также состояние ЛВСЛ при различных воспалительных заболеваниях.
Материал исследования составили 32 больных бронхиальной астмой (БА), 12 больных хронической обструк-тивной болезнью легких (ХОБЛ), 12 больных пневмонией, а также 40 практически здоровых лиц. План обследования включал: общие анализы крови и мочи, ЭКГ, R-логическое исследование органов грудной клетки, исследование липидного спектра сыворотки крови, других биохимических тестов, а также функции внешнего дыхания и мокроты. Выполнялось ультразвуковое сканирование магистральных сосудов с помощью аппарата Hewlett Packard Sonos 4500. У всех обследованных проведено исследование ЛВСЛ in vitro по оригинальной авторской методике (патент РФ № 2194995 от 20.12.2002). Изучали ферментативную активность культивируемых нейтрофилов в НСТ-тесте, который выполняли до начала культивирования, к концу 1-х и 3-х суток культивирования у больных ИБС. Проведена оценка влияния некоторых бактериальных антигенов, биологически активных веществ и иммунотроп-ных препаратов на ЛВСЛ.
Результаты показали, что преднизолон в концентрации 15 мкг/мл культуральной среды подавляет высвобождение холестерина в 63,6% случаев. Ронколейкин - синтетический аналог IL-2 (5000 ЕД/мл) - во всех случаях стимулировал этот процесс. Имунофан в концентрации 0,025 мкг/мл снижал ЛВСЛ у 46,1%, увеличивал - у 30,8% и не изменял - у 23,1% пациентов. У отдельных больных ИБС мы наблюдали резкую многократную стимуляцию липидвысвобождающей способности лейкоцитов при добавлении в культуру лейкоцитов антигенов гонококковой вакцины. В течение первых суток активность ферментов, оцениваемых в НСТ-тесте, оставалась высокой и даже несколько возрастала, что указывает на активные метаболические процессы. Установлено, что больные пневмони-
ей отличаются достаточно низкими величинами ЛВСЛ, особенно низкие значения определяются у больных нагно-ительными заболеваниями легких. Получены достоверные различия средних величин ЛВСЛ у больных БА и ХОБЛ. Увеличение ЛВСЛ у больных ХОБЛ соответствовало высокой частоте выявления атеросклероза магистральных сосудов методом ультразвукового сканирования. Тяжесть БА имеет обратную взаимосвязь с величиной ЛВСЛ и концентрацией ß-XC в крови.
Таким образом, в исследовании продемонстрирована зависимость нарушений липидного обмена от механизмов иммунорегуляции при воспалительных заболеваниях. Процесс высвобождения холестерина опосредован реакцией иммунокомпетентных клеток (Т-лимфоцитов) - основных продуцентов IL-2. Стимулирующее влияние микробных антигенов на ЛВСЛ можно объяснить участием сенсибилизированных Т-лимфоцитов больного.
