CC BY
72
■ Аграрный вестник Урала №4 (83), 2011 г.-
Ветеринария
Таблица 1
Иммунизация важенок и нетелей ПК «Малтан» Момского района
№ стада ПК «Малтан» Иммунизиро- ваны Кол-во животных Отелилось животных Мертворож- денных тугутов Аборти- ровало
№ 2 B.abortus 75/79-АВ В дозе 50 млрд. м. к. 475 356 2 3 (на 9 и 20-е сутки)
сроки после вакцинации (75 и 90) было установлено, что к этому времени бруцеллы вакцинного штамма практически элиминируется из организма оленей.
Результаты изучения иммунологической реактивности вакцины из штамма B. abortus 75/79-АВ при введении в организм северных оленей подтверждают, что данный штамм действительно является слабо-агглютиногенным и к 70 дню выпадает диагностические титры в сыворотке крови привитых животных.
Аллергическое исследование, проведенное с использованием бруцеллина ВИЭВ, показало, что процент положительно реагирующих на 70 день после вакцинации составляет 22,2-25,0 % и в целом не зависит от дозы введения исходного штамма.
Результаты проверки напряженности иммунитета у северных оленей, привитых вакциной из штамма B. abortus 75/79-АВ, показали, что через 5 месяцев после иммунизации северные олени, привитые вышеуказанной вакциной в разных дозах подкожного введения, противостояли заражению референтным штаммом B. suis 1330 в дозе 25 млн. м. к. (100 % иммунны).
Полученные данные свидетельствуют о том, что вакцина из слабоагглютиноген-ного штамма B. abortus 75/79-АВ является
безвредной для организма оленей и пригодной для иммунопрофилактики бруцеллеза северных оленей. Оптимальной для северных оленей является доза в 50 млрд. м. к.
Однако необходимо было изучить абортогенные свойства вакцины, так как ее применение проходило в основном на фоне ранее используемой вакцины из штамма B. abortus 82.
Результаты исследований.
Для решения этого вопроса мы провели иммунизацию всех важенок и нетелей стада № 2 ПК «Малтан» Момского района в марте 2007 года.
Иммунизацию провели вакциной из штамма B. abortus 75/79-АВ в дозе 50 млрд. м. к. подкожным методом (табл. 1).
После иммунизации в течение 60 дней вели наблюдение за привитыми животными. Результаты изучения абортогенно-сти вакцины были подведены комиссионно.
Всего в период отела отелилось 395 важенок и нетелей, из них мертворожденных — 2 гол.
Абортировало всего 3 важенки, у одной аборт произошел на 9-ые сутки, а у двух других — на 20-ые.
Всего в период отела было отмечено 2 мертворожденных трупа.
От абортированных плодов был взят патологический материал и отправлен на бактериологическое исследование.
Результаты бактериологического исследования оказались отрицательными на бруцеллез.
Выводы. Рекомендации.
Вакцина живая сухая из штамма B. abortus 75/79-АВ не обладает абортогенными свойствами, и ее можно применять важенкам и нетелям не зависимо от сроков их беременности.
Литература
1. Евграфов Г. Г. Изучение иммунологической реактивности организма северных оленей при реиммунизации вакцинами из штаммов B. abortus 75/79-AB // X сибирский ветеринарный конгресс. Новосибирск, 2010. С. 155, 330.
2. Слепцов Е. С., Захарова О. И., Аммосов Г. Г. Результаты испытаний вакцины из штамма Brucella abortus 75/79-АВ при бруцеллезе северных оленей // Материалы международной науч.-практ. конф., посвященной к 110-летию ВИЭВ, Москва, 9-10 октября 2008 г. М., 2008. С. 126-128.
иммунологическая реактивность организма северных оленей при повторной реиммунизации
ВАКЦИНАМИ ИЗ ШТАММОВ B. ABORTUS 82
И B. ABORTUS 75/79-АВ
Е. С. СлЕПЦов, доктор ветеринарных наук, заведующий лабораторией бруцеллеза и туберкулеза животных, н. в. виноКуров, ведущий специалист,
Г. Г. Евграфов, младший научный сотрудник, якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства, в. и. Федоров, кандидат ветеринарных наук, заведующий кафедрой акушерства, патанатомии и ветсанэкспертизы, якутская ГСХА
677007, Республика Саха (Якутия), г. Якутск, ул. Красильникова, д.15
Ключевые слова: инфекционный процесс, иммунитет, штамм, эпизоотический процесс, вакцина. Keywords: Infection process, immunity, strain, epizootic process, vaccine.