ДИНАМИКА СОДЕРЖАНИЯ ОКСИПРОЛИНА И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ЦИТОКИНА TGF-ß В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ ОСТРЫМ ИНФАРКТОМ МИОКАРДА
Нургалиева Г.К.. Богданов А.Ю.*. Беляев H.H.*
НИИ кардиологии и внутренних болезней;
* Институт молекулярной биологии и биохимии им. МЛ. Айтхожина, Алматы, Казахстан
В последнее время получены данные о значительной роли воспаления в механизмах возникновения острого коронарного синдрома. В этом аспекте большой интерес представляет изучение специфических маркеров воспаления -цитокинов, которые могут быть прогностически более значимыми в определении процессов, связанных с развитием острого инфаркта миокарда (ОИМ) и формированием постинфарктного рубца. Известно, что при ОИМ некрозу подвергается не только мышечная ткань, но и интерстициальная структура сердца. Направленность процессов синтеза и деструкции межуточной ткани миокарда наиболее адекватно отражает содержание в основном структурном элементе коллагене аминкислоты гидроксипролина. Существенное значение при этом имеет дифференциация гидроксипролина на две фракции - СОП и ПОП, по изменению которых можно судить о выраженности деструктивных и репаративных процессов. Есть мнение, что именно TGF-ß контролирует экспрессию коллагенов при развитии атеросклероза. Целью настоящей работы явилось изучение динамики концентрации оксипролинов и противовоспалительного цитокина - TGF-ß у больных ИБС, перенесших инфаркт миокарда. Уровень содержания противовоспалительного цитокина TGF-ß определяли с помощью коммерческих ИФА-наборов фирмы «Boehringer Mannheim» (Германия). Концентрацию свободного и пептидосвязанного оксипролина (СОП и ПОП) в сыворотке крови определяли по методу П.И.Шараева. Нами были обследованы 16 больных ОИМ со средним возрастом 45,6±1,4 года и 10 практически здоровых лиц, сопоставимых по полу и возрасту. У всех больных диагностирован
первичный крупноочаговый инфаркт миокарда, чаще была переднеперегородочная локализация, в остальных случаях - заднедиафрагмальная. Встречались осложнения в виде нарушения ритма и проводимости (50%), сердечной недостаточности (43%), аневризмы миокарда левого желудочка (28,6%), отека легких и другие (29%). Проводилась традиционная терапия. Тромболитические, антибактериальные, гормональные и противовоспалительные лекарственные средства больные не получали. Сроки исследований -1 и 21 сутки острого инфаркта миокарда. Полученные результаты динамики концентрации TGF-ß, а также СОП и ПОП в сыворотке крови представлены в таблице.
Как видно из таблицы, динамика уровня концентрации TGF-ß и ПОП имеет одинаковую направленность, в то время как СОП и цитокин находятся в обратной корреляционной зависимости. Возможно, это связано с тем, что в процессе коллагенообразования при организации постин-фарктной рубцовой ткани цитокин TGF-ß является одним из ключевых факторов.
HELICOBACTER PYLORI, КИСЛОРОДЗАВИСИМЫЙ МЕТАБОЛИЗМ НЕЙТРОФИЛОВ И АНТИОКСИДАНТНАЯ ЗАЩИТАУ БОЛЬНЫХ С ОБОСТРЕНИЕМ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ СЕРДЦА
Павлов О.H., Кратнов А.Е.
Государственная медицинская академия, Ярославль, Россия
Цель исследования: изучить состояние кислородза-висимого метаболизма нейтрофилов и антиоксидантной защиты у больных с обострением ишемической болезни сердца (ИБС) и сопутствующим сахарным диабетом 2 типа в зависимости от наличия инфекции Helicobacter pylori.
Материал и методы. Проведена фиброэзофагогастро-дуоденоскопия с множественными биопсиями слизистой оболочки желудка 32 больным с обострением ИБС - нестабильной стенокардией и инфарктом миокарда без зубца Q. Из них с обострением ИБС без диабета - 15, с обострением ИБС и сопутствующим сахарным диабетом 2 типа - 17 пациентов. Средний возраст больных в различных группах достоверно не различался. Количественную оценку степени обсеменения H. pylori слизистой оболочки желудка проводили по шкале Л.И. Аруина. Были изучены состояния кислородзависимого метаболизма нейтрофилов (HCT-тест, миелопероксидаза) и антиоксидантной защиты (глутатионпероксидаза в нейтрофилах, супероксиддис-мутаза и каталаза плазмы крови), активность перекисно-го окисления липидов (малоновый диальдегид).
Таблица. Кислородзависимый метаболизм нейтрофилов, антиоксидантная защита, активность перекисного окисления липидов у больных с обострением ИБС в зависимости от наличия H. pylori.
В течение 6 месяцев наблюдения после выписки из стационара количество повторных коронарных событий (возобновление стенокардии покоя, (ре)инфаркт миокарда, коронарная смерть) у больных с обострением ИБС было достоверно больше у больных с наличием инфекции
H. pylori (60%>33,3%; р=0,04). Сильная (3+) степень обсе-
Показатель 1 сутки 21 сутки Доноры
TGF-ß, пг/мл 891,6±18,4 1054,0±19,2; Р<0,001 922,6±14,4
СОП 12,11 ±064 932±0,51; Р<0,05 6,90±0,35
ПОП 7,12±0,71 9,35±0,50; Р<0,05 9,20±0,45
РЕЗУЛЬТАТЫ
Показатель Н. pylori отсутствует п = 6 Сильная степень обсеменения Н. pylori п = 13 Р
Спонтанный НСТ-тест 102,7±15,2 111,0±9,7 НД
Стимулированный НСТ 95,3±2,5 128,0±12,6 0,02
Глутатионпероксидаза 77,1 ±71,0 24,6±31,0 нд
Каталаза 532,2±106,2 286,3±52,8 0,01
Супероксиддисмутаза 3,4±0,6 2,0±0,7 0,04
Малоновый диальдегид 40,7±10,3 57,6±3,9 0,04
менения Н. pylori слизистой оболочки антрального отдела желудка достоверно чаще (58,8>20%; р=0,02) выявлялась у пациентов ИБС с диабетом. У пациентов с обострением ИБС и наличием Я. pylori при поступлении в стационар наблюдался более высокий уровень стимулированного лектином НСТ-теста с нейтрофилами, снижение содержания глутатионпероксидазы в клетках, повышение уровня малонового диальдегида в плазме. При этом у больных с сильной (3+) степенью обсеменения слизистой оболочки желудка Н. pylori на фоне дальнейшего роста уровня малонового диальдегида в плазме крови содержание глу-татионредуктазы в нейтрофилах достигало минимальных значений.
Заключение: наличие сахарного диабета 2 типа и более частое развитие повторных коронарных событий у больных с обострением ИБС ассоциируется с наличием инфекции Я. pylori, высокая степень обсеменения которой слизистой оболочки антрального отдела желудка сопровождается активацией кислородзависимого метаболизма нейтрофилов и “коллапсом” их антиоксидантной защиты.
СВЯЗЬ КИСЛОРОДЗАВИСИМОГО МЕТАБОЛИЗМА НЕЙТРОФИЛОВ С РАЗВИТИЕМ ДИАСТОЛИЧЕСКОЙ ДИСФУНКЦИИ ПРИ ОСТРОМ КОРОНАРНОМ СИНДРОМЕ
Попов С.А.. Кратнов А.Е.. Углов Е.С.
Государственная медицинская академия, Ярославль, Россия
В настоящее время остаётся невыясненной роль состояния кислородзависимого метаболизма нейтрофилов и антиоксидантной защиты в развитии сердечной недостаточности у больных с острым коронарным синдромом (ОКС).
Цель работы: изучение связи состояния кислородзависимого метаболизма нейтрофилов и антиоксидантной защиты с развитием сердечной недостаточности у больных с ОКС.
Методы: обследовано 87 больных с ОКС, из них 48 -с нестабильной стенокардией, 12 - с инфарктом миокарда без зубца Q и 27 - с инфарктом миокарда с зубцом Q. Средний возраст больных составил 64,1 ±8,9 лет. Наблюдение за больными для выявления неблагоприятных исходов проводилось в течение шести месяцев с момента поступления в стационар. Неблагоприятными исходами считались: смерть, сердечно-легочная реанимация, (ре)ин-фаркт миокарда, тяжёлая повторная стенокардия покоя, прогрессирование хронической сердечной недостаточности, возникновение аритмий. Всего больных с неблагоприятными исходами было 26 (29,9%). Больным проводилось общеклиническое обследование, прекардиальную электрокардиотопографию в 35 отведениях (ПЭКТГ), стандарт-
ная эхокардиография (ЭХОКГ), изучение параметров трансмитрального кровотока в импульсном допплеровском режиме, а также специальные иммунологические методики. Для оценки кислородзависимого метаболизма нейтрофилов (НФ) использовались спонтанный и стимулированный НСТ-тест (в качестве индукторов применялись взвесь убитых клеток Staphylococcus aureus штамма Р-209 и фитогемагглютинин). Для оценки состояния системы антиоксидантной защиты определяли уровни ката-лазы и супероксидисмутазы (СОД) в плазме крови, глю-татионредуктазы в нейтрофилах. Интенсивность перекис-ного окисления липидов оценивали по уровню малонового диальдегида (МДА) плазмы.