Цель и методика исследований.
Одним из важнейших условий подъема животноводства и обеспечения населения продуктами питания является снижение, а затем ликвидация инфекционных болезней сельскохозяйственных животных. В оленеводстве актуальным вопросом является проблема бруцеллеза северных оленей. Не менее важным является ликвидация бруцеллеза в эпидемиологическом отношении, так как больные бруцеллезом животные являются источником инфекции для людей [3].
Однако искоренение этой болезни представляет большую проблему, требующую значительных трудозатрат и проведения комплекса ветеринарно-санитарных и организационно-хозяйственных мероприятий [2]. В настоящее время при специфической профилактике бруцеллеза северных оленей применяется вакцина из слабо-агглютиногенного штамма B. abortus 82 [2].
Нами в литературе не было обнаружено материалов по реиммунизации противобруцеллезными вакцинами
против бруцеллеза северных оленей.
В связи с этим была поставлена цель изучения иммунологической реактивности организма северных оленей при повторной реиммунизации вакцинами из штаммов Brucella abortus 82 и 75/79-АВ.
Работа была выполнена в период с 2005 по 2010 гг. в ПК «Малтан» и СХПК «Искра» Момского района Республики Саха (Якутия).
В неблагополучном по бруцеллезу оленеводческом стаде № 2 ПК «Малтан» была
Таблица 1
Схема опыта по изучению иммунологической реактивности организма северных оленей при
первичной и вторичной иммунизации
№
Иммунизированы вакцинным штаммом
Кол-во
живот-
ных
Метод
вакци-
нации
Иммунизация в млрд.м.к.
Первичная реиммунизация в млрд.м.к
Вторичная реиммунизация в млрд.м.к
B.abortus 82
10
п/к
25
25
10
B.abortus 82
10
п/к
50
50
25
B.abortus 82
10
п/к
100
100
50
B.abortus 75/79-АВ
10
п/к
25
25
10
B.abortus 75/79-АВ
10
п/к
50
50
25
B.abortus 75/79-АВ
10
п/к
100
100
50
Непривитый контроль
20
не
привиты
не привиты
не привиты
Таблица 2
Динамика уровня агглютинирующих антител в сыворотке крови оленей при повторной реиммунизации различными дозами и методами введения вакцин из штаммов B. abortus 82 и
75/79-АВ
Сроки при повторной реиммунизации (дни)
Процент реагирующих / средний титр антител
Вакцина и доза иммунизации (млрд.м.к.)
B. abortus 82
25+10
п/к
50+25
п/к
100+50
п/к
B. abortus 75/79-АВ
25+10
п/к
50+25
п /к
100+50
п/к
До реиммунизации 7 15 30 60 90 120
0/8,30/0
20,0/30,0
60,0/30,0
60,0/30,0
40,0/30,0
20,0/15,0
0/15,0
0/10,0
40,0/25,0
60,0/45,0
60,0/30,0
40,0/30,0
20,0/10,0
0/16,6
0/10,0
33,3/25,0
60,0/45,0
60,0/45,0
60,0/30,0
20,0/20,0
0/15,0
0/4,1
20,0/30,0
60,0/30,0
60,0/30,0
40,0/30,0
16,6/20,8
0/10,0
0/10,0
33,3/25,0
60,0/45,0
60,0/30,0
60,0/45,0
20,0/15,0
0/15,0
0/10,0
40,0/25,0
60,0/30,0
60,0/45,0
60,0/45,0
20,0/30,0
0/16,6
Таблица 3
Динамика уровня комплементсвязывающих антител в сыворотке крови оленей при первичной и повторной реиммунизации различными дозами и методами введения вакцин из
штаммов B. abortus 82 и 75/79-АВ
7
Сроки при повторной и повторной реиммунизации (дни) Процент реагирующих / средний титр антител
Вакцина и доза иммунизации (млрд.м.к.)