Результаты: в группе больных с неблагоприятными исходами были отмечены следующие достоверные отличия: более высокие степень (EST 9,9±10,7>3,8±6,8 мм, р=0,003) и площадь (nST 7,7±6,7>4,2±6,1 см2, р=0,02) ишемического повреждения миокарда, по данным ПЭКТГ при поступлении, снижение фракции выброса левого желудочка (ЛЖ) (46,8±7,2<54,6± 16,4 мл, р=0,04), замедление заполнения ЛЖ в раннюю диастолу (Ve/Va 0,6±0,1<0,8±0,2, р=0,04), рост резерва активности мембранной НАДФ-оксидазы НФ при стимуляции С3Ь-рецеп-торов (125±21,1>107,7±25,4 нмоль восст. НСТ, р=0,01) на фоне увеличения уровня промежуточных продуктов пере-кисного окисления липидов в плазме крови (МДА 73±23,6>57,9± 16,7 мкмоль/л, р=0,008). Также у этих больных отмечалось недостоверное снижение антиоксидант-ных ферментов плазмы (каталазы и СОД).
Заключение: у больных с неблагоприятными исходами ОКС при поступлении в стационар наблюдались более выраженные ишемическое повреждение миокарда и диастолическая дисфункция левого желудочка, сопровождавшиеся большей активацией кислородзависимого метаболизма нейтрофилов на фоне недостоверного снижения антиоксидантной защиты плазмы крови.
СОДЕРЖАНИЕ ПРО - И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА С ОСТРЫМ КОРОНАРНЫМ СИНДРОМОМ И СТАБИЛЬНОЙ СТЕНОКАРДИЕЙ НАПРЯЖЕНИЯ
Сергеева Е.Г., Красильникова Е.И., Шляхто Е.В., Галкина О.В.
Кафедра факультетской терапии СПбГМУ им. акад. И.П.Павлова
В литературе последних лет обсуждаются иммуновос-палительные механизмы патогенеза острых форм ишемической болезни сердца, причём большое значение придаётся нарушению баланса про- и противовоспалительных цитокинов. Известно, что цитокины регулируют межкле-
точные взаимодействия, поддерживают системное и местное воспаление в атеросклеротической бляшке с её последующей дестабилизацией и развитием острого коронарного синдрома. Целью настоящей работы явилось изучение содержания провоспалительных цитокинов: интерлейкина-^, интерлейкина 8 и фактора некроза опухоли-альфа, а также противовоспалительного цитокина интерлейкина 4 в сыворотке крови больных ИБС с острым коронарным синдромом и стабильной стенокардией напряжения. Использовали метод иммуноферментного анализа, набор моноклональных антител НИИ ОЧБ. Обследовано 38 мужчин с верифицированным диагнозом ИБС в возрасте от 42 до 68 лет. Пятнадцать больных были госпитализированы по поводу острого коронарного синдрома, остальные 23 пациента наблюдались по поводу стабильной стенокардии напряжения 2-3 функционального класса. Пятнадцать больных наблюдались в динамике на фоне терапии симвастатином в дозе 10 мг в сутки.
В ходе проведённого исследования было установлено, что концентрации 1Ь-ф в сыворотке крови больных ИБС с острым коронарным синдромом было существенно выше, чем в группе больных ИБС со стабильным течением стенокардии напряжения 4, 0 ± 0,72 пкг/мл против 1,5±0,32 пкг/мл, Р<0,05. Отмечалось значимое повышение содержания интерлейкина 8 в группе пациентов с острым коронарным синдромом (11,4±3,5 пкг/мл и 2,1±1,1 пкг/мл при стабильной стенокардии). Достоверных различий в содержании ТЖ-а в этих двух группах пациентов выявлено не было (1,4±0,04 и 1,8±0,06 соответственно). Нами установлено, что у больных ИБС содержание 1Ь-1(3 в сыворотке крови имело достоверную регрессионную зависимость с концентрацией интерлейкина 8 - г=0,504, Р<0,01. Выявлено, что концентрация противовоспалительного цитокина интерлейкина 4 в сыворотке крови больных ИБС с острым коронарным синдромом была достоверно ниже, чем у больных со стабильной стенокардией напряжения И-Ш функционального класса: (44±3,4 против 56+1,5 пкг/мл, Р<0,05). Наблюдалась слабая отрицательная статистически недостоверная корреляция между активностью 1Ь-4 и 1Ь-1 (3. На фоне терапии симвастатином ( курс терапии - 2 месяца) наблюдалось достоверное снижение содержания 1Ь8 (от 5,2± 1,2 до 3,7±0,9 пкг/мл)). В динамике в среднем на 36% уменьшилась продукция ТЫР-а.
Таким образом, в ходе проведённого исследования выявлена высокая активность таких провоспалительных цитокинов, как 1ИР и интерлейкин 8 у больных острым коронарным синдромом. Известно, что 1Ь-ф способствует активации местного и системного воспаления, усиливает дисфункцию эндотелия, продукцию им 1Ь-8. Интерлейкин 8, в свою очередь, индуцирует процесс миграции и адгезии лейкоцитов (преимущественно мононуклеаров) к интиме, особенно в зонах повреждения эндотелия, что способствует прогрессированию атеросклеротических изменений сосудов.
Интерлейкин 4 ингибирует синтез провоспалительных цитокинов. Поэтому выявленное нами снижение уровня 1Ь-4 у больных ОКС способствует дальнейшему усилению процесса иммунного воспаления и дестабилизации атеросклеротической бляшки, что лежит в основе острого коронарного синдрома. Полученные нами данные свидетельству-
ют, что в ряде случаев плеотропный эффект симвастатина связан со снижением активности провоспалительных цитокинов, что подчёркивает актуальность его применения у больных с острым коронарным синдромом.
СОДЕРЖАНИЕ 11.-1, И-2, И-6 В СТЕНКЕ АОРТЫ, АРТЕРИИ И ВЕНЕ У БОЛЬНЫХ ИБС
Столов С.В.. Зарайский М.И. *, Мазуров В.И., Раймуев К.В., Шнейдер Ю.А., Немченко Е.В.
Медицинская академия последипломного образования, СПб, Россия;
* Государственный университет им. акад. И.П. Павлова, СПб, Россия
Иммуновоспалительные повреждения сосудистой стенки вносит существенный вклад в развитие атеросклероза. Важная роль в этом процессе принадлежит провос-палительным цитокинам, секретируемым эндотелием и клетками, инфильтрирующими атеросклеротически измененные артерии.
Цель исследования: определение содержания 1Ь-1, 1Ь-2 и 1Ь-6 в сосудистой стенке у больных коронарным атеросклерозом.
Детекцию ¿ЯКА цитокинов проводили методом РТ-ПЦР в биоптатах аорты, лучевой артерии и подкожной вены голени, полученных во время операции аорто-коро-нарного шунтирования 12 больных. Результаты исследования отражены в таблице.