B.abortus 82 B.abortus 75/79-АВ
25+10 50+25 100+50 25+10 50+25 100+50
п/к п/к п/к п/к п/к п/к
До реиммунизации 7 15 30 60 90 120 0/0 40,0/6,0 80,0/6,0 100,0/16,0 100,0/8,0 40,0/3,0 20,0/2,0 0/0 40,0/6,0 80,0/6,0 100,0/16,0 100,0/12,5 40,0/5,0 20,0/2,0 0/0 83,3/25,0 83,3/26,0 100,0/17,0 100,0/27,5 40,0/3,0 40,0/3,0 20,0/1,0 80,0/6,0 80,0/16,0 100,0/8,0 80,0/16,0 40,0/3,0 20,0/2,0 16,6/0,8 80,0/6,0 80,0/16,0 100,0/16,0 80,0/26,0 40,0/2,0 20,0/2,0 20,0/1,0 100,0/16,0 100,0/17,0 100,0/17,0 100,0/8,0 50,0/2,5 40,0/7,0
№ Иммунизированы вакцинным штаммом Кол-во живот- ных Метод вакци- нации Иммунизация в млрд.м.к. Первичная реиммунизация в млрд.м.к Вторичная реиммунизация в млрд.м.к
1 B.abortus 82 10 п/к 25 25 10
2 B.abortus 82 10 п/к 50 50 25
3 B.abortus 82 10 п/к 100 100 50
4 B.abortus 75/79-АВ 10 п/к 25 25 10
5 B.abortus 75/79-АВ 10 п/к 50 50 25
6 B.abortus 75/79-АВ 10 п/к 100 100 50
7 Непривитый контроль 20 не привиты не привиты не привиты
Сроки при повторной реиммунизации (дни) Процент реагирующих / средний титр антител
Вакцина и доза иммунизации (млрд.м.к.)
B. abortus 82 B. abortus 75/79-АВ
25+10 50+25 100+50 25+10 50+25 100+50
п/к п/к п/к п/к п/к п/к
До реиммунизации 7 15 30 60 90 120 0/8,30/0 20,0/30,0 60,0/30,0 60,0/30,0 40,0/30,0 20,0/15,0 0/15,0 0/10,0 40,0/25,0 60,0/45,0 60,0/30,0 40,0/30,0 20,0/10,0 0/16,6 0/10,0 33,3/25,0 60,0/45,0 60,0/45,0 60,0/30,0 20,0/20,0 0/15,0 0/4,1 20,0/30,0 60,0/30,0 60,0/30,0 40,0/30,0 16,6/20,8 0/10,0 0/10,0 33,3/25,0 60,0/45,0 60,0/30,0 60,0/45,0 20,0/15,0 0/15,0 0/10,0 40,0/25,0 60,0/30,0 60,0/45,0 60,0/45,0 20,0/30,0 0/16,6
изучена иммунологическая реактивность организма северных оленей при первичной и повторной реиммунизации слабоагглюти-ногенными вакцинами из штаммов B. abortus 82 и B. abortus 75/79-АВ в производственных условиях. Вакцину из штамма Brucella abortus 75/79-АВ получили из Приволжского биокомбината. (ОСТ 10-19-001-03, серия № 5, изготовлена 22.05.06 г., годна до 22.05.07 г., контроль № 25.) В октябре 2006 года поставили опыт на 60 особях северных оленей в ПК «Малтан» с целью определения уровня специфических антител в сыворотке крови в зависимости от дозы введения вакцин из штаммов Brucella abortus 82 и Brucella abortus 75/79-АВ (табл. 1).
При исследовании сыворотки крови животных применяли РБП, РА, РСК и РНГА. Гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ) изучали путем постановки пальпебральной аллергической пробы с бруцел-лином ВИЭВ.
После иммунизации в течение 2-х недель определяли местную и общую реакцию организма северных оленей на введение вышеуказанных вакцин путем наблюдения за общим состоянием организма животных (табл. 1).
Животных опытных групп после 12 месячного совместного содержания в неблагополучном стаде подвергали убою. Из каждой группы было отобрано по 3 головы северных оленей, которые были подвергнуты контрольному убою.