Полученные данные показывают, что сосудистая стенка периферической артерии, аорты и вены у больных коронарным атеросклерозом содержит ¡1ША изучаемых цитокинов. Однако содержание интерлейкинов в образцах различно. В аорте выявляется преимущественно 1Ь-2 (10 образцов из 12 (83,3%)), в то время как в лучевой артерии тех же больных он обнаруживается лишь в одном случае (8,3%).
В лучевой артерии основными выявляемыми цитоки-нами были 1Ь-1 и 1Ь-6 (8 образцов (66,7%) и 9 (75,0%) соответственно), в то время как в аорте эти цитокины выявлялись редко (2 образца (16,7%) и 1 (8,3%) соответственно). В вене регистрировались 1Ь-1 и 1Ь-6 (25 и 33%, соответственно), но не 1Ь-2.
Различие в содержании интерлейкинов свидетельствует о принципиальном отличии в характере воспаления, протекающего в аорте и лучевой артерии при ИБС. В аорте (и коронарных сосудах) развивается адаптивный иммунный ответ, о чем свидетельствует продукция 1Ь-2, тогда как в зонах с относительно благоприятным течением процесса (лучевой артерии) основное значение имеет неспецифическое воспаление, опосредуемое макрофагальным звеном иммунной системы, основными цитокинами которого являются 1Ь-1,1Ь-6 и ТОТ-а.
Известно, что атеросклероз развивается в сосудах резистивного типа, но не поражает венозную систему. В значительной степени это связано с меньшей выраженностью иммунного воспаления в вене и, как следствие, низкой цитокиновой продукцией; при этом в стенке вены вырабатываются преимущественно “доиммунные” цитокины - 1Ь-1 и 1Ь-6.
Исследуемый материал 11.-1 11.-2 11.-6
Аорта, (% обнаружений) 2 (16,7%) 10(83,3%) 1 (8,3%)
Артерия, (% обнаружений) 8 (66,7%) 1(8,3%) 9 (75,0%)
Вена, (% обнаружения) 3 (25%) 0 4 (33%)
Основной вывод исследования заключается в следующем: в дебюте атеросклероза основными участниками сосудистого воспаления выступают макрофаги, трансформирующиеся в пенистые клетки и синтезирующие IL-1 и IL-6; в дальнейшем, по мере прогрессирования заболевания, в зоны атеросклеротического повреждения мигрируют лимфоциты, определяющие развитие адаптивного иммунитета. Лечебная тактика у больных ИБС должна строиться с учетом иммунной составляющей патогенеза заболевания.
ВЛИЯНИЕ ИНСУЛИНА НА ПРОДУКЦИЮ ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ МОНОЦИТАМИ У БОЛЬНЫХ С МЕТАБОЛИЧЕСКИМ СЕРДЕЧНОСОСУДИСТЫМ СИНДРОМОМ
Суслова Т.Е.. Груздева О.В., Кошельская O.A., Карпов P.C.
Научно-исследовательский институт кардиологии ТНЦ СО РАМН, Томск, Россия
Инсулинорезистентность - предполагаемый общий механизм развития артериальной гипертонии, сахарного диабета 2 типа, дислипидемии, абдоминального ожирения, состояний, сочетание которых объединяют в рамки метаболического сердечно-сосудистого синдрома и обусловливающих развитие сердечно-сосудистых осложнений. В ранее представленных материалах мы предположили участие интерлейкина-lß (IL-lß) и фактора некроза опухоли-ос (TNF-a) в формированиии инсулинорезистентности на основании выявленных взаимосвязей между уровнем IL-lß и TNF-a в плазме крови и содержанием инсулина, С-пептида у больных с нарушенной толерантностью к углеводам. У больных с метаболическим синдромом при наличии сахарного диабета 2 типа клетки организма находятся в условиях сформировавшегося относительного дефицита инсулина. В связи с этим целью работы явилось изучение влияния инсулина in vitro на продукцию моноцитами IL-lß и TNF-a у больных с метаболическим сердечно-сосудистым синдромом, имеющих сочетание сахарного диабета 2 типа, артериальной гипертонии, дислипидемии, ишемической болезни сердца.
Обследовано 30 больных с метаболическим синдромом, имеющих сочетание сахарного диабета 2 типа, артериальную гипертонию, дислипидемию, ишемическую болезнь сердца. Больные имели компенсированное течение сахарного диабета, в зависимости от способа коррекции гипергликемии группа обследованных больных была разделена на две подгруппы. У пациентов первой подгруппы (п=14) нормогликемия поддерживалась только диетическими мероприятиями, пациенты второй подгруппы (п=16) для коррекции гипергликемии получали препараты - производные сульфонилмочевины II поколения. Исследования проводили после отмены предшествующей гипотензивной терапии. Контрольной группой служили 15 здоровых доноров. Моноциты получали с помощью избирательного прилипания в плоскодонных флаконах из взвеси мононуклеаров, выделенных дифференциальным центрифугированием в градиенте плотности с п= 1,077 г/ см3. В супернатантах суточной культуры моноцитов определяли уровень IL-lß и TNF-a, изучали продукцию цитокинов спонтанную, индуцированную бактериальным липополисахаридом (ЛПС) и в присутствии инсулина. Оценивали также концентрации IL-lß и TNF-a в плазме крови.
Содержание IL-lß и TNF-a в плазме крови было увеличенным у больных первой подгруппы, достоверных различий в уровнях провоспалительных цитокинов у больных второй подгруппы и здоровых доноров обнаружено не было. Индуцированная ЛПС продукция IL-lß и TNF-a моноцитами у больных как первой, так и второй подгруппы была сниженной по сравнению с контрольной группой. Спонтанная продукция IL-lß и TNF-a была значительно увеличена у больных первой подгруппы по сравнению со здоровыми донорами и больными второй подгруппы. Сравнительный анализ влияния инсулина на продукцию моноцитами провоспалительных цитокинов показал, что инсулин in vitro в физиологической концентрации (0,3 нМ) не оказывал эффекта на спонтанную выработку IL-lß и TNF-a у здоровых доноров, несущественно влиял на моноциты больных второй подгруппы и вызывал значительное снижение спонтанной продукции IL-lß больных первой подгруппы. В этой же подгруппе имелась тенденция к уменьшению продукции TNF-a под влиянием инсулина.
Полученные результаты свидетельствуют, что в условиях инсулинорезистентности моноциты приобретают способность к повышенному синтезу IL-lß и TNF-a. Инсулин in vitro, снижая относительную инсулиновую недостаточность, уменьшает продукцию провоспалительных цитокинов. По всей видимости, у больных с медикаментозной коррекцией гипергликемии пониженный спонтанный синтез провоспалительных цитокинов в моноцитах и нормальный их уровень в плазме крови является следствием снижения инсулинорезистентности, известно, что производные сульфанилмочевины II поколения повышают чувствительность тканей к инсулину.
Таким образом, инсулин является фактором, который регулирует выработку провоспалительных цитокинов моноцитами у больных с метаболическим синдромом, имеющих выраженную инсулинорезистентность. По-видимому, некорригируемая относительная недостаточность инсулина приводит к повышенному синтезу провоспалительных цитокинов, которые в свою очередь способствуют поддержанию инсулинорезистентности, замыкается порочный круг, результатом которого являются сердечнососудистые поражения.
СОДЕРЖАНИЕ ФАКТОРА ВИЛЛЕБРАНДА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ У БОЛЬНЫХ С ОСТРЫМ КОРОНАРНЫМ СИНДРОМОМ
Шилова О.В.. Бородин А.Г., Барышева A.C., Ражева O.K., Баранов A.A.