Бактериологические исследования были проведены в Момской ветеринарноиспытательной лаборатории, лимфатические узлы и паренхиматозные органы — от каждого животного в количестве 15-20 объектов. Высевы были проведены на одну пробирку с мясо-пептонным печеночным бульоном (МППБ) и две пробирки с мясо-пептонно-печеночным глюкозо-глицериновым агаром (МППГГА). Высевы проводили стерильной пастеровской пипеткой после предварительного прижигания места укола патологического материала разогретым на пламени спиртовым шпателем.
Пробирки с засеянным материалом инкубировали в термостате при 37С до 30 суток с периодическими просмотром характера роста культур.
Результаты исследований.
В октябре 2007 года провели первичную реиммунизацию в дозах 10, 25 и 50 млрд. м. к. подкожным методом вакцинами из штаммов B. abortus 75/79-АВ и B. abortus 82. В течение года наблюдали за иммунологической реактивностью организма северных оленей на введение антигена. Иммунологическая реакция организма северных оленей на введение разных доз вакцин протекала по характеру вторичного иммунного ответа.
Серологические исследования после повторной ревакцинации были проведены через 7, 15, 30, 60, 90 и 120 день.
Закономерность появления и угасания положительных реакций у РБП, у северных оленей, повторно реиммунизированных различными дозами вакцин из штаммов 82 и 75/79-АВ, была такой же, как и при первичной ревакцинации. Такая же определенная зависимость сроков появления, угасания,
а также высоты титра антител в зависимости от дозы введения противобруцел-лезных вакцин наблюдалась и при исследовании сыворотки крови привитых северных оленей в реакции агглютинации (РА).
Агглютинины были выявлены во всех группах на 7 день после повторной ревакцинации. Максимальное их значение наблюдалось на 15 день после ревакцинации и составляло по группам 1 — 30,0; 2 — 45,0; 3 — 45,0; 4 — 30,0; 5 — 45,0; 6 — 30,0 (табл. 2).
При сравнении уровней титров антител в сыворотке крови животных, которое образовались в ответ на введение вакцин из штаммов 82 и 75/79-АВ, существенной разницы не отмечалось (Р < 0,05). Вместе с тем, при сравнении этих данных с данными, полученными с разными дозами, также не было отмечено существенной разницы.
Снижение уровня агглютининов у привитых северных оленей во всех группах было отмечено с 90 дня после повторной ревакцинации. В то же время во всех
группах уровень агглютинирующих антител не достигал диагностического титра во все сроки наблюдения.
Следует отметить, что при повторной реиммунизации различными дозами вакцин из штаммов 82 и 75/79-АВ уровень агглютинирующих антител был сравнительно ниже, чем при первичной ревакцинации.
Комплементсвязывающие антитела, как и при первичной реиммунизации, были выявлены на 7 день после повторной ревакцинации во всех группах (табл. 3).
Максимальный уровень антител наблюдался на 30 день после реиммунизации.
Уровень титров антител у животных, привитых подкожно вакцинами из штаммов 82 и 75/79-АВ в разных дозах, существенно не отличался (Р < 0,05). Через 4 месяца во всех группах северных оленей комплемен-тсвязывающие антитела были выявлены в очень незначительных титрах и разницы уровней антител в этих группах не было отмечено (Р < 0,05).
Таким образом, как и при первичной реиммунизации не прослеживается определенная зависимость уровня комплемен-тсвязывающих антител в сыворотке крови исследованных северных оленей от дозы введения вакцины. Однако при сравнении с первичной ревакцинацией уровень ком-плементсвязывающих антител у северных
оленей, привитых вакциной из штамма 82 и 75/79-АВ подкожным методом, был значительно выше и положительные реакции обнаруживались после повторной ревакцинации до 4 месяцев.
Выводы.
На основании полученных данных о сроках угасания титров поствакцинальных
антител ниже диагностического уровня в сыворотке крови северных оленей, были установлены возможные сроки проведения серологических исследований после первичной и повторной реиммунизации вакцинами из штаммов B. abortus 82 и 75/79-АВ подкожным методом через 4 месяца.
Литература
1. Аммосов Г. Г., Слепцов Е. С., Федоров В. Ф. Применение вакцины из штамма Brucella abortus 75/79-AB для профилактики и борьбы с бруцеллезом северных оленей : методические рекомендации. Якутск, 2005. 10 с.