Ярославская государственная медицинская академия, Дорожная клиническая больница, ст. Ярославль
В последние годы особый интерес проявляется к иммунным нарушениям в формировании и прогрессировании атеросклеротического поражения сердечно-сосудистой системы. Одним из главных патогенетических механизмов атеросклероза является реакция на повреждение сосудистой стенки, прежде всего, эндотелия. Эндотелиальные клетки играют фундаментальную роль в регуляции свертывания крови, сосудистого тонуса и им-муновоспалительных реакций, что позволяет рассматривать воспаление стенки сосуда в качестве одного из основных механизмов формирования острого коронарного синдрома (ОКС).
Широко обсуждается роль иммунологических маркеров дисфункции эндотелия, в том числе фактора Виллеб-ранда (ФВ). Высвобождение ФВ из эндотелиоцитов индуцируется различными провоспалительными стимулами, повышение базального уровня ФВ, по данным некоторых авторов, ассоциируется с риском развития сосудистых осложнений у пациентов с нарушениями липидного обмена.
Целью настоящей работы явилось изучение содержания в сыворотке крови ФВ у больных с ОКС (нестабильная стенокардия (НС), инфаркт миокарда (ОИМ) с зубцом 0, и без зубца (2). Кровь у больных с ОКС забирали в сроки до 12 ч от момента появления его симптомов.
В исследование включены 37 больных (22 мужчины (59,5%) и 15 женщин (40,5%)) в возрасте от 34 до 77 лет (в среднем 62,9±3,28 лет). ОИМ диагностирован у 21 пациента (56,7%). Инфаркт миокарда без зубца О, отмечен у 9 (24,3%) больных, с зубцом Q - у 12 (32,4%). У 11 (29,7%) больных текущий ОИМ был первым, повторным у 10 (27,0%), в 1 случае отмечалось рецидивирующее течение. Недостаточность кровообращения отмечена у 34 пациентов (91,9%), отек легких -у 3 (8,1%), нарушения ритма - у 7 (18,9%). Из 37 обследованных больных двое (5,4%) умерли в течение первых трех суток от начала развития ОКС.
Определение ФВ в сыворотке крови проводилось с помощью иммуноферментного метода. Концентрация ФВ в группе контроля (20 здоровых доноров) находилась в пределах от 0,15 до 2,01 МЕ/мл. Среднее значение соста-
вило 1,06±0,34 (М±6). В качестве верхней границы нормы использовалось значение 2,1 МЕ/мл (М + 36 доноров).
При анализе полученных результатов в группе пациентов с ИБС средний уровень ФВ составил 3,09± 1,31 МЕ/мл (от 1,16 до 6,32 МЕ/мл) и был достоверно выше показателей доноров (р<0,05). Повышенный уровень ФВ (> 2,1 МЕ/мл) обнаружен у 27 больных (77,1%), что превышает значения контрольной группы (р < 0,001). Высокие титры ФВ (более М + 106 доноров) отмечены у 3 пациентов. Одна из этих больных погибла в первые сутки наблюдения. При анализе клинической картины ИБС у двух других пациентов отмечено тяжелое течение госпитального периода с частым рецидивированием болевого синдрома.
При корреляционном анализе содержания ФВ обнаружена отрицательная зависимость с уровнем общего белка г = - 0,85 (р < 0,001), мочевины (г = 0,31, р = 0,07, н.д.) и креатинина (г = 0,48, р < 0,05). У 17 больных (45,9%) был диагностирован сахарный диабет 2 типа. Обнаружена зависимость содержания ФВ и повышения уровня глюкозы крови (г = 0,42, р < 0,02).
Таким образом, для больных с ОКС характерно повышение уровня ФВ в сыворотке крови, что коррелирует с рядом клинических и лабораторных показателей. Дальнейшее изучение ФВ при ОКС, вероятно, позволит уточнить патогенетическую роль данного субстрата при ИБС, оценить возможную предикторную роль ФВ в развитии ИБС и ее осложнений.