2. Слепцов Е. С. [и др.]. Иммунизация северных оленей против бруцеллеза разными методами введения вакцин из штаммов B. abortus 19 и 82: метод. рекомендации. Новосибирск, 1998. 8 с.
3. Хоч А. А., Слепцов Е. С. Бруцеллез северных оленей в Якутии. Якутск : Сахаполитиздат, 2001. 205 с.
регенеративные процессы в почечной
ТКАНИ ПОСЛЕ частичной НЕфРЭКТОМИИ
С ПРИМЕНЕНИЕМ КЕТгУТА И АЛЛОПЛАНТА
Е. в. ШАлАМовА,
аспирант,
А. н. КвоЧКо (фото), 355017, г. Ставрополь,
доктор биологических наук, профессор, Ставропольский ГАу пер. Зоотехнический, д. 12; e-mail: [email protected]
Ключевые слова: почки, частичная нефрэктомия, кетгут, аллоплант, регенерация.
Keywords: kidneys, partial nephrectomy, < Цель и методика исследований.
В последние годы возрастает интерес ученых к изучению репаративных процессов в почках после хирургических вмешательств, поскольку они обеспечивают гомеостаз организма.
Наиболее сложными для хирургического лечения являются пациенты с анатомически или функционально единственной почкой, билатеральными опухолями, хронической почечной недостаточностью [3]. Это обосновывает необходимость изыскания такого шовного материала, который бы не вызывал разрастания соединительной ткани в зоне трансплантации, стимулировал регенерацию почечной ткани, обладал низкой антигенностью [1].
В связи с этим целью нашего исследования явилось изучение влияния нитей кетгута и аллопланта на регенеративную способность почечной ткани.
Исследования проводили с 2007 по 2010 год в условиях клиники кафедры физиологии, хирургии и акушерства ФГОУ ВПО «Ставропольский ГАУ». Объектом исследования были кролики (п = 36) в возрасте 6-8 месяцев и массой тела 3-4 кг, которым была выполнена нефрэктомия с иссечением каудального полюса почки, с последующим ушиванием раны почки и операционной раны брюшной стенки нитями кетгута или аллопланта.
У животных до операции (контроль) и после на 3, 6, 12, 15, 18 и 60 день отбирали из зоны наложения шва материал для гистологических исследований, который фиксировали 10,0 % водным раствором нейтрального формалина, проводили через
\tgut, alloplant, regeneration.
спирты возрастающей крепости, заливали в гистологическую среду «Гистомикс». После заливки кусочки почек фиксировали на деревянные блоки, а затем выполняли гистосрезы на микротоме толщиной 5-7 мкм.
Для обзорных целей гистосрезы окрашивали гематоксилином и эозином, по способу Ван-Гизон, коллагеновые волокна — по способу Маллори по методикам, изложенным в руководствах по гистотехнике [2].
Микротелефотометрическое исследование гистосрезов выполняли при помощи анализатора изображения, состоящего из фотоаппарата OLYMPUS C-2000, поли-функционального микроскопа, компьютера «PENTIUM 300» с использованием программы «Видео Тест мастер» версия 4.0 (производство г. Санкт-Петербург, 2004).
Результаты исследования.
В группе с использованием кетгута на 3 день после операции выявлены некротизи-рованые участки почечной ткани в области раневого дефекта. За зоной некроза присутствует зона отека, почечные тельца расширены (рис. 1).
К шестому дню после оперативного вмешательства в области раневого дефекта вокруг кетгута образована демаркационная линия из клеток лимфоцитов, нейтрофилов и фибробластов.
Гистологическая картина 12 и 15 суток значительно не отличается. Регистрируется явно выраженная зона некроза, в области отека имеют место эндоваскулиты, расширенные почечные тельца, лизис сосудистых клубочков и эпителия канальцев нефрона.
Рисунок 1
3 сутки после операции. Зона отека вблизи раневого дефекта. Окраска гематоксилином и эозином. Об.Ю,
ок.16.
Раневой канал заполнен рубцовой тканью. Обнаружены капилляры, прорастающие в кетгут. Окраска по Маллори выявляет наличие коллагеновых волокон, как в почечных тельцах, так и по периферии канальцев нефрона (рис. 2).
Рисунок 2
15 день после операции. Коллагеноз нефрона.
Окраска по Маллори. Об.40, ок.16.
